温度、pH和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究及应用的制作方法

技术特征：
1.一种温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究，其特征在于：包括温度对中华鳖非特异性免疫的影响研究、ph胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究以及氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究，具体操作步骤如下：一、试验设计试验一：温度对中华鳖非特异性免疫的影响研究选择平均体质量502
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49g养殖中华鳖36只，随机分成3组，3组水温分别为20℃、28℃、33℃，每组12只，设3个重复，每个重复4只，放入9个pvc周转箱养殖7d后，使用ms
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222麻醉后取血并放入15ml离心管中，离心管中不添加抗凝剂，4℃静置12h让血液凝固析出血清，再3000r/min离心10min分离血清，取上清液置
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20℃冷冻保存，测定血清t
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aoc、sod、lzm、akp、acp活性；试验二：ph胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究选择平均体质量502
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49g养殖中华鳖36只，随机分成3组，分别为对照组p1(ph7.5)、低ph胁迫组p2(ph6.0)、高ph胁迫组p3(ph9.0)，每组3个平行，每个平行4只中华鳖，放入9个pvc周转箱养殖7d后，使用ms
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222麻醉后取血，4℃静置12h让血液凝固析出血清(不加抗凝剂)，3000r/min离心10min分离血清，置
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20℃冷冻保存，测定血清t
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aoc、sod、lzm、akp、acp活性；试验三：氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究选择平均体质量502
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49g养殖中华鳖36只，随机分成3组，分别为对照组n1(氨氮0.6mg/l)、试验组n2(氨氮1.2mg/l)、试验组n3(氨氮1.7mg/l)，每组3个平行，每个平行4只中华鳖，放入9个pvc周转箱养殖7d后，使用ms
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222麻醉后取血，4℃静置12h让血液凝固析出血清(不加抗凝剂)，3000r/min离心10min分离血清，置
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20℃冷冻保存，测定血清t
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aoc、sod、lzm、akp、acp活性；二、试验对象养殖中华鳖取自章丘市白云湖特种水产养殖有限公司，体色土黄、体质健壮、无外伤、平均体质量502
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49g，共计108只；三、数据处理和统计分析试验结果用“平均值
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标准差”表示，采用spss17.0软件对数据进行单因素方差分析和lsd多重比较，p﹤0.05表示差异显著，p﹤0.01表示差异极显著。2.根据权利要求1所述的温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究，其特征在于：所述pvc周转箱的型号为120cm
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80cm
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60cm，所述试验过程中养殖中华鳖所投喂饲料为市售中华鳖粉状饲料，购自山东天神饲料有限公司。3.根据权利要求1所述的温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究，其特征在于：所述试验二中分别使用hcl和nahco3调整ph值至6.0和9.0，ph计型号为mettler toledo sg2，所述试验三中使用nh4cl调整氨氮水平，氨氮检测仪为多功能水质分析仪，型号为spectroquant pharo 300，所述试验一、试验二和试验三中用到的离心机型号为eppendorf（5430r）台式冷冻离心机，所述hcl和所述nahco3的使用浓度为1.0mol/l，所述nh4cl的使用浓度为10g/l。4.根据权利要求1所述的温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究，其特征在于：所述血清t
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aoc、sod、lzm、akp、acp活性均为送样至南京建成生物工程研究所进行检测。
5.根据权利要求1所述的温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究，其特征在于：试验一整个试验过程中，保持水中ph7.5，氨氮0.6mg/l；试验二整个试验过程中，保持水温28℃，水中氨氮0.6mg/l；试验三整个试验过程中，保持水温28℃，水中ph7.5。6.一种温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究应用，其特征在于：包括提供一种可调节ph和氨氮含量的水箱模块，所述水箱模块包括过滤池（1）和蓄水池（2），所述过滤池（1）和所述蓄水池（2）底部均连接有三角支柱（3），所述过滤池（1）和所述蓄水池（2）之间连通有连接管（4），所述过滤池（1）侧壁底部连通有注水管（5），所述蓄水池（2）侧壁底部连通有排水管（6），所述注水管（5）和所述排水管（6）上均连接有电子阀门（7），所述蓄水池（2）侧壁上设有观察窗口（8），所述蓄水池（2）上端连接有ph计（9）和氨氮检测仪（10），所述蓄水池（2）侧壁上连接有hcl溶液瓶（12）、nahco3溶液瓶（13）和nh4cl溶液瓶（14），所述hcl溶液瓶（12）、nahco3溶液瓶（13）和nh4cl溶液瓶（14）上分别连接有挤压球（15），所述hcl溶液瓶（12）、nahco3溶液瓶（13）和nh4cl溶液瓶（14）上均连接有出水管（16）和注水口塞（17），所述出水管（16）前端与所述蓄水池（2）上表面连通。7.根据权利要求6所述的温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究应用，其特征在于：所述ph计（9）和氨氮检测仪（10）底部延伸至所述蓄水池（2）内部并与所述观察窗口（8）底表面齐平，所述蓄水池（2）侧壁上连接有三个固定带（18），所述hcl溶液瓶（12）、nahco3溶液瓶（13）和nh4cl溶液瓶（14）分别卡在所述固定带（18）内，所述hcl溶液瓶（12）、nahco3溶液瓶（13）和nh4cl溶液瓶（14）型号结构相同，所述挤压球（15）的体积等于或大于所述hcl溶液瓶（12）/nahco3溶液瓶（13）/nh4cl溶液瓶（14）的体积。8.根据权利要求6所述的温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究应用，其特征在于：所述过滤池（1）内固定有网格板（19），所述网格板（19）上从下至上依次放置有石英砂层（20）、生化棉层（21）和活性炭层（22），所述注水管（5）位于所述网格板（19）下方，所述蓄水池（2）顶部连接有伺服电机（11），所述伺服电机（11）底部连接有两个相对的折线型搅拌棒（23），所述搅拌棒（23）延伸至所述蓄水池（2）内。9.根据权利要求6所述的温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究应用，其特征在于：所述hcl溶液瓶（12）/nahco3溶液瓶（13）/nh4cl溶液瓶（14）内部设有液体储存管（24）和气体储存管（25），所述液体储存管（24）和所述气体储存管（25）均为波纹软管，所述挤压球（15）与所述气体储存管（25）连通，所述液体储存管（24）和所述气体储存管（25）上下面均固定有平衡面板（28），所述液体储存管（24）上表面的平衡面板（28）固定在所述hcl溶液瓶（12）/nahco3溶液瓶（13）/nh4cl溶液瓶（14）内部上表面，所述气体储存管（25）下表面的平衡面板（28）固定在所述hcl溶液瓶（12）/nahco3溶液瓶（13）/nh4cl溶液瓶（14）内部底表面，所述液体储存管（24）下表面的平衡面板（28）和所述气体储存管（25）上表面的平衡面板（28）侧壁上均连接有呈对称结构的导向块（29），所述hcl溶液瓶（12）/nahco3溶液瓶（13）/nh4cl溶液瓶（14）内壁上设有呈对称结构的导向槽（30），所述导向块（29）嵌在所述导向槽（30）内，所述液体储存管（24）上表面的平衡面板（28）上设有连接口（26）和注水口（27），所述出水管（16）底部固定在所述连接口（26）上，所述注水口塞（17）卡在所述注水口（27）内。10.根据权利要求6或权利要求7所述的温度、ph和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究应用，其特征在于：所述ph计（9）型号为mettler toledo sg2，所述氨氮检测仪（10）为多功能水质分析仪，型号为spectroquant pharo 300，所述hcl溶液瓶（12）中hcl浓度为
1.0mol/l，所述nahco3溶液瓶（13）中nahco3浓度为1.0mol/l，所述nh4cl溶液瓶（14）中nh4cl浓度为10g/l。

技术总结
本发明公开了一种温度、pH和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究及应用，包括三个试验，分别为温度对中华鳖非特异性免疫的影响研究、pH胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究以及氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究，并根据研究结果展开对温度、pH和氨氮胁迫对中华鳖免疫活性的影响研究应用。本发明公开的试验结果表明，常温28℃状态下，水中pH为7.5，水中氨氮含量为0.6mg/L时，中华鳖的非特异性免疫能力最高，其抵御病害的能力最强，并由此结果提供一种可调节pH和氨氮含量的水箱模块，确保中华鳖养殖池中内水的pH保持7.5，氨氮含量保持0.6mg/L，增强中华鳖的抗病能力。增强中华鳖的抗病能力。增强中华鳖的抗病能力。


技术研发人员：冒树泉 曹振杰 王秉利 许鹏 张延华 马国红
受保护的技术使用者：山东省淡水渔业研究院(山东省淡水渔业监测中心)
技术研发日：2021.04.19
技术公布日：2021/10/19