一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用的制作方法

1.本发明涉及疾病治疗药物领域，更具体地说，涉及一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用。


背景技术：

2.冠状病毒是一个大型病毒家族，可引起感冒、发热、肺炎乃至中东呼吸综合征(mers)和严重急性呼吸综合征(sars)等较严重疾病。 2019冠状病毒疾病(corona virus disease 2019，covid-19)，其广 泛的传染性和较强的致病性给全世界人民的生命和健康带来了极大的 威胁。该病以发热、干咳、乏力为主要表现。少数患者伴有鼻塞、流涕、 咽痛、肌痛和腹泻等症状。重症患者多在发病一周后出现呼吸困难和/ 或低氧血症,严重者可快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、 难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍及多器官功能衰竭等。
3.covid-19由2019新型冠状病毒(severe acute respiratorysyndrome coronavirus 2，sars-cov-2)感染所致，临床治疗主要是对症支持治疗，尚无特效治疗药物，因此寻找针对该病毒的有效药物显得尤为迫切。银杏内酯作为银杏叶中的主要活性成分之一，是一类罕见的天然化合物，迄今尚未发现存于其它植物中，具有抗炎、抗氧化、抗血小板聚集、抗细胞凋亡及死亡、扩张血管、保护中枢神经和缺血组织等药理作用，其能否成为有效预防及治疗冠状病毒相关疾病特别是 covid-19亟待开展科学研究。


技术实现要素：

4.有鉴于此，本发明旨提出一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用，其中，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯 a、b、k，其特征在于，以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为(20～40)：(50～75)：(0.2～5)。
5.进一步地，所述冠状病毒感染的疾病包括covid-19(新型冠状病毒肺炎)。
6.进一步地，所述银杏内酯组合物以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为(20～35)：(50～70)：(0.5～4)。
7.进一步地，所述银杏内酯组合物以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为(20～30)：(50～65)：(0.8～4)。
8.优选地，以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为20：50：5。
9.优选地，以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为30：75：0.2。
10.具体地，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
11.具体地，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂。
12.本发明的组合物的注射剂在1:1，1:10，1:100倍稀释浓度下，能够在2019-ncov病
毒感染的vero细胞上表现出良好的保护作用，可一定程度抑制2019-ncov在细胞内复制，相对于阴性对照，使用本发明的组合物能抑制感染后的细胞发生病变，说明本发明的组合物具有良好的治疗或预防冠状病毒相关疾病的效果。
具体实施方式
13.本发明提供了一种银杏内酯组合物的用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
14.除有特别说明，本发明采用的药品、生物材料或仪器皆为普通市售品，皆可于市场购得。
15.下面结合实施例，进一步阐述本发明：
16.实施例1银杏内酯组合物注射剂的体外抗2019-ncov实验
17.1.实验材料
18.受试药物：江苏康缘药业股份有限公司所生产的市售银杏二萜内酯葡胺注射液，批号200208，该样品中银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为(20～30)：(50～65)：(0.8～4)。
19.vero细胞：由微生物流行病研究所细胞库保存。
20.2019-ncov病毒：滴度为107ccid
50
/ml，由微生物流行病研究所病毒库及p3毒种冰箱-80℃保存。使用病毒滴度为100ccid
50
/孔。
21.2.实验方法
22.无菌96孔培养板，每孔加入100μl浓度为1
×
105cell/mlvero细胞， 37℃5％co2培养24小时；受试药物稀释成3个浓度(1:1，1:10，1:100)，每个浓度4个复孔，每孔100μl，然后每孔再加入等体积100ccid
50
病毒，作用1h；1h后，弃去96孔培养板中细胞培养液，加入上述混合液；同时设立细胞对照、空白对照(溶剂对照)和病毒对照(阴性对照)；细胞37℃，5％co2孵箱孵育3天；光学显微镜下观察细胞病变(cpe)，细胞完全病变记录为“ ”，75％病变记录为“ ”，50％病变记录为“ ”，25％病变记录为“ ”，未病变记录为“－”。
23.3.实验条件：以上实验操作均在bsl-3实验室内完成。
24.4.结果判断：细胞不出现cpe为有效抑制病毒的浓度，出现cpe为无效。
25.5.实验结果：
26.本发明药物组设置3个浓度，在细胞上均能有效抑制2019-ncov 复制。结果见表1。
27.表1.药物抗2019-ncov效果
[0028][0029]
/细胞毒性
[0030]
备注：“－”为未病变；“ ”为细胞完全病变。
[0031]
6.结论：
[0032]
根据细胞水平的筛选结果，市售银杏二萜内酯注射液在1:1、1:10、 1:100倍稀释浓度下，可一定程度上抑制病毒导致的cpe效应，提示银杏二萜内酯注射液有体外抗2019-ncov活性。
[0033]
需要指出的是，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。


技术特征：
1.一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述冠状病毒感染包括covid-19。3.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯a、b、k，其特征在于，以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为(20～40)：(50～75)：(0.2～5)。4.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯a、b、k，其特征在于，以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为(20～35)：(50～70)：(0.5～4)。5.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯a、b、k，其特征在于，以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为(20～30)：(50～65)：(0.8～4)。6.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯a、b、k，其特征在于，以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为20：50：5。7.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯a、b、k，其特征在于，以重量比计，银杏内酯a：银杏内酯b：银杏内酯k比例为30：75：0.2。8.根据权利要求1-7任一所述的应用，其特征在于，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物还包括药学上可接受的辅料。9.根据权利要求8任一所述的应用，其特征在于，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂。

技术总结
本发明公开了一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用。所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～40)：(50～75)：(0.2～5)。本发明的组合物在1:1，1:10，1:100倍稀释浓度下，能够在2019-nCoV病毒感染的Vero细胞上表现出良好的保护作用，可抑制2019-nCoV在细胞内复制，说明本发明的中药组合物具有良好的治疗或预防冠状病毒感染所致相关疾病的效果。防冠状病毒感染所致相关疾病的效果。


技术研发人员：肖伟 柯志鹏 张新庄 陶晓倩 苏真真 曹泽彧 曹亮 王振中
受保护的技术使用者：江苏康缘药业股份有限公司
技术研发日：2020.04.09
技术公布日：2021/10/18