苦参酮在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用的制作方法

1.本发明属于生物医药技术领域，尤其是涉及苦参酮在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用。


背景技术：

2.近三十年来，我国水产品养殖业发展迅速，水产品产量居世界首位，随着水产养殖业集约化的迅猛发展，与水产动物疾病和水体环境污染有关的许多问题逐渐暴露出来，严重制约了水产养殖业的稳定发展。水产动物的主要病原体包括细菌、病毒和寄生虫等，据估计，我国每年因水产动物疾病造成的损失超过100亿元人民币。其中，细菌性疾病引起的水产动物疾病损失占58%，是导致水产养殖经济损失的最严重因素；水产养殖中细菌性疾病的病原主要有哈维氏弧菌、副溶血弧菌、嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌等，目前，应用于水产养殖业的抗菌药物主要是从医用和兽用抗生素移植而来，而水产专用抗菌原料药物种类很少，抗生素在水产养殖业中的长期应用或滥用导致病原菌的耐药性不断增加，使抗生素的疗效越来越不理想，此外，残留在水产品中的抗生素对人类的健康与安全也造成一定的威胁。随着人们对抗生素负面影响的逐步了解以及食品安全的重要性日益提高，开发“绿色”抗生素替代品已成为当务之急；中草药资源具有丰富、便宜、易于获得、毒性极小、副作用少、残留物相对少和几乎没有污染的优良特性，使其在开发绿色环保抗生素替代品方面具有很大的潜力和广阔的应用前景；中草药苦参为豆科植物苦参（sophora flavescenes ait）的干燥根，其化合物种类丰富，包括生物碱、黄酮、三萜皂苷、木质素及酚酸等，苦参作为传统中药材，有几千年的药用历史，临床应用广泛，有抗肿瘤、抗病毒、抗病原微生物、抗氧化、抗炎等作用；目前，苦参已被中国农业部批准用于防治水产动物疾病，但其抗菌活性物质尚不清楚，并且整体疗效不稳定，因此鉴定苦参抗水产病原菌活性分子对开发绿色环保抗生素替代品具有重要的意义。


技术实现要素：

3.本发明公开了苦参酮（kurarinone）在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用，所述苦参酮具有以下结构式：。
4.进一步的，所述苦参酮具有抗水产病原哈维氏弧菌、副溶血弧菌、嗜水气单细胞和迟缓爱德华氏菌的活性。
5.进一步的，所述苦参酮在水产病原菌引起的弧菌病、出血病和爱德华菌病疾病中
的应用。
6.进一步的，所述苦参酮可以通过本领域已知的各种方法或者变通方法从植物中分离提取、合成或半合成的方法制备得到，也可以直接商业购买获得。
7.进一步的，所述苦参酮自苦参中提取分离获得，苦参酮的制备方法包括如下步骤：（1）将无水乙醇和苦参按照液料比30:1 ml/g混合，于79℃条件下加热提取146 min，制备混合液；（2）将上述混合液进行抽滤分离，去除残渣保留提取液；（3）将上述提取液减压蒸发回收溶剂，制备获得固态苦参提取物；（4）使用agilent 1260高效液相色谱仪，色谱柱为clc
‑
ods (10.0 mm
×
250 mm, 5 μm, 1.5 ml/min) ，检测波长为295 nm；流动相为0.1%磷酸水和甲醇；梯度洗脱程序如下（v/v）: 0 min 30%甲醇， 20 min 80%甲醇，45 min 90%甲醇， 60 min 100%甲醇；收集苦参酮峰的洗脱溶液，减压浓缩干燥得到苦参酮。
8.本发明与现有技术相比，有如下优点：经过生物活性测试，苦参酮对水产病原哈维氏弧菌、副溶血弧菌、嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌均具有良好的抑制作用，最小抑菌浓度分别为0.0625 mg/ml、0.0625 mg/ml、0.125 mg/ml、0.0625 mg/ml，表明苦参酮可以用作抗生素替代品，用于预防或者治疗水产病原菌感染。
附图说明
9.图1为苦参酮标准品（a）的高效液相色谱图。
10.图2为苦参提取物（b）的高效液相色谱图。
具体实施方式
11.下面结合附图对本发明做详细说明：苦参酮（kurarinone）在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用，所述苦参酮具有以下结构式：。
12.作为优选方案，所述苦参酮具有抗水产病原哈维氏弧菌、副溶血弧菌、嗜水气单细胞和迟缓爱德华氏菌的活性。
13.作为优选方案，所述苦参酮在水产病原菌引起的弧菌病、出血病和爱德华菌病疾病中的应用。
14.作为优选方案，所述苦参酮可以通过本领域已知的各种方法或者变通方法从植物中分离提取、合成或半合成的方法制备得到，也可以直接商业购买获得。
15.作为优选方案，所述苦参酮自苦参中提取分离获得，苦参酮的制备方法包括如下
mg/ml、0.125 mg/ml、0.0625 mg/ml，表明苦参酮可以用作抗生素替代品，用于预防或者治疗水产病原菌感染。
21.本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所做的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其他不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之内。


技术特征：
1.苦参酮在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用，其特征在于：所述苦参酮具有下列结构式：。2.根据权利要求1所述的苦参酮在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用，其特征在于：所述苦参酮具有抗水产病原哈维氏弧菌、副溶血弧菌、嗜水气单细胞和迟缓爱德华氏菌的活性。3.根据权利要求2所述的苦参酮在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用，其特征在于：所述苦参酮在水产病原菌引起的弧菌病、出血病和爱德华菌病中的应用。4.根据权利要求2所述的苦参酮在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用，其特征在于：所述苦参酮采用从植物中提取分离或者合成或半合成的方法获得。5.根据权利要求4所述的苦参酮在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用，其特征在于：所述苦参酮自苦参中提取分离获得。

技术总结
本发明公开了苦参酮（Kurarinone）在制备抗水产病原菌药物或饲料添加剂中的应用，具体为用于预防或治疗由水产病原菌引起的疾病中的用途，尤其是在制备抑制水产病原哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）、副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）、嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）和迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）的药物或饲料添加剂中的应用，本发明经过生物活性测试，苦参酮对水产病原哈维氏弧菌、副溶血弧菌、嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌均具有良好的抑制作用，最小抑菌浓度在0.0625~0.125 mg/mL范围内，表明苦参酮可以用作抗生素替代品，用于预防或者治疗水产病原菌感染。感染。感染。


技术研发人员：郭雷 郭斯崖 郑慧芳 王鑫彤 王文彬 许福泉 陈建华
受保护的技术使用者：江苏海洋大学
技术研发日：2021.08.11
技术公布日：2021/10/15