一种人干细胞因子皮肤修复液的智能制备方法与流程

1.本发明涉及皮肤修复液制备技术领域，尤其涉及一种人干细胞因子皮肤修复液的智能制备方法。


背景技术：

2.干细胞(stem cell)是一类具有自我更新、自我复制能力(self
‑
renewing)的多潜能细胞，干细胞可以分为胚胎干细胞和成体干细胞，根据不同的分化潜能分类可分为全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞，其具有多向分化潜能、无限地分裂、增殖等特性，简单来讲，它是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未分化细胞，是形成哺乳类动物的各组织器官的原始细胞。干细胞在形态上具有共性，通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性。干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞；
3.人体的衰老，皱纹的出现，究其根源实质上都是细胞的衰老和减少。而细胞的衰老和减少则是由干细胞老化引起的。干细胞是各种组织细胞更新换代的种子细胞，是人体细胞的生产厂。干细胞族群的老化严重减弱了其增殖和分化的能力，新生的细胞补充不足，衰老细胞不能及时被替代，全身各系统功能下降，让人一天天老去。而皮肤，也因为皮肤干细胞的衰老而无法及时更新，衰老的皮肤得不到修复，因此人们基于人干细胞制备一种皮肤修复液；
4.在现有的皮肤修复液的制备中，大都是通过人干细胞培养增值而成，在制备时，需要将细胞置于培养基中，然后放入培养箱内保持一定的温度、湿度，二氧化碳浓度，氧气浓度等条件；
5.但是现有的培养箱结构简单，人们取出培养样本时，需要经常观察培养箱内的细胞增值情况以及营养液的使用情况，使得营养液缺失或者细胞增值数量过大时，需要更换营养液或者稀释细胞，人们就需要将培养箱打开取出更换，培养箱打开，导致培养箱内部空气与外部连通，导致培养箱内的温湿度以及气体含量失衡，影响细胞的培养。
6.因此，有必要提供一种人干细胞因子皮肤修复液的智能制备方法解决上述技术问题。


技术实现要素：

7.为解决上述技术问题，本发明是提供一种人干细胞因子皮肤修复液的智能制备方法。
8.本发明提供的一种人干细胞因子皮肤修复液的智能制备方法，采用一种培养箱配合完成，所述制备方法包括以下步骤：
9.1)、无菌采集脐带血，采用组织块直接培养法放入培养箱内进行培养；
10.2)、弃组织块后，更换新鲜无血清培养基继续放入培养箱内进行培养；
11.3)、细胞融合90％后，收取上清液，再加入胰酶消化，离心，获得细胞；
12.4)、将细胞接种于培养器中进行培养，加入无血清培养基继续传代；
13.5)、收取细胞培养液，离心，并通过0.2μm孔径过滤器过滤；
14.6)、将上清液以分子量为指标进行筛选，获得由分子量为6.201kd的表皮生长因子、分子量为15.3kd的酸性成纤维细胞生长因子、分子量为16～18.5kd的碱性成纤维细胞生长因子和分子量为32～45kd的血管内皮生长因子构成的混合物；
15.其中，步骤1)中的培养箱包括箱体、第一隔板、槽轮减速机、限位机构、驱动机构、转盘、滑动槽、放置块、放置槽、培养皿、滑道、第一滑动块、第一驱动块、第二驱动块、门洞、第一门体、第二隔板、第二门体、安装块和电子显微镜，所述箱体内壁下端固定有第一隔板，所述第一隔板下表面固定有槽轮减速机，所述槽轮减速机的输出端穿过第一隔板固定有转盘，所述转盘表面等距开设有滑动槽，所述滑动槽内壁滑动连接有放置块，所述放置块表面开设有放置槽，所述放置槽内壁放置有培养皿，所述滑动槽内壁底部开设有滑道，所述放置块底部固定有第一滑动块，且第一滑动块呈弧形设置，所述第一隔板上表面一端固定有驱动机构，所述驱动机构的动端对称固定有第一驱动块和第二驱动块，所述第一驱动块和第二驱动块均呈与第一滑动块相配合的弧形设置，且第一驱动块和第二驱动块呈同心设置，所述第一滑动块内部安装有限位机构，所述箱体上端外侧开设有门洞，所述门洞内壁下端通过铰链铰接有第一门体，所述箱体内壁上端固定有第二隔板，所述门洞位于第二隔板上表面的一端通过铰链铰接有第二门体，所述箱体内壁中部固定有安装块，所述安装块中部固定有电子显微镜。
16.优选的，所述槽轮减速机包括第一驱动壳、第一转轴、第一驱动盘、拨槽、弧形槽、第二转轴、第一伺服电机、第二驱动盘、拨柱、限位盘和避让槽，所述第一隔板下表面固定有第一驱动壳，所述第一驱动壳内壁通过轴承转动连接有第一转轴，所述第一转轴通过轴承与第一隔板转动连接，所述第一隔板顶部与转盘固定连接，所述第一转轴底部固定有第一驱动盘，所述第一驱动盘外侧等距开设有拨槽和弧形槽，所述第一驱动壳内壁通过轴承转动连接有第二转轴，所述第一驱动壳底部固定有第一伺服电机，且第一伺服电机的输出端与第二转轴固定连接，所述第二转轴中部固定有第二驱动盘，所述第二驱动盘表面边缘固定有拨柱，且拨柱与拨槽滑动连接，所述第二驱动盘一侧固定有限位盘，且限位盘直径与弧形槽直径相同，所述限位盘一侧开设有避让槽。
17.优选的，所述驱动机构包括第二驱动壳、第一螺纹杆、第二滑动块和第二伺服电机，所述第一隔板上表面靠近门洞的一端固定有第二驱动壳，所述第二驱动壳内壁通过轴承转动连接有第一螺纹杆，所述第二驱动壳内壁滑动连接有第二滑动块，且第一驱动块和第二驱动块均与第二滑动块固定连接，所述第二驱动壳一端固定有第二伺服电机，所述第二伺服电机的输出端与第一螺纹杆固定连接。
18.优选的，所述箱体靠近第二驱动壳的一端开设有取物孔，所述取物孔内壁滑动连接有滑动板，且滑动板与第二驱动块固定连接，所述滑动板远离第二驱动块的一端固定有密封门，所述密封门呈与箱体相配合的弧形设置。
19.优选的，所述限位机构包括第一凹槽、第二凹槽、第一滑孔、滑动条、第三滑动块、梯形块、第二滑孔、卡块、驱动槽、第一弹簧、第二弹簧和卡槽，所述第一滑动块内壁开设有第一凹槽，所述第一凹槽内壁顶部开设有第二凹槽，所述第一凹槽内壁靠近第一驱动块的一端开设有第一滑孔，所述第一滑孔内壁滑动连接有滑动条，所述滑动条靠近第一凹槽的
一端固定有第三滑动块，所述第三滑动块顶部固定有梯形块，所述第二凹槽内壁一侧开设有第二滑孔，所述第二滑孔内壁滑动连接有卡块，所述卡块下表面开设有与梯形块相配合的驱动槽，且梯形块与驱动槽内壁滑动接触，所述卡块一端固定有第一弹簧，且第一弹簧一端与第二凹槽内壁固定连接，所述第三滑动块一侧对称固定有第二弹簧，且第二弹簧一端与第一凹槽内壁固定连接，所述滑道内壁靠近卡块的一端开设有卡槽，且卡块与卡槽卡接。
20.优选的，所述放置块两端对称固定有限位块，所述滑道内壁对称开设有限位槽，且限位块与限位槽滑动连接，所述第一凹槽内壁固定有导杆，且导杆通过通孔与第三滑动块滑动连接，所述导杆位于一个第二弹簧内壁。
21.优选的，所述放置槽内壁底部固定有led灯珠，所述放置槽内壁位于led灯珠顶部固定有导光板。
22.优选的，所述第一伺服电机和第二伺服电机均为一种减速电机，所述箱体一侧固定有控制显示面板，且第一伺服电机、第二伺服电机、led灯珠和电子显微镜均与控制显示面板电性连接。
23.优选的，所述第一门体和第二门体中部均镶嵌固定有透明玻璃，所述第一门体和第二门体一侧固定有把手。
24.优选的，所述箱体底部对称固定有螺纹套筒，所述螺纹套筒内壁螺纹连接有第二螺纹杆，所述第二螺纹杆底部固定有六角旋钮，所述六角旋钮底部固定有放置片。
25.与相关技术相比较，本发明提供的人干细胞因子皮肤修复液的智能制备方法具有如下有益效果：
26.本发明提供人干细胞因子皮肤修复液的智能制备方法：
27.1、通过控制led灯珠和导光板发光，对培养皿进行照明，并且通过电子显微镜观察培养皿内的细胞情况和培养基情况，并记录，通过槽轮减速机驱动转盘上的培养皿旋转一个工位，使得相邻的未被检测的培养皿旋转至电子显微镜下方进行观察，依次往复，可自动对培养皿内的细胞进行检测，避免工作人员频繁检测，减少打开第一门体的频率，减少人们的劳动强度；
28.2、当检测出需要更换培养基或者需要细胞稀释时，通过控制显示面板给操作人员发送更换信号，工作人员通过控制显示面板控制第一伺服电机转动，将需要更换的培养皿旋转至密封门的一端，使得放置块上的第一滑动块移动至第一驱动块和第二驱动块之间的位置，此时通过驱动机构带动第一驱动块滑动，对限位机构进行解锁，并推动第一滑动块向密封门的一端滑动，从而带动放置块向密封门的一端滑动，且第二滑动块移动可通过滑动板带动密封门远离取物孔，将密封门打开，使得放置块上的培养皿慢慢从取物孔推出，人们可直接将培养皿取出即可，取出完成后，第二伺服电机反转，带动第二滑动块收回后，密封门关闭，对箱体进行密封，此过程中，仅仅是取物孔打开一段时间，即可将需要去除的培养皿去除，大大减少了箱体与外界的连通面积和时间，减少空气交换，从而方便稳定控制箱体内的温湿度和气体含量，减少波动，并降低能耗；
29.3、在放置块伸出和归位的过程中，可自动进行解锁和限位，防止放置块滑动，提高稳定性。
附图说明
30.图1为本发明提供的整体结构示意图；
31.图2为本发明提供的整体内部结构示意图；
32.图3为本发明提供的门洞结构示意图；
33.图4为本发明提供的取物孔结构示意图；
34.图5为本发明提供的放置块结构示意图；
35.图6为本发明提供的放置槽结构示意图；
36.图7为本发明提供的第一滑动块结构示意图；
37.图8为本发明提供的驱动机构结构示意图；
38.图9为本发明提供的槽轮减速机结构示意图；
39.图10为本发明提供的第一滑孔结构示意图；
40.图11为本发明提供的限位机构结构示意图；
41.图12为本发明提供的第三滑动块结构示意图；
42.图13为本发明提供的卡块结构示意图；
43.图14为本发明提供的led灯珠结构示意图；
44.图15为本发明提供的制备流程图。
45.图中标号：1、箱体；2、第一隔板；3、槽轮减速机；31、第一驱动壳；32、第一转轴；33、第一驱动盘；34、拨槽；35、弧形槽；36、第二转轴；37、第一伺服电机；38、第二驱动盘；39、拨柱；310、限位盘；311、避让槽；4、限位机构；41、第一凹槽；42、第二凹槽；43、第一滑孔；44、滑动条；45、第三滑动块；46、梯形块；47、第二滑孔；48、卡块；49、驱动槽；410、第一弹簧；411、第二弹簧；412、卡槽；5、驱动机构；51、第二驱动壳；52、第一螺纹杆；53、第二滑动块；54、第二伺服电机；6、转盘；7、滑动槽；8、放置块；9、放置槽；10、培养皿；11、滑道；12、第一滑动块；13、第一驱动块；14、第二驱动块；15、门洞；16、第一门体；17、第二隔板；18、第二门体；19、安装块；20、电子显微镜；21、取物孔；22、滑动板；23、密封门；24、限位块；25、限位槽；26、导杆；27、led灯珠；28、导光板；29、控制显示面板；101、透明玻璃；102、把手；103、螺纹套筒；104、第二螺纹杆；105、六角旋钮；106、放置片。
具体实施方式
46.下面结合附图和实施方式对本发明作进一步说明。
47.在具体实施过程中，如图1、图2、图3、图4、图5、图6、图7、图8和图15所示，一种人干细胞因子皮肤修复液的智能制备方法，采用一种培养箱配合完成，本发明的主要特征在于选择了本发明的培养箱，实施例中仅对本产品的一个制备方法进行描述，所述制备方法包括以下步骤：
48.1)、无菌采集脐带血，采用组织块直接培养法放入培养箱内进行培养，在本发明一个较佳的实施例采集的脐带血为人脐带血；
49.2)、弃组织块后，更换新鲜无血清培养基继续放入培养箱内进行培养；
50.3)、细胞融合90％后，收取上清液，再加入胰酶消化，离心，获得细胞；
51.4)、将细胞接种于培养器中进行培养，加入无血清培养基继续传代；
52.5)、收取细胞培养液，离心，并通过0.2μm孔径过滤器过滤；
53.6)、将上清液以分子量为指标进行筛选，获得由分子量为6.201kd的表皮生长因子、分子量为15.3kd的酸性成纤维细胞生长因子、分子量为16～18.5kd的碱性成纤维细胞生长因子和分子量为32～45kd的血管内皮生长因子构成的混合物；
54.其中，步骤1)中的培养箱包括箱体1、第一隔板2、槽轮减速机3、限位机构4、驱动机构5、转盘6、滑动槽7、放置块8、放置槽9、培养皿10、滑道11、第一滑动块12、第一驱动块13、第二驱动块14、门洞15、第一门体16、第二隔板17、第二门体18、安装块19和电子显微镜20，所述箱体1内壁下端固定有第一隔板2，所述第一隔板2下表面固定有槽轮减速机3，所述槽轮减速机3的输出端穿过第一隔板2固定有转盘6，所述转盘6表面等距开设有滑动槽7，所述滑动槽7内壁滑动连接有放置块8，所述放置块8两端对称固定有限位块24，所述滑道11内壁对称开设有限位槽25，且限位块24与限位槽25滑动连接，所述放置块8表面开设有放置槽9，所述放置槽9内壁放置有培养皿10，所述滑动槽7内壁底部开设有滑道11，所述放置块8底部固定有第一滑动块12，且第一滑动块12呈弧形设置，所述第一隔板2上表面一端固定有驱动机构5，所述驱动机构5的动端对称固定有第一驱动块13和第二驱动块14，所述第一驱动块13和第二驱动块14均呈与第一滑动块12相配合的弧形设置，且第一驱动块13和第二驱动块14呈同心设置，所述第一滑动块12内部安装有限位机构4，所述箱体1上端外侧开设有门洞15，所述门洞15内壁下端通过铰链铰接有第一门体16，所述箱体1内壁上端固定有第二隔板17，所述门洞15位于第二隔板17上表面的一端通过铰链铰接有第二门体18，所述箱体1内壁中部固定有安装块19，所述安装块19中部固定有电子显微镜20。
55.参考图7和图9所示，所述槽轮减速机3包括第一驱动壳31、第一转轴32、第一驱动盘33、拨槽34、弧形槽35、第二转轴36、第一伺服电机37、第二驱动盘38、拨柱39、限位盘310和避让槽311，所述第一隔板2下表面固定有第一驱动壳31，所述第一驱动壳31内壁通过轴承转动连接有第一转轴32，所述第一转轴32通过轴承与第一隔板2转动连接，所述第一隔板2顶部与转盘6固定连接，所述第一转轴32底部固定有第一驱动盘33，所述第一驱动盘33外侧等距开设有拨槽34和弧形槽35，所述第一驱动壳31内壁通过轴承转动连接有第二转轴36，所述第一驱动壳31底部固定有第一伺服电机37，且第一伺服电机37的输出端与第二转轴36固定连接，所述第二转轴36中部固定有第二驱动盘38，所述第二驱动盘38表面边缘固定有拨柱39，且拨柱39与拨槽34滑动连接，所述第二驱动盘38一侧固定有限位盘310，且限位盘310直径与弧形槽35直径相同，所述限位盘310一侧开设有避让槽311，通过第一伺服电机37转动一圈，带动第二驱动盘38和限位盘310旋转，进而带动拨柱39拨动拨槽34，使得第一驱动盘33旋转六分之一圈，此与现有的六分之一槽轮机构原理相同。
56.参考图7和图8所示，所述驱动机构5包括第二驱动壳51、第一螺纹杆52、第二滑动块53和第二伺服电机54，所述第一隔板2上表面靠近门洞15的一端固定有第二驱动壳51，所述第二驱动壳51内壁通过轴承转动连接有第一螺纹杆52，所述第二驱动壳51内壁滑动连接有第二滑动块53，且第一驱动块13和第二驱动块14均与第二滑动块53固定连接，所述第二驱动壳51一端固定有第二伺服电机54，所述第二伺服电机54的输出端与第一螺纹杆52固定连接，通过第二伺服电机54转动带动螺纹杆转动，进而可带动第二滑动块53进行滑动，从而带动第一驱动块13向密封门23的一端移动。
57.参考图4和图7所示，所述箱体1靠近第二驱动壳51的一端开设有取物孔21，所述取物孔21内壁滑动连接有滑动板22，且滑动板22与第二驱动块14固定连接，所述滑动板22远
离第二驱动块14的一端固定有密封门23，所述密封门23呈与箱体1相配合的弧形设置，密封门23通过驱动机构5驱动进行开合，可配合放置块8上的培养皿10开合。
58.参考图10、图11、图12和图13所示，所述限位机构4包括第一凹槽41、第二凹槽42、第一滑孔43、滑动条44、第三滑动块45、梯形块46、第二滑孔47、卡块48、驱动槽49、第一弹簧410、第二弹簧411和卡槽412，所述第一滑动块12内壁开设有第一凹槽41，所述第一凹槽41内壁顶部开设有第二凹槽42，所述第一凹槽41内壁靠近第一驱动块13的一端开设有第一滑孔43，所述第一滑孔43内壁滑动连接有滑动条44，所述滑动条44靠近第一凹槽41的一端固定有第三滑动块45，所述第三滑动块45顶部固定有梯形块46，所述第二凹槽42内壁一侧开设有第二滑孔47，所述第二滑孔47内壁滑动连接有卡块48，所述卡块48下表面开设有与梯形块46相配合的驱动槽49，且梯形块46与驱动槽49内壁滑动接触，所述卡块48一端固定有第一弹簧410，且第一弹簧410一端与第二凹槽42内壁固定连接，所述第三滑动块45一侧对称固定有第二弹簧411，且第二弹簧411一端与第一凹槽41内壁固定连接，所述第一凹槽41内壁固定有导杆26，且导杆26通过通孔与第三滑动块45滑动连接，所述导杆26位于一个第二弹簧411内壁，所述滑道11内壁靠近卡块48的一端开设有卡槽412，且卡块48与卡槽412卡接，第一驱动块13慢慢靠近第一滑动块12，并挤压第一滑动块12上的滑动条44，从而挤压滑动条44，带动第三滑动块45滑动，从而可带动梯形块46滑动，使得梯形块46的斜面挤压驱动槽49的斜面，进而可带动卡块48慢慢滑进第二凹槽42内，与卡槽412脱离，此时第一驱动块13与第一滑动块12接触，并推动第一滑动块12向密封门23的一端滑动，从而带动放置块8向密封门23的一端滑动，且第二滑动块53移动可通过滑动板22带动密封门23远离取物孔21，将密封门23打开，使得放置块8上的培养皿10慢慢从取物孔21推出，人们可直接将培养皿10取出即可，取出完成后，第二伺服电机54反转，带动第二滑动块53向回滑动，从而使得第一驱动块13与第一滑动块12脱离，而第二驱动块14与第一滑动块12接触，通过第二驱动块14将第一滑动块12推回，直至第二滑孔47滑动至与卡槽412重合的位置，使得卡块48在第一弹簧410的弹力下卡进卡槽412内，可对放置块8进行限位，防止在转盘6旋转时，放置块8滑动，第二滑动块53收回后，带动密封门23关闭，对箱体1进行密封。
59.参考图14所示，所述放置槽9内壁底部固定有led灯珠27，所述放置槽9内壁位于led灯珠27顶部固定有导光板28。
60.参考图1所示，所述第一伺服电机37和第二伺服电机54均为一种减速电机，所述箱体1一侧固定有控制显示面板29，且第一伺服电机37、第二伺服电机54、led灯珠27和电子显微镜20均与控制显示面板29电性连接。
61.参考图1所示，所述第一门体16和第二门体18中部均镶嵌固定有透明玻璃101，所述第一门体16和第二门体18一侧固定有把手102。
62.参考图3所示，所述箱体1底部对称固定有螺纹套筒103，所述螺纹套筒103内壁螺纹连接有第二螺纹杆104，所述第二螺纹杆104底部固定有六角旋钮105，所述六角旋钮105底部固定有放置片106，通过把手旋转六角旋钮105可带动第二螺纹杆104在螺纹套筒103内升降，从而可调节箱体1的水平。
63.工作原理：
64.在使用时，人们将装有细胞的培养皿10放置在放置槽9内，然后将第一门体16关闭，使得培养皿10在箱体1内进行培养，并且通过控制led灯珠27和导光板28发光，对培养皿
10进行照明，并且通过电子显微镜20观察培养皿10内的细胞情况和培养基情况，并记录，通过第一伺服电机37转动一圈，带动第二驱动盘38和限位盘310旋转，进而带动拨柱39拨动拨槽34，使得第一驱动盘33旋转六分之一圈，此与现有的六分之一槽轮机构原理相同，第一驱动盘33转动带动第一转轴32转动，进而可带动转盘6旋转六分之一圈，使得转盘6上的培养皿10旋转一个工位，使得相邻的未被检测的培养皿10旋转至电子显微镜20下方进行观察，依次往复，当检测出需要更换培养基或者需要细胞稀释时，通过控制显示面板29给操作人员发送更换信号，工作人员通过控制显示面板29控制第一伺服电机37转动，将需要更换的培养皿10旋转至密封门23的一端，使得放置块8上的第一滑动块12移动至第一驱动块13和第二驱动块14之间的位置，此时通过第二伺服电机54转动带动螺纹杆转动，进而可带动第二滑动块53进行滑动，从而带动第一驱动块13向密封门23的一端移动，第一驱动块13慢慢靠近第一滑动块12，并挤压第一滑动块12上的滑动条44，从而挤压滑动条44，带动第三滑动块45滑动，从而可带动梯形块46滑动，使得梯形块46的斜面挤压驱动槽49的斜面，进而可带动卡块48慢慢滑进第二凹槽42内，与卡槽412脱离，此时第一驱动块13与第一滑动块12接触，并推动第一滑动块12向密封门23的一端滑动，从而带动放置块8向密封门23的一端滑动，且第二滑动块53移动可通过滑动板22带动密封门23远离取物孔21，将密封门23打开，使得放置块8上的培养皿10慢慢从取物孔21推出，人们可直接将培养皿10取出即可，取出完成后，第二伺服电机54反转，带动第二滑动块53向回滑动，从而使得第一驱动块13与第一滑动块12脱离，而第二驱动块14与第一滑动块12接触，通过第二驱动块14将第一滑动块12推回，直至第二滑孔47滑动至与卡槽412重合的位置，使得卡块48在第一弹簧410的弹力下卡进卡槽412内，可对放置块8进行限位，防止在转盘6旋转时，放置块8滑动，第二滑动块53收回后，带动密封门23关闭，对箱体1进行密封，此过程中，仅仅是取物孔21打开一段时间，即可将需要去除的培养皿10去除，大大减少了箱体1与外界的连通面积和时间，减少空气交换，从而方便稳定控制箱体1内的温湿度和气体含量，减少波动，并降低能耗。
65.本发明中涉及的电路以及控制均为现有技术，在此不进行过多赘述。
66.以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其它相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。