大豆转基因事件IND-ØØ41Ø-5的制作方法

技术特征：

1.包含事件IND-ØØ41Ø-5的大豆植物或其部分，其中包含事件IND-ØØ41Ø-5的代表性大豆种子已经以ATCC PTA-125535登录号保藏。

2.根据权利要求1所述的植物的种子，其中所述种子包含事件IND-ØØ41Ø-5。

3.用根据权利要求2所述的种子生产的商品产品。

4.根据权利要求3所述的商品产品，其额外定义为粉、粉沫、絮片、油、生物柴油、生物气或其它生物材料。

5.根据权利要求1所述的大豆植物的部分，其定义为细胞、花粉、胚珠、花、芽、根或叶。

6.根据权利要求1所述的植物，其中相对于在相同条件下没有所述事件的植物，所述植物在非生物胁迫条件下具有提高的产量。

7.根据权利要求1所述的大豆植物，还定义为包含所述事件IND-ØØ41Ø-5的大豆植物的任何世代的后代植物。

8.根据权利要求1所述的大豆植物，其中所述植物基因组包含含有SEQ ID NO: 1的DNA分子。

9.根据权利要求7所述的大豆植物，其中当在DNA扩增方法中试验时，源自所述植物的DNA产生事件IND-ØØ41Ø-5的诊断扩增子，其包含所述扩增子SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3。

10. 根据权利要求2所述的种子，其中当在DNA扩增方法中试验时，所述种子DNA产生事件IND-ØØ41Ø-5的诊断扩增子，其包含所述扩增子SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3。

11.根据权利要求4所述的粉、粉沫、絮片、油、生物柴油、生物气或其它生物材料，额外定义为包含DNA分子，当在DNA扩增方法中试验时，所述DNA分子产生事件IND-ØØ41Ø-5的诊断扩增子，所述扩增子包含SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3。

12.被包含在事件IND-ØØ41Ø-5中的重组DNA分子，其特征在于包含序列SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 3且由以登录号ATCC PTA-125535的保藏物代表。

13.根据权利要求12所述的DNA分子，其特征在于在非生物胁迫条件下提高大豆栽培种的产量。

14.根据权利要求12所述的重组DNA分子，其特征在于，所述重组DNA分子由SEQ ID NO: 4的异源核酸分子与大豆植物、植物细胞或种子的基因组DNA的剪接而形成。

15.根据权利要求12所述的重组DNA分子，其特征在于，所述DNA分子存在于源自大豆转基因事件IND-ØØ41Ø-5的大豆植物、植物细胞、种子、后代植物、植物的部分或商品产品中。

16.包含核酸分子的DNA分子，所述核酸分子的核苷酸序列与SEQ ID NO: 1的连续核苷酸序列的足够部分互补，以作为DNA探针起作用，所述DNA探针在严格条件下与包含SEQ ID NO: 1的核苷酸序列的DNA分子杂交并且在严格条件下不与不包含SEQ ID NO: 1的核苷酸序列的DNA分子杂交。

17.一种DNA多核苷酸引物分子，其包含SEQ ID NO: 1的至少15个连续核苷酸或其互补序列，其可用于DNA扩增方法中以产生用于事件IND-ØØ41Ø-5的诊断扩增子。

18.一种分离的DNA多核苷酸引物分子，其包含SEQ ID NO: 750、751、752、753、754、755、756、757、758、759、760、2527、203、378、1970、1747、1748、1745、1746、822、1127、817、818、868、752、530、531、527、528、718、719、934或935的序列。

19.一种分离的DNA多核苷酸探针分子，其包含SEQ ID NO: 819、532、529、720或936的序列。

20.一种在植物中有功能的表达载体，其特征在于包含序列SEQ ID NO: 43。

21.根据权利要求1所述的微生物，其包含具有由SEQ ID NO: 4组成的核苷酸序列的核酸分子。

22.根据权利要求21所述的微生物，其中所述微生物是细菌。

23.根据权利要求22所述的微生物，其特征在于，所述细菌是根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)。

24.根据权利要求20所述的载体用于转化植物的用途。

25.根据权利要求21-23中的任一项所述的微生物用于转化植物的用途。

26.一种DNA检测试剂盒，其至少包含DNA分子，该DNA分子包含具有足够长度的SEQ ID NO: 1的连续核苷酸的核苷酸序列，以作为DNA引物或特异性探针起作用来检测源自大豆转基因事件IND-ØØ41Ø-5的DNA的存在，其中所述DNA的检测诊断所述大豆转基因事件IND-ØØ41Ø-5在样品中的存在。

27.一种生产耐受非生物胁迫的大豆植物的方法，所述方法包括下述步骤：

(a) 将事件IND-ØØ41Ø-5引入大豆细胞的基因组中；

(b) 选择含有bar标记基因的细胞；和

(c) 从项目(b)的细胞再生大豆植物。

28.一种生产耐受非生物胁迫的大豆植物的方法，所述方法包括下述步骤：

(a) 将包含事件IND-ØØ41Ø-5的第一大豆植物与缺乏事件IND-ØØ41Ø-5的第二大豆植物杂交以产生后代植物；和

(b) 至少选择包含事件IND-ØØ41Ø-5并且耐受非生物胁迫的第一后代植物。

29.根据权利要求28所述的方法，进一步包括自交所述第一后代植物以产生来自第二代的后代植物，并选择至少一株事件IND-ØØ41Ø-5的第一纯合植物。

30.一种检测与大豆事件IND-ØØ41Ø-5对应的DNA在样品中的存在的方法，其特征在于包括：

(a)将包含大豆DNA的样品与一组引物进行匹配，当在具有大豆事件IND-ØØ41Ø-5的基因组DNA的核酸的扩增反应中使用时，所述引物产生大豆事件IND-ØØ41Ø-5的诊断扩增子；和

(b)进行核酸扩增反应，从而产生诊断扩增子；

(c)检测诊断扩增子。

31.一种用于确定包含来自事件IND-ØØ41Ø-5的DNA的大豆基因组的接合性的方法，其包括：

a)将样品与不同的引物和探针对接触，

i)当在具有大豆事件IND-ØØ41Ø-5的核酸的扩增反应中使用时，所述引物和探针对产生作为大豆事件IND-ØØ41Ø-5的阳性诊断的诊断扩增子；和

ii)当在具有非IND-ØØ41Ø-5的大豆基因组DNA的核酸的扩增反应中使用时，所述引物和探针对产生诊断大豆野生型基因组DNA或并非事件IND-ØØ41Ø-5的扩增子；

b)进行核酸的扩增反应；和

c)检测所述扩增子；其中所述各扩增子的存在诊断所述样品中的杂合基因组，并且其中仅一种扩增子的存在诊断所述样品中事件IND-ØØ41Ø-5或野生型的纯合基因组，这取决于引物是在i)提到的那些还是ii)中提到的那些。

32.一种生产由大豆制成的商品产品的方法，其包括，

(a) 获得根据权利要求1所述的大豆植物或其部分；和

(b) 从所述大豆植物或其部分制备商品产品。

33.根据权利要求32所述的方法，其中所述商品产品定义为粉、粉沫、絮片、蛋白分离物、油、生物柴油、生物气或其它生物材料。

34.一种无生命植物材料，其包含根据权利要求12所述的重组DNA分子。

技术总结
本发明涉及植物生产、植物育种和农业的领域。更具体地，它涉及大豆转基因事件IND‑ØØ41Ø‑5，其表达赋予耐旱性的基因HaHB4，而不影响其它农业能力。本申请也公开了有关的核苷酸序列、植物、植物的部分、种子、细胞、农业产物、以及检测和生产方法。

技术研发人员：C·德扎尔;P·米兰达;G·沃森;M·奇奥扎;M·瓦茨奎兹;
受保护的技术使用者：百塞生技有限责任公司;
技术研发日：2019.03.28
技术公布日：2021.10.22