一种IC-ICP-MS血砷形态分析前处理装置及方法与流程

一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置及方法
技术领域
1.本发明属于血液砷形态分析领域，特别涉及一种集磁辅助分散萃取和超声喷雾分离于一体的用于ic
‑
icp
‑
ms血液中砷形态分析的前处理装置及其方法。


背景技术：

2.砷是一种分布范围广且具有生物累积性的类金属元素，主要通过食物和饮用水进入生物体，一旦摄入，可溶性砷很容易从胃肠道进入血液，并在第一次通过肝脏后分配到器官/组织。长期接触砷会导致一系列健康问题，例如肾癌、皮肤癌、周围神经病变和心血管疾病等。了解血液中的砷形态，有利于识别和量化生物体的砷暴露情况，探索生物体的解毒机制以保护器官免受其不利影响。然而，血液基质复杂，砷浓度又较低，且一些砷形态易与某些蛋白结合，致使在对血液样品进行砷形态分析前，通常需要使用微波消解仪、离心机等大量前处理设备进行预处理操作。这些繁琐操作不仅费时费力，且容易导致不稳定的砷形态发生改变。因此，开发一种能简单、快捷、高效地提取血液中不同砷形态的前处理装置，对于提高后续砷形态分析的便利性和准确性具有重要意义。
3.血液中目标物的提取可分为直接法和间接法。直接法即通过物理、化学的方法直接从血液基质中提取和纯化目标分析物，如电渗析、电膜提取、氢化物发生、微透析等。在血砷提取中，电渗析/电膜提取难以分离中性分子(如：在酸性或中性条件下以非电离形态h3aso3(又写作haso2)存在的三价砷)，氢化物发生对多形态的砷的发生效率难以一致、微透析的提取效率相对较低。因此上述方法均难以保证同时高效提取所有目标砷形态。间接法是先将蛋白质沉淀再通过离心、过滤等方法去除血液基质，进而分离目标物。已经开发出了一些基于离心分离血液目标分析物的简单方法，如利用打蛋器、指尖陀螺、纸陀螺等产生的离心力来分离血浆，但是它们难以快速将血液与蛋白沉淀剂混合，实现蛋白质沉淀。如今，基于纸张的分离方法因其廉价、简单、生物相容性和天然亲水性等优势而广受青睐。基于纸的被动过滤是通过毛细作用吸收溶液，并将复杂基质截留在纸张的微孔结构里达到基质分离的效果，但是这种方法往往分离时间较长且分离效率较低。纸基电喷雾可以解决这一问题，但是需要通过施加几千伏特的电势来实现雾化分离，因此，如何方便、高效地分离复杂基质的干扰一直是准确进行血样中砷形态分析的前提。
4.所以，为降低预处理成本，确保血液中砷形态分析的便利性和准确性，急需开发一种简单，快速，高效的提取和分离血液中的砷形态的预处理设备及方法。


技术实现要素：

5.针对上述技术问题，本发明提供一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置及方法，为提取和分离血液中的砷形态提供了便捷的预处理设备，提高随后通过ic
‑
icp
‑
ms进行砷形态分析的便利性和准确性。其具体技术方案如下：
6.一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置，包括磁辅助分散萃取系统(mde)和超声雾化分离系统(uss)；
7.所述磁辅助分散萃取系统包括指尖陀螺、旋转轴、4个圆环形磁铁、2个长方体磁铁ⅰ、2个长方体磁铁ⅱ、离心管ⅰ、离心管ⅱ、磁力搅拌子和底座；
8.所述指尖陀螺经旋转轴固定于底座的中心位置；所述4个圆环形磁铁对称粘贴于底座对角线处，n极向上；所述2个长方体磁铁ⅰ粘贴于底座过中点的一条垂线处，s极向上；所述2个长方体磁铁ⅱ位于底座过中点的另一条垂线处，粘贴于旋转轴上，s极向上；所述指尖陀螺为3叶，每个叶上设有圆孔，圆孔用于容纳离心管ⅰ和离心管ⅱ，离心管ⅰ底部放置磁力搅拌子；所述指尖陀螺经手指拨动旋转，使磁力搅拌子在相对变化的磁力的作用下在离心管ⅰ内旋转，形成粉碎性机械运动；所述离心管ⅰ与离心管ⅱ的管口对接；
9.所述指尖陀螺的材质为不锈钢，尺寸为15mm高度
×
55mm直径；
10.所述指尖陀螺的圆孔的直径为9.84mm，离心管ⅰ与离心管ⅱ的容量均为2ml，磁力搅拌子为
11.所述旋转轴的尺寸为25mm高度
×
10mm直径；
12.所述底座的尺寸为85mm长度
×
85mm宽度
×
1mm高度；
13.所述4个圆环形磁铁距底座中点距离为370mm；
14.所述4个圆环形磁铁、2个长方体磁铁ⅰ和2个长方体磁铁ⅱ的材质均为钕铁硼磁体；所述4个圆环形磁铁的尺寸为9mm高度
×
29mm外径
×
10mm内径；所述2个长方体磁铁ⅰ和2个长方体磁铁ⅱ尺寸均为20mm长
×
10mm宽
×
4mm高；
15.所述2个长方体磁铁ⅰ距中点距离为29mm，距底板上表面距离为5mm；所述2个长方体磁铁ⅱ距底板上表面距离为2mm；
16.所述离心管ⅰ与离心管ⅱ的管口对接处设置有超声雾化分离系统；所述超声雾化分离系统包括滤片、超滤膜和网格型压电超声换能器(mpun)；所述网格型压电超声换能器包括雾化片和pcb线路驱动板，所述雾化片由压电陶瓷环和同心的不锈钢基体组成；所述雾化片通过铜线连接pcb线路驱动板；所述滤片和超滤膜依次放置于雾化片的不锈钢基体面；所述雾化片上设有微孔；
17.所述压电陶瓷环的尺寸为内径8mm，外径16mm；
18.所述pcb线路驱动板的尺寸为长35mm，宽19mm，额定电压为5v、功率为2w；产生高频交变电场，频率为110khz；
19.所述滤片为f319
‑
04滤片，截留颗粒直径为0.3μm；所述超滤膜为10kda规格的聚醚砜超滤膜；所述滤片和超滤膜均为亲水性。
20.一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析方法，使用上述一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置，包括如下步骤：
21.步骤1，磁辅助分散萃取过程：
22.量取血液样品于离心管ⅰ中，依次加入曲拉通x
‑
100和n
‑
乙基马来酰亚胺，用手指拨动1次指尖陀螺使之旋转至自然停止，后静置；此时细胞破碎并使n
‑
乙基马来酰亚胺与血液样品中的巯基反应，以释放与蛋白结合的砷；然后，加入高氯酸并拨动指尖陀螺，使高氯酸与血液充分混合，以脱蛋白得到蛋白质沉淀后的均质化混合物；
23.步骤2，超声雾化分离过程：
24.倒置离心管ⅰ，使离心管ⅱ位于离心管ⅰ下方，打开网格型压电超声换能器的开关，均质化混合物中的小分子物质和水在毛细作用下自动经过滤片到达超滤膜上方，在雾化片
的高频振荡下经过超滤膜并雾化到离心管ⅱ中，即得到澄清的含砷溶液；
25.步骤3，ic
‑
icp
‑
ms形态分析过程：
26.将含砷溶液注射到ic
‑
icp
‑
ms系统中进行形态分析。
27.所述步骤1中，血液包括全血、血浆和血清；
28.所述步骤1中，曲拉通x
‑
100浓度为0.2％(v/v)，溶剂为水，用量为0～10μl。
29.所述步骤1中，n
‑
乙基马来酰亚胺浓度为12gl
‑1，溶剂为水，保存环境为阴凉避光，保持容器密封，用量为20～100μl。
30.所述步骤1中，高氯酸浓度为15％(v/v)，溶剂为水，高氯酸用量为20～60μl。
31.所述步骤1中，手指拨动指尖陀螺使之旋转至自然停止的时间为4～6s。
32.所述步骤1中，静置时间为5～6min。
33.所述步骤1中，加入高氯酸后拨动指尖陀螺2～6次。
34.所述步骤2中，雾化的时间2～3min，所述含砷溶液的体积>100μl。
35.所述步骤3中，注射使用100μl平头色谱进样针。
36.所述步骤3中，形态分析使用欧润oic
‑
600型离子色谱仪，配备有双柱塞串联平流泵，色谱柱为阴离子交换柱：hamiltonprp
‑
x100规格为250mm
×
4.1mm，10μm，保护柱：hamiltonprp
‑
x100规格为20mm
×
4.1mm，10μm，温度为室温，流动相为20mm磷酸氢二铵水溶液，用10％(v/v)甲酸调节ph＝6，流速：1ml/min，进样量：25μl；色谱柱出口通过50cm长的，内径为0.125mm的聚醚醚酮管连接至电感耦合等离子体质谱(icpms)同心雾化器入口；使用安捷伦7500icp
‑
ms，在时间分辨模式下进行检测；捕捉并记录待测元素的瞬时信号随时间响应，得到色谱峰，根据有效信号数值和高斯拟合结果得到色谱峰面积，定量血液中待测元素；载气流量1l/min；载气氩气纯度均为99.999％；安捷伦7500icp
‑
ms的功率为1500w，积分时间为100ms。
37.本发明的一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置及方法，与现有技术相比，有益效果为：
38.一、本发明装置使用在磁场驱动下立体旋转的磁力搅拌子，将血液与蛋白质沉淀剂混合来辅助砷形态的分散提取，然后，倒置装置中的离心管，利用覆盖有滤片和超滤膜的超声雾化片将砷形态从复杂基质中原位分离。
39.二、指尖陀螺经手指拨动旋转，使磁力搅拌子在相对变化的磁力的作用下在离心管内旋转，从而形成粉碎性机械运动，离心管中的血液样本和试剂可以快速、充分混合以实现均质化，从而完成砷形态的磁辅助分散萃取。
40.三、混合后将离心管倒置，均质化混合物中的大分子沉淀物质被滤片和超滤膜截留且滤片的吸水性特征还可以很容易地使小分子物质和水在毛细作用下到达超滤膜上方，继而经紧贴超滤膜的雾化片的高频振荡将其雾化分离得到澄清的溶液，从而完成砷形态的基质分离。
41.四、本发明最重要的是将血砷的提取与分离集成在一个装置上，所得溶液可直接用于后续的ic
‑
icp
‑
ms分析，不仅使预处理过程变得简单、快捷，保证了砷形态的稳定性，而且能高效地提取血液中砷，具体表现为在优化条件下对血砷的提取效率>96％，加标回收率为96
‑
103％。
42.五、本发明方法很好的去除了主要的样品基体成分，降低了基质的复杂性，对于提
高后续砷形态分析的便利性和准确性具有重要意义，具体表现为血砷检出限达0.006
‑
0.008μgl
‑1。
43.六、本发明使用了小型的玩具指尖陀螺、磁铁和家用雾化片，无需高温高压，或大功率仪器，大大降低了样品处理成本。所提出的发明为复杂基质的样品预处理的小型化和在线化奠定了基础。
附图说明
44.图1为本发明实施例1的一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置示意图；
45.图2为本发明实施例1的一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置俯视图；
46.图3为图2的a
‑
a面剖视图；
47.图4为图2的b
‑
b面剖视图；
48.图中：1
‑
底座，2
‑
旋转轴，3
‑
圆环形磁铁，4
‑
长方体磁铁ⅰ，5
‑
长方体磁铁ⅱ，6
‑
指尖陀螺，7
‑
离心管ⅰ，8
‑
离心管ⅱ，9
‑
磁力搅拌子。
49.图5为本发明实施例1的超声雾化分离系统示意图，图中：10
‑
滤片，11
‑
超滤膜，12
‑
雾化片，13
‑
pcb线路驱动板。
50.图6为本发明实施例1的雾化片示意图，图中：14
‑
压电陶瓷环，15
‑
不锈钢基体，16
‑
微孔。
51.图7为本发明实施例1的雾化片工作频率图。
52.图8为本发明实施例1的指尖陀螺从0
°
旋转到180
°
时，磁力搅拌子的在离心管ⅰ中的位置和状态。
53.图9中图a
‑
e为本发明实施例1的指尖陀螺一个旋转周期后通过ccd相机获得的全血样品与高氯酸混合的图像和相应的灰度分布图；图f
‑
j为本发明实施例1的砷提取物在分离之前和分离后以及对照物水的照片和相应的显微图像。
具体实施方式
54.下面结合具体实施案例和附图1
‑
9对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
55.实施例1
56.一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置，如图1
‑
6所示，包括磁辅助分散萃取系统和超声雾化分离系统；
57.所述磁辅助分散萃取系统包括指尖陀螺6、旋转轴2、4个圆环形磁铁3、2个长方体磁铁ⅰ4、2个长方体磁铁ⅱ5、离心管ⅰ7、离心管ⅱ8、磁力搅拌子9和底座1；
58.所述指尖陀螺6经旋转轴2固定于底座1的中心位置；所述4个圆环形磁铁3对称粘贴于底座1对角线处，n极向上；所述2个长方体磁铁ⅰ4粘贴于底座1过中点的一条垂线处，n极向上；所述2个长方体磁铁ⅱ5位于底座1过中点的另一条垂线处，粘贴于旋转轴2上，s极向上；所述指尖陀螺6为3叶，每个叶上设有圆孔，圆孔用于容纳离心管ⅰ7和离心管ⅱ8，离心管ⅰ7底部放置磁力搅拌子9；所述指尖陀螺6经手指拨动旋转，使磁力搅拌子9在相对变化的磁力的作用下在离心管ⅰ7内旋转，形成粉碎性机械运动；所述离心管ⅰ7与离心管ⅱ8的管口对接；
59.所述指尖陀螺6的材质为不锈钢，尺寸为15mm高度
×
55mm直径；
60.所述指尖陀螺6的圆孔的直径为9.84mm，离心管ⅰ7和离心管ⅱ8的容量均为2ml，磁力搅拌子9为
61.所述旋转轴2的尺寸为25mm高度
×
10mm直径；
62.所述底座1的尺寸为85mm长度
×
85mm宽度
×
1mm高度；
63.所述4个圆环形磁铁3距底座1中点距离为370mm；
64.所述4个圆环形磁铁3、2个长方体磁铁ⅰ4和2个长方体磁铁ⅱ5的材质均为钕铁硼磁体；所述4个圆环形磁铁3的尺寸为9mm高度
×
29mm外径
×
10mm内径；所述2个长方体磁铁ⅰ4和2个长方体磁铁ⅱ5的尺寸均为20mm长
×
10mm宽
×
4mm高；
65.所述2个长方体磁铁ⅰ4距中点距离为29mm，距底板上表面距离为5mm；所述2个长方体磁铁ⅱ2距底板上表面距离为2mm；
66.所述离心管ⅰ7与离心管ⅱ8的管口对接处设置有超声雾化分离系统；所述超声雾化分离系统包括滤片10、超滤膜11和网格型压电超声换能器(mpun)；所述网格型压电超声换能器包括雾化片12和pcb线路驱动板13，所述雾化片12由压电陶瓷环14和同心的不锈钢基体15组成；所述雾化片12通过铜线连接pcb线路驱动板13；所述滤片10和超滤膜11依次放置于雾化片12的不锈钢基体面；所述雾化片上设有微孔16；
67.所述压电陶瓷环14的尺寸为内径8mm，外径16mm；
68.所述pcb线路驱动板13的尺寸为长35mm，宽19mm，额定电压为5v、功率为2w；产生高频交变电场，频率为110khz；
69.所述滤片10为f319
‑
04滤片，截留颗粒直径为0.3μm；所述超滤膜11为10kda规格的聚醚砜超滤膜；所述滤片10和超滤膜11均为亲水性。
70.一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析方法，使用上述一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置，包括如下步骤：
71.步骤1，磁辅助分散萃取过程：
72.量取100μl全血样品于离心管ⅰ7中，依次加入10μl曲拉通x
‑
100和100μln
‑
乙基马来酰亚胺，用手指拨动1次指尖陀螺6使之旋转至自然停止，磁力搅拌子的在离心管ⅰ7中的位置和状态如图8所示，为指尖陀螺从0
°
旋转到180
°
时，磁力搅拌子的在离心管ⅰ7中的位置和状态，当指尖陀螺从180
°
旋转到360
°
时，重复该过程状态；后静置5min；此时细胞破碎并使n
‑
乙基马来酰亚胺与全血样品中的巯基反应，以释放与蛋白结合的砷；然后，加入60μl的高氯酸并拨动指尖陀螺6为5次，使高氯酸与样品充分混合，以脱蛋白得到蛋白质沉淀后的均质化混合物；本实施例，通过获取的图像和2d直方图对全血样品(全血100μl，含曲拉通x
‑
100、n
‑
乙基马来酰亚胺)和高氯酸的混合过程进行评估。随着混合的进行，像素强度的分布趋于统一，因此直方图中的峰值宽度，即标准差σ(t)减小，如图9所示：图中(a
‑
e)为指尖陀螺每个旋转周期(rp，从开始旋转到自然停止为一个旋转周期)后，通过ccd相机获得的全血样品(含曲拉通x
‑
100和n
‑
乙基马来酰亚胺)与高氯酸混合的图像和相应的灰度分布图(灰度分布的标准差σ揭示了混合状态，σ越小混合越均匀)，因此含有曲拉通x
‑
100和n
‑
乙基马来酰亚胺的全血样品可以在30s内完全与蛋白沉淀剂高氯酸混合。
73.步骤2，超声雾化分离过程：
74.倒置离心管ⅰ7，使离心管ⅱ8位于离心管ⅰ7下方，打开网格型压电超声换能器的开
关，均质化混合物中的小分子物质和水在毛细作用下自动经过滤片10到达超滤膜11上方，在雾化片12的高频振荡下经过超滤膜11并雾化到离心管ⅱ8中，雾化片工作频率如图7所示，即得到澄清的含砷溶液。本实施例分离效果见图9，图中砷提取物在分离(f)之前和分离后全血(g)和对照物水(j)的照片和相应的显微图像，可以观察到，获得的砷提取物完全透明，蛋白沉淀被超声雾化分离系统完全去除。
75.步骤3，ic
‑
icp
‑
ms形态分析过程：
76.将含砷溶液注射到ic
‑
icpms系统中进行形态分析。
77.所述步骤1中，曲拉通x
‑
100浓度为0.2％(v/v)，溶剂为水。
78.所述步骤1中，n
‑
乙基马来酰亚胺浓度为12gl
‑1，溶剂为水，保存环境为阴凉避光，保持容器密封。
79.所述步骤1中，高氯酸浓度为15％(v/v)，溶剂为水。
80.所述步骤1中，手指拨动指尖陀螺6使之旋转至自然停止的时间为4～6s。
81.所述步骤2中，雾化的时间2～3min，所述含砷溶液的体积为>100μl。
82.所述步骤3中，注射使用100μl平头色谱进样针。
83.所述步骤3中，形态分析使用欧润oic
‑
600型离子色谱仪，配备有双柱塞串联平流泵，色谱柱为阴离子交换柱：hamiltonprp
‑
x100规格为250mm
×
4.1mm，10μm，保护柱：hamiltonprp
‑
x100规格为20mm
×
4.1mm，10μm，温度为室温，流动相为20mm磷酸氢二铵缓冲液，用10％(v/v)甲酸调节ph＝6，流速：1ml/min，进样量：25μl；色谱柱出口通过50cm长的，内径为0.125mm的聚醚醚酮管连接至电感耦合等离子体质谱(icpms)同心雾化器入口；使用安捷伦7500icp
‑
ms，在时间分辨模式下进行检测；捕捉并记录待测元素的瞬时信号随时间响应，得到色谱峰，根据有效信号数值和高斯拟合结果得到色谱峰面积，定量血液中待测元素；载气流量1l/min；载气氩气纯度均为99.999％；安捷伦7500icp
‑
ms的功率为1500w，积分时间为100ms。
84.实施例2
85.一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置，同实施例1的装置。
86.一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析方法，使用上述一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置，包括如下步骤：
87.步骤1，磁辅助分散萃取过程：
88.量取150μl血浆样品于离心管ⅰ7中，加入50μln
‑
乙基马来酰亚胺，用手指拨动1次指尖陀螺6使之旋转至自然停止，后静置5min；此时细胞破碎并使n
‑
乙基马来酰亚胺与血浆样品中的巯基反应，以释放与蛋白结合的砷；然后，加入30μl的高氯酸并拨动指尖陀螺6为4次，使高氯酸与样品充分混合，以脱蛋白得到蛋白质沉淀后的均质化混合物；
89.步骤2，超声雾化分离过程：
90.倒置离心管ⅰ7，使离心管ⅱ8位于离心管ⅰ7下方，打开网格型压电超声换能器的开关，均质化混合物中的小分子物质和水在毛细作用下自动经过滤片10到达超滤膜11上方，在雾化片12的高频振荡下经过超滤膜11并雾化到离心管ⅱ8中，即得到澄清的含砷溶液。本实施例分离效果见图9，图中砷提取物在分离后血浆(h)的照片和相应的显微图像，可以观察到，获得的砷提取物完全透明，蛋白沉淀被超声雾化分离系统完全去除。
91.步骤3，ic
‑
icp
‑
ms形态分析过程：
92.将含砷溶液注射到ic
‑
icp
‑
ms系统中进行形态分析。
93.所述步骤1中，n
‑
乙基马来酰亚胺浓度为12gl
‑1，溶剂为水，保存环境为阴凉避光，保持容器密封。
94.所述步骤1中，高氯酸浓度为15％(v/v)，溶剂为水；
95.所述步骤1中，手指拨动指尖陀螺6使之旋转至自然停止的时间为4～6s。
96.所述步骤2中，雾化的时间2～3min，所述含砷溶液的体积为>100μl。
97.所述步骤3中，注射使用100μl平头色谱进样针。
98.所述步骤3中，形态分析使用欧润oic
‑
600型离子色谱仪，配备有双柱塞串联平流泵，色谱柱为阴离子交换柱：hamiltonprp
‑
x100规格为250mm
×
4.1mm，10μm，保护柱：hamiltonprp
‑
x100规格为20mm
×
4.1mm，10μm，温度为室温，流动相为20mm磷酸氢二铵缓冲液，用10％(v/v)甲酸调节ph＝6，流速：1ml/min，进样量：25μl；色谱柱出口通过50cm长的，内径为0.125mm的聚醚醚酮管连接至电感耦合等离子体质谱(icpms)同心雾化器入口；使用安捷伦7500icp
‑
ms，在时间分辨模式下进行检测；捕捉并记录待测元素的瞬时信号随时间响应，得到色谱峰，根据有效信号数值和高斯拟合结果得到色谱峰面积，定量血浆中待测元素；载气流量1l/min；载气氩气纯度均为99.999％；安捷伦7500icp
‑
ms的功率为1500w，积分时间为100ms。
99.实施例3
100.一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置，同实施例1的装置。
101.一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析方法，使用上述一种ic
‑
icp
‑
ms血砷形态分析前处理装置，包括如下步骤：
102.步骤1，磁辅助分散萃取过程：
103.量取200μl血清样品于离心管ⅰ7中，加入20μln
‑
乙基马来酰亚胺，用手指拨动1次指尖陀螺6使之旋转至自然停止，后静置5min；此时细胞破碎并使n
‑
乙基马来酰亚胺与血清样品中的巯基反应，以释放与蛋白结合的砷；然后，加入20μl的高氯酸并拨动指尖陀螺6为3次，使高氯酸与样品充分混合，以脱蛋白得到蛋白质沉淀后的均质化混合物；
104.步骤2，超声雾化分离过程：
105.倒置离心管ⅰ7，使离心管ⅱ8位于离心管ⅰ7下方，打开网格型压电超声换能器的开关，均质化混合物中的小分子物质和水在毛细作用下自动经过滤片10到达超滤膜11上方，经雾化片12的高频振荡后经过超滤膜11并雾化到离心管ⅱ8中，即得到澄清的含砷溶液。本实施例分离效果见图9，图中砷提取物在分离后血清(i)的照片和相应的显微图像，可以观察到，获得的砷提取物完全透明，蛋白沉淀被超声雾化分离系统完全去除。步骤3，ic
‑
icp
‑
ms形态分析过程：
106.将含砷溶液注射到ic
‑
icpms系统中进行形态分析。
107.所述步骤1中，n
‑
乙基马来酰亚胺浓度为12gl
‑1，溶剂为水，保存环境为阴凉避光，保持容器密封。
108.所述步骤1中，高氯酸浓度为15％(v/v)，溶剂为水。
109.所述步骤1中，手指拨动指尖陀螺6使之旋转至自然停止的时间为4～6s。
110.所述步骤2中，雾化的时间2～3min，所述含砷溶液的体积为>100μl。
111.所述步骤3中，注射使用100μl平头色谱进样针。
112.所述步骤3中，形态分析使用欧润oic
‑
600型离子色谱仪，配备有双柱塞串联平流泵，色谱柱为阴离子交换柱：hamiltonprp
‑
x100规格为250mm
×
4.1mm，10μm，保护柱：hamiltonprp
‑
x100规格为20mm
×
4.1mm，10μm，温度为室温，流动相为20mm磷酸氢二铵缓冲液，用10％(v/v)甲酸调节ph＝6，流速：1ml/min，进样量：25μl；色谱柱出口通过50cm长的，内径为0.125mm的聚醚醚酮管连接至电感耦合等离子体质谱(icpms)同心雾化器入口；使用安捷伦7500icp
‑
ms，在时间分辨模式下进行检测；捕捉并记录待测元素的瞬时信号随时间响应，得到色谱峰，根据有效信号数值和高斯拟合结果得到色谱峰面积，定量血清中待测元素；载气流量1l/min；载气氩气纯度均为99.999％；安捷伦7500icp
‑
ms的功率为1500w，积分时间为100ms。