一种灵芝孢子粉/葛根复合肽粉及其制备方法与流程

1.本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种灵芝孢子粉/葛根复合肽粉及其制备方法。


背景技术：

2.灵芝孢子粉是灵芝的种子，在生长和成熟期间从灵芝菇菌褶中排出。灵芝孢子粉中含有多糖、三萜、有机锗、腺嘌呤核苷和微量元素硒等有益活性成分。灵芝多糖可增强免疫系统机能，加强血液循环。灵芝三萜是灵芝的主要药理成分，对于抗肿瘤、镇痛消炎等有着重要功效。有机锗能增强人体血液供氧量，促进血液新陈代谢，清除体内自由基，防止细胞老化。腺嘌呤核苷可抑制血小板凝聚，防止血栓形成。微量元素硒可预防癌症，减轻疼痛，预防前列腺增生。
3.葛根是一种野生植物，含多种黄酮类成分，主要活性成分为大豆素、大豆甙、葛根素等。葛根性良、气平、味甘、具有清热、降火、排毒等功效。黄酮类化合物葛根素对高血压、高血脂、高血糖和肥胖病及心脑血管病都有一定疗效。
4.灵芝孢子粉和葛根粉分子量大，特别是灵芝孢子粉，有两层坚硬的细胞壁，直接食用后很难吸收和利用物质内的营养成分。


技术实现要素：

5.针对现有技术中的问题，本发明提出了一种灵芝孢子粉/葛根复合肽粉，该灵芝孢子粉/葛根复合肽粉，其分子量小，有效成分易吸收利用，可增强食用效果，发挥生理活性作用。
6.为了实现上述目的，本发明提出了如下技术方案：
7.一种灵芝孢子粉/葛根复合肽粉，由以下重量份数的原料制成：
8.破壁灵芝孢子粉50
‑
80份，葛根粉30
‑
50份，红曲酯化酶0.1
‑
1.0份，阿斯巴甜0.1
‑
0.8份。
9.优选地，所述破壁灵芝孢子粉的制备方法为：
10.(1)将溶壁酶加入到溶剂中，随后加入灵芝孢子粉浸泡其中，浸泡时间2
‑
5h，温度保持在20
‑
40℃，得到灵芝袍子粉浸泡液；
11.(2)将灵芝袍子粉浸泡液放于离心管中，启动离心机离心，离心结束后，用玻璃棒搅拌离心管中的物质，混合均匀后，静置5
‑
10min，随后启动离心机再次离心，得到离心产物；
12.(3)将离心产物放于干净的烧杯中，超声振荡30
‑
60min；
13.(4)采用冷冻干燥法，将步骤(3)中得到的产物进行干燥，提取其中的破壁灵芝孢子粉，经过透析进一步纯化产物。
14.优选地，所述离心机的转速为3000
‑
4000r/s，离心时间为10
‑
30min。
15.优选地，所述灵芝孢子粉为40
‑
60份，所述溶剂为80
‑
160份，所述溶壁酶为0.2
‑
1.2
份。
16.优选地，所述溶剂为无水乙醇。
17.优选地，所述葛根粉的制备方法为：将葛根清洗干净，在温度为40
‑
60℃的烘箱中烘干30
‑
60min，然后加入药用搅拌机中粉碎，得到40
‑
60目葛根粉。
18.优选地，所述红曲酯化酶的制备方法为：
19.(1)在浓香型大曲中分离筛选得到红曲霉菌种；
20.(2)一级培育：将红曲霉菌种以50％的接种量置于灭菌的培养基中培养，培养时间为24
‑
72h，培养温度为25
‑
35℃，得到一级红曲霉；
21.(3)二级培育：将一级红曲霉以25％的接种量置于灭菌的培养基中培养，培养时间为24
‑
72h，培养温度为25
‑
35℃，得到二级红曲霉；
22.(4)将培育好的一级红曲霉再进行常规扩大培养即可得到红曲酯化酶。
23.优选地，所述的培养基由以下质量百分比的原料制成：磷酸氢二钾0.1
‑
0.3％、硫酸镁0.03
‑
0.1％、琼脂15
‑
30％、麦芽浸粉30
‑
50％、大曲粉0.5
‑
1.0％、蒸馏水25
‑
45％。
24.本发明还提供了一种灵芝孢子粉/葛根复合肽粉的制备方法，包括以下步骤：
25.(1)将破壁灵芝孢子粉和葛根粉按照重量份数混合在干净烧杯中，然后加入蒸馏水搅拌，放在50
‑
100℃的水浴锅中水浴加热1
‑
3h，再加入红曲酯化酶和阿斯巴甜，温度调到30
‑
50℃加热2
‑
3h；
26.(2)取上层的浸出液，在真空泵中进行抽滤，最终抽滤瓶中的滤液即为肽液；
27.(3)对肽液进行真空喷雾干燥，所得的干燥物粉碎处理，得到灵芝孢子粉/葛根复合肽粉。
28.与现有技术相比，本发明将破壁灵芝孢子粉和葛根粉混合，然后用含有红曲酯化酶的溶液提取活性物质，最后把含有活性物质的浸出液抽滤干燥，得到灵芝孢子粉/葛根复合肽粉。
29.本发明能把破壁灵芝孢子粉多糖、三萜等活性物质和葛根粉中大豆素、大豆甙等活性物质提取到肽粉之中，增强了可食用价值。灵芝孢子粉具有两层坚硬的细胞壁，将其破壁后，其内的活性物质才容易被人吸收。葛根粉分子量大，直接服用，其内的有效活性物质很难被吸收。
30.用红曲酯化酶能有效提取破壁灵芝孢子粉和葛根粉中的活性物质，红曲酯化酶能促进酸和醇进行酯化反应，它也能成为多糖、三萜、大豆素等活性物质的溶剂，红曲酯化酶和活性物质中的分子间作用力相似，很容易互溶。这些小分子的活性物质被提取后，制成多肽能被人体有效吸收，增强食用效果，最大程度地发挥其生理活性作用。
31.本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式中予以详细说明。
具体实施方式
32.为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐明本发明。
33.本发明中所有的原料，对其纯度没有特别限定，本发明优选采用分析纯或复合材料领域使用的常规纯度。
34.实施例1
35.本实施例中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉，由以下重量份数的原料制成：
36.破壁灵芝孢子粉50份，葛根粉30份，红曲酯化酶0.1份，阿斯巴甜0.1份。
37.破壁灵芝孢子粉的制备方法为：
38.(1)将0.2份溶壁酶加入到100份无水乙醇中，随后加入40份灵芝孢子粉浸泡其中，浸泡时间2h，温度保持在30℃，得到灵芝袍子粉浸泡液；
39.(2)将灵芝袍子粉浸泡液放于离心管中，启动离心机离心，离心机的转速为3000r/s，离心时间为20min，离心结束后，用玻璃棒搅拌离心管中的物质，混合均匀后，静置10min，随后启动离心机再次离心，得到离心产物；
40.(3)将离心产物放于干净的烧杯中，超声振荡40min；
41.(4)采用冷冻干燥法，将步骤(3)中得到的产物进行干燥，提取其中的破壁灵芝孢子粉，经过透析进一步纯化产物。
42.红曲酯化酶的制备方法为：
43.(1)在浓香型大曲中分离筛选得到红曲霉菌种；
44.(2)一级培育：将红曲霉菌种以50％的接种量置于灭菌的培养基中培养，培养时间为36h，培养温度为25℃，得到一级红曲霉；
45.(3)二级培育：将一级红曲霉以25％的接种量置于灭菌的培养基中培养，培养时间为36h，培养温度为25℃，得到二级红曲霉；
46.(4)将培育好的红曲霉再进行常规扩大培养即可得到红曲酯化酶。
47.培养基由以下质量百分比的原料制成：磷酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.05％、琼脂25％、麦芽浸粉40％、大曲粉0.55％、蒸馏水34.2％。
48.一种灵芝孢子粉/葛根复合肽粉的制备方法，包括以下步骤：
49.(1)将50份破壁灵芝孢子粉和30份葛根粉混合在干净烧杯中，然后加入蒸馏水搅拌，放在60℃的水浴锅中水浴加热2h，再加入0.1份红曲酯化酶和0.1份阿斯巴甜，温度调到40℃加热2h；
50.(2)取上层的浸出液，在真空泵中进行抽滤，最终抽滤瓶中的滤液即为肽液；
51.(3)对肽液进行真空喷雾干燥，所得的干燥物粉碎处理，得到灵芝孢子粉/葛根复合肽粉。
52.实施例2
53.本实施例与实施例1中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉的制备方法基本一致，不同的是，本实施例中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉由以下重量份数的原料制成：
54.破壁灵芝孢子粉80份，葛根粉50份，红曲酯化酶1.0份，阿斯巴甜0.8份。
55.实施例3
56.本实施例与实施例1中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉的制备方法基本一致，不同的是，本实施例中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉由以下重量份数的原料制成：
57.破壁灵芝孢子粉60份，葛根粉40份，红曲酯化酶0.5份，阿斯巴甜0.5份。
58.对比例1
59.本对比例与实施例1中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉的制备方法基本一致，不同的是，本实施例中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉由以下重量份数的原料制成：
60.破壁灵芝孢子粉60份，葛根粉40份，红曲酯化酶0.08份，阿斯巴甜0.5份。
61.对比例2
62.本对比例与实施例1中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉的制备方法基本一致，不同的是，本实施例中的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉由以下重量份数的原料制成：
63.破壁灵芝孢子粉60份，葛根粉40份，红曲酯化酶1.5份，阿斯巴甜0.5份。
64.针对实施例1
‑
3和对比例1
‑
2制备得到的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉进行物质含量的测定。采用uv
‑
2700型紫外分光光度计来测定复合肽粉中的多糖、三萜的含量，采用高效液相色谱法测定复合肽粉中的葛根素含量，测定的数据结果见表1。
65.表1实施例1
‑
3和对比例1测定的结果(％)
66.组别多糖三萜葛根素实施例11.461.023.52实施例21.891.254.21实施例31.611.163.69对比例10.920.682.13对比例21.621.163.71
67.由表1中的数据可知，根据本发明方法制备所得的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉中含有的多糖、三萜和葛根素的含量相对较多，多糖和三萜是灵芝孢子粉中的有效活性成分，葛根素是葛根中的有效活性成分，由此可知，通过本发明方法成功提取了灵芝孢子粉和葛根中的有效活性物质，制备得到的灵芝孢子粉/葛根复合肽粉中含有更多的营养成分，更能发挥生理活性作用。此外，通过对比例2可知，加入过多的红曲酯化酶，提取的活性物质也不一定更多，反而会造成资源的浪费。
68.以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的特点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明的范围内。本发明要求保护的范围由所附的权利要求书及其等效物界定。