一种具有降血压功效的蝉花虫草牛奶及其制备方法与流程

1.本发明属于功能性食用菌深加工技术领域，具体涉及一种具有降血压功效的蝉花虫草牛奶及其制备方法。


背景技术：

2.血压是指血液在动脉壁造成的压力，当血液流经血管时，动脉壁压力的大小受到三个主要因素的影响：血容量、动脉壁张力和血液粘稠度，当此三个因素中的一个或多个发生病变时，血液在血管中流动时对血管壁造成的压力值会高于正常值，即为高血压。高血压是最常见的心血管疾病之一，也是导致脑卒中、冠心病、心力衰竭等疾病的重要危险因素。
3.n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷(n6
‑
(2
‑
hydroxyethyl)adenosine，hea)是从蝉花虫草菌丝体中提取的腺苷类衍生物，是虫草的特有成分，已报道的功能包括杀菌、抗癌、抗惊厥和降血压等，并具有ca
2
拮抗作用和肌肉收缩活性。hea是目前已知的第一个生物来源的钙离子拮抗剂，也是腺苷a1受体激动剂，使用dpcpx(腺苷a1受体拮抗剂)可以证明hea是作用于腺苷a1受体，而虫草独特的药用价值更促使其药理学研究不断发展。因此，基于蝉花虫草开发相应的降血压食品或保健品成为新的保健时尚。


技术实现要素：

4.为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种具有降血压功效的蝉花虫草牛奶，并进一步公开其制备方法。
5.为解决上述技术问题，本发明所述的一种具有降血压功效的蝉花虫草牛奶的制备方法，包括如下步骤：
6.(1)取蝉花虫草子实体粉碎，加水后混匀，并进行高速磨浆破壁处理；
7.(2)将得到的混合料液进行均质处理，浓缩后经真空干燥处理得到粉料；
8.(3)将所得粉料经气流超微粉碎机进行深度粉碎，得到蝉花虫草子实体超微粉，备用；
9.(4)取生牛乳经闪蒸处理后进行脱脂处理，得到脱脂生牛乳；
10.(5)将得到的脱脂生牛乳倒入调配罐中，升温至55
‑
60℃，并加入所述蝉花虫草超微粉和甜味剂，充分混匀，备用；
11.(6)将所得的料液升温到65
‑
70℃并进行均质处理，经高温杀菌，冷却后灌装，即得。
12.具体的，所述步骤(1)中，所述蝉花虫草子实体与水的质量比为1：0.8
‑
1.2。
13.具体的，所述步骤(1)中，所述高速磨浆破壁处理步骤的转速为1200
‑
1500r/min。
14.具体的，所述步骤(2)中，所述均质步骤为高压均质处理。
15.具体的，所述步骤(2)中，所述真空干燥步骤中，控制真空度为0.05
‑
0.1mpa，温度为60
‑
80℃。
16.具体的，所述步骤(3)中，控制所述超微粉的粒径小于10μm。
17.具体的，所述步骤(3)中，控制所述蝉花虫草的加入量占所述脱脂生牛乳用量的10
‑
15wt％。
18.具体的，所述步骤(3)中，控制所述甜味剂的加入量占所述脱脂生牛乳用量的0.5
‑
0.8wt％。
19.具体的，所述甜味剂包括蔗糖、麦芽糖和/或蜂蜜。
20.本发明还公开了由所述方法制备得到的具有降血压功效的蝉花虫草牛奶。
21.本发明所述的n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷高含量蝉花虫草子实体经由可提高蝉花虫草子实体中n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷含量的方法栽培获得，具体包括在液体培养基中进行液体菌种培养以及在固体培养基中进行子实体培养的步骤；
22.所述固体培养基包括质量比为1：0.8
‑
1.5的固体基质和营养液；
23.所述固体基质包括如下重量份的组分：玉米渣20
‑
30重量份、麸皮10
‑
20重量份、蝉蛹粉10
‑
20重量份、桑枝碎粒3
‑
8重量份、烟叶茎秆碎粒5
‑
12重量份、em菌粉0.5
‑
2重量份；
24.所述营养液包括如下质量含量的组分：碳源20
‑
30g/l、氮源20
‑
30g/l、无机盐5
‑
12g/l，ph6
‑
8。
25.具体的，所述提高蝉花虫草子实体中n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷含量的栽培方法：
26.所述碳源包括葡萄糖；
27.所述氮源包括蛋白胨；
28.所述无机盐包括磷酸二氢钾、磷酸氢二钾和硫酸镁的混合物。
29.具体的，所述子实体培养步骤包括发菌步骤、转色步骤以及子实体管理步骤。
30.具体的，所述发菌步骤的控制条件包括：控制培养温度15
‑
18℃、湿度60
‑
80％，进行避光培养。
31.具体的，所述转色步骤的控制条件包括：控制光照条件为200
‑
500lux，控制光周期光暗比为l15
‑
18：d6
‑
9，培养温度15
‑
18℃，湿度60
‑
80％。
32.具体的，所述子实体管理步骤的控制条件包括：控制光照条件为200
‑
500lux，控制光周期光暗比为l15
‑
18：d6
‑
9，培养温度20
‑
25℃，湿度60
‑
80％。
33.具体的，所述液体培养基包括如下质量含量的组分：葡萄糖2
‑
6％、鸡蛋清1
‑
2％、蛋白胨1
‑
3％、mgso4·
7h2o 0.05％、kh2po
4 0.05％，自然ph值。
34.具体的，所述液体菌种培养的条件包括：控制发酵温度20
‑
25℃，搅拌转速150
‑
180rpm。
35.具体的，还包括在所述液体菌种培养步骤前将所述菌株进行常规活化的步骤。
36.本发明还公开了由所述栽培方法得到的蝉花虫草子实体。
37.本发明所述具有降血压功效的蝉花虫草牛奶，以蝉花虫草子实体为原料，经加工成超微粉形态后加入至脱脂牛乳中，加工形成功能性牛奶。由于所述蝉花虫草子实体具有较高含量的n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷，确保其具有较好的降血压功效，且便于日常饮用，保健效果更优。
38.本发明所述具有降血压功效的蝉花虫草牛奶，其使用的蝉花虫草子实体为经优化工艺栽培所得的n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷高含量产品，其在常规蝉花虫草子实体栽培工艺的基础上，通过对固体培养基基质的筛选，有效的诱导发酵过程中n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷的积累，提高蝉花虫草子实体中n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷的含量。本发明所述方法特异性针对于发酵过
程中n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷的积累，相比于一般性针对于腺苷优化的方案，其对于n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷含量的提高尤为突出。
具体实施方式
39.实施例1
40.在本发明下述制备例中，选用的培育蝉花虫草的菌株为现有技术常规已知菌株即可，下述实施例选用的所述蝉花虫草菌株购于上海抚生实业有限公司。
41.本发明下述制备例中，所述蝉花虫草经液体培养获得相应的培养液(种子液)，再接种于相应的固体培养基中进行子实体的发酵。下述制备例中，所述液体培养步骤使用的液体培养基包括如下质量含量的组分：葡萄糖4％、鸡蛋清1％、蛋白胨2％、mgso4·
7h2o 0.05％、kh2po
4 0.05％，自然ph值。经灭菌后，于无菌条件下，将保存的菌株挖块接种至上述液体培养基中，控制发酵温度22℃，搅拌转速160rpm进行摇瓶培养48h，获得如下实施例中待接种进行子实体固体发酵的种子液，备用。
42.制备例1
43.本制备例中将上述获得的种子液在固体培养基中进行子实体的培养。
44.按照如下含量配制所述固体基质：玉米渣20重量份、麸皮20重量份、蝉蛹粉10重量份、桑枝碎粒8重量份、烟叶茎秆碎粒5重量份、em菌粉2重量份(暂不加入)；
45.按照如下含量配制所述营养液：葡萄糖20g/l、蛋白胨30g/l、磷酸二氢钾2g/l、磷酸氢二钾1g/l、硫酸镁2g/l；
46.按照1：0.8的质量比将上述固体培养基(除em菌粉)和营养液相混匀，将配制好的培养基封口，置于高压湿热灭菌锅中，121℃常规灭菌40min。
47.于室温及无菌条件下，按照10wt％的接种量将上述种子液接种入所述固体培养基中，并加入相应量的所述em菌粉混匀，随后将接种后的培养基置于栽培室内培养，控制温度17℃，湿度70％，进行避光培养3
‑
5天，至发菌完全。
48.随后调整光照条件，控制光照条件为300lux下，控制光周期光暗比为l16：d8，继续控制培养温度17℃、湿度70％，继续培养5
‑
8天完成转色并可形成子座芽。
49.随后保持上述光照条件，继续控制光照条件为300lux下，控制光周期光暗比为l16：d8，控制培养温度22℃、湿度70％，继续培养15
‑
20天，采收成熟的子实体，烘干，即得。
50.制备例2
51.本制备例中将上述获得的种子液在固体培养基中进行子实体的培养。
52.按照如下含量配制所述固体基质：玉米渣30重量份、麸皮10重量份、蝉蛹粉20重量份、桑枝碎粒3重量份、烟叶茎秆碎粒12重量份、em菌粉0.5重量份(暂不加入)；
53.按照如下含量配制所述营养液：葡萄糖30g/l、蛋白胨20g/l、磷酸二氢钾4g/l、磷酸氢二钾4g/l、硫酸镁4g/l；
54.按照1：1.5的质量比将上述固体培养基(除em菌粉)和营养液相混匀，将配制好的培养基封口，置于高压湿热灭菌锅中，121℃常规灭菌40min。
55.于室温及无菌条件下，按照10wt％的接种量将上述种子液接种入所述固体培养基中，并加入相应量的所述em菌粉混匀，随后将接种后的培养基置于栽培室内培养，控制温度17℃，湿度70％，进行避光培养3
‑
5天，至发菌完全。
56.随后调整光照条件，控制光照条件为300lux下，控制光周期光暗比为l16：d8，继续控制培养温度17℃、湿度70％，继续培养5
‑
8天完成转色并可形成子座芽。
57.随后保持上述光照条件，继续控制光照条件为300lux下，控制光周期光暗比为l16：d8，控制培养温度22℃、湿度70％，继续培养15
‑
20天，采收成熟的子实体，烘干，即得。
58.制备例3
59.本制备例中将上述获得的种子液在固体培养基中进行子实体的培养。
60.按照如下含量配制所述固体基质：玉米渣25重量份、麸皮15重量份、蝉蛹粉15重量份、桑枝碎粒5重量份、烟叶茎秆碎粒8重量份、em菌粉1重量份(暂不加入)；
61.按照如下含量配制所述营养液：葡萄糖25g/l、蛋白胨25g/l、磷酸二氢钾3g/l、磷酸氢二钾2g/l、硫酸镁3g/l；
62.按照1：1.2的质量比将上述固体培养基(除em菌粉)和营养液相混匀，将配制好的培养基封口，置于高压湿热灭菌锅中，121℃常规灭菌40min。
63.于室温及无菌条件下，按照10wt％的接种量将上述种子液接种入所述固体培养基中，并加入相应量的所述em菌粉混匀，随后将接种后的培养基置于栽培室内培养，控制温度17℃，湿度70％，进行避光培养3
‑
5天，至发菌完全。
64.随后调整光照条件，控制光照条件为300lux下，控制光周期光暗比为l16：d8，继续控制培养温度17℃、湿度70％，继续培养5
‑
8天完成转色并可形成子座芽。
65.随后保持上述光照条件，继续控制光照条件为300lux下，控制光周期光暗比为l16：d8，控制培养温度22℃、湿度70％，继续培养15
‑
20天，采收成熟的子实体，烘干，即得。
66.制备例4
67.本制备例所述蝉花虫草子实体的培养方法同制备例3，其区别仅在于，所述固体基质中不含有所述em菌粉。
68.制备例5
69.本制备例所述蝉花虫草子实体的培养方法同制备例3，其区别仅在于，所述固体基质中不含有所述烟叶茎秆碎粒。
70.制备例6
71.本制备例所述蝉花虫草子实体的培养方法同制备例3，其区别仅在于，所述固体基质中不含有所述桑枝碎粒。
72.分别收集上述制备例4
‑
6中采收所得子实体100g，按照中国专利cn102070690b中公开的方法，先后利用树脂柱进行分离除杂以及制备型色谱柱进行分离，分别收集各保留时间下的虫草素、腺苷和n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷，称量并计算其得率，记录于下表1。
73.表1虫草素、腺苷和n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷的提取量
74.75.可见，本发明所述方法通过对固体培养基的针对性筛选，其尤为适宜于虫草子实体发酵过程中n6
‑
(2
‑
羟乙基)腺苷的积累。
76.实施例1
77.本实施例所述具有降血压功效的蝉花虫草牛奶的制备方法，包括如下步骤：
78.(1)取制备例4中采收的蝉花虫草子实体粉碎，加入等量的水进行混匀，并加入至磨浆机中，控制转速1300rpm进行高速磨浆破壁处理；
79.(2)将得到的混合料液于10
‑
15mpa下进行均质处理，经浓缩后置于真空干燥箱中，控制真空度为0.08mpa，温度为70℃进行真空干燥处理，得到粉料；
80.(3)将所得粉料经气流超微粉碎机进行深度粉碎，得到平均粒径小于10μm的蝉花虫草子实体超微粉，备用；
81.(4)取生牛乳经闪蒸处理后进行脱脂处理，得到脂肪含量低于1％的脱脂生牛乳，备用；
82.(5)将得到的脱脂生牛乳倒入调配罐中，升温至55
‑
60℃保温，并加入占所述脱脂生牛乳质量12wt％的所述蝉花虫草超微粉，和，占所述脱脂生牛乳质量0.6wt％的蔗糖为甜味剂，充分混匀，备用；
83.(6)将所得的料液升温到65
‑
70℃并进行均质处理，经高温杀菌，冷却后灌装，即得。
84.实施例2
85.本实施例所述具有降血压功效的蝉花虫草牛奶的制备方法，包括如下步骤：
86.(1)取制备例4中采收的蝉花虫草子实体粉碎，加入等量的水进行混匀，并加入至磨浆机中，控制转速1200rpm进行高速磨浆破壁处理；
87.(2)将得到的混合料液于10
‑
15mpa下进行均质处理，经浓缩后置于真空干燥箱中，控制真空度为0.05mpa，温度为80℃进行真空干燥处理，得到粉料；
88.(3)将所得粉料经气流超微粉碎机进行深度粉碎，得到平均粒径小于10μm的蝉花虫草子实体超微粉，备用；
89.(4)取生牛乳经闪蒸处理后进行脱脂处理，得到脂肪含量低于1％的脱脂生牛乳，备用；
90.(5)将得到的脱脂生牛乳倒入调配罐中，升温至55
‑
60℃保温，并加入占所述脱脂生牛乳质量10wt％的所述蝉花虫草超微粉，和，占所述脱脂生牛乳质量0.5wt％的葡萄糖为甜味剂，充分混匀，备用；
91.(6)将所得的料液升温到65
‑
70℃并进行均质处理，经高温杀菌，冷却后灌装，即得。
92.实施例3
93.本实施例所述具有降血压功效的蝉花虫草牛奶的制备方法，包括如下步骤：
94.(1)取制备例4中采收的蝉花虫草子实体粉碎，加入等量的水进行混匀，并加入至磨浆机中，控制转速1500rpm进行高速磨浆破壁处理；
95.(2)将得到的混合料液于15mpa下进行均质处理，经浓缩后置于真空干燥箱中，控制真空度为0.1mpa，温度为60℃进行真空干燥处理，得到粉料；
96.(3)将所得粉料经气流超微粉碎机进行深度粉碎，得到平均粒径小于10μm的蝉花
虫草子实体超微粉，备用；
97.(4)取生牛乳经闪蒸处理后进行脱脂处理，得到脂肪含量低于1％的脱脂生牛乳，备用；
98.(5)将得到的脱脂生牛乳倒入调配罐中，升温至55
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60℃保温，并加入占所述脱脂生牛乳质量15wt％的所述蝉花虫草超微粉，和，占所述脱脂生牛乳质量0.8wt％的蔗糖为甜味剂，充分混匀，备用；
99.(6)将所得的料液升温到65
‑
70℃并进行均质处理，经高温杀菌，冷却后灌装，即得。
100.显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。