植物基原料复合发酵益生菌源液的制作方法

1.本发明涉及益生菌饮料技术领域，具体涉及一种植物基原料复合发酵益生菌源液。


背景技术：

2.人体的许多健康问题都是由体内菌群失衡引起的，人体健康的决定因素是微生态的平衡。服用益生菌可以通过使体内菌群重新达到生态平衡来实现缓解与治疗疾病的目的。补充“益生菌”的思路是直接吃进活的细菌类似于空投一些“好细菌”来抑制“坏细菌”。比如：腹泻、便秘等综合症状，国内外已经经过多年的研究和实践证明使用特定的益生菌可有效地治疗，可谓是安全高效的治疗手段。
3.人体主要通过食物及饮水摄取锶。我国饮用水中锶水平甚微，不少矿泉水中都含有丰富的锶，锶含量在0.20～0.40mg/l时为天然饮用矿泉水。另外，叶菜类中锶水平较高，而畜禽肉蛋类较低。由于饮食习惯不同，可能会造成部分人群锶摄入量不足，可通过改变饮食习惯来达到摄入足够量的锶。5mg/l以下的含锶水，有益于人体健康，而又不会产生不良的作用。
4.传统的益生菌饮料是以益生菌固体为原料，复水成为液体饮料，需要携带水杯才能服用益生菌，且口感较差。随着国人对健康观念的热衷，益生菌饮料销量逐年上升。目前还没有出现一款能随身携带，撕开即食的高活菌数
‘
活菌型’益生菌饮料。因此多种益生菌组合，调配益生元，方便即食的益生菌液体饮料会更容易被消费者所青睐。


技术实现要素：

5.本发明的目的是提供一种植物基原料复合发酵益生菌源液，通过干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、动物双歧杆菌分别发酵后混合制备，对胃酸和胆汁盐具有良好的耐受性，且具有丰富的氨基酸及微量元素锶，能够改善肠道菌群。
6.本发明所采用的技术方案为：
7.植物基原料复合发酵益生菌源液，其特征在于：
8.所述益生菌源液通过将复合菌种分别在发酵培养基中发酵后混合得到；
9.所述复合菌种包括动物双歧杆菌ximc
‑
002、植物乳杆菌ximc
‑
005和格式乳杆菌ximc
‑
011；
10.所述发酵培养基中包含有豆类和富锶水。
11.所述复合菌种还包括干酪乳杆菌ximc
‑
003、副干酪乳杆菌ximc
‑
001和发酵乳杆菌ximc
‑
009。
12.所述豆类选自黄豆、黑豆、赤小豆、豌豆、花豆、绿豆中的一种或几种。
13.所述发酵培养基的配方为：
14.豆类10
‑
100g；
15.葡萄糖10
‑
100g；
16.乙酸钠1
‑
10g；
17.酵母浸粉1
‑
10g；
18.用富锶水定容至1l。
19.所述动物双歧杆菌ximc
‑
002于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22522；
20.所述植物乳杆菌ximc
‑
005于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22526；
21.所述格式乳杆菌ximc
‑
011于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22523。
22.所述副干酪乳杆菌ximc
‑
001于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22521；
23.所述干酪乳杆菌ximc
‑
003于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22524；
24.所述发酵乳杆菌ximc
‑
009于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22525。
25.各个菌种在发酵培养基中的接种量分别为：动物双歧杆菌ximc
‑
002的接种量为1％，植物乳杆菌ximc
‑
005的接种量为0.5％，格式乳杆菌ximc
‑
011的接种量为0.5％，干酪乳杆菌ximc
‑
003的接种量为0.3％，副干酪乳杆菌ximc
‑
001的接种量为0.3％，发酵乳杆菌ximc
‑
009的接种量为0.3％。
26.所述富锶水中锶的含量为0.6
‑
0.7mg/kg。
27.如所述的植物基原料复合发酵益生菌源液的制备方法，其特征在于：
28.所述方法包括以下步骤：
29.a、选择菌种：选择副干酪乳杆菌ximc
‑
001；
30.b、制种子瓶：将菌株用接种环取出放入配有mrs培养液的三角瓶中，然后放入培养箱中培养；
31.c、种子罐灭菌：对含有豆类和富锶水的发酵培养基进行灭菌；
32.d、发酵培养：首先将培养箱的种子液无菌取样镜检，进行接种，拧开接种口密封盖，用接种火焰圈放置在接种口，点燃火焰圈后，打开接种盖，将种子液倒入罐内，结束后拧紧接种盖，罐中通无菌空气，保压、保温、搅拌、培养，菌种培养好后取样测活菌数；
33.e、制备其它菌种发酵液：将动物双歧杆菌ximc
‑
002、植物乳杆菌ximc
‑
005、格式乳杆菌ximc
‑
011、干酪乳杆菌ximc
‑
003和发酵乳杆菌ximc
‑
009重复步骤a至步骤d的操作，获得动物双歧杆菌ximc
‑
002、植物乳杆菌ximc
‑
005、格式乳杆菌ximc
‑
011、干酪乳杆菌ximc
‑
003和发酵乳杆菌ximc
‑
009发酵液；
34.f、混合：将动物双歧杆菌ximc
‑
002、植物乳杆菌ximc
‑
005、格式乳杆菌ximc
‑
011、干酪乳杆菌ximc
‑
003、副干酪乳杆菌ximc
‑
001和发酵乳杆菌ximc
‑
009六种菌的发酵液混合，搅拌均匀，得到混合液；
35.g、成品：使用灌装机将混合液分装成小条包液体，制得成品，冷藏保存。
36.本发明具有以下优点：
37.本发明利用所筛选的干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏
乳杆菌、动物双歧杆菌在富锶水豆类发酵培养基培养，混合得到锶含量和氨基酸含量较高的益生菌源液，6株菌对胃酸和胆汁盐具有良好的耐受性，其中的植物乳杆菌可耐受高达1％的胆汁盐浓度，样品均匀乳黄色，酸爽可口，可作为食品饮料长期食用，改善肠道菌群。
附图说明
38.图1为实施例1中复合菌株发酵豆类培养基的氨基酸含量。
39.图2为实施例1中复合菌株发酵豆类培养基的锶含量。
40.图3为实施例4中6株菌发酵豆类培养基的生长曲线。
具体实施方式
41.下面结合具体实施方式对本发明进行详细的说明。
42.本发明涉及一种植物基原料复合发酵益生菌源液，所述益生菌源液通过将复合菌种分别在发酵培养基中分别发酵后混合得到。所述复合菌种包括动物双歧杆菌ximc
‑
002、植物乳杆菌ximc
‑
005和格式乳杆菌ximc
‑
011；还包括干酪乳杆菌ximc
‑
003、副干酪乳杆菌ximc
‑
001和发酵乳杆菌ximc
‑
009。所述发酵培养基中包含有豆类和富锶水，豆类选自黄豆、黑豆、赤小豆、豌豆、花豆、绿豆中的一种或几种。
43.6株菌对胃酸和胆汁盐具有良好的耐受性，其中的植物乳杆菌可耐受高达1％的胆汁盐浓度，乳杆菌胆汁盐耐受性最高为0.5％。且所述的益生菌源液具有丰富氨基酸及微量元素锶，是一种随身携带，撕开即食，通过长期服用，能够改善肠道菌群的饮料。
44.发酵培养基的具体配方为：豆类10
‑
100g；葡萄糖10
‑
100g；乙酸钠1
‑
10g；酵母浸粉1
‑
10g；用富锶水定容至1l。富锶水中锶的含量为0.6
‑
0.7mg/kg。
45.所述动物双歧杆菌(bifidobacterium animalis)ximc
‑
002于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22522；发酵温度为39.5℃，培养18小时，活菌数最高。动物双歧杆菌分泌的大量短链脂肪酸，可酸化肠道，其结果能控制由有害菌引起的异常发酵，使肠道内渗透压增高，刺激胃肠蠕动，促进排便。
46.所述植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)ximc
‑
005于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22526；发酵温度为33.5℃，培养12小时，活菌数最高。植物乳杆菌有一定的免疫调节作用；降低胆固醇和血糖，抑制脂肪积累，可抑制致病菌等。
47.所述格式乳杆菌(lactobacillus gasseri)ximc
‑
011于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22523；发酵温度为36℃，培养18小时，活菌数最高。格氏乳杆菌可稳定肠道菌群，维持肠道生平衡态，可强化免疫系统，促进营养吸收。
48.所述副干酪乳杆菌(lactobacillus parcasei)ximc
‑
001于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22521；发酵温度为35.5℃，培养16.5小时，活菌数最高。干酪乳杆菌增强宿主对病原微生物的抵抗力，加快清除肠道致病菌，治疗肠道紊乱，调节肠道菌群平衡，促进人体消化吸收。
49.所述干酪乳杆菌(lactobacillus casei)ximc
‑
003于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22524；发酵温度为34.5℃，培养15小
时，活菌数最高。副干酪乳杆菌是一种益生菌，主要存在于人体的肠道当中，具有增强免疫力，维持肠道菌群平衡，促进消化等作用，促进肠道蠕动，能够有效的预防和治疗便秘。
50.所述发酵乳杆菌(lactobacillus fermentum)ximc
‑
009于2021年5月14日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.22525；发酵温度为36.5℃，培养12小时，活菌数最高。发酵乳杆菌能发酵多种糖，产酸能力强，而且有很高的耐酸力，具有超强的肠道细胞粘附能力，强力定植，有效阻断致病菌在肠道中的粘附。
51.各个菌种在发酵培养基中的接种量分别为：动物双歧杆菌ximc
‑
002的接种量为1％，植物乳杆菌ximc
‑
005的接种量为0.5％，格式乳杆菌ximc
‑
011的接种量为0.5％，干酪乳杆菌ximc
‑
003的接种量为0.3％，副干酪乳杆菌ximc
‑
001的接种量为0.3％，发酵乳杆菌ximc
‑
009的接种量为0.3％。
52.上述植物基原料复合发酵益生菌源液的制备方法，具体包括以下步骤：
53.a、选择菌种：选择副干酪乳杆菌ximc
‑
001，菌种活化，传代3次后使用；
54.b、制种子瓶：将菌株用接种环取出放入配有mrs培养液的三角瓶中，然后放入培养箱中培养；
55.c、种子罐灭菌：对含有豆类和富锶水的发酵培养基进行灭菌，灭菌温度121℃，罐内空气0.11mpa，持续15分钟灭菌，随后降温至37℃，罐内压力降至0.01mpa；
56.d、发酵培养：首先将培养箱的种子液无菌取样镜检，进行接种，拧开接种口密封盖，用接种火焰圈放置在接种口，点燃火焰圈后，打开接种盖，将种子液倒入罐内，结束后拧紧接种盖，罐中通无菌空气，罐内压力到0.02mpa，进行保压，温度保持37℃，压力0.02mpa，搅拌转速为20r/min，培养15小时，菌种培养好后取样测活菌数；
57.e、制备其它菌种发酵液：将动物双歧杆菌ximc
‑
002、植物乳杆菌ximc
‑
005、格式乳杆菌ximc
‑
011、干酪乳杆菌ximc
‑
003和发酵乳杆菌ximc
‑
009重复步骤a至步骤d的操作，获得动物双歧杆菌ximc
‑
002、植物乳杆菌ximc
‑
005、格式乳杆菌ximc
‑
011、干酪乳杆菌ximc
‑
003和发酵乳杆菌ximc
‑
009发酵液；
58.f、混合：将动物双歧杆菌ximc
‑
002、植物乳杆菌ximc
‑
005、格式乳杆菌ximc
‑
011、干酪乳杆菌ximc
‑
003、副干酪乳杆菌ximc
‑
001和发酵乳杆菌ximc
‑
009六种菌的发酵液按照1：1：1：1：1：1的比例混合，搅拌均匀，得到混合液；
59.g、成品：使用灌装机将混合液分装成30毫升小条包液体，制得成品，冷却降温至10℃，冷藏保存。
60.发酵培养基中的豆类以豆浆的形式加入，清洗磨浆之前用富锶水浸泡。
61.所述的益生菌源液活菌数为30亿/毫升，锶浓度为0.5mg/l，氨基酸总含量为1g/100g，其中谷氨酸含量为0.1g/100g、精氨酸含量为0.04g/100g。
62.实施例1：植物乳杆菌的筛选与鉴定
63.1：筛选
64.(1)取陕西省西安市长安区农村发酵浆水1ml置于9ml灭菌生理盐水中，震荡30s，依次稀释至10
‑6、10
‑7、10
‑8。
65.(2)取上述稀释液1ml置于无菌平皿内，倒入15ml融化保温45℃的mrs固体培养基，37℃培养48
‑
72h，挑取平皿上的菌落划线接种于mrs培养基上，37℃培养48
‑
72h，重复3次得到纯菌种保存于20％的甘油管中。
66.(3)对上述菌株分别进行耐酸、耐胆汁盐能力检测。
67.2：筛选
68.取上述耐酸、耐胆汁盐较强的菌株进行分子生物学方法鉴定，测得其16s rrna序列。然后将对胆汁盐耐受性最高的菌株ximc
‑
005序列通过ncbi blast进行序列对比，结果显示该序列与植物乳杆菌的16s rrna序列同源性超过99.9％，因此本发明筛选的ximc
‑
005菌株为植物乳杆菌。同理筛选出干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、动物双歧杆菌。
69.实施例2中6种菌株对胃酸和胆汁盐的耐受性
70.1.耐胃酸性能检测方法：
71.取活化的植物乳杆菌ximc
‑
005悬液30ml加入50ml的离心管中，4000g离心8分钟，弃上清收集菌体，用无菌pbs缓冲液洗涤2次后向离心管加入30ml人工胃液(用盐酸调整水ph为3.5，加入胃蛋白酶调整浓度至1g/100g，用0.22微米无菌滤膜过滤除菌)，在37℃培养箱培养3小时后做活菌计数。
72.耐胆汁盐性能检测方法：
73.取活化的植物乳杆菌ximc
‑
005菌悬液30ml加入50ml的离心管中，4000g离心8分钟，弃上清收集菌体，用无菌pbs缓冲液洗涤2次后向离心管加入30ml人工胆液(加入牛胆盐调整浓度至0.3g/100g，用0.22微米无菌滤膜过滤除菌)，在37℃培养箱培养3小时后做活菌计数。其中植物乳杆菌耐受胆汁盐浓度依次为0.3g/100g、0.4g/100g、0.5g/100g、0.6g/100g、0.7g/100g、0.8g/100g、0.9g/100g、和1g/100g。
74.表1六株菌耐胃酸、耐胆汁盐性能检测结果
[0075][0076]
表2植物乳杆菌ximc
‑
005耐受不同浓度胆汁盐性能检测结果
[0077][0078]
从表1的数据中可以看出，6种菌都具有良好的耐受胃酸和胆汁盐性能，在ph为3.5和0.3g/100g胆汁盐浓度中活菌数均在106以上，其中，表2进一步表明本发明筛选的植物乳杆菌ximc
‑
005具有非常强的耐受胆汁盐能力，在胆汁盐浓度为1g/100g中的活菌数仍在106以上。
[0079]
实施例4
[0080]
活化培养基：mrs肉汤，mrs固体培养基：
[0081]
发酵培养基：黄豆，黑豆，赤小豆，花豆，豌豆，绿豆，葡萄糖，乙酸钠，酵母浸粉，饮用水。
[0082]
1菌种活化
[0083]
菌种：干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、动物双歧杆菌，用mrs肉汤进行活化，传代3次后使用。
[0084]
2种子液准备
[0085]
在超净工作台，将菌株用接种环取出放入250ml配有mrs培养液的三角瓶中，然后封号瓶口放入培养箱中，培养箱温度为37℃，静止培养48小时；
[0086]
豆浆制备：将黄豆、黑豆、赤小豆、花豆、豌豆、绿豆浸泡于饮用水中，清洗后用破壁机磨浆；
[0087]
20l罐灭菌：将豆浆、葡萄糖和酵母浸粉用饮用水定容至15l，进行灭菌，灭菌温度121℃，罐内空气0.11mpa，持续15分钟灭菌，随后降温至37℃，罐内压力降至0.01mpa；
[0088]
发酵培养：首先将培养箱的种子液无菌取样镜检，进行接种，拧开接种口密封盖，用接种火焰圈放置在接种口，点燃火焰圈后，打开接种盖，将种子液倒入罐内，结束后拧紧接种盖，罐中通无菌空气，罐内压力到0.03mpa，进行保压，温度分别保持33℃、33.5℃、34℃、34.5℃、35℃、35.5℃、36℃、36.5℃、37℃、37.5℃、38℃、38.5℃、39℃、39.5℃、40℃，压力0.03mpa，搅拌转速为20r/min，连续培养20小时后检测活菌数。
[0089]
培养时间的确定：在确定副干酪乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为35.5℃；动物双歧杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为39.5℃时；干酪乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为34.5℃时；发酵乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为36.5℃时；植物乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为33.5℃时；格氏乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为36℃时。分别监测6株菌的生长曲线，得到最优培养时间。
[0090]
表3 6株菌在不同温度培养20小时的活菌数结果(亿/毫升)
[0091][0092]
从表3的活菌数和图3的生长曲线可以看出，6株菌以豆类培养基进行发酵，其活菌数最高的培养温度和培养时间均不一致。副干酪乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为35.5℃，培养16.5小时，活菌数最高；动物双歧杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为39.5℃，培养18小时，活菌数最高；干酪乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为34.5℃，培养15小时，活菌数最高；发酵乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为36.5℃，培养12小时，活菌数最高；
植物乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为33.5℃，培养12小时，活菌数最高；格氏乳杆菌以豆类为培养基，其发酵温度为36℃，培养18小时，活菌数最高。
[0093]
实施例5中一种植物基复合原料发酵益生菌源液，是由以下组分组成，各组分重量如下：
[0094]
活化培养基：mrs肉汤，mrs固体培养基：
[0095]
发酵培养基：黄豆，黑豆，葡萄糖，乙酸钠，酵母浸粉，饮用水。
[0096]
1菌种活化
[0097]
干酪乳杆菌菌株ximc
‑
003，用mrs肉汤进行活化，传代3次后使用。
[0098]
2种子液准备
[0099]
在超净工作台，将菌株用接种环取出放入250ml配有mrs培养液的三角瓶中，然后封号瓶口放入培养箱中，培养箱温度为37℃，静止培养48小时；
[0100]
3豆浆制备：将黄豆、黑豆浸泡于饮用水中，清洗后用破壁机磨浆；
[0101]
4 20l罐灭菌：将豆浆、葡萄糖和酵母浸粉用饮用水定容至15l，进行灭菌，灭菌温度121℃，罐内空气0.11mpa，持续15min灭菌，随后降温至37℃，罐内压力降至0.01mpa；
[0102]
5发酵培养：首先将培养箱的种子液无菌取样镜检，进行接种，拧开接种口密封盖，用接种火焰圈放置在接种口，点燃火焰圈后，打开接种盖，将种子液倒入罐内，结束后拧紧接种盖，罐中通无菌空气，罐内压力到0.03mpa，进行保压，温度保持34.5℃，压力0.03mpa，搅拌转速为20r/min，连续培养15小时放罐。
[0103]
6制备动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液：重复步骤1至步骤5，其中动物双歧杆菌的发酵培养温度为39.5℃，培养18小时；发酵乳杆菌的发酵培养温度为36.5℃，培养12小时；植物乳杆菌的发酵培养温度为33.5℃，培养12小时；格氏乳杆菌的发酵培养温度为36℃，培养18小时；副干酪乳杆菌的发酵培养温度为35.5℃，培养16.5小时。分别获得动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液；
[0104]
7混合：将干酪乳杆菌、动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液按照1：1：1：1：1：1比例配置，搅拌均匀，得到混合液，即为益生菌源液；
[0105]
9成品：使用灌装机将混合液分装成30ml的小条包液体，制得成品，冷却降温至10℃，冷藏保存。
[0106]
10检测：按照国标gb 5009.124
‑
2016为标准进行氨基酸含量检测，按照国标gb 8538
‑
2016为标准进行锶含量检测。
[0107]
进一步，优选的，实施例6中一种植物基复合原料发酵益生菌源液，是由以下组分组成，各组分重量如下：
[0108]
活化培养基：mrs肉汤，mrs固体培养基：
[0109]
发酵培养基：黄豆，黑豆，赤小豆，花豆，豌豆，绿豆，葡萄糖，乙酸钠，酵母浸粉，饮用水。
[0110]
1菌种活化
[0111]
干酪乳杆菌菌株ximc
‑
003，用mrs肉汤进行活化，传代3次后使用。
[0112]
2种子液准备
[0113]
在超净工作台，将菌株用接种环取出放入250ml配有mrs培养液的三角瓶中，然后
封号瓶口放入培养箱中，培养箱温度为37℃，静止培养48小时；
[0114]
3豆浆制备：将黄豆，黑豆，赤小豆，花豆，豌豆，绿豆浸泡于饮用水中，清洗后用破壁机磨浆；
[0115]
4 20l罐灭菌：将豆浆、葡萄糖和酵母浸粉用饮用水定容至15l，进行灭菌，灭菌温度121℃，罐内空气0.11mpa，持续15分钟灭菌，随后降温至37℃，罐内压力降至0.01mpa；
[0116]
5发酵培养：首先将培养箱的种子液无菌取样镜检，进行接种，拧开接种口密封盖，用接种火焰圈放置在接种口，点燃火焰圈后，打开接种盖，将种子液倒入罐内，结束后拧紧接种盖，罐中通无菌空气，罐内压力到0.03mpa，进行保压，温度保持34.5℃，压力0.03mpa，搅拌转速为20r/min，连续培养15小时放罐。
[0117]
6制备动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液：重复步骤1至步骤5，其中动物双歧杆菌的发酵培养温度为39.5℃，培养18小时；发酵乳杆菌的发酵培养温度为36.5℃，培养12小时；植物乳杆菌的发酵培养温度为33.5℃，培养12小时；格氏乳杆菌的发酵培养温度为36℃，培养18小时；副干酪乳杆菌的发酵培养温度为35.5℃，培养16.5小时。分别获得动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液；
[0118]
7混合：将干酪乳杆菌、动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液按照1：1：1：1：1：1比例配置，搅拌均匀，得到混合液，即为益生菌源液；
[0119]
9成品：使用灌装机将混合液分装成30毫升的小条包液体，制得成品，冷却降温至10℃，冷藏保存。
[0120]
10检测：按照国标gb 5009.124
‑
2016为标准进行氨基酸含量检测，按照国标gb 8538
‑
2016为标准进行锶含量检测。
[0121]
进一步，优选的，实施例7中一种植物基复合原料发酵益生菌源液，是由以下组分组成，各组分重量如下：
[0122]
活化培养基：mrs肉汤，mrs固体培养基：
[0123]
发酵培养基：黄豆，黑豆，赤小豆，花豆，豌豆，绿豆，葡萄糖，乙酸钠，酵母浸粉，富锶水。
[0124]
1菌种活化
[0125]
干酪乳杆菌菌株ximc
‑
003，用mrs肉汤进行活化，传代3次后使用。
[0126]
2种子液准备
[0127]
在超净工作台，将菌株用接种环取出放入250ml配有mrs培养液的三角瓶中，然后封号瓶口放入培养箱中，培养箱温度为37℃，静止培养48小时；
[0128]
3豆浆制备：将黄豆，黑豆，赤小豆，花豆，豌豆，绿豆浸泡于富锶水中，清洗后用破壁机磨浆；
[0129]
4 20l罐灭菌：将豆浆、葡萄糖和酵母浸粉用富锶水定容至15l，进行灭菌，灭菌温度121℃，罐内空气0.11mpa，持续15min灭菌，随后降温至37℃，罐内压力降至0.01mpa；
[0130]
5发酵培养：首先将培养箱的种子液无菌取样镜检，进行接种，拧开接种口密封盖，用接种火焰圈放置在接种口，点燃火焰圈后，打开接种盖，将种子液倒入罐内，结束后拧紧接种盖，罐中通无菌空气，罐内压力到0.03mpa，进行保压，温度保持34.5℃，压力0.03mpa，搅拌转速为20r/min，连续培养15小时放罐。
[0131]
6制备动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液：重复步骤1至步骤5，其中动物双歧杆菌的发酵培养温度为39.5℃，培养18小时；发酵乳杆菌的发酵培养温度为36.5℃，培养12小时；植物乳杆菌的发酵培养温度为33.5℃，培养12小时；格氏乳杆菌的发酵培养温度为36℃，培养18小时；副干酪乳杆菌的发酵培养温度为35.5℃，培养16.5小时。分别获得动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液；
[0132]
7混合：将干酪乳杆菌、动物双歧杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、格氏乳杆菌、发酵乳杆菌发酵液按照1∶1∶1∶1∶1∶1比例配置，搅拌均匀，得到混合液，即为益生菌源液；
[0133]
9成品：使用灌装机将混合液分装成30ml的小条包液体，制得成品，冷却降温至10℃，冷藏保存。
[0134]
10检测：按照国标gb 5009.124
‑
2016为标准进行氨基酸含量检测，按照国标gb 8538
‑
2016为标准进行锶含量检测。表4为益生菌源液的氨基酸含量与锶含量检测结果。
[0135]
表4实施例5
‑
例7的氨基酸含量与锶含量检测结果
[0136]
检测项目例5例6例7氨基酸总量g/100g0.6341.011.00天冬氨酸g/100g00.110.11苏氨酸g/100g00.040.043丝氨酸g/100g00.0490.05谷氨酸g/100g00.190.19脯氨酸g/100g00.50.048甘氨酸g/100g00.50.048丙氨酸g/100g0.010.0750.078缬氨酸g/100g0.060.0580.058蛋氨酸g/100g0.0090.010异亮氨酸g/100g0.060.0450.045亮氨酸g/100g0.10.0740.073酪氨酸g/100g0.0460.0330.03苯丙氨酸g/100g0.0650.0510.048赖氨酸g/100g0.090.0590.06组氨酸g/100g0.0740.0480.048精氨酸g/100g0.120.0680.064锶mg/l000.36
[0137]
如表4所示，一种植物基复合原料发酵益生菌源液的氨基酸含量和锶含量很高，分别达到1g/100g和0.36mg/l。且富含16种氨基酸，适合各类人群长期饮用，调理肠道菌群。
[0138]
本发明的内容不限于实施例所列举，本领域普通技术人员通过阅读本发明说明书而对本发明技术方案采取的任何等效的变换，均为本发明的权利要求所涵盖。