一种具有修复抗衰功效的脂质体冻干粉及其制备方法与流程

1.本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种具有修复抗衰功效的脂质体冻干粉及制备方法。


背景技术：

2.近年来，多肽在生物体内的生理功能受到越来越多的重视。大量研究结果表明，生物活性多肽的分子量小、容易吸收，不仅可以多种方式与受体结合，增强对受体的特异性，而且还可增强皮肤的渗透性，具有较好的稳定性，使得生物活性多肽在皮肤美容方面具有很好的应用前景，在化妆品方面上越来越受到重视，在化妆品中添加生物活性多肽，以达到美白，抗衰老的目的，在化妆品中应用越来越广泛，如抗衰老的面部原乳，抗衰老的面膜等；大麻二酚(cbd)，是大麻素的主要活性成分，具有非成瘾性，无神经毒性等特征。近年来科学家发现大麻二酚为强力抗氧化剂，并且具有阻断乳腺癌转移、抗癫痫、抗痉挛、抗类风湿性关节炎、抗焦虑、抗失眠等一系列生理活性功能。在皮肤外用方面，大麻二酚具有抗氧化、延缓衰老、抗菌消炎、祛痘、抗过敏等功效。但由于大麻二酚属于脂溶性化合物，不溶于水，而对于大部分含水量高的化妆品，大麻二酚的低溶解度严重限制了其添加量，从而达不到理想的护肤效果。
3.现有大多数含有多肽、大麻二酚的化妆产品，虽然能达到修护肌肤的目标，但是其活性受环境影响大，同时由于cbd的水溶性差，光稳定性不佳，多肽类原料的稳定性容易受到水溶液、温度等因素的影响等问题，导致现有该类别化妆产品储存周期短、护肤效果不稳定等问题。因此，为了解决cbd和多肽成分的不稳定性，研发出一种兼具修复、祛皱、消炎等多功效且高稳定性的无菌冻干粉，是促进cbd和肽类护肤产品市场发展的关键技术之一。
4.文献专利cn110251466a公开了一种大麻二酚脂质体，所需的原料包括磷脂、胆固醇、大麻二酚和缓冲盐溶液，最终制得的脂质体包封率高、水溶性好，但其具有的稳定性较差。文献专利cn110179687a公开了一种多效修护多肽组合物及其在化妆品中的应用，首次将六种多肽进行复配，使其得到的化妆品具有保湿、抗氧化、淡斑、抗皱及舒缓敏感刺激的全面修护效果，能够增强肌肤的光泽度和紧致度，使肌肤恢复健康状态，但具有的稳定性差。经过检索尚未发现存在大麻二酚(cbd)与多肽复配的脂质体冻干粉在化妆品技术领域中的应用。


技术实现要素：

5.本发明旨在提供一种具有抗衰、修复功效的脂质体冻干粉，通过多肽与大麻二酚(cbd)的复配进一步提升了原料淡化皱纹、抗炎修复的效果，同时通过脂质体包裹工艺提高原料大麻二酚的水溶性和稳定性，并通过包裹技术与冻干技术的结合进一步提高脂质体的稳定性，从而提高包裹活性物的稳定性。
6.为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：一种具有修复抗衰功效的脂质体冻干粉，包含以下原料及重量份数：大麻二酚脂质体备用液1～5份、多肽脂质体备用液1～5
份、20％甘露醇注射剂20～30份、血清白蛋白0.01～0.15份、磷酸氢二钠0.1～0.5份、磷酸二氢钠0.01～0.1份、海藻糖0.1～1份、甘氨酸0.1～1份、聚山梨醇酯
‑
80 0.01～0.1份，超纯水57～78份。
7.优选地，包含以下原料及重量份数：大麻二酚脂质体备用液3份、多肽脂质体备用液2份、20％甘露醇注射剂25份、血清白蛋白0.05份、磷酸氢二钠0.2份、磷酸二氢钠0.05份、海藻糖0.5份、甘氨酸0.5份、聚山梨醇酯
‑
80 0.05份，超纯水68.7份。
8.优选地，所述大麻二酚脂质体备用液与多肽脂质体备用液的重量份数比例为(3～5)：(1～2)。
9.优选地，所述大麻二酚脂质体备用液的制备工艺为：准确称取大麻二酚、磷脂和胆固醇加入有机溶媒中，加热搅拌，使其充分溶解，得到有机相；在旋转蒸发仪上将所得有机相蒸发除去溶剂，使残余物在容器内壁形成磷脂薄膜；向其中加入磷酸盐缓冲液，继续旋蒸，使磷脂薄膜脱落，得脂质体混悬液；将混悬液注入高压均质机均质2
‑
3次，均质后过100～200nm滤膜过滤挤出，得大麻二酚脂质体备用液。
10.优选地，所述多肽脂质体备用液的制备工艺为：称取多肽原料、蛋白活性保护剂，溶于磷酸缓冲盐溶液中；称取卵磷脂、胆酸钠，加入无水乙醇，水浴超声溶解；将含有脂质材料的有机相在35～45℃进行旋蒸，获得均匀连续的脂质薄膜，充分除去残留有机溶剂；降温至常温后将含有多肽的磷酸缓冲盐溶液加入，并旋转振摇使脂质薄膜充分剥离容器壁，并使脂质薄膜充分水化，形成均一脂质体混悬液；将脂质体混悬液冰水浴超声，过0.22μm的微孔滤膜，即得均一多肽脂质体备用液。
11.进一步地，所述蛋白活性保护剂由盐酸精氨酸和蔗糖组合物按照质量比为1：(3～5)组成。
12.进一步地，所述多肽原料包括寡肽1、寡肽3、芋螺肽或胶原蛋白肽中的一种或几种。
13.进一步地，所述卵磷脂和胆酸钠的重量份数比例为1：(1.5～2)。
14.此外，本发明还提供了上述一种具有修复抗衰功效的脂质体冻干粉的制备方法，具体包括以下步骤：
15.s1、选择已经消毒过的容器，加入配方量1/5的超纯水，称取配方量的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、海藻糖、甘氨酸、血清白蛋白、聚山梨醇酯
‑
80依次加入水中，搅拌至完全溶解，备用；
16.s2、在步骤s1制备得到的溶液中加入配方量的大麻二酚脂质体备用液、多肽脂质体备用液，搅拌至完全溶解后用0.22um的滤膜过滤，得到滤液备用；
17.s3、将步骤s2得到滤液加入剩余的超纯水、配方量的20％甘露醇注射液，搅拌至均匀后分装冻干，即得无菌冻干粉。
18.进一步地，所述步骤s3中的冻干过程包括以下步骤：
19.s31、预冻：以0.4～0.8℃/min的速率降温至
‑
40
±
2℃，预冻2
‑
4h，抽取真空，使压强降至10～20pa；
20.s32、升华干燥：升温至
‑
25，保持3～5h，再逐级升温至
‑
15℃、0℃，依次保持3～5h、1～2h；
21.s33、解析干燥：升温至20～30℃，保持8～10h。
22.因此，与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
23.(1)本发明中多肽和大麻二酚的复配使用，有效地提高制备出的脂质体冻干粉在抗衰修复皮肤、消炎去红肿、抗皱方面的作用。
24.(2)本发明通过脂质体包裹技术提高了原料大麻二酚的水溶性，避免了在水剂类产品中析出的问题，同时通过脂质体包裹技术和冻干技术的结合，提高了原料中活性成分的稳定性，保证了产品的能达到最优的抗衰修复皮肤、抗皱、消炎去红肿效果。
附图说明
25.图1是抗皱修复功能测试中测得的实施例1～3冻干粉与对比例3～4冻干粉的修复效果以及对表皮细胞的促增殖作用。
具体实施方式
26.以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。
27.实施例1、一种具有修复抗衰功效的脂质体冻干粉
28.配方：大麻二酚脂质体备用液3g、多肽脂质体备用液2g、20％甘露醇注射剂25g、血清白蛋白0.1g、磷酸氢二钠0.2g、磷酸二氢钠0.05g、海藻糖0.5g、甘氨酸0.5g、聚山梨醇酯
‑
80 0.05g，超纯水68.5g。
29.大麻二酚脂质体备用液的制备方法：准确称取2g大麻二酚、50g磷脂和8.4g胆固醇，加入无水乙醇中，加热搅拌，使其充分溶解，得到有机相；在旋转蒸发仪上将所得有机相蒸发除去溶剂，使残余物在容器内壁形成磷脂薄膜；向其中加入磷酸盐缓冲液，继续旋蒸，使磷脂薄膜脱落，得脂质体混悬液；将混悬液注入高压均质机均质2次，均质后过100nm滤膜过滤挤出，得大麻二酚脂质体备用液。
30.多肽脂质体备用液的制备方法：称取2g寡肽1、1g盐酸精氨酸和3g蔗糖组合物，溶于磷酸缓冲盐溶液中；称取4g卵磷脂、6g胆酸钠，加入无水乙醇，水浴超声溶解；将含有脂质材料的有机相在40℃进行旋蒸，获得均匀连续的脂质薄膜，充分除去残留有机溶剂；降温至25℃后将含有多肽的磷酸缓冲盐溶液加入，并旋转振摇使脂质薄膜充分剥离容器壁，使脂质薄膜充分水化，形成均一脂质体混悬液；将脂质体混悬液冰水浴超声，过0.22μm的微孔滤膜，即得均一多肽脂质体备用液。
31.脂质体冻干粉的制备方法：
32.s1、选择已经消毒过的容器，加入配方量1/5的超纯水，称取配方量的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、海藻糖、甘氨酸、血清白蛋白、聚山梨醇酯
‑
80依次加入水中，搅拌至完全溶解，备用；
33.s2、在步骤s1制备得到的溶液中加入配方量的大麻二酚脂质体备用液、多肽脂质体备用液，搅拌至完全溶解后用0.22um的滤膜过滤，得到滤液备用；
34.s3、将步骤s2得到滤液加入剩余的超纯水、配方量的20％甘露醇注射液，搅拌至均匀后分装冻干，即得无菌冻干粉。
35.所述步骤s3中的冻干过程具体包括以下步骤：
36.s31、预冻：以0.6℃/min的速率降温至
‑
40
±
2℃，预冻3h，抽取真空，使压强降至
15pa；
37.s32、升华干燥：升温至
‑
25，保持4h，再逐级升温至
‑
15℃、0℃，依次保持4h、1h；
38.s33、解析干燥：升温至30℃，保持8h。
39.实施例2、一种具有修复抗衰功效的脂质体冻干粉
40.配方：大麻二酚脂质体备用液3g、多肽脂质体备用液1g、20％甘露醇注射剂20g、血清白蛋白0.01g、磷酸氢二钠0.1g、磷酸二氢钠0.01g、海藻糖0.1g、甘氨酸0.1g、聚山梨醇酯
‑
80 0.01g，超纯水79.07g。
41.大麻二酚脂质体备用液的制备方法：准确称取2g大麻二酚、50g磷脂和8.4g胆固醇，加入无水乙醇中，加热搅拌，使其充分溶解，得到有机相；在旋转蒸发仪上将所得有机相蒸发除去溶剂，使残余物在容器内壁形成磷脂薄膜；向其中加入磷酸盐缓冲液，继续旋蒸，使磷脂薄膜脱落，得脂质体混悬液；将混悬液注入高压均质机均质2次，均质后过100nm滤膜过滤挤出，得大麻二酚脂质体备用液。
42.多肽脂质体备用液的制备方法：称取2g寡肽1、1g盐酸精氨酸和3g蔗糖组合物，溶于磷酸缓冲盐溶液中；称取4g卵磷脂、6g胆酸钠，加入无水乙醇，水浴超声溶解；将含有脂质材料的有机相在40℃进行旋蒸，获得均匀连续的脂质薄膜，充分除去残留有机溶剂；降温至25℃后将含有多肽的磷酸缓冲盐溶液加入，并旋转振摇使脂质薄膜充分剥离容器壁，使脂质薄膜充分水化，形成均一脂质体混悬液；将脂质体混悬液冰水浴超声，过0.22μm的微孔滤膜，即得均一多肽脂质体备用液。
43.脂质体冻干粉的制备方法：
44.s1、选择已经消毒过的容器，加入配方量1/5的超纯水，称取配方量的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、海藻糖、甘氨酸、血清白蛋白、聚山梨醇酯
‑
80依次加入水中，搅拌至完全溶解，备用；
45.s2、在步骤s1制备得到的溶液中加入配方量的大麻二酚脂质体备用液、多肽脂质体备用液，搅拌至完全溶解后用0.22um的滤膜过滤，得到滤液备用；
46.s3、将步骤s2得到滤液加入剩余的超纯水、配方量的20％甘露醇注射液，搅拌至均匀后分装冻干，即得无菌冻干粉。
47.所述步骤s3中的冻干过程具体包括以下步骤：
48.s31、预冻：以0.4℃/min的速率降温至
‑
40
±
2℃，预冻2h，抽取真空，使压强降至10pa；
49.s32、升华干燥：升温至
‑
25，保持3h，再逐级升温至
‑
15℃、0℃，依次保持3h、1h；
50.s33、解析干燥：升温至30℃，保持8h。
51.实施例3、一种具有修复抗衰功效的脂质体冻干粉
52.配方：大麻二酚脂质体备用液5g、多肽脂质体备用液2g、20％甘露醇注射剂30g、血清白蛋白0.15g、磷酸氢二钠0.5g、磷酸二氢钠0.1g、海藻糖1g、甘氨酸1g、聚山梨醇酯
‑
80 0.1g，超纯水60.15g。
53.大麻二酚脂质体备用液的制备方法：准确称取2g大麻二酚、50g磷脂和8.4g胆固醇，加入无水乙醇中，加热搅拌，使其充分溶解，得到有机相；在旋转蒸发仪上将所得有机相蒸发除去溶剂，使残余物在容器内壁形成磷脂薄膜；向其中加入磷酸盐缓冲液，继续旋蒸，使磷脂薄膜脱落，得脂质体混悬液；将混悬液注入高压均质机均质2次，均质后过100nm滤膜
过滤挤出，得大麻二酚脂质体备用液。
54.多肽脂质体备用液的制备方法：称取2g寡肽1、1g盐酸精氨酸和3g蔗糖组合物，溶于磷酸缓冲盐溶液中；称取4g卵磷脂、6g胆酸钠，加入无水乙醇，水浴超声溶解；将含有脂质材料的有机相在40℃进行旋蒸，获得均匀连续的脂质薄膜，充分除去残留有机溶剂；降温至25℃后将含有多肽的磷酸缓冲盐溶液加入，并旋转振摇使脂质薄膜充分剥离容器壁，使脂质薄膜充分水化，形成均一脂质体混悬液；将脂质体混悬液冰水浴超声，过0.22μm的微孔滤膜，即得均一多肽脂质体备用液。
55.脂质体冻干粉的制备方法：
56.s1、选择已经消毒过的容器，加入配方量1/5的超纯水，称取配方量的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、海藻糖、甘氨酸、血清白蛋白、聚山梨醇酯
‑
80依次加入水中，搅拌至完全溶解，备用；
57.s2、在步骤s1制备得到的溶液中加入配方量的大麻二酚脂质体备用液、多肽脂质体备用液，搅拌至完全溶解后用0.22um的滤膜过滤，得到滤液备用；
58.s3、将步骤s2得到滤液加入剩余的超纯水、配方量的20％甘露醇注射液，搅拌至均匀后分装冻干，即得无菌冻干粉。
59.所述步骤s3中的冻干过程具体包括以下步骤：
60.s31、预冻：以0.8℃/min的速率降温至
‑
40
±
2℃，预冻4h，抽取真空，使压强降至20pa；
61.s32、升华干燥：升温至
‑
25，保持5h，再逐级升温至
‑
15℃、0℃，依次保持5h、2h；
62.s33、解析干燥：升温至30℃，保持8h。
63.对比例1
64.与实施例1相比，本对比例的区别仅在于：将大麻二酚脂质体备用液相应替换为大麻二酚，多肽脂质体备用液相应替换为多肽原料。
65.冻干粉的制备方法参考实施例1。
66.对比例2
67.配方组成同实施例1。
68.制备方法与实施例1相比，本对比例的区别仅在于：步骤s3制备得到的溶液不进行冻干处理。
69.对比例3
70.与实施例1相比，本对比例的区别仅在于：不含有cbd脂质体备用液，相应地将多肽脂质体备用液的含量提高至5g。
71.制备方法参考实施例1。
72.对比例4
73.与实施例1相比，本对比例的区别仅在于：不含有多肽脂质体备用液，相应地将cbd脂质体备用液的含量提高至5g。
74.制备方法参考实施例1。
75.实验例一、稳定性测试
76.一、实验样品：实施例1～3冻干粉样品、对比例1～2样品。
77.二、实验方法
78.2.1温度稳定性试验
79.将实施例1～3冻干粉、对比例1～2样品分别置于
‑
15
±
2℃和45
±
2℃环境中一个月，之后将样品按100mg/ml的浓度溶解于蒸馏水中，观察溶液是否有分层或沉淀现象。
80.2.2长期保存稳定性实验
81.将实施例1～3冻干粉、对比例1～2样品置于室温25℃
±
5℃下保存24个月，并于第0、3、6、12、18、24个月时取出，并按100mg/ml的浓度溶解于蒸馏水中，观察是否有沉淀现象，并记录其复溶性。
82.三、实验结果
83.实验结果如表1～2所示。
84.表1各样品温度稳定性试验结果
[0085][0086]
由表1可知，本发明实施例1～3在不同温度下均能保持较好的稳定性，且均优于对比例1～2；由实施例1～3与对比例1～2的结果可以证明本发明脂质体包裹技术和冻干技术的结合有效地提高了最终产品的稳定性，保证制备出的脂质体冻干粉能够具有较高的消炎修复、抗衰老、去皱等的功效。
[0087]
表2长期保存稳定性试验结果
[0088][0089][0090]
由表2中数据可以得知，本发明实施例1～3在24个月长期保存实验中仍能具有较
好的稳定性，复溶性强且均优于对比例1～2；从实施例1～3与对比例1～2的结果可以得知，本发明脂质体包裹技术能够有效地提高原料大麻二酚的水溶性，同时脂质体包裹技术与冻干技术的结合进一步增强最终产品的稳定性，同时保持较好的复溶性。
[0091]
实验例二、体外抗氧化性试验
[0092]
一、实验样品：实施例1～3冻干粉、对比例3～4冻干粉。
[0093]
二、实验方法
[0094]
2.1dpph清除率测定
[0095]
取实施例1～3冻干粉、对比例3～4的冻干粉0.5g，溶解于乙醇溶液中，并稀释配成0.5mg/ml，之后取0.5mg/ml的样品溶液2ml于试管中，加入2ml dpph溶液(无水乙醇配制0.1mmol/l)，混合均匀，置于黑暗中反应30min，于分光光度计517nm处测定吸光值。以水代替样品溶液作空白实验，以无水乙醇代替dpph溶液作样品干扰实验。计算样品对dpph自由基的清除率，经线性拟合计算ic50。dpph清除率计算公式见公式(1)。
[0096]
dpph清除率(％)＝[1
‑
(a1
‑
a/a0)]
×
100％
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(1)
[0097]
式中：a0为空白组的吸光值；a1为样品组的吸光值；a为干扰组的吸光值。
[0098]
2.2清除羟基自由基
[0099]
在96孔板中加入2.2mmol/l h2o2、2.25mmol/l feso4水溶液、2.25mmol/l水杨酸95％(体积分数)乙醇溶液各0.067ml，试样溶液0.1ml，室温避光反应5min后在510nm下检测吸光度。空白对照组以0.1ml试样溶剂代替试样溶液，每个浓度均做3个复孔，清除率按式(2)计算，经线性拟合计算ic50。
[0100]
羟基自由基清除率＝(a1
‑
a2)/a1
×
100％
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(2)
[0101]
式中：a1为空白的平均吸光度；a2为试样的平均吸光度。
[0102]
三、实验结果
[0103]
实验测得数据结果如表3～4所示。
[0104]
表3样品对dpph自由基的清除能力
[0105][0106]
表4样品对羟基自由基的清除能力
[0107][0108]
由表3中的数据可以得知，本发明实施例1～3制备得到的脂质体冻干粉均具有较强的dpph自由基清除能力；由实施例1～3的ic50值比对比例3～4低，可以得出本发明实施例1～3相比于对比例3～4具有更强的抗氧化能力。
[0109]
由表4中的数据可以得知，本发明实施例1～3冻干粉均具有较好的羟基自由基清除能力；同时相比于对比例3～4的ic50值可以得知本发明实施例1～3具有更好的抗氧化能力。由表3～4中数据可以证明本发明中多肽和大麻二酚的复配使用能够有效地提高冻干粉的抗氧化抗衰老能力。
[0110]
实验例三、产品安全皮肤刺激性评价
[0111]
一、实验样品：实施例1～3冻干粉、对比例1样品和生理盐水。
[0112]
二、实验方法
[0113]
采用自体对照方式，选择健康、成年、皮肤无损的白色家兔20只，随机分为5组，每组4只，采用同体左右侧自身比较法。试验前24h用8％硫化钠将试验动物背部脊柱两侧背毛去除，去除面积左右各约3cm
×
3cm，将0.5ml实施例1～3、对比例1样品用溶媒溶解为溶液并涂抹于一侧，另一侧作为空白对照，每天涂抹一次，涂抹后清洗观察皮肤状态，连续涂抹观察14天。第二天开始，每次涂抹前剪毛，用水清除残留受试物。涂抹1h后观察结果，根据2015年版《化妆品卫生规范》中皮肤刺激性反应评分标准对实验结果进行评分，计算给药动物积分均值，并对照皮肤刺激强度评分表判定皮肤刺激强度。
[0114]
皮肤刺激反应评分标准：无红斑记0分，轻度红斑(勉强可见)记1分，中度红斑(明显可见)记2分，重度红斑记3分，紫红色红斑到轻度焦痂记4分；无水肿记0分，轻度水肿(勉强可见)记1分，中度水肿(明显隆起)记2分，重度水肿(皮肤隆起1mm，轮廓清楚)记3分，严重水肿(皮肤隆起1mm以上并有扩大)记4分。
[0115]
皮肤刺激反应评分均值＝(红斑和焦痂总分 水肿总分)/实验动物总数，每组的评分以不同观察时间的最高值计。皮肤刺激强度分级标准：评分<0.5，无刺激性；评分0.5～<2.0，轻度刺激性；评分2.0～6.0，中度刺激性；评分>6.0，强刺激性。实验评分结果如表3所示。
[0116]
三、实验结果
[0117]
实验评分结果如表4所示。
[0118]
表4皮肤刺激性反应评分结果
[0119][0120]
由表4的实验数据可以得知，本发明实施例1～3和生理盐水组均未对实验家兔皮肤产生红斑、水肿等的刺激，平均反应刺激强度分值均为0；对比例1样品液在用药后24h时出现了勉强可见的红斑，但在48h内恢复正常，评分均值为0.25<0.5，无刺激性。
[0121]
皮肤破损组别对比例1，在24h时出现了勉强可见的红斑水肿且在48h内均完全恢复正常，其他组别除了刀片划伤正常皮肤后出现的暗红色结痂外，均未见红斑或水肿出现。
[0122]
综上所述，本发明实施例1～3的冻干粉使用时对皮肤不具有刺激性。
[0123]
实验例四、抗皱修复功能测试
[0124]
一、修复功能测试
[0125]
1、样品制备：将本发明实施例1～3冻干粉，对比例3～4冻干粉等量称取，并分别溶解在1ml的超纯水中，0.22微米无菌滤器过滤除菌，制备成样品液，
‑
20℃保存备用。
[0126]
2、检测方法：将永生化表皮细胞hacat细胞按照6
×
104cells/ml的接种密度接种至96孔细胞培养板内，培养过夜。将实施例1～3，对比例3、4的样品溶液用1640细胞培养基(含有0.4％胎牛血清，)细胞培养基进行相同的倍比稀释成6个浓度梯度，弃除培养板培养基，更换成样品稀释液，每孔100微升，每个浓度4个复孔，设置细胞空白对照。继续培养48小时，采用cck8检测试剂盒检测细胞增殖情况。每孔加10微升的cck
‑
8试剂溶液，继续培养1～4小时后低速摇床混匀1分钟，450nm检测波长，在酶标仪上进行od值检测。
[0127]
细胞促增值率(％)＝[(实验组od
‑
空白对照od值)
‑
(细胞对照组od值
‑
空白对照组)]/(细胞对照组od值
‑
空白对照组)
×
100％
[0128]
3、检测结果
[0129]
结果如附图1所示。
[0130]
本发明实施例1～3的冻干粉在不同的浓度下相比于对比例3～4的冻干粉，均具有更高的细胞增殖率，且当实施例1浓度为10mg/ml时具有的细胞增殖率最高为48％，从实验数据可以证明本发明通过大麻二酚与多肽的联合使用，能够有效地增强冻干粉的皮肤修复功能。
[0131]
二、抗皱效果检测
[0132]
1、受试样品：本发明实施例1～3、对比例3、对比例4制备的冻干粉进行受试者试用，样品在使用前用纯净水溶解，未溶解状态的保存形式为常温保存即可。
[0133]
2、受试人群：健康女性，年龄：35～45岁之间，皮肤状况：皮肤状态大致相近，干性
‑
中性皮肤，面部皱纹程度相差不大，无皮肤病过敏史。每组10名受试者。
[0134]
3、测试方法
[0135]
每组试用者使用同一个样品。这些志愿者皮肤对化妆品不过敏，在实验期间禁止用其他化妆品。志愿者们每天早上八点与晚上九点，洁面后擦干面部水分，取适量样品涂抹全脸，再用指腹轻轻的按摩，促使样品充分吸收。实验周期为一个月，一个月后利用skin
‑
sp皮肤检测仪检测受试者面部5个定点位置的肌肤弹性，利用皮肤检测仪mc
‑
880检测受试者面部总皱纹数量减少程度。
[0136]
4、实验结果
[0137]
实验测试结果如表5所示。
[0138]
表5实施例1冻干粉的测试结果
[0139][0140]
由表5可知，本发明实施例1～3制得的脂质体冻干粉相对于对比例3和对比例4的肌肤弹性指数显著提升、皱纹总量减少量更明显，证明本发明的冻干粉具有去除皱纹，修复肌肤，改善肌肤弹力的作用。
[0141]
从以上实验可以得知，本发明通过多肽原料和大麻二酚的复配使用，提升了冻干粉原料组分在淡化皱纹、抗炎修复方面的功效，并且通过脂质体包裹技术与冻干技术的结合，进一步提高了原料大麻二酚的水溶性和稳定性，此外本发明原料组分大多属于天然组分具有的刺激性低，适合不同肤质的人群使用。
[0142]
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。