一种含外泌体滴眼液及其制备方法和应用与流程

技术特征：
1.一种含外泌体滴眼液，其特征在于，由以下质量分数的组分制成：渗透压调节剂0.19
‑
0.21％，ph调节剂0.019
‑
0.021％和营养补充剂0.01
‑
5％，余量为间充质干细胞外泌体/β
‑
葡聚糖水溶液；所述β
‑
葡聚糖水溶液质量分数为0.1
‑
3％。2.如权利要求1所述的含外泌体滴眼液，其特征在于，所述的间充质干细胞外泌体为脐带间充质干细胞或脂肪间充质干细胞。3.如权利要求2所述的含外泌体滴眼液，其特征在于，所述的间充质干细胞外泌体是在人角膜缘基质细胞条件培养液中诱导培养间充质干细胞分泌的外泌体。4.如权利要求3所述的含外泌体滴眼液，其特征在于，所述的β
‑
葡聚糖为β
‑
1，3葡聚糖。5.如权利要求4所述的含外泌体滴眼液，其特征在于，所述的β
‑
1，3葡聚糖的分子量为1
‑
2600kda。6.如权利要求5所述的含外泌体滴眼液，其特征在于，所述渗透压调节剂为葡聚糖、甘露糖醇、甘油和生理盐水中的任意一种或几种的混合。7.一种权利要求1
‑
6任一项所述的含外泌体滴眼液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：s1，间充质干细胞外泌体的制备：首先，收集人角膜缘基质细胞按照0.2
‑1ⅹ
105/cm2的密度接种于完全培养基中培养，待细胞生长至细胞密度为80
‑
85％时，收集上清，即得到人角膜缘基质细胞条件培养液，将其加入到间充质干细胞中诱导培养，待细胞培养至细胞密度为85％
‑
90％时，弃掉上清，清洗细胞，继续培养24
‑
48h，收集上清液，离心后获得间充质干细胞外泌体，备用；s2，将β
‑
葡聚糖加入注射用水中，加热至80℃左右，搅拌溶解后，降温至室温，获得β
‑
葡聚糖水溶液，备用；s3，将s1制得的间充质干细胞外泌体与s2中制得的β
‑
葡聚糖水溶液混合均匀，加入渗透压调节剂、ph调节剂和营养补充剂，搅拌溶解完全，过滤除菌，获得含外泌体滴眼液。8.如权利要求7所述的含外泌体滴眼液的制备方法，其特征在于，s1中，所述人角膜缘基质细胞的培养条件为37℃、5％co2。9.如权利要求7所述的含外泌体滴眼液的制备方法，其特征在于，s1中，离心的具体过程为：1000rpm离心10分钟，去除死细胞和细胞碎片，取上清，获得的上清10，000
×
g离心30分钟，取上清，100，000
×
g，在4℃下持续离心60
‑
120分钟，去掉上清，留下的沉淀pbs重悬，获得间充质干细胞外泌体。10.一种权利要求1
‑
6任一项所述的β
‑
葡聚糖在含外泌体滴眼液制备中的用途，其特征在于，β
‑
葡聚糖用于保护外泌体的稳定性，提升外泌体的功效。

技术总结
本发明涉及滴眼液制备方法领域，具体公开了一种含外泌体滴眼液及其制备方法和应用，所述滴眼液由间充质干细胞外泌体，β


技术研发人员：李阿峰 明磊国 王清霞
受保护的技术使用者：陕西科美致尚生物科技有限公司
技术研发日：2021.08.03
技术公布日：2021/10/28