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一种斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法与流程

2021-10-20 01:23:00 来源:中国专利 TAG:精巢 损伤 修复 模型 斑马

技术特征:
1.一种斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,包括转基因系tg(gsdf:egfp)斑马鱼和成年tg(gsdf:egfp)转基因系斑马鱼精巢组织损伤。2.根据权利要求1所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,所述转基因系tg(gsdf:egfp)斑马鱼构建过程为:构建质粒pt2a

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egfp,将pt2a

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egfp转入一细胞期斑马鱼受精卵当中,经培养至成年筛选其后代并培养,即获得转基因系tg(gsdf:egfp)斑马鱼。3.根据权利要求2所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,所述pt2a

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egfp的浓度为15ng/ul。4.根据权利要求3所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,后代筛选依据是性腺有荧光的后代。5.根据权利要求1所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,所述成年tg(gsdf:egfp)转基因系斑马鱼精巢组织损伤过程包括:首先,选3月龄性成熟tg(gsdf:egfp)转基因系斑马鱼,用麻醉剂进行麻醉固定;然后,先对绿色的精巢组织上的皮肤组织刺孔,再对绿色精巢组织进行部分组织摘除;于养殖系统进行培养,正常喂食养殖,养殖14天。6.根据权利要求5所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,摘除的精巢组织面积为摘除一侧1/2的精巢组织。7.根据权利要求6所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,所述麻醉剂为ethyl 3

aminobenzoate methanesulfonate。8.根据权利要求7所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,所述麻醉剂的体积分数为0.22%。9.根据权利要求1所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,构建的斑马鱼精巢损伤修复模型能够在14dpa内损伤精巢组织实现完全再生。10.根据权利要求9所述的斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,其特征在于,构建的斑马鱼精巢损伤修复模型,14dpa雄鱼与野生型雌鱼子代与对照组无差异,能完全受精,14dpa内生殖能力完全恢复。

技术总结
本发明属于损伤修复模型技术领域,具体涉及一种斑马鱼精巢损伤修复模型的构建方法,具体是通过斑马鱼精巢组织切除方式构建。本发明通过构建斑马鱼精巢损伤修复模型,发现斑马鱼精巢具有强大的损伤修复能力,对于研究男性不育症治疗中提供了模型构建依据。育症治疗中提供了模型构建依据。育症治疗中提供了模型构建依据。


技术研发人员:曹子岗
受保护的技术使用者:井冈山大学
技术研发日:2021.04.25
技术公布日:2021/10/19
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