一种对食品中非法添加的托拉塞米进行定性、定量检测的方法及应用与流程

技术特征：
1.一种对食品中非法添加的托拉塞米进行定性、定量检测的方法，其特征在于，其包括如下步骤：s1、样品前处理：若食品样品为固体时，取1g，精确至0.0001g，若食品样品为液体时，取1ml，置于50ml量瓶中，加入甲醇35～45ml，振摇，超声提取，加甲醇定容至刻度，摇匀，用0.22μm的滤膜过滤，取续滤液作为待测样品溶液；s2、制备标准溶液：配制托拉塞米标准储备液，然后将标准储备液用甲醇稀释为标准使用液，再用甲醇将标准使用液配制成不同浓度的标准系列溶液；s3、样品定性测定：采用高效液相色谱
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串联质谱仪分别测定食品样品的续滤液及标准溶液，记录食品样品和标准溶液中各化合物的色谱保留时间，以相对于最强离子丰度的百分比作为定性离子对的相对丰度，记录浓度相当的试样与标准溶液中相应成分的相对离子丰度；当试样中检出与托拉塞米标准溶液色谱峰保留时间一致的色谱峰，变化范围在
±
2.5％之内，并且相对离子丰度允许偏差不超过下表中规定的范围，确定试样中检出相应化合物；相对离子丰度的最大允许偏差s4、样品定量测定：将托拉塞米的标准系列溶液采用液相色谱
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串联质谱法进行测定，根据标准溶液的峰面积a与标准系列溶液的浓度绘制标准曲线，得回归方程a＝kc b，将待测样品的峰面积a带入标准曲线回归方程中，计算得到待测样品中非法添加的托拉塞米的浓度，继而得出样品中托拉塞米的含量。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s1中，食品样品为固体时，需要先将食品研细，取粉末进行称量。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s1中，超声的功率为150w，频率为40khz，时间为30min，续滤液用甲醇稀释至标准系列溶液浓度范围内，进行上样检测。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s2中，先配制100μg/ml标准储备液，之后采用100μg/ml标准储备液加入甲醇配制为托拉塞米浓度为5μg/ml的标准使用液a，再用标准使用液a加入甲醇配制为托拉塞米浓度为1μg/ml的标准使用液b，之后分别取0.1ml、0.2ml、0.4ml、1.0ml、2.0ml的标准使用液b，置于20ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，获得浓度依次为5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml的标准系列溶液。5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述100μg/ml标准储备液的制备为准确称取托拉塞米标准品10.0mg，精确至0.0001g，置于100ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s3和s4中，所述高效液相色谱
的条件为色谱柱为资生堂capcell
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色谱柱或acquity uplc beh amide或与其性能相当者；流动相为a为10mmol/l的乙酸铵溶液，b为乙腈，a:b＝70:30；流速为0.5ml/min，柱温为20℃，进样量为10μl。7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s3和s4中，质谱的条件为离子源为电喷雾离子源，检测方式是多反应监测，扫描方式采用负离子模式，毛细管电压为负离子模式：4500v，离子源温度设为400℃，干燥气流量为12l/min，雾化气压力为70psi，鞘气温度为250℃，鞘气为n2；气帘气压力为35psi，辅助气压力为60psi；喷嘴电压为正离子模式：500v；负离子模式为2000v。8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于：质谱测定条件中，托拉塞米的出峰时间、定量离子对、定性离子对、碎裂电压、碰撞电压、检测模式分别为:7.2min，346.8
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261.7，346.8
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196.0，80v，24v，负离子。9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s4中，对标准系列溶液进行测定，得到相应的标准系列溶液的色谱峰面积，以标准系列溶液的浓度为横坐标，以色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；根据检测获得的样品的色谱峰面积，对应绘制的标准曲线，可得到相应进样样品中托拉塞米的浓度。10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，将进样样品中托拉塞米的浓度代入下式计算食品中托拉塞米的含量x：其中：x—食品样品中托拉塞米的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)或毫克每升(mg/l)；c—从标准曲线中读出的进样样品溶液中托拉塞米的浓度，单位为纳克每毫升(ng/ml)；v—样液最终定容体积，单位为毫升(ml)；m—试样溶液所代表的质量或体积，单位为克(g)或毫升(ml)；k—稀释倍数；计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。

技术总结
本发明提供了一种对食品中非法添加的托拉塞米进行定性、定量检测的方法及应用，其方法包括：制备待测样品、托拉塞米的标准溶液；采用高效液相色谱


技术研发人员：刘静 孙苓苓 史延通 王震红 吴琼 孔令锋
受保护的技术使用者：辽宁省药品检验检测院
技术研发日：2021.07.13
技术公布日：2021/10/19