一种茯苓多肽及其抗病毒作用的制作方法

技术特征：
1.一种茯苓多肽，其特征在于，所述多肽序列包括：wqlglayvl、mtaanigvsrii或lalpalalp。2.一种如权利要求1所述茯苓多肽在制备抗病毒制剂中的应用。3.一种如权利要求1所述茯苓多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取：在研细过筛的茯苓粉中加入tris
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hcl缓冲液，37 ℃水浴60 min，取出冷冻离心，取上清液用盐酸溶液调节至有絮状沉淀，再冷冻离心后弃上清液取沉淀，
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70℃预冻24 h后，
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50℃真空冷冻干燥48 h，得茯苓冻干蛋白；（2）酶解：取茯苓冻干蛋白溶于hcl溶液中，加入胃蛋白酶于37 ℃水浴酶解12 h，冷冻离心后取上清液以 naoh溶液调节ph 至8.0，加入 nh4hco3缓冲溶液，加入胰蛋白酶于于37 ℃水浴酶解12 h后，沸水浴灭活后冷冻离心，取上清液备用；（3）净化：max spe柱先后以5ml甲醇、5ml水活化，将上述酶解液上样，依次用3 ml5%氨水、1ml甲醇淋洗，抽干淋洗液，以10ml 5%甲醇溶液洗脱，洗脱液于45℃氮吹干，以1 ml 1 %甲酸溶液溶解，过0.22
ꢀµ
m滤膜，进行色谱分离、质谱检测、电喷雾离子源检测。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述色谱条件为：hypersil gold c18色谱柱，100m
ꢀ×ꢀ
2.1 mm，1.9
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m；柱温：30℃；流动相：a：0.1%甲酸水，b：乙腈，洗脱梯度：0~50 min，乙腈10%~90%；50~55 min，乙腈90%；55~56 min，乙腈90%~10%；56~60 min，乙腈10%；流速：0.3 ml/min；进样量：10
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l。5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述质谱条件为：扫描模式：full ms/dd
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ms2，分析时长60 min，检测方式：正离子，母离子扫描范围：100
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1500 m/z，一级质谱分辨率：70000 at m/z，agg target: le6，一级maximum it: 100 ms，number of scan ranges: 1，动态排除: 40.0 s一次，ms2 activation type: hcd，isolation window: 0.4 m/z，二级质谱分辨率：17500 at m/z 200，microscans: 1，二级maximum it: 50 ms，碰撞能量: 30 ev，underfill ratio: 0.1%。6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，电喷雾离子源检测方法包括：载气为高纯氮气，纯度>99.5%，鞘气流速40个单位arb，辅气流速15个单位arb；喷雾电压3.2 kv；碰撞池采用梯度碰撞能量：25%、35%、55%；毛细管温度320℃，离子透镜电压频率为60，辅气热源温度350℃。

技术总结
本发明公开了一种茯苓多肽，所述多肽序列包括：WQLGLAYVL、MTAANIGVSRII或LALPALALP。本发明采用以复酶水解茯苓蛋白，通过离子交换净化、反相液相色谱分离、四极杆


技术研发人员：吴世林 徐骏 邱彬
受保护的技术使用者：福建掌链科技有限公司
技术研发日：2021.07.16
技术公布日：2021/10/23