一种改良番茄对青枯病抗性的方法与流程

技术特征：
1.核苷酸序列如seq id no.1所示的cdpk18l基因在提高番茄抗青枯病中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括：利用基因编辑技术沉默番茄cdpk18l基因编码蛋白的表达，进而获得抗青枯病性能增强的番茄突变体。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，利用crispr/cas9技术对番茄cdpk18l基因进行沉默。4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述番茄突变体的编码基因的序列为如seq id no.1所示核苷酸序列中第70位和71位碱基缺失，或者如seq id no.1所示核苷酸序列中第70位的碱基缺失。5.一种改良番茄对青枯病抗性的育种方法，其特征在于，包括：(1)在核苷酸序列如seq id no.1所示的cdpk18l蛋白编码区选取含有pam结构的靶标片段，以靶标片段pam结构前20个碱基为依据，进行引物设计，构建cripr/cas9载体；(2)将cripr/cas9载体转化受体番茄材料中，培育，获得不含外源cas9蛋白且稳定遗传的纯合突变体株系。6.如权利要求5所述的改良番茄对青枯病抗性的育种方法，其特征在于，所述靶标片段pam结构前20个碱基序列为如seq id no.3所示。7.如权利要求6所述的改良番茄对青枯病抗性的育种方法，其特征在于，构建所述cripr/cas9载体的引物的核苷酸序列如seq id no.4和seq id no.5所示。8.如权利要求5所述的改良番茄对青枯病抗性的育种方法，其特征在于，步骤(2)中，利用农杆菌介导技术将cripr/cas9载体转化至番茄子叶中。9.如权利要求5所述的改良番茄对青枯病抗性的育种方法，其特征在于，受体番茄为番茄condine red。

技术总结
本发明公开了一种改良番茄对青枯病抗性的方法，属于生物技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的番茄CDPK18L基因进行编辑，沉默番茄CDPK18L基因编码蛋白的表达，进而获得抗青枯病性能增强的番茄突变体。该突变体能够显著增强对番茄青枯病的抗性，可用于抗青枯病番茄品种的选育。种的选育。种的选育。


技术研发人员：师恺 丁淑婷 吕建荣 王娇 胡璋健 喻景权
受保护的技术使用者：浙江大学
技术研发日：2021.04.21
技术公布日：2021/10/19