一种阻断或减弱水稻OsMIR7695表达以改良籽粒性状的方法与流程

技术特征：
1.一种改良水稻籽粒性状的方法，其特征在于：阻断或者减弱水稻中osmir7695的表达，提高水稻籽粒性状。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的阻断或者减弱水稻中osmir7695的表达通过敲除水稻osmir7695编码基因或者干扰osmir7695编码基因表达产物的作用进行。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的干扰osmir7695编码基因表达产物作用的方法包括rna干扰法、反义rna法、靶基因类似物法、短串联靶标类似物法或crispr-cas13法中的至少一种。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的敲除水稻基因组中的osmir7695编码基因的方法为基因组编辑法、同源重组法或随机插入突变法中的至少一种进行；优选的，所述的基因组编辑法包括巨大核酸酶(meganuclease)法、zfn法、talen法或crispr-cas法中的至少一种。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：当使用crispr-cas法敲除水稻基因组中的osmir7695编码基因时，包括以下步骤：a、设计针对水稻osmir7695编码基因的向导rna；b、构建可表达该向导rna的cas编辑表达载体；c、用步骤a的得到的表达载体转化水稻，利用crispr-cas基因编辑体系得到转化植株；d、收集转化植株的种子，筛选出水稻osmir7695编码基因定向编辑突变体种子，即得提高籽粒性状的水稻突变体；优选的，所述的crispr-cas法包括crispr-cas9、crispr-cas12a或crispr-cas12b中的至少一种。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤a中所述的针对水稻osmir7695编码基因的向导rna的核苷酸序列为seq id no.2所示。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的提高水稻籽粒性状为提高千粒重、粒长或粒宽中的至少一种。8.阻断或者减弱水稻中osmir7695的表达的试剂在提高水稻籽粒性状中的用途。9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述阻断或者减弱水稻中osmir7695的表达的试剂包括敲除水稻osmir7695编码基因的试剂或者干扰osmir7695编码基因表达产物的试剂中的至少一种。10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述的干扰osmir7695编码基因表达产物的试剂包括使用rna干扰法、反义rna法、crispr-cas13法、靶基因类似物法或短串联靶标类似物法中的至少一种所使用的试剂；优选的，所述干扰osmir7695表达产物作用的试剂包括针对osmir7695表达产物的sirna、针对osmir7695表达产物的反义rna、靶基因类似物、短串联靶标类似物、用于crispr-cas13法以编辑osmir7695表达产物的向导rna中的至少一种。11.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述的敲除水稻基因组中的osmir7695编码基因的试剂包括针对osmir7695编码基因的用于巨大核酸酶法的巨大核酸酶、用于zfn法的zfn蛋白、用于talen法的talen蛋白、用于crispr-cas法编辑osmir7695编码基因的向导rna、用于同源重组法的重组dna片段、用于随机插入突变法的t-dna或转座子中的至少一种。12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于：用于crispr-cas12a的crrna的核苷酸序
列为seq id no.2所示。13.针对水稻osmir7695编码基因的crrna；优选的，所述的crrna的编码核苷酸序列为seq id no.2所示。14.装载有权利要求15或16所述的向导rna的载体；优选的，所述的载体为用于crispr-cas基因编辑技术的cas编辑表达载体；更优选的，所述crispr-cas基因编辑技术为crispr-cas12a技术。

技术总结
本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种阻断或者减弱水稻中OsMIR7695的表达以改良水稻籽粒性状的方法。本发明要解决的技术问题是改良水稻籽粒性状。本发明解决技术问题的技术方案是提供一种通过阻断或者减弱水稻中OsMIR7695的表达，提高水稻籽粒性状的方法。进一步的，该方法中阻断或者减弱水稻中OsMIR7695的表达可通过敲除水稻OsMIR7695编码基因或者干扰OsMIR7695编码基因表达产物的作用进行。使用本发明方法能得到籽粒千粒重、粒长或粒宽增加的水稻突变体，表明其籽粒性状得到了很大改良。本发明方法步骤简明、易于操作，具有很好的前景。具有很好的前景。具有很好的前景。


技术研发人员：郑雪莲 张勇 周建平 李倩 全泉 唐旭
受保护的技术使用者：电子科技大学
技术研发日：2020.04.08
技术公布日：2021/10/11