表达CAR和shRNA的逆转录病毒载体及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种表达car和shrna的逆转录病毒载体，其特征在于，该病毒载体中靶向lsd1的shrna与car共表达。2.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，该病毒载体中u6启动子和ef1α启动子分别整合到car表达载体中，代替长末端重复序列来驱动表达，由u6启动子驱动lsd1 shrna的表达ef1α启动子驱动抗car的表达，所述抗car优选是抗cd19car和/或cd38 car。3.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，所述逆转录病毒载体中包括依次串联的u6启动子、lsd1 shrna、ef1α启动子、上游的信号肽和用于检测的myc标签；cd19 car抗原结合区域；cd8铰链
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跨膜结构域；cd28或4
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1bb协同激活结构域和cd3ζ胞内信号传导结构域。4.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，靶向lsd1的shrna的克隆id是trcn0000046068，克隆名称是nm_015013.1
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1812s1c1，序列是seq id no:2:gcctagacattaaactgaata。5.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，靶向lsd1的shrna的克隆id是trcn0000046069，克隆名称是nm_015013.1
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2168s1c1，序列是seq id no:3:gctccaatactgttggcacta。6.一种靶向嵌合抗原受体t细胞，其特征在于，包括由权利要求1
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5任一所述的逆转录病毒载体表达的靶向嵌合抗原受体。7.一种治疗肿瘤的药物，其特征在于，其含有权利要求6所述的嵌合抗原受体t细胞。8.根据权利要求7所述的药物，所述肿瘤是多发性骨髓瘤。9.根据权利要求1
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5任一所述的逆转录病毒载体的应用，其特征在于，将编码所述嵌合抗原受体的基因片段插入所述载体中，包装成病毒载体，感染人t细胞，制备得到嵌合抗原受体t细胞，用于表面cd19阳性和/或cd38阳性的肿瘤治疗。

技术总结
本发明提供一种表达CAR和shRNA的逆转录病毒载体，该病毒载体中靶向LSD1的shRNA与CAR共表达。本发明中将LSD1shRNA与anti


技术研发人员：王建勋 张静 朱晶晶 冯娅茹 李晓瑞 尚凤琴
受保护的技术使用者：北京中医药大学
技术研发日：2021.07.05
技术公布日：2021/10/8