营养组成物的用途的制作方法

1.本发明是有关一种营养组成物，尤其是一种营养组成物的用途。


背景技术：

2.随着全球人口数增加以及可耕地面积的大幅减少，对于粮食需求数也因此持续向上攀升。然而，大规模生产模式会消耗一定量资源且造成环境压力，为此，提升单一面积生产量以及增加附加营养价值是世界粮食生产的趋势。
3.然而，传统捕渔业由于过渡捕渔以及海域污染，导致捕获量逐年下降，同时捕捞渔业的鱼捞量估计已经达到极限。因此，近年来皆是由水产养殖业来弥补渔业产品(单纯由传统捕渔业)供应量的不足，才足以应付全球市场对水产品的需求。
4.而，水产养殖向来是重要的经济产业之一。近20年来，水产养殖业迅速的发展，带来丰硕的营收。目前，水产养殖生物除了虾类以外，亦包含多种类的养殖经济鱼种，例如石斑、鲻鱼、虱目鱼、鲈鱼及海鲡等。
5.在养殖过程中，为了抑制水产养殖生物的病菌或者是加速其生长，目前仍不免会使用化学药剂来控制养殖环境。但世界养殖用药法规日趋严苛，可用的化学药剂种类逐渐减少。另外，化学药剂也有可能残留在生物体内，食用后也可能危害人体健康。
6.由于上述化学药剂的缺点，从饲料的配方组成份上来进行改良为现今最为常见的做法。饲料原本是指可供给维持家畜的存活以及家畜生产奶、肉、蛋及毛皮等等所必须的有机或无机营养素的物质。
7.但演变至今，现今的饲料由不仅是各种家畜所需的营养素，如能量、蛋白质、维生素及矿物质，还进一步包含生长促进剂和疾病预防剂均匀混合而成的。
8.习用水产饲料的主要蛋白质来源主要为鱼粉，平均每公斤鱼粉要价 60～65元，然而，由于近年来海洋环境的污染、全球气候变迁及生态环境的破坏，使得全球鱼粉原料短缺，造成水产养殖业的饲料成本居高不下，因此，许多习用水产饲料改以价格较低的大豆粉取代部分鱼粉，藉以降低习用水产饲料的成本。
9.虽然，大豆粉每公斤成本较低(约15元)，且能够作为鱼粉的取代原料，以提供水产动物成长所需的必需胺基酸，然而，由于大豆所含有的胺基酸不平衡，如甲硫胺酸缺乏，而无法完全取代鱼粉，以供应水产养殖动物生长所需的营养。
10.此外，由于大豆含有许多抗营养物质，对于水产养殖动物而言，大豆粉会对水产养殖动物造成营养吸收阻碍的问题。因此，习用水产饲料中的大豆粉能够取代鱼粉的比例有限，通常以不超过原用鱼粉量的40％为原则，以避免大豆的抗营养物质造成饲料转换率过低的问题。
11.因此，如何藉由改良饲料的配方，来提高养殖鱼类的养成速度、缩短上市的时间、降低饲料转换率(饲料投喂重量/鱼只体重增加重量)、降低饲料成本以及降低养殖期间可能发生的风险，是值得努力研究的方向，目前已成为本领域技术人员当前研究的课题。


技术实现要素：

12.本发明的主要目的，在于提供一种营养组成物的用途，营养组成物将大豆蛋白培养基以及牛樟芝萃取物加入酵母菌进行发酵后而得，且营养组成物用于降低鲈鱼的饲料转换率及体脂肪，并促进鲈鱼的小肠绒毛生长以及肌肉面积的增加。
13.为了达到上述目的及功效，本发明揭示了一种营养组成物用于绒毛增生的用途，其中该营养组成物由一大豆培养基、一牛樟芝萃取物经一啤酒酵母菌种进行一发酵制程后而成，该营养组成物用于鲈鱼且该营养组成物进一步包含一小分子胜肽，该小分子胜肽为3kda以下，该营养组成物的制备方法包含：取一大豆蛋白以一蛋白酵素及一纤维酵素进行一水解制程，形成该大豆培养基；以及依8：2的比例取该大豆培养基、该牛樟芝萃取物以该啤酒酵母菌种进行一发酵制程，形成该营养组成物。
14.本发明提供一实施例，其内容在于营养组成物用于绒毛增生的用途，该营养组成物进一步包含一有机酸、一抑菌素及超氧歧化酵素活性物。
15.本发明提供一实施例，其内容在于营养组成物用于绒毛增生的用途，其中，以每公斤饲料加入1克的该营养组成物混合后喂食鲈鱼。
16.又，本发明揭示了一种营养组成物用于降低鲈鱼的饲料转换的用途，其中该营养组成物由一大豆培养基、一牛樟芝萃取物经一啤酒酵母菌种进行一发酵制程而成，且该营养组成物进一步包含一小分子胜肽，该小分子胜肽为3kda以下，该营养组成物的制备方法包含：取一大豆蛋白以一蛋白酵素及一纤维酵素进行一水解制程，形成该大豆培养基；以及依8：2的比例取该大豆培养基、该牛樟芝萃取物以该啤酒酵母菌种进行一发酵制程，形成该营养组成物。
17.本发明提供一实施例，其内容在于营养组成物用于降低鲈鱼的饲料转换的用途，其中，以每公斤饲料加入1克的该营养组成物混合后喂食鲈鱼。
18.又，本发明揭示了一种营养组成物用于降低鲈鱼的体脂肪的用途，其中该营养组成物由一大豆培养基、一牛樟芝萃取物经一啤酒酵母菌种进行一发酵制程而成，且该营养组成物进一步包含一小分子胜肽，该小分子胜肽为3kda 以下，该营养组成物的制备方法包含：取一大豆蛋白以一蛋白酵素及一纤维酵素进行一水解制程，形成该大豆培养基；以及依8：2的比例取该大豆培养基、该牛樟芝萃取物以该啤酒酵母菌种进行一发酵制程，形成该营养组成物。
19.本发明提供一实施例，其内容在于营养组成物用于降低鲈鱼的体脂肪的用途，其中，以每公斤饲料加入1克的该营养组成物混合后喂食鲈鱼。
20.又，本发明揭示了一种营养组成物用于增加鲈鱼的肌肉面积的用途，其中该营养组成物由一大豆培养基、一牛樟芝萃取物经一啤酒酵母菌种进行一发酵制程而成，且该营养组成物进一步包含一小分子胜肽，该小分子胜肽为3kda以下，该营养组成物的制备方法包含：取一大豆蛋白以一蛋白酵素及一纤维酵素进行一水解制程，形成该大豆培养基；以及依8：2的比例取该大豆培养基、该牛樟芝萃取物以该啤酒酵母菌种进行一发酵制程，形成该营养组成物。
21.本发明提供一实施例，其内容在于营养组成物用于增加鲈鱼的肌肉面积的用途，其中，以每公斤饲料加入1克的该营养组成物混合后喂食鲈鱼。
附图说明
22.图1：其为本发明的一实施例的实验流程图；图2：其为本发明的营养组成物的分析结果图；图3：其为本发明的一实施例的饲料转换率的实验结果图；图4：其为本发明的一实施例的绒毛组织的实验结果图；图5：其为本发明的一实施例的肝脏组织的实验结果图；图6：其为本发明的一实施例的肌肉组织的实验结果图；图7a：其为本发明的营养组成物与市售鱼饲料的绒毛长度的实验结果图；图7b：其为本发明的营养组成物与市售鱼饲料的绒毛长度的实验直方图；以及图8：其为本发明的营养组成物与市售鱼饲料的饲料转换率的实验直方图。【图号对照说明】1 细胞空泡化2 完整细胞3 黑色素巨噬细胞s1～s2 步骤流程
具体实施方式
23.为了使本发明的结构特征及所达成的功效有更进一步的了解与认识，特用较佳的实施例及配合详细的说明，说明如下：
24.随着全球人口数增加，粮食需求数也持续攀升，而大规模生产模式消耗资源且造成环境压力，因此，为达到永续生产愿景，如何采取有效率的粮食生产模式渐被重视。经济动物饲养方面，水产动物相对于畜禽动物有较佳的「饲料转换率(feed conversion ratio,fcr)」，因此被联合国粮农组织(fao) 的智库团队hlpe(the high level panel of experts on food security andnutrition)认为在养殖上可以投入较少的资源(2014)，对环境相对友善。
25.而饲料转换率(fcr)的计算方式为动物所摄食的饲料重除以动物的体增重，即动物每公斤的体增重所需摄取的饲料重。故，若fcr是3/1，则代表需要使用3公斤的饲料来增加一公斤养殖生物的重量。
26.因此，如何藉由改良饲料来降低饲料转换率，且减少对环境的污染。为养殖领域人员所需要面对的问题。
27.有鉴于传统饲料造成养殖鱼的生成速度过慢、过高的饲料转换率以及饲料成本过大的问题。据此，本发明遂提出一种营养组成物的用途，以解决习知技术所造成的问题。
28.以下将进一步说明本发明的营养组成物的用途其包含的特性、所搭配的结构及制备方法：
29.请参阅图1，其为本发明的一实施例的实验流程图，如图所示，本发明的一种营养组成物的制备方法，其步骤包含：
30.s1：取大豆蛋白以蛋白酵素及纤维酵素进行水解制程，形成大豆培养基；以及
31.s2：依8：2的比例取大豆培养基、牛樟芝萃取物进行发酵制程，形成营养组成物。
32.如步骤s1所示，取一大豆蛋白(为1吨脱壳豆粉)先以一纤维酵素(约 350克)于50
℃、1小时的条件下进行一水解制程，再于50℃、3小时的条件下以一蛋白酵素(约100克)进行该水解制程，干燥后形成一大豆培养基。
33.并接续步骤s2，本发明的一牛樟芝萃取物包含一三萜类化合物以及一多醣体萃取物。并于步骤s2前，进一步包含步骤：
34.s11：取牛樟芝子实体进行有机溶液萃取制程，取得三萜类化合物；
35.s12：再取牛樟芝子实体进行水溶液萃取制程，取得多醣体萃取物；以及
36.s13：取三萜类化合物及多醣体萃取物进行混合，形成牛樟芝萃取物。
37.如步骤s11所示，取1吨牛樟芝子实体进行一有机溶液萃取制程(为以95％乙醇浸泡该牛樟芝子实体达30日，使其细胞破裂)，并于萃取后，采减压浓缩并经干燥取得400公斤的粉末，此粉末经纯化分析，其内含4.25％三萜类化合物。
38.而本发明的三萜类化合物其化学结构为
39.如步骤s12所示，取1吨牛樟芝子实体进行一水溶液萃取制程 (将牛樟芝子实体置于热回流萃取装置，以100℃、24小时的条件下进行)，并于萃取后冷却，再经离心、纯化、干燥等制程，可取得400的粉末，本萃取物经分析，其内含5％多醣体萃取物。
40.如步骤s13所示，取三萜类化合物及多醣体萃取物进行混合，形成该牛樟芝萃取物。
41.最后，进行步骤s2，依8：2的比例取该大豆培养基、该牛樟芝萃取物进行混合。并且，将利用该啤酒酵母菌种(saccharomyces cerevisiae)，进行该发酵制程，形成该营养组成物。
42.而该啤酒酵母菌种其培养过程为先种瓶，以作为接入发酵槽的种菌，种瓶以数个250ml三角锥瓶为容器，分别装入100ml液态培养基(此液态培养基的组成物为酵母萃取物、麦芽萃取物、蛋白胨、葡萄糖等)，并接入1ml甘油保存酵母菌管，以30℃培养24小时后，再将100ml酵母菌液续扩大培养至10l 液态培养基，同样以30℃培养24小时，作为发酵槽生产的种瓶。接着进行主发酵，取种瓶菌液接入发酵槽体内(主发酵的液态培养基为上述整合培养基粉末，再加水溶解，每吨液态培养基制作比例为20公斤整合培养基粉末加1吨水搅拌溶解。通常发酵作业体积大于1吨)，接菌量1％，固定调控ph值为5、通气量为1 v.v.m、120rpm、30℃条件培养8天，得该营养组成物。
43.其中，该营养组成物包含该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取发酵而来，该小分子胜肽为3kda以下)。再者，本发明的该营养组成物以快速凝胶过滤色谱法(gel filtration chromatograph)分析多肽含量，经分析，本发明的该营养组成物的分子量2.5kda以下的该小分子胜肽，其占含量高达71.56％(如图2 所示)。且，本发明的该营养组成物经分析，其富含大量该小分子胜肽、有机酸、抑菌素(bacteriocin)、该牛樟芝萃取物及超氧歧化酵素(sod)等活性物。
44.接续，本发明的一种营养组成物用于绒毛增生的用途，其中该营养组成物由该大
豆培养基、该牛樟芝萃取物经该啤酒酵母菌种进行该发酵制程而成，该营养组成物用于鲈鱼。其用于降低鲈鱼的饲料转换率、用于促进鲈鱼的绒毛生长、用于降低鲈鱼的体脂肪及用于增加鲈鱼的肌肉面积等用途由下列实验例来进行，其制备方法皆相同。
45.实验例
46.动物分组及饲养方式
47.本发明的该营养组成物用于鲈鱼(但不以此为限，亦可为牛、羊、鸡、猪
…
等)。于此实验中本发明选用加州鲈鱼(micropterus salmoides；学名大口黑鲈)为实验动物，将加州鲈鱼分为两个组别，分组及饲养方式如下：
48.(1)对照组，取5000只加州鲈鱼，每日喂食一般研磨的大豆蛋白为主所制造的商业饲料(饲料量为约80～100克/只)，测试期为60
‑
90天(称为blank 组)。
49.(2)实验组，取5000只加州鲈鱼，每日喂食本发明的该营养组成物 (该营养组成物量为约80～100克/只)，测试期为60
‑
90天(称为test组)。
50.实验方法
51.不论对照组或是实验组皆每14天取样30只加州鲈鱼进行检测。将加州鲈鱼牺牲后，分别取得小肠绒毛组织、肝脏组织以及肌肉组织以10％缓冲福尔马林溶液进行固定，取样后再经过酒精(alcohol)脱水、二甲苯(xylene)缓冲、石蜡(paraffin)浸润，最后包埋保存于石蜡的中。接续，利用切片机切成适当的厚度(2～5μm)并黏附于载玻片上后，根据苏木紫
‑
伊红分别将小肠绒毛组织、肝脏组织以及肌肉组织的切片进行染色后，并进行观察。
52.实验结果
53.根据上述实验方法，其实验结果请参阅第3
‑
6图。首先，图3其为本发明的一实施例的饲料转换率的实验结果图。如图所示，对照组与实验组在第0 周的饲料转换率(动物所摄食的饲料重除以动物的体增重，fcr)分别为1.656与 1.711。经由10周喂食后，相较于对照组(其fcr为1.57)，实验组(为本发明的该营养组成物)的fcr降为1.27，显示本发明的该营养组成物用于降低鲈鱼的饲料转换率
，
对于加州鲈鱼有较佳的饲料利用效率。
54.接续，图4其为本发明的一实施例的绒毛组织的实验结果图。如图所示，经10周喂食后，与第0周相比，且相较于对照组，实验组(为本发明的该营养组成物)的小肠绒毛长度平均增长8％。显示本发明的该营养组成物用于促进鲈鱼的绒毛生长。
55.再者，图5其为本发明的一实施例的肝脏组织的实验结果图。如图所示，在第0周时，对照组与实验组的肝脏组织皆呈现空泡状，显示肝细胞因含过多脂肪无法代谢，进而堆积于肝细胞中，形成脂肪肝。并且致使参与免疫反应的黑色素巨噬细胞无法浸润攻击细菌。经10周喂食后，对照组的肝脏组织仍呈现细胞空泡化1，反观实验组(本发明的该营养组成物)可以快速修复肝细胞使其有完整细胞2，使细胞空洞化减少，并且可以观察到有黑色素巨噬细胞3存在于肝脏组织中。显示本发明的该营养组成物用于降低鲈鱼的体脂肪，并恢复肝脏中的黑色素巨噬细胞3，以增强免疫效果。
56.最后，图6其为本发明的一实施例的肌肉组织的实验结果图。如图所示，经10周喂食后，与第0周相比，且相较于对照组，喂食实验组(本发明的该营养组成物)的该鲈鱼其肌肉面积平均增大27％。显示本发明的该营养组成物用于增加鲈鱼的肌肉面积。
57.本发明的该营养组成物用于绒毛增生的用途，其有别于以往习知饲料，本发明的该营养组成物可确实有效快速让绒毛细胞增长，并增强鲈鱼对饲料营养的吸收。并由fcr数
值降低可知，本发明的该营养组成物可大幅减少饲料投喂量与人工投入等成本支出。并可快速增强鲈鱼的免疫力，有效抵抗细菌或病毒的感染。
58.又再进一步的，将本发明的该营养组成物中的该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取而来)与市售的相关鱼饲料进行比较，以证明本发明的该小分子胜肽的功效。其分组及饲养的方法为：取5000只加州鲈鱼，每日喂食的饲料量为约80～100克/只，测试期为60
‑
90天。并如下表2
‑
5所示，其为市售鱼饲料(表1：一般商业饲料(为a组)、表2：加入本发明的该营养组成物的该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取而来)的相关饲料(为b组)、表3：永旭成饲料(为c组)以及表4：达邦饲料(为d组)。
59.其相应的实验结果如第7a、7b、8图，其为本发明的营养组成物与市售鱼饲料的绒毛长度的实验结果图、本发明的营养组成物与市售鱼饲料的绒毛长度的实验直方图以及本发明的营养组成物的该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取而来)与市售鱼饲料的饲料转换率的实验直方图。表1、一般商业饲料组成分比一般商业饲料组成分比表2、加入营养组成物的相关饲料成分比
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重量(kg)饲料百分比阿拉斯加鱼粉41841.8面粉20020熟化豆粉24925小分子胜肽10.1干贝粉505鲑鱼鱼油505乌贼油101磷酸二氢钙101有机矿物质10.1维他命0.80.08盐30.3胆碱30.3卵磷脂2.70.27维他命c0.50.05维他命e10.1 1000100表3、永旭成饲料组成分比
表4、达邦饲料组成分比
60.并如表1至4可知，本发明的该营养组成物的该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取而来)仅取代了1公斤。而其实验结果则如第7a
‑
7b图。加入本发明的该营养组成物中的该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取发酵而来)后(为b组)，其绒毛的长度相较于其他3组(a组
‑
一般商业饲料、c组
‑
永旭成饲料、d组
‑
达邦饲料) 增长了不少，显示仅需加入少量本发明的该营养组成物中的该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取而来)即可让鲈鱼的绒毛长度增长。
61.又，参阅图8，加入本发明的该营养组成物中的该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取而来)后(为b组)，其鲈鱼的饲料转换率较于其他3组(a组
‑
一般商业饲料、c组
‑
永旭成饲料、d组
‑
达邦饲料)低，显示仅需加入少量本发明的该营养组成物中的该小分子胜肽(由该大豆蛋白萃取而来)即可让鲈鱼的饲料转换率进一步下降。
62.上文仅为本发明的较佳实施例而已，并非用来限定本发明实施的范围，凡依本发明权利要求范围所述的形状、构造、特征及精神所为的均等变化与修饰，均应包括于本发明的权利要求范围内。