一种抗新型冠状病毒的双特异性抗体及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种抗新型冠状病毒的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体包含单抗b38的重链可变区、单抗b38的轻链可变区、单抗h4的重链可变区、单抗h4的轻链可变区，其中，单抗b38的重链可变区包含：氨基酸序列如seq id no.9所示的cdr1、氨基酸序列如seq id no.10所示的cdr2、以及氨基酸序列如seq id no.11所示的cdr3；单抗b38的轻链可变区包含：氨基酸序列如seq id no.12所示的cdr1、氨基酸序列如seq id no.13所示的cdr2、以及氨基酸序列如seq id no.14所示的cdr3；单抗h4的重链可变区包含：氨基酸序列如seq id no.15所示的cdr1、氨基酸序列如seq id no.16所示的cdr2、以及氨基酸序列如seq id no.17所示的cdr3；单抗h4的轻链可变区包含：氨基酸序列如seq id no.18所示的cdr1、氨基酸序列如seq id no.19所示的cdr2、以及氨基酸序列如seq id no.20所示的cdr3；优选地，所述单抗b38的重链可变区的氨基酸序列如seq id no.32所示，单抗b38的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.33所示；所述单抗h4的重链可变区的氨基酸序列如seq id no.34所示，单抗h4的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.35所示。2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中，所述双特异性抗体为bs
‑
mab
‑
1，其具有从n端到c端的如下结构：重链：vh
h4
‑
vh
b38
‑
ch
b38
，轻链：vl
h4
‑
vl
b38
‑
cl
b38
，其中，vh
h4
与vh
b38
通过连接肽连接，vl
h4
与vl
b38
通过连接肽连接；或者，所述双特异性抗体为bs
‑
mab
‑
2，其具有从n端到c端的如下结构：重链：vh
b38
‑
ch
b38
‑
vh
h4
‑
vl
h4
，轻链：vl
b38
‑
cl
b38
；其中，vh
h4
与vl
h4
通过连接肽连接，组成单链抗体；ch
b38
与vh
h4
通过连接肽连接；优选地，所述连接肽的氨基酸序列为(ggggs)n，其中，n为1
‑
4的自然数；优选地，在抗体bs
‑
mab
‑
1中，连接肽的n为2；在抗体bs
‑
mab
‑
2中，所述vh
h4
与vl
h4
之间的连接肽的n为4，ch
b38
与vh
h4
之间的连接肽的n为1。3.根据权利要求2所述的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体bs
‑
mab
‑
1，其轻链的氨基酸序列如seq id no.4所示或经一个或多个氨基酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能的蛋白的氨基酸序列，其重链的氨基酸序列如seq id no.2所示或经一个或多个氨基酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能的蛋白的氨基酸序列；或者，所述双特异性抗体bs
‑
mab
‑
2，其轻链的氨基酸序列如seq id no.8所示或经一个或多个氨基酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能的蛋白的氨基酸序列，其重链的氨基酸序列如seq id no.6所示或经一个或多个氨基酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能的蛋白的氨基酸序列。4.根据权利要求1
‑
3任一所述的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体为鼠源抗体、人源化抗体、嵌合抗体或重组抗体；优选地，所述抗体为igg1抗体、igg2抗体、igg3抗体、igg4抗体中的一种。5.编码权利要求1
‑
4任一项所述双特异性抗体的基因；优选地，所述双特异性抗体轻链的核苷酸序列如seq id no.3所示，重链的核苷酸序列如seq id no.1所示；或
所述双特异性抗体轻链的核苷酸序列如seq id no.7所示，重链的核苷酸序列如seq id no.5所示。6.包含权利要求5所述基因的生物材料，所述生物材料是重组dna、表达盒、载体、宿主细胞、工程菌或细胞系。7.权利要求1
‑
4任一项所述双特异性抗体的制备方法，其特征在于，包括：分别构建含有所述双特异性抗体bs
‑
mab
‑
1或bs
‑
mab
‑
2重链和轻链基因的重组表达载体；将重组表达载体导入宿主细胞，获得稳定表达所述双特异性抗体的宿主细胞；培养宿主细胞，经分离纯化获得所述双特异性抗体。8.一种药物组合物，其特征在于，含有权利要求1
‑
4任一项所述双特异性抗体。9.一种试剂盒，其特征在于，含有权利要求1
‑
4任一项所述双特异性抗体。10.权利要求1
‑
4任一项所述双特异性抗体或权利要求5所述基因或权利要求6所述生物材料或权利要求8所述的药物组合物或权利要求9所述的试剂盒的如下任一应用：(1)在制备预防或治疗新型冠状病毒感染所引起疾病的药物中的应用；(2)在制备新型冠状病毒诊断试剂或诊断试剂盒中的应用；(3)在制备新型冠状病毒疫苗中的应用；(4)在预防或治疗sars
‑
cov
‑
2冠状病毒引起疾病中的应用；(5)在检测新型冠状病毒中的应用。11.一种单剂量形式的药物组合物，其中，所述单剂量形式含有180mg
‑
6000mg的权利要求1～4任一项所述的双特异性抗体；优选地，含有180mg
‑
3000mg的权利要求1～4任一项所述的双特异性抗体；更优选地，含有500mg
‑
1800mg的权利要求1～4任一项所述的双特异性抗体；进一步优选地，含有900mg
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1800mg的权利要求1～4任一项所述的双特异性抗体；更进一步优选地，含有500mg
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1000mg的权利要求1～4任一项所述的双特异性抗体；优选地，所述药物组合物被配制为适合静脉给药的形式。

技术总结
本发明涉及一种抗新型冠状病毒的双特异性抗体及其应用。本发明的双特异性抗体通过基因工程方法对新冠病毒单抗H4和B38进行改造获得，可以同时识别新型冠状病毒S蛋白RBD的不同位点，对新冠病毒假病毒的中和活性远高于母源单抗，对新冠病毒活病毒的抑制活性也高于母源单抗。本发明的双特异性抗体提高了母源单抗的选择性和中和活性，改善了单抗药物的安全性和有效性，可作为制备诊断、预防、治疗新型冠状病毒引起疾病的潜在药物，市场价值巨大，应用前景良好。景良好。


技术研发人员：高福 吴燕 李世华 黎朝晖 谭曙光
受保护的技术使用者：中国科学院微生物研究所
技术研发日：2021.07.27
技术公布日：2021/10/29