一种检测细菌的微流控芯片、检测仪及检测方法及应用与流程

技术特征：
1.一种检测细菌的微流控芯片，包括：采样口(11)、反应腔室(12)及芯片通道(13)；其中，所述采样口(11)及所述反应腔室(12)通过芯片通道(13)连接；所述反应腔室(12)预先包被引发链和适配体，用于细菌捕获及信号放大；所述微流控芯片至少包括上层和下层，所述上层用于构建微通道，所述下层用于修饰包被的引发链和适配体，所述上层和所述下层贴合形成反应腔室(12)，所述反应腔室(12)内，进行杂交链式反应和g
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四联体介导的h2o2显色反应。2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述反应腔室至少一侧的芯片材料为透明可视材料；优选地，所述微流控芯片还包括加样口(14)，用于所述引发链和适配体的注入，所述加样口(14)位于所述反应腔室(12)的上方；和/或所述微流控芯片还包括接口(15)，所述接口(15)位于与采样口(11)相对的一侧；所述采样口(11)与所述反应腔室(12)通过进样通道(16)连接，所述接口(15)与所述反应腔室(12)通过流出通道(17)和表面张力细通道(8)连接；优选地，所述进样通道(16)与反应腔室(12)连接端的宽度等于进样通道(16)与采样口(11)连接端的宽度；优选地，所述表面张力细通道(18)与反应腔室(12)连接端的宽度小于流出通道(17)与接口(15)连接端的宽度；优选地，所述进样通道(16)与反应腔室(12)连接端的宽度为0.8～1.5mm，更优选为1mm；优选地，所述表面张力细通道(18)与反应腔室(12)连接端的宽度为80～150μm，更优选为100～120μm。3.根据权利要求1或2所述的微流控芯片，其特征在于，所述芯片(1)为梯形，所述梯形的上底设置所述采样口(11)，所述梯形的下底设置所述接口(15)；优选地，所述采样口(11)的尺寸为(0.8～1.5)mm
×
(100～200)μm，优选为1mm
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150μm；优选地，所述接口(15)的尺寸为(0.8～1.5)mm
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(100～200)μm，优选为1mm
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150μm；优选地，所述反应腔室(12)为圆形或椭圆形，更优选为椭圆形；优选地，所述反应腔室(12)为椭圆形，反应腔室(12)的尺寸为：长轴长0.8～1.5cm，优选为1cm；短轴长0.3～0.7cm，优选为0.5cm；优选地，所述微流控芯片(1)具有多个并联的反应腔室(12)，所述进样通道(16)和所述流出通道(17)分别通过多个连接端与多个并联的所述反应腔室(12)相连。4.一种细菌检测仪，包括取样器(2)及权利要求1
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3中任意一项所述的微流控芯片(1)。5.根据权利要求4所述的细菌检测仪，其特征在于，所述取样器(2)包括芯片卡槽(21)和微型泵(22)，所述芯片卡槽(21)上方的连接口(211)与所述微型泵(22)的入口相连；当所述微流控芯片(1)插入芯片卡槽(21)时，位于芯片卡槽(21)上方的连接口(211)与所述微流控芯片(1)的接口(15)相连通；优选地，所述连接口(211)与所述微型泵(22)相连的一端设置海绵片(23)；优选地，所述取样器(2)与所述微流控芯片(1)气密性连接；优选地，所述取样器(2)与所述微流控芯片(1)可拆卸地连接；
优选地，所述取样器(2)还包括控制芯片(24)，用于控制所述微型泵(22)。6.根据权利要求4或5所述的细菌检测仪检测细菌的方法，包括：s1.使用所述细菌检测仪吸取待测样品，在细菌检测仪的微流控芯片的反应腔室中与适配体接触，排出待测样品；s2.使用细菌检测仪吸取试剂，在细菌检测仪的的微流控芯片的反应腔室中停留，排出试剂；s3.使用所述细菌检测仪吸取h2o2和显色试剂溶液，观察颜色变化。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述引发链的序列如seq id no.1所示；优选地，s2中，所述试剂包括h1链和h2链，以及氯化血红素溶液；优选地，s3中，所述h2o2的浓度为1～8mm，优选为2～5mm；和/或，所述显色试剂的浓度为1～6mm，优选为1～3mm；优选地，s3中，所述显色试剂包括2,2'
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联氮
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双
‑3‑
乙基苯并噻唑啉
‑6‑
磺酸。8.权利要求1
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3中任一项所述的微流控芯片或权利要求4或5
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所述的细菌检测仪或权利要求6或7所述的方法在细菌检测中的应用。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述细菌为食源性病菌，优选所述食源性病菌包括致病性大肠埃希菌、沙门氏菌、志贺氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌、溶血性链球菌、蜡状芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌中的至少一种。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述食源性病菌为致病性大肠埃希菌，所述适配体序列如seq id no.2所示，所述h1链的序列如seq id no.3所示，所述h2序列如seq id no.4所示；和/或，所述食源性病菌为蜡状芽孢杆菌，所述适配体序列如seq id no.5所示，所述h1链的序列如seq id no.6所示，所述h2序列如seq id no.7所示；和/或，所述食源性病菌为金黄色葡萄球菌，所述适配体序列如seq id no.8所示，所述h1链的序列如seq id no.9所示，所述h2序列如seq id no.10所示。

技术总结
本发明提供一种检测细菌的微流控芯片，包含上述微流控芯片的细菌检测仪，以及方法和在细菌检测技术领域的应用。所述微流控芯片包括采样口、反应腔室及芯片通道；其中，所述采样口及所述反应腔室通过芯片通道连接；所述反应腔室预先包被引发链和适配体；所述微流控芯片至少包括两层，反应腔室至少一侧的芯片材料均为可视材料。本发明提供的一种检测食源性病菌的微流控芯片及检测仪，体积小、成本低廉、利于批量生产，便于携带，基于微流控芯片技术及杂交链式反应(HCR)和G


技术研发人员：林金明 李楠
受保护的技术使用者：清华大学
技术研发日：2021.04.21
技术公布日：2021/10/19