技术特征:
1.提取dna的组合物,其特征在于:所述组合物含有细胞悬浮液、裂解液、磁珠悬浮液和结合液;所述组合物中各溶液的配比为细胞悬浮液300
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500μl,裂解液300
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500μl,磁珠悬浮液5
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20μl,结合液600
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800μl;所述细胞悬浮液为tris
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hcl缓冲溶液;所述裂解液的溶质为十二烷基硫酸钠、np
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40和蛋白酶k,溶剂是所述tris
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hcl缓冲溶;所述溶质和溶剂的配比为np
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40 5g,蛋白酶k 100ng,tris
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hcl缓冲溶液100ml;所述磁珠悬浮液为直径80
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1000nm的fe
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si磁珠与水的混合液,所述磁珠的浓度为10
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20mg/ml;所述结合液的溶剂为100%异丙醇,溶质为异硫氝酸呱,所述溶质与溶剂的配为286g:1000ml。2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于:所述裂解液的溶质还包括叠氮化钠和氯化钠,所述裂解液的溶质的配比为np
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40 5g,蛋白酶k 100ng,tris
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hcl缓冲溶液100ml,叠氮化钠1g,氯化钠11.58g。3.根据权利要求1或2所述的组合物,其特征在于:所述组合物还包括漂洗液和洗脱液。4.根据权利要求3所述的组合物,其特征在于:所述漂洗液为乙醇水溶液;所述洗脱液为水;所述组合物中各溶液的配比为细胞悬浮液300
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500μl,裂解液300
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500μl,磁珠悬浮液5
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20μl,结合液600
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800μl,漂洗液500
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1000μl,洗脱液100
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200μl。5.根据权利要求1
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4中任一权利要求所述的组合物,其特征在于:所述组合物中各溶液的配比为细胞悬浮液400μl,裂解液400μl,磁珠悬浮液5μl,结合液800μl,漂洗液700μl,洗脱液100μl。6.提取dna的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括权利要求1
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6中任一权利要求所述的提取dna的组合物。7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括离心板和/或磁力搅拌棒;所述磁珠的直径为80
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1000nm;所述磁珠在所述磁珠悬浮液中的浓度为10mg/ml。8.权利要求1
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5中任一权利要求所述的组合物和/或权利要求6或7所述的试剂盒在提取动物样本dna中的应用。9.提取动物血液样本dna的方法,其特征在于:所述方法包括在所述动物血液样本中加入权利要求1中所述的细胞悬浮液和裂解液后静置,得到裂解混合液;将所述裂解混合液离心后加入权利要求1中所述的结合液和磁珠悬浮液,混匀后静置得到与磁珠结合的dna,将所述与磁珠结合的dna进行纯化得到纯化的dna。10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述动物血液样本与所述细胞悬浮液、所述裂解液的配比为动物血液样本:5
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20μl,细胞悬浮液400μl,裂解液400μl;所述静置的温度为56℃,静置时间为10
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20min;所述离心的离心力为1700g,离心时间为5min。
技术总结
本发明公开了一种高通量快速磁珠法提取鸡血基因组DNA的试剂盒及提取法。本发明所要保护的一个技术方案是提取DNA的组合物。所述组合物含有细胞悬浮液、裂解液、磁珠悬浮液和结合液。所述组合物中各溶液的配比可为细胞悬浮液300
技术研发人员:刘君 程溪柳 王欢 孙莹
受保护的技术使用者:中国农业科学院生物技术研究所
技术研发日:2021.07.12
技术公布日:2021/10/23
再多了解一些
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