一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体及其制备方法和应用与流程

技术特征：
1.一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体，其特征在于，所述抗体为抗s.eriocheiris的特异性igy抗体，是由破碎后的螺原体注射进母鸡体内，从鸡蛋的卵黄中分离并纯化得到的特异性抗体。2.权利要求1所述的一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)将s.eriocheiris在r2培养基中培养24h后离心去上清，并用pbs重悬；步骤2)将经步骤1)重悬后的s.eriocheiris进行超声破碎，并于20℃保存备用；步骤3)对母鸡进行肌肉注射，注射1ml 200～400μg/ml经步骤2)破碎后的s.eriocheiris，生产特异性抗体igy；步骤4)对母鸡进行3次注射，间隔2周，每天收集鸡蛋，直至第九周，提取鸡蛋卵黄，从卵黄中分离出igy并纯化，即得。3.权利要求1所述的一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体在抑制s.eriocheiris生长方面的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：步骤a)从注射了200～400μg/ml的s.eriocheiris的鸡卵黄中分离出igy并纯化；步骤b)将步骤a)得到的igy以滴度为1:1～30000的比例进行稀释，得到特异性igy；步骤c)在r2培养基中接种s.eriocheiris并添加步骤b)得到的特异性igy，其中igy与培养基按照1:4～100的比率混合，培养0～48h后观察s.eriocheiris的生长情况。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤a)所述鸡卵黄中，注射的s.eriocheiris的浓度为400μg/ml；步骤b)所述滴度为1:10000；步骤c)所述igy与培养基的比率为1:4。6.权利要求1所述的一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体在中华绒螯蟹抵抗s.eriocheiris感染中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：步骤a)从注射了400μg/ml的s.eriocheiris的鸡卵黄中分离出igy并纯化；将分离纯化的igy以滴度为1:10000的比例进行稀释，得到特异性igy；步骤b
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1)将步骤a)制得的特异性igy与饲料混合，混合质量比为1:4，并用蛋清作为粘合剂，制得混合饲料；步骤c
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1)将步骤b
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1)制得的混合饲料在阳光下暴晒直至干燥，对中华绒螯蟹进行喂食，喂食率为每天1％，饲养15天后观察结果。8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：步骤a)从注射了400μg/ml的s.eriocheiris的鸡卵黄中分离出igy并纯化；将分离纯化的igy以滴度为1:10000的比例进行稀释，得到特异性igy；步骤b
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2)将步骤a)制得的特异性igy与pbs按体积比为1:4进行混合，制得注射物；步骤c
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2)将步骤b
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2)制得的注射物对中华绒螯蟹进行注射，15天后观察结果。9.权利要求1所述的一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体在水产养殖中的应用。

技术总结
本发明公开了一种针对中华绒螯蟹螺原体的特异性卵黄抗体及其制备方法和应用，所述抗体为抗S.eriocheiris的特异性IgY抗体，是由破碎后的螺原体注射进母鸡体内，从鸡蛋的卵黄中分离并纯化得到的特异性抗体。该特异性抗体可通过饲料饲喂或注射等方式应用于中华绒螯蟹抵抗S.eriocheiris的感染中，结果证明与现有的治疗中华绒螯蟹颤抖病的方法相比，本发明的方法对环境无污染、针对性强、效果显著。本发明成功地证明了抗S.eriocheiris特异性IgY在中华绒螯蟹抵抗S.eriocheiris感染过程中的潜在作用，并可以应用于水产养殖中以提高中华绒螯蟹的产量和渔民的收入，促进中华绒螯蟹养殖产业的发展。业的发展。业的发展。


技术研发人员：曹晓慧 刘鸿丽 顾伟 王文 孟庆国
受保护的技术使用者：南京师范大学
技术研发日：2021.06.16
技术公布日：2021/10/23