基于LEAPER技术靶向编辑RNA的方法和药物与流程

技术特征：
1.一种基于leaper技术靶向编辑细胞中靶标rna的方法，其中所述靶标rna包含含有鸟苷(g)到腺苷(a)突变位点(靶标腺苷)的α
‑
l
‑
艾杜糖醛酸酶(α
‑
l
‑
iduronidase，idua)的基因转录本序列，该方法包括：将arrna或包含所述arrna编码序列的构建体导入所述细胞中，其中所述arrna包含与所述靶标rna杂交的互补rna序列，并且其中所述arrna与所述靶标rna杂交后能够招募作用于rna的腺苷脱氨酶(adar)以使靶标rna中的靶标腺苷脱氨基。2.根据权利要求1的方法，其中所述arrna上与靶标腺苷相对的核苷(靶向核苷)为胞苷(c)、腺苷(a)或尿苷(u)。3.根据权利要求1或2的方法，其中所述靶标腺苷与其5’最近邻核苷和3’最近邻核苷组成靶标三联体，该靶标三联体为5
’‑
uag
‑3’
。4.根据权利要求1
‑
3任一项的方法，其中所述靶向核苷的5’最近邻核苷为c、g或u。5.根据权利要求1
‑
4任一项的方法，其中所述靶向核苷的3’最近邻核苷为a。6.根据权利要求1
‑
5任一项的方法，其中所述靶向核苷与其5’最近邻核苷和3’最近邻核苷组成靶向三联体，该靶向三联体为5
’‑
cca
‑3’
。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的方法，其中所述arrna长度为选自61nt
‑
121nt中的任一整数个nt。8.根据权利要求1
‑
7任一项的方法，其中所述arrna的靶向核苷距离所述arrna的3’末端的距离小于所述靶向核苷距离所述arrna的5’末端的距离。9.根据权利要求1
‑
8中任一项的方法，其中所述arrna的靶向核苷距离其3'末端为选自9nt
‑
60nt中的任一整数个nt。10.根据权利要求1
‑
9中任一项的方法，其中所述arrna的靶向核苷距离其5’末端为选自25nt
‑
60nt中的任一整数个nt。11.根据权利要求1
‑
10中任一项的方法，其中所述arrna选自下述任一长度特征的arrna：55nt
‑
c
‑
35nt、55nt
‑
c
‑
25nt、55nt
‑
c
‑
24nt、55nt
‑
c
‑
21nt、55nt
‑
c
‑
20nt、55nt
‑
c
‑
19nt、55nt
‑
c
‑
18nt、55nt
‑
c
‑
17nt、55nt
‑
c
‑
16nt、55nt
‑
c
‑
15nt、55nt
‑
c
‑
14nt、55nt
‑
c
‑
13nt、55nt
‑
c
‑
12nt、55nt
‑
c
‑
11nt、55nt
‑
c
‑
10nt、55nt
‑
c
‑
9nt、50nt
‑
c
‑
20nt、50nt
‑
c
‑
15nt或45nt
‑
c
‑
20nt，其中c为arrna中与靶标腺苷相对的靶向核苷，arrna的方向为5’至3’的方向。12.根据权利要求1
‑
11中任一项的方法，其中所述arrna选自下述任一长度特征的arrna：55nt
‑
c
‑
20nt、55nt
‑
c
‑
15nt、55nt
‑
c
‑
14nt。13.根据权利要求1
‑
12中任一项的方法，其中所述arrna包含一种或多种化学修饰。14.根据权利要求13的方法，其中所述化学修饰选自如下的一种或多种：2
’‑
o
‑
甲基化修饰、核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰、脱氧核糖核苷替代修饰、lna修饰、2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰。15.根据权利要求13或14的方法，其中所述化学修饰选自如下的一种或多种：1)前2、3、4或5个核苷酸的2'
‑
o
‑
甲基化修饰；2)后2、3、4、或5个核苷酸的2'
‑
o
‑
甲基化修饰；3)除靶向三联体以外全部胞苷的2'
‑
o
‑
甲基化修饰；4)前2、3或4个核苷酸的2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰；
5)后2、3或4个核苷酸的2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰；6)前2、3或4个核苷酸的脱氧核糖核苷替代修饰；7)后2、3或4个核苷酸的脱氧核糖核苷替代修饰；8)前1、2、3、4或5个核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰；9)后1、2、3、4、或5个核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰；10)除靶向三联体各核苷酸5’或3’最近邻核苷酸间连接中的一个或多个不做硫代磷酸酯修饰以外，所有核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰；和11)除靶向三联体各核苷酸5’或3’最近邻核苷酸间连接中的一个或多个不做硫代磷酸酯修饰以外，每间隔1个、2个、3个、或4个核苷酸的核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰。16.根据权利要求13
‑
15中任一项的方法，所述arrna包含选自下组任一种的化学修饰：cm0：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，并且前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；cm1：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；并且序列中全部u均经2
’‑
o
‑
甲基化修饰；cm2：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；并且靶向核苷的3’最近邻核苷经2
’‑
o
‑
甲基化修饰；cm3：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；并且靶向核苷的5’最近邻核苷经2
’‑
o
‑
甲基化修饰；cm4：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；并且靶向三联体中的三个碱基与各自的3’最近邻核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；cm6：序列前5个和后5个核苷酸分别被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，并且前5个和后5个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；cm148：序列前4个和后4个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰，前3个和后4个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有u均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm149：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰，前2个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有u均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm150：序列前2个和后2个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰，第1个和后2个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有u均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm151：序列前4个和后4个核苷酸分别经lna修饰，前3个和后4个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有尿苷均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm152：序列前3个和后3个核苷酸分别经lna修饰，前2个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有尿苷均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm153：序列前2个和后2个核苷酸分别经lna修饰，前2个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有尿苷均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm94：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰，且从5’末端第4个核苷酸间连接至3’末端第3个核苷酸间连接中除靶向三联体中各核苷酸5’最近邻核苷酸间连接不做硫代磷酸酯修饰以外，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；
cm119：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰；从5’末端第4个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸间连接以及从3’末端第3个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；并且靶标核苷经脱氧核糖核苷替代；cm120：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰；从5’末端第4个核苷酸间连接至靶向核苷的5’最近邻核苷酸间连接以及从3’末端第3个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸间连接，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；并且靶标核苷经脱氧核糖核苷替代；cm123：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰；从5’末端第4个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸间连接以及从3’末端第3个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；并且靶向三联体中的各核苷均经脱氧核糖核苷替代；cm125：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接及靶标核苷的3’最近邻核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰；从5’末端第4个核苷酸间连接至靶向核苷的5’最近邻核苷酸的5’最近邻核苷酸以及从3’末端第3个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；并且靶向三联体中的各核苷均经脱氧核糖核苷替代。17.根据权利要求1
‑
16中任一项的方法，其中所述arrna靶向的g到a的突变位点是赫勒氏综合征患者基因组中nm_000203.4(idua)
‑
c.1205g>a(p.trp402ter)的突变位点，或其相应的突变位点。18.根据权利要求1
‑
17中任一项所述的方法，其中所述arrna包含选自以下的任一序列，其中*表示硫代磷酸酯修饰，m表示2
’‑
o
‑
甲基化修饰，moe表示2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰， 表示lna修饰，d表示脱氧核糖核苷替代：1)gm*am*cm
‑
g*cm
‑
cm*cm
‑
a*cm
‑
cm*g
‑
um*g
‑
um*g
‑
g*um
‑
um*g
‑
cm*um
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
a*g
‑
g*a
‑
cm*g
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
cm*g
‑
g*cm
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
g*a
‑
cm*a
‑
cm*um
‑
um*cm
‑
g*g
‑
cm
‑
c
‑
c
‑
a*g
‑
a*g
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
um*cm
‑
cm*um*cm*am(seq id no:31)2)gm*am*cm
‑
g*cm
‑
cm*cm
‑
a*
‑
cm
‑
cm*g
‑
um*g
‑
um*g
‑
g*um
‑
um*g
‑
cm*um
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
a*g
‑
g*a
‑
cm*g
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
cm*g
‑
g*cm
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
g*
‑
a
‑
cm*a
‑
cm*um
‑
um*cm
‑
g*g
‑
cm*cd
‑
cd*ad*
‑
g
‑
a*g
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
um*cm
‑
cm*um*cm*am(seq id no:31)；3)gm*am*cm
‑
g*cm
‑
cm*cm
‑
a*cm
‑
cm*g
‑
um*g
‑
um*g
‑
g*um
‑
um*g
‑
cm*um
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
a*g
‑
g*a
‑
cm*
‑
g
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
cm*g
‑
g*cm
‑
cm*um
‑
g*
‑
cm
‑
g*a
‑
cm*a
‑
cm*um
‑
um*cm
‑
g*g
‑
cm
‑
cd
‑
cd*ad*g
‑
a*g
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
um*cm
‑
cm*um*cm*am(seq id no:31)；4)gmoe*amoe*cmoe*gmoe
‑
c
‑
c
‑
c
‑
a
‑
c
‑
c
‑
g
‑
um
‑
g
‑
um
‑
g
‑
g
‑
um
‑
um
‑
g
‑
c
‑
um
‑
g
‑
um
‑
c
‑
c
‑
a
‑
g
‑
g
‑
a
‑
c
‑
g
‑
g
‑
um
‑
c
‑
c
‑
c
‑
g
‑
g
‑
c
‑
c
‑
um
‑
gc
‑
g
‑
a
‑
c
‑
a
‑
c
‑
um
‑
um
‑
c
‑
g
‑
g
‑
c
‑
c
‑
c
‑
a
‑
g
‑
a
‑
g
‑
c
‑
um
‑
g
‑
c
‑
um
‑
c*cmoe*umoe*cmoe*amoe(seq id no:31)；或5)g *a *c *g c
‑
c
‑
c
‑
a
‑
c
‑
c
‑
g
‑
um
‑
g
‑
um
‑
g
‑
g
‑
um
‑
um
‑
g
‑
c
‑
um
‑
g
‑
um
‑
c
‑
c
‑
a
‑
g
‑
g
‑
a
‑
c
‑
g
‑
g
‑
um
‑
c
‑
c
‑
c
‑
g
‑
g
‑
c
‑
c
‑
um
‑
gc
‑
g
‑
a
‑
c
‑
a
‑
c
‑
um
‑
um
‑
c
‑
g
‑
g
‑
c
‑
c
‑
c
‑
a
‑
g
‑
a
‑
g
‑
c
‑
um
‑
g
‑
c
‑
um
‑
c*c *u *c *a (seq id no:31)。19.根据权利要求1
‑
18中任一项的方法，其中所述arrna通过选自如下的任一方法导入所述细胞：电转染、脂质体转染、外泌体递送、或脂质
‑
纳米颗粒递送(lnp)。20.根据权利要求1
‑
19中任一项的方法，其中所述arrna单次导入细胞的量为5
‑
160nm。21.根据权利要求1
‑
20中任一项的方法，其中所述arrna经多次导入所述细胞，且两次导入间隔≤21天。22.一种工程化arrna，该arrna用于基于leaper技术靶向编辑细胞中靶标rna，其中，所述靶标rna包含含有鸟苷(g)到腺苷(a)突变位点(靶标腺苷)的α
‑
l
‑
艾杜糖醛酸酶(α
‑
l
‑
iduronidase，idua)的基因转录本序列，所述arrna包含与所述靶标rna杂交的互补rna序列，所述arrna与所述靶标rna杂交后能够招募作用于rna的腺苷脱氨酶(adar)以使靶标rna中的靶标腺苷脱氨基，所述arrna靶向的g到a的突变位点是赫勒氏综合征患者基因组中nm_000203.4(idua)
‑
c.1205g>a(p.trp402ter)的突变位点，或其相应的突变位点。23.根据权利要求22的arrna，其中所述arrna选自下述任一长度特征的arrna：55nt
‑
c
‑
35nt、55nt
‑
c
‑
25nt、55nt
‑
c
‑
24nt、55nt
‑
c
‑
21nt、55nt
‑
c
‑
20nt、55nt
‑
c
‑
19nt、55nt
‑
c
‑
18nt、55nt
‑
c
‑
17nt、55nt
‑
c
‑
16nt、55nt
‑
c
‑
15nt、55nt
‑
c
‑
14nt、55nt
‑
c
‑
13nt、55nt
‑
c
‑
12nt、55nt
‑
c
‑
11nt、55nt
‑
c
‑
10nt、55nt
‑
c
‑
9nt、50nt
‑
c
‑
20nt、50nt
‑
c
‑
15nt、45nt
‑
c
‑
20nt，其中c为arrna中与靶标腺苷相对的靶向核苷，arrna的方向为5’至3’的方向。24.根据权利要求22或23的arrna，其中所述arrna包含一种或多种化学修饰。25.根据权利要求22
‑
24中任一项的arrna，其中所述化学修饰选自如下的一种或多种：2
’‑
o
‑
甲基化修饰、核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰、脱氧核糖核苷替代修饰、lna修饰、2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰。26.根据权利要求22
‑
25中任一项的arrna，其中所述化学修饰选自如下的一种或多种：1)前2、3、4或5个核苷酸的2'
‑
o
‑
甲基化修饰；2)后2、3、4、或5个核苷酸的2'
‑
o
‑
甲基化修饰；3)除靶向三联体以外全部胞苷的2'
‑
o
‑
甲基化修饰；4)前2、3或4个核苷酸的2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰；5)后2、3、或4个核苷酸的2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰；6)前2、3或4个核苷酸的脱氧核糖核苷替代修饰；7)后2、3或4个核苷酸的脱氧核糖核苷替代修饰；8)前1、2、3、4或5个核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰；9)后1、2、3、4、或5个核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰；10)除靶向三联体各核苷酸5’或3’最近邻核苷酸间连接中的一个或多个不做硫代磷酸酯修饰以外，所有核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰；和11)除靶向三联体各核苷酸5’或3’最近邻核苷酸间连接中的一个或多个不做硫代磷酸酯修饰以外，每间隔一个、二个、或三个、或四个核苷酸的核苷酸间连接做硫代磷酸酯修饰。27.根据权利要求22
‑
26中任一项的arrna，所述arrna包含选自下组任一种的化学修饰：cm0：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，并且前3个和后3个核苷酸间
连接分别经硫代磷酸酯修饰；cm1：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；并且序列中全部u均经2
’‑
o
‑
甲基化修饰；cm2：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；并且靶向核苷的3’最近邻核苷经2
’‑
o
‑
甲基化修饰；cm3：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；并且靶向核苷的5’最近邻核苷经2
’‑
o
‑
甲基化修饰；cm4：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前3个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；并且靶向三联体中的三个碱基与各自的3’最近邻核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；cm6：序列前5个和后5个核苷酸分别被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，并且前5个和后5个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰；cm148：序列前4个和后4个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰，前3个和后4个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有u均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm149：序列前3个和后3个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰，前2个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有u均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm150：序列前2个和后2个核苷酸分别经2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰，第1个和后2个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有u均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm151：序列前4个和后4个核苷酸分别经lna修饰，前3个和后4个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有尿苷均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm152：序列前3个和后3个核苷酸分别经lna修饰，前2个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有尿苷均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm153：序列前2个和后2个核苷酸分别经lna修饰，前2个和后3个核苷酸间连接分别经硫代磷酸酯修饰，且所有尿苷均经2
’‑
o
‑
me修饰；cm94：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰，且从5’末端第4个核苷酸间连接至3’末端第3个核苷酸间连接中除靶向三联体中各核苷酸5’最近邻核苷酸间连接不做硫代磷酸酯修饰以外，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；cm119：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰；从5’末端第4个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸间连接以及从3’末端第3个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；并且靶标核苷经脱氧核糖核苷替代；cm120：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰；从5’末端第4个核苷酸间连接至靶向核苷的5’最近邻核苷酸间连接以及从3’末端第3个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸间连接，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；并且靶标核苷经脱氧核糖核苷替代；cm123：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被
2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰；从5’末端第4个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸间连接以及从3’末端第3个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；并且靶向三联体中的各核苷均经脱氧核糖核苷替代；cm125：序列前3个和后3个核苷酸、序列中的全部u和除靶向三联体以外的全部c均被2
’‑
o
‑
甲基化修饰，前4个和后3个核苷酸间连接及靶标核苷的3’最近邻核苷酸间连接均为硫代磷酸酯修饰；从5’末端第4个核苷酸间连接至靶向核苷的5’最近邻核苷酸的5’最近邻核苷酸以及从3’末端第3个核苷酸间连接至靶向核苷的3’最近邻核苷酸，每隔一个核苷酸间连接经硫代磷酸酯修饰；并且靶向三联体中的各核苷均经脱氧核糖核苷替代。28.根据权利要求22
‑
27中任一项的arrna，其中所述arrna包含选自以下的任一序列，其中*表示硫代磷酸酯修饰，m表示2
’‑
o
‑
甲基化修饰，moe表示2
’‑
o
‑
(2
‑
甲氧乙基)修饰， 表示lna修饰，d表示脱氧核糖核苷替代：1)gm*am*cm*g*cm
‑
cm*cm
‑
a*cm
‑
cm*g
‑
um*g
‑
um*g
‑
g*um
‑
um*g
‑
cm*um
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
a*g
‑
g*a
‑
cm*g
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
cm*g
‑
g*cm
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
g*a
‑
cm*a
‑
cm*um
‑
um*cm
‑
g*g
‑
cm
‑
c
‑
c
‑
a*g
‑
a*g
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
um*cm
‑
cm*um*cm*am(seq id no:31)2)gm*am*cm*g*cm
‑
cm*cm
‑
a*
‑
cm
‑
cm*g
‑
um*g
‑
um*g
‑
g*um
‑
um*g
‑
cm*um
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
a*g
‑
g*a
‑
cm*g
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
cm*g
‑
g*cm
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
g*
‑
a
‑
cm*a
‑
cm*um
‑
um*cm
‑
g*g
‑
cm*cd
‑
cd*ad*
‑
g
‑
a*g
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
um*cm
‑
cm*um*cm*am(seq id no:31)；3)gm*am*cm*g*cm
‑
cm*cm
‑
a*cm
‑
cm*g
‑
um*g
‑
um*g
‑
g*um
‑
um*g
‑
cm*um
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
a*g
‑
g*a
‑
cm*
‑
g
‑
g*um
‑
cm*cm
‑
cm*g
‑
g*cm
‑
cm*um
‑
g*
‑
cm
‑
g*a
‑
cm*a
‑
cm*um
‑
um*cm
‑
g*g
‑
cm
‑
cd
‑
cd*ad*g
‑
a*g
‑
cm*um
‑
g*cm
‑
um*cm
‑
cm*um*cm*am(seq id no:31)；4)gmoe*amoe*cmoe*gmoe
‑
c
‑
c
‑
c
‑
a
‑
c
‑
c
‑
g
‑
um
‑
g
‑
um
‑
g
‑
g
‑
um
‑
um
‑
g
‑
c
‑
um
‑
g
‑
um
‑
c
‑
c
‑
a
‑
g
‑
g
‑
a
‑
c
‑
g
‑
g
‑
um
‑
c
‑
c
‑
c
‑
g
‑
g
‑
c
‑
c
‑
um
‑
gc
‑
g
‑
a
‑
c
‑
a
‑
c
‑
um
‑
um
‑
c
‑
g
‑
g
‑
c
‑
c
‑
c
‑
a
‑
g
‑
a
‑
g
‑
c
‑
um
‑
g
‑
c
‑
um
‑
c*cmoe*umoe*cmoe*amoe(seq id no:31)；或5)g *a *c *g c
‑
c
‑
c
‑
a
‑
c
‑
c
‑
g
‑
um
‑
g
‑
um
‑
g
‑
g
‑
um
‑
um
‑
g
‑
c
‑
um
‑
g
‑
um
‑
c
‑
c
‑
a
‑
g
‑
g
‑
a
‑
c
‑
g
‑
g
‑
um
‑
c
‑
c
‑
c
‑
g
‑
g
‑
c
‑
c
‑
um
‑
gc
‑
g
‑
a
‑
c
‑
a
‑
c
‑
um
‑
um
‑
c
‑
g
‑
g
‑
c
‑
c
‑
c
‑
a
‑
g
‑
a
‑
g
‑
c
‑
um
‑
g
‑
c
‑
um
‑
c*c *u *c *a (seq id no:31)。29.包含权利要求22或23的arrna编码序列的构建体。30.包含权利要求22
‑
28中任一项的arrna或权利要求29的构建体的组合物、脂质体、外泌体、脂质
‑
纳米颗粒、细胞、文库或试剂盒。

技术总结
本申请涉及一种基于LEAPER技术的核酸药物，及使用该核酸药物靶向编辑RNA治疗疾病例如赫勒氏综合征(Hurler syndrome)的方法。该方法包括使用所述核酸药物进行RNA上由腺苷到次黄嘌呤碱基的编辑，精准地修复例如赫勒氏综合征(Hurler syndrome)的致病性G>A突变位点，恢复由RNA编码的蛋白例如IDUA在体内的正常表达。达。


技术研发人员：袁鹏飞 赵艳霞 刘能银 易泽轩 汤刚彬
受保护的技术使用者：博雅辑因（北京）生物科技有限公司
技术研发日：2021.04.15
技术公布日：2021/10/23