一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法与流程

1.本发明涉及一种植物中有效成分的提取，特别是一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法。


背景技术：

2.牡丹花是中国特有的名贵花卉，有着“国色天香”的美称。牡丹花提取物的活性成分主要是牡丹花色素、黄酮类，植物精油以及氨基酸混合物等。其中，牡丹花黄酮对于皮肤护肤作用最大，牡丹总黄酮具有良好的抗氧化和美白功效，可有效清除羟基自由基和氧自由基，抗皮肤衰老。牡丹花提取物可以广泛用于功效型护肤品中。
3.现有技术中，对于牡丹花中总黄酮的提取工艺主要为有机溶剂醇提法、酶法、超声波提取法。其中，有机溶剂法使用甲醇或乙醇为溶剂，存在溶剂残留风险；而酶法提取提取时间长、要求长时间保持较高的温度条件，对于温度有较高的要求，浪费能源、不利于大规模生产，且对牡丹黄酮的活性也有影响；超声波提取可以在常温下进行，萃取率高，能耗低，但是当样品量大时，到达样品内部的超声波能量衰减严重，提取效果差，且样品用量多时，堆积厚度增大，试剂对样品内部的浸提作用就不充分，影响提取效果，而且超声波提取对提取瓶的厚度和提取瓶放置位置要求较高，影响提取效果。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于，提供一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法。本发明具有提高总黄酮提取收率，保证总黄酮有效成分的活性，提取条件要求低、易操作的特点。
5.本发明的技术方案：一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
6.s1、取干燥的牡丹花，去除杂质，粉碎，得牡丹花粉末为a品；
7.s2、将a品和1,3
‑
丙二醇混合均匀，得b品；
8.s3、将b品经超临界co2萃取，萃取初期，co2的流量为8
‑
12l/h，萃取压力为25
‑
35mpa，萃取温度为30
‑
32℃，萃取时间为8
‑
12min；然后提高co2的流量至20
‑
30l/h，萃取压力以每分钟0.3
‑
0.6mpa的速度，增加至45
‑
55mpa，保持萃取温度为30
‑
32℃，萃取时间为45
‑
55min，得c品；
9.s4、将c品分离，得成品。
10.前述的一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法中，所述步骤s1中，牡丹花粉末过40
‑
50目筛得到。
11.前述的一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法中，所述步骤s2中，a品和1,3
‑
丙二醇的质量比为10∶1
‑
20∶1。
12.前述的一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法中，所述步骤s2中，a品和1,3
‑
丙二醇的质量比为20∶1。
13.前述的一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法中，所述步骤s3为，将b品经超临界co2萃取，萃取初期，co2的流量为10l/h，萃取压力为30mpa，萃取温度为31℃，萃取时间为
10min；然后提高co2的流量至25l/h，萃取压力以每分钟0.5mpa的速度，增加至50mpa，保持萃取温度为31℃，萃取时间为50min，得c品。
14.前述的一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法中，所述步骤s4中，分离压力以每分钟0.4
‑
0.6mpa的速度，降低至2
‑
8mpa。
15.前述的一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法中，所述步骤s4中，分离压力以每分钟0.5mpa的速度，降低至5mpa。
16.前述的一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法中，所述步骤s4中，分离的温度为25
‑
30℃。
17.前述的一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法中，所述步骤s4中，分离的温度为30℃。
18.与现有技术相比，本发明采用超临界co2流体萃取牡丹中总黄酮，为提高总黄酮含量，引入1,3
‑
丙二醇作为超临界co2提取的夹带剂，成分健康、天然、安全，绿色环保，与皮肤相容性更好，具有良好的保湿效果；而且夹带剂1,3
‑
丙二醇也是黄酮类化合物的良好溶剂，可以进一步提高黄酮类物质在co2流体萃取的溶解性，提炼更加纯净，提高牡丹总黄酮收率，最终提取的总黄酮含量＞2％；
19.在超临界co2萃取过程中，初期的co2的流量为8
‑
12l/h，萃取压力为25
‑
35mpa，然后co2的流量增加至20
‑
30l/h，萃取压力增加至45
‑
55mpa，改变了黄酮类物质的极性，有助于提高黄酮类物质溶解度，可以最大限度的提升活性物质含量；同时萃取压力的提高，还进一步降低沸点，可以有选择地把牡丹花中的植物精油与黄酮类物质有效分离，富集黄酮类物质，提高黄酮类物质的提取效率；
20.萃取过程中的温度始终保持在30
‑
32℃，在分离过程中控制分离温度为25
‑
30℃，可以有效地防止热敏性黄酮类成分的被氧化，完整保留其生物活性。
21.整个牡丹花提取总黄酮的工艺操作，溶剂残留少，安全性高，对温度、设备要求低，节省能源和成本，易操作，提取效果好，适合大规模生产。
具体实施方式
22.下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。
23.实施例1：
24.一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
25.s1、取干燥的牡丹花，去除杂质，粉碎，得牡丹花粉末为a品；
26.s2、将a品和1,3
‑
丙二醇以质量比为10∶1
‑
20∶1混合均匀，得b品；
27.s3、将b品经超临界co2萃取，萃取初期，co2的流量为8
‑
12l/h，萃取压力为25
‑
35mpa，萃取温度为30
‑
32℃，萃取时间为8
‑
12min；然后提高co2的流量至20
‑
30l/h，萃取压力以每分钟0.3
‑
0.6mpa的速度，增加至45
‑
55mpa，保持萃取温度为30
‑
32℃，萃取时间为45
‑
55min，得c品；
28.s4、将c品分离，分离压力以每分钟0.4
‑
0.6mpa的速度，降低至2
‑
8mpa，分离的温度为25
‑
30℃，得成品。
29.实施例2：
30.一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
31.s1、取干燥的牡丹花，去除杂质，粉碎过40
‑
50目筛，得牡丹花粉末为a品；
32.s2、将a品和1,3
‑
丙二醇以质量比为10∶1混合均匀，得b品；
33.s3、将b品经超临界co2萃取，萃取初期，co2的流量为8l/h，萃取压力为25mpa，萃取温度为30℃，萃取时间为8min；然后提高co2的流量至20l/h，萃取压力以每分钟0.3mpa的速度，增加至45mpa，保持萃取温度为30℃，萃取时间为45min，得c品；
34.s4、将c品分离，分离压力以每分钟0.4mpa的速度，降低至8mpa，分离的温度为25℃，得成品。
35.实施例3：
36.一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
37.s1、取干燥的牡丹花，去除杂质，粉碎过50目筛，得牡丹花粉末为a品；
38.s2、将a品和1,3
‑
丙二醇以质量比为15∶1混合均匀，得b品；
39.s3、将b品经超临界co2萃取，萃取初期，co2的流量为12l/h，萃取压力为35mpa，萃取温度为32℃，萃取时间为12min；然后提高co2的流量至30l/h，萃取压力以每分钟0.6mpa的速度，增加至55mpa，保持萃取温度为32℃，萃取时间为55min，得c品；
40.s4、将c品分离，分离压力以每分钟0.6mpa的速度，降低至2mpa，分离的温度为30℃，得成品。
41.实施例4：
42.一种从牡丹花中提取总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
43.s1、取干燥的牡丹花，去除杂质，粉碎过45目筛，得牡丹花粉末为a品；
44.s2、将a品和1,3
‑
丙二醇以质量比为20∶1混合均匀，得b品；
45.s3、将b品经超临界co2萃取，萃取初期，co2的流量为10l/h，萃取压力为30mpa，萃取温度为31℃，萃取时间为10min；然后提高co2的流量至25l/h，萃取压力以每分钟0.5mpa的速度，增加至50mpa，保持萃取温度为31℃，萃取时间为50min，得c品。
46.s4、将c品分离，分离压力以每分钟0.5mpa的速度，降低至5mpa，分离的温度为30℃，得成品。
47.实验例：
48.将实施例4提取到的成品，以槲皮素(一种黄酮)为标准品，通过高效液相色谱测试槲皮素的含量，即等同于总黄酮含量，以质量百分比计算。
49.分别以现有传统的有机溶剂法提取到的总黄酮和酶解法提取到的总黄酮进行检测对比。
50.1)总黄酮含量：
51.不同提取方法提取牡丹花总黄酮的含量结果如表1所示：
52.表1不同的提取方法提取到的总黄酮含量表
[0053][0054]
由表1可知，采用本发明的超临界co2萃取法，提取的总黄酮含量远大于现有的有机溶剂法和酶解法提取的总黄酮含量，提取牡丹花总黄酮的效率大于其他提取方法。
[0055]
2)总黄酮的抗氧化性能：
[0056]
根据上海日用化学品行业协会团体标准(t/shrh 006
‑
2018)中规定的自由基(dpph)清除实验方法评估牡丹总黄酮的抗氧化性能。
[0057]
通过对比不同方法提取牡丹总黄酮样品的ic50，评估总黄酮的抗氧化活性，ic50越小代表活性越强。
[0058]
不同提取方法提取牡丹花总黄酮的抗氧化性能测试结果如表2所示：
[0059]
表2不同的提取方法提取到的总黄酮的抗氧化性能表
[0060][0061]
由表2可知，采用本发明的超临界co2萃取方法获得的牡丹总黄酮的清除dpph自由基的效率最高，因此本发明所述超临界co2萃取方法提取牡丹花总黄酮的抗氧化性能优于其他方法。