Fmoc-AA-NH2的制备方法与流程

才是与fmoc
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aa
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osu反应生成fmoc
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aa
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nh2的重要原料，采用本方法可以有效代替nh3/有机溶剂体系，不用事先将nh3溶于有机溶剂，操作简单、成本低，生产效率得到显著提高。
具体实施方式
22.为解决本发明的第一个技术问题，所述fmoc
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aa
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nh2的制备方法包括：将nh4x先溶于碱性溶剂体系中，再加入fmoc
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aa
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osu反应得到fmoc
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aa
‑
nh2；
23.其中，所述反应的ph为8～9，所述的aa为只有一个羧基的氨基酸或氨基酸衍生物；
24.所述的nh4x为nh4cl，(nh4)2so4中的至少一种；
25.所述碱性溶剂体系中的碱为nahco3，khco3，na2co3，k2co3中的至少一种；
26.所述碱性溶剂体系中的溶剂体系为thf/h2o，can/h2o中的至少一种。
27.ph不在8～9会产生副产物，提纯过程增加，从而导致受率较低或者得不到产品。
28.在一种具体实施方式中，所述fmoc
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aa
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osu先溶于有机溶剂中后，再按照每秒4～6滴的速率滴加到nh4x的碱性溶剂体系中。
29.在一种具体实施方式中，所述碱性溶剂体系中碱含量以维持反应的ph8～9为准。
30.在一种具体实施方式中，所述反应的时间为3～4小时。
31.在一种具体实施方式中，所述fmoc
‑
aa
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osu与nh4x的摩尔比为1:2～4。
32.在一种具体实施方式中，所述fmoc
‑
aa
‑
osu与nh4x的摩尔比为1:2～3。
33.在一种具体实施方式中，所述aa为亮氨酸、丙氨酸、天冬氨酸叔丁酯、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸。
34.在一种具体实施方式中，所述fmoc
‑
aa
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osu的制备方法包括：将fmoc
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aa
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oh、hosu与二氯甲烷混合后，加入多肽缩合试剂a反应生成fmoc
‑
aa
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osu；其中，所述的多肽缩合试剂a为dcc，dic中的至少一种。
35.在一种具体实施方式中，所述fmoc
‑
aa
‑
oh、hosu、多肽缩合试剂a的摩尔比为1:1.2～2:1.2。
36.在一种具体实施方式中，所述加入多肽缩合试剂a的温度为
‑
5～0℃，所述多肽缩合试剂a的加入速率为每秒4～6滴。
37.下面结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
38.本发明缩写含义：
39.表1本发明缩写含义
40.缩写含义fmoc
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aa
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ohn
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芴甲氧羰基
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氨基酸hosun
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羟基琥珀酰亚胺dccn,n'
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二环己基碳二亚胺dicn,n
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二异丙基碳二亚胺thf四氢呋喃can乙腈fmoc
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asp(otbu)
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ohn
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芴甲氧羰基
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天冬氨酸4
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叔丁酯fmoc
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leu
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ohn
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芴甲氧羰基
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亮氨酸
fmoc
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ala
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ohn
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芴甲氧羰基
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丙氨酸
41.实施例1
42.在反应瓶中加入205.5g fmoc
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asp(otbu)
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oh，69g hosu，1l二氯甲烷搅拌溶解，控制温度在0℃以下，搅拌下以每秒5滴的速率加入75.6g dic，室温反应过夜。反应结束后将混合体系过滤，滤液浓缩蒸除溶剂得到fmoc
‑
asp(otbu)
‑
osu备用。
43.将159g na2co3、107g nh4cl、1.5l水、500ml thf加入到5l三口瓶中，搅拌溶解。将上步所得fmoc
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asp(otbu)
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osu溶于1l thf中后以每秒5滴的速率加到上述体系中，ph控制在8～9，反应3.5h。反应结束后加入400ml乙酸乙酯萃取产品，乙酸乙酯相用400ml na2co3水溶液洗涤2次，400ml饱和盐水洗涤3次，用50g无水硫酸钠干燥2h后过滤，收集滤液加入400ml石油醚搅拌结晶4h，过滤便可得到fmoc
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asp(otbu)
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nh2。
44.产品纯度为99.92％，单个最大杂质为0.03％，收率为75.2％。
45.实施例2
46.在反应瓶中加入35.3g fmoc
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leu
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oh，13.8g hosu，200ml二氯甲烷搅拌溶解，控制温度在0℃以下，搅拌下以每秒5滴的速率加入15.1g dic，室温反应过夜。反应结束后将混合体系过滤，滤液浓缩蒸除溶剂得到fmoc
‑
leu
‑
osu备用。
47.将32g na2co3、26.4g(nh4)2so4、300ml水、100ml thf加入到1l三口瓶中，搅拌溶解。将上步所得fmoc
‑
leu
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osu溶于200ml thf中后以每秒5滴的速率加到上述体系中，ph控制在8～9，反应3.5h。反应结束后加入100ml乙酸乙酯萃取产品，乙酸乙酯相用100ml na2co3水溶液洗涤2次，100ml饱和盐水洗涤3次，用30g无水硫酸钠干燥2h后过滤，收集滤液加入100ml石油醚搅拌结晶4h，过滤便可得到fmoc
‑
leu
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nh2。
48.产品纯度为99.61％，单个最大杂质为0.13％，收率为83.1％。
49.实施例3
50.在反应瓶中加入62.1g fmoc
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ala
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oh，27.6g hosu，400ml二氯甲烷搅拌溶解，控制温度在0℃以下，搅拌下以每秒54
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6滴的速率加加入30.2g dic，室温反应过夜。反应结束后将混合体系过滤，滤液浓缩蒸除溶剂得到fmoc
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ala
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osu备用。
51.将64g na2co3、42.8g nh4cl、600ml水、200ml acn加入到3l三口瓶中，搅拌溶解。将上步所得fmoc
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leu
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osu溶于400ml acn中后以每秒5滴的速率加到上述体系中，ph控制在8～9，反应3.5h。反应结束后加入200ml乙酸乙酯萃取产品，乙酸乙酯相用200ml na2co3水溶液洗涤2次，200ml饱和盐水洗涤3次，用40g无水硫酸钠干燥2h后过滤，收集滤液加入200ml石油醚搅拌结晶4h，过滤便可得到fmoc
‑
ala
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nh2。
52.产品纯度为99.46％，单个最大杂质为0.16％，收率为79.6％。
53.对比例1
54.在反应瓶中加入20.6g fmoc
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asp(otbu)
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oh，6.9g hosu，100m l二氯甲烷搅拌溶解，控制温度在0℃以下，搅拌下以每秒5滴的速率加入7.6g dic，室温反应过夜。反应结束后将混合体系过滤，滤液浓缩蒸除溶剂得到fmoc
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asp(otbu)
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osu备用。
55.将12g naoh、10.7g nh4cl、1.5l水、500ml thf加入到5l三口瓶中，搅拌溶解。将上步所得fmoc
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asp(otbu)
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osu溶于1l thf中后以每秒5滴的速率加到上述体系中，ph大于10。反应结束后加入40ml乙酸乙酯萃取产品，乙酸乙酯相用40ml na2co3水溶液洗涤2次，40ml饱和盐水洗涤3次，用10g无水硫酸钠干燥2h后过滤，收集滤液加入40ml石油醚搅拌结晶4h，过
滤得到fmoc
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asp(otbu)
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nh2。产品纯度为83.56％，单个最大杂质为11.36％。