高纯度甜菊醇糖苷
1.序列表
2.创建于2018年4月10日、具有15千字节数据并与本文同时提交的标题为“pc_77wo_final_st25.txt”的文本文件据此全文以引用方式并入本技术中。
技术领域
3.本发明涉及一种用于制备包含甜菊醇糖苷的组合物(包括高度纯化的甜菊醇糖苷组合物)的方法。
背景技术：
4.高强度甜味剂的甜度水平比蔗糖的甜度水平高许多倍。它们基本上是无热量的，并且常常用于减肥产品和低卡路里产品(包括食物和饮料)中。高强度甜味剂不会引起血糖应答，从而使得它们适用于针对糖尿病患者以及有兴趣控制其碳水化合物摄入的其他人员的产品。
5.甜菊醇糖苷是一类存在于甜叶菊(stevia rebaudiana bertoni)叶中的化合物，甜叶菊是原产于南美洲某些区域的菊科(asteraceae，compositae)家族中的多年生灌木。它们的结构特征在于单一基体
‑
甜菊醇，其不同之处在于在位置c13和c19处存在碳水化合物残基。它们在甜叶菊(stevia)叶中积聚并占总干重的大约10％
‑
20％。以干重计，存在于甜叶菊叶中的四种主要糖苷通常包括蛇菊苷(9.1％)、莱苞迪苷a(3.8％)、莱苞迪苷c(0.6％
‑
1.0％)和杜尔可甙a(0.3％)。其他已知的甜菊醇糖苷包括：莱苞迪苷b、c、d、e、f和m；甜菊醇双糖苷；和甜茶苷。
6.虽然已知用于由甜叶菊制备甜菊醇糖苷的方法，但这些方法中的许多方法不适用于商业用途。
7.因此，仍然需要用于制备包含甜菊醇糖苷的组合物(包括高度纯化的甜菊醇糖苷组合物)的简单、有效且经济的方法。
技术实现要素：
8.如本文所用，缩写术语“reb”是指“莱苞迪苷”。这两个术语具有相同的含义并且可互换使用。
9.如本文所用，“生物催化”或“生物催化的”是指使用天然的或遗传改造的生物催化剂，诸如能够对有机化合物进行一步或多步化学转化的酶或包含一种或多种酶的细胞。生物催化过程包括发酵、生物合成、生物转换和生物转化过程。分离的酶和全细胞生物催化方法均是本领域已知的。生物催化剂蛋白酶可以是天然存在的或重组的蛋白。
10.如本文所用，术语“甜菊醇糖苷”是指甜菊醇的糖苷，包括但不限于天然存在的甜菊醇糖苷，例如甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱
苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s；合成的甜菊醇糖苷，例如酶促葡糖基化甜菊醇糖苷；以及它们的组合。
11.如本文所用，术语“svg7”是指任何天然存在的甜菊醇糖苷或任何合成的甜菊醇糖苷，包括酶促葡糖基化甜菊醇糖苷以及它们的组合，特别是包含具有共价连接的七个葡萄糖残基的甜菊醇的分子，包括但不限于reb 1a、reb 1b、reb 1c、reb 1d、reb 1e、reb 1f、reb 1g、reb 1h、reb 1i、reb 1j、reb 1k、reb 1l、reb 1m、reb 1n、reb 1o、reb 1p、reb 1q、reb 1r、reb 1s、reb 1t、reb 2a、reb 2b、reb 2c、reb 2d、reb 2e、reb 2f、reb 2g、reb 2h、reb 2i、reb 2j、reb 2k、reb 2l、reb 2m、reb 2n、reb 2o、reb 2p、reb 2q、reb 2r和/或reb 2s。svg7可指具有共价连接的七个葡萄糖残基的单个甜菊醇糖苷或具有共价连接的七个葡萄糖残基的甜菊醇糖苷的混合物。
12.本发明提供了一种用于制备包含目标甜菊醇糖苷的组合物的方法，该方法通过使包含有机底物的起始组合物与微生物细胞和/或酶制剂接触，从而产生包含目标甜菊醇糖苷的组合物。
13.起始组合物可以是包含至少一个碳原子的任何有机化合物。在一个实施方案中，起始组合物选自甜菊醇糖苷、多元醇或糖醇、各种碳水化合物。
14.目标甜菊醇糖苷可以是任何甜菊醇糖苷。在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s、svg7或合成的甜菊醇糖苷。
15.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1a。
16.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1b。
17.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1c。
18.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1d。
19.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1e。
20.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1f。
21.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1g。
22.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1h。
23.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1i。
24.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1j。
25.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1k。
26.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1l。
27.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1m。
28.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1n。
29.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1o。
30.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1p。
31.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1q。
32.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1r。
33.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1s。
34.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1t。
35.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2a。
36.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2b。
37.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2c。
38.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2d。
39.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2e。
40.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2f。
41.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2g。
42.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2h。
43.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2i。
44.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2j。
45.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2k。
46.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2l。
47.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2m。
48.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2n。
49.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2o。
50.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2p。
51.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2q。
52.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2r。
53.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2s。
54.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m4。
55.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m5。
56.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是svg7。
57.在一些优选的实施方案中，使用包含一种或多种酶的酶制剂或包含一种或多种酶的微生物细胞，该一种或多种酶能够将起始组合物转化成目标甜菊醇糖苷。酶可位于表面上和/或细胞内。酶制剂可以全细胞悬浮液、粗制裂解物或纯化酶的形式提供。酶制剂可为游离形式或固定至由无机或有机材料制成的固体载体。
58.在一些实施方案中，微生物细胞包含用于将起始组合物转化成目标甜菊醇糖苷所必需的酶及编码其的基因。因此，本发明还提供了一种用于制备包含目标甜菊醇糖苷的组合物的方法，该方法通过使包含有机底物的起始组合物与包含至少一种酶的微生物细胞接触，从而产生包含至少一种目标甜菊醇糖苷的培养基，该至少一种酶能够将起始组合物转化成目标甜菊醇糖苷。
59.将起始组合物转化成目标甜菊醇糖苷所必需的酶包括甜菊醇生物合成酶、ndp
‑
葡糖基转移酶(ngt)、adp
‑
葡糖基转移酶(agt)、cdp
‑
葡糖基转移酶(cgt)、gdp
‑
葡糖基转移酶(ggt)、tdp
‑
葡糖基转移酶(tdp)、udp
‑
葡糖基转移酶(ugt)和/或ndp
‑
再循环酶、adp
‑
再循环酶、cdp
‑
再循环酶、gdp
‑
再循环酶、tdp
‑
再循环酶和/或udp
‑
再循环酶。
60.在一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶包括甲羟戊酸(mva)途径酶。
61.在另一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶包括非甲羟戊酸2
‑
c
‑
甲基
‑
d
‑
赤藓醇
‑4‑
磷酸途径(mep/doxp)酶。
62.在一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶选自香叶基香叶基二磷酸合酶、柯巴基二磷酸合酶、贝壳杉烯合酶、贝壳杉烯氧化酶、贝壳杉烯酸13
‑
羟化酶(kah)、甜菊醇合成酶、脱氧木酮糖5
‑
磷酸合酶(dxs)、d
‑1‑
脱氧木酮糖5
‑
磷酸还原异构酶(dxr)、4
‑
二磷酸胞苷
‑2‑
c
‑
甲基
‑
d
‑
赤藓醇合酶(cms)、4
‑
二磷酸胞苷
‑2‑
c
‑
甲基
‑
d
‑
赤藓醇激酶(cmk)、4
‑
二磷酸胞苷
‑2‑
c
‑
甲基
‑
d
‑
赤藓醇2，4
‑
环二磷酸合酶(mcs)、1
‑
羟基
‑2‑
甲基
‑
2(e)
‑
丁烯基4
‑
二磷酸合酶(hds)、1
‑
羟基
‑2‑
甲基
‑
2(e)
‑
丁烯基4
‑
二磷酸还原酶(hdr)、乙酰乙酰
‑
coa硫解酶、截短的hmg
‑
coa还原酶、甲羟戊酸激酶、磷酸甲羟戊酸激酶、甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶、细胞色素p450还原酶等。
63.udp
‑
葡糖基转移酶可以是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇和/或甜菊醇糖苷底物以提供目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。
64.如下文所用，除非另外指明，否则术语“susy_at”是指具有如实施例1所述的氨基酸序列“seq id 1”的蔗糖合酶，或与seq id 1多肽具有基本的(＞85％、＞86％、＞87％、＞88％、＞89％、＞90％、＞91％、＞92％、＞93％、＞94％、＞95％、＞96％、＞97％、＞98％、＞99％)氨基酸序列同一性的多肽，以及编码那些多肽的分离的核酸分子。
65.如下文所用，除非另外指明，否则术语“ugts12”是指如实施例1所述具有氨基酸序列“seq id 2”的udp
‑
葡糖基转移酶，或与seq id 2多肽具有基本的(＞85％、＞86％、＞87％、＞88％、＞89％、＞90％、＞91％、＞92％、＞93％、＞94％、＞95％、＞96％、＞97％、＞98％、＞99％)氨基酸序列同一性的多肽，以及编码那些多肽的分离的核酸分子。
66.如下文所用，除非另外指明，否则术语“ugt76g1”是指如实施例1所述具有氨基酸序列“seq id 3”的udp
‑
葡糖基转移酶，或与seq id 3多肽具有基本的(＞85％、＞86％、＞87％、＞88％、＞89％、＞90％、＞91％、＞92％、＞93％、＞94％、＞95％、＞96％、＞97％、＞98％、＞99％)氨基酸序列同一性的多肽，以及编码那些多肽的分离的核酸分子。
67.在一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶和udp
‑
葡糖基转移酶在微生物细胞中产生。微生物细胞可为例如大肠杆菌、酵母属、曲霉菌属、毕赤酵母属、芽孢杆菌属、耶氏酵母属等。在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是合成的。
68.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶选自：与这些多肽具有基本的(＞85％、＞86％、＞87％、＞88％、＞89％、＞90％、＞91％、＞92％、＞93％、＞94％、＞95％、＞96％、＞
97％、＞98％、＞99％)氨基酸序列同一性的ugt74g1、ugt85c2、ugt76g1、ugt91d2、ugts12、eugt11和ugt，以及编码这些ugt的分离的核酸分子。
69.在一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶、ugt和udp
‑
葡萄糖再循环系统存在于一种微生物(微生物细胞)中。微生物可为例如大肠杆菌、酵母属、曲霉菌属、毕赤酵母属、芽孢杆菌属、耶氏酵母属。
70.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇或在c13处带有
‑
oh官能团的任何起始甜菊醇糖苷，以得到在c13处具有
‑
o
‑
葡萄糖β吡喃葡萄糖苷糖苷键的目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2，或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
71.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇或在c19处带有
‑
cooh官能团的任何起始甜菊醇糖苷，以得到在c19处具有
‑
coo
‑
葡萄糖β
‑
吡喃葡萄糖苷糖苷键的目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1，或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
72.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c19侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
2吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
73.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c19侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的键糖苷键处带有至少一个β1
→
3吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
74.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c19侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
4吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
75.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c19侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
6吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转
移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
76.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c13侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
2吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
77.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c13侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的键糖苷键处带有至少一个β1
→
3吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
78.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c13侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
4吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
79.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c13侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
6吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
80.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇以形成甜菊醇单糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
81.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇以形成甜菊醇单糖苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
82.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷以形成甜菊醇双糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，
udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
83.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷以形成甜菊醇双糖苷d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
84.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷以形成甜茶苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1，或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
85.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷a以形成甜茶苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
86.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷a以形成甜菊醇双糖苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
87.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷a以形成甜菊醇双糖苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
88.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷以形成莱苞迪苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
89.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷以形成蛇菊苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1，或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
90.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷d以形成莱苞迪苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
91.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷d以形成莱苞迪苷g的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
92.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜
茶苷以形成蛇菊苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
93.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜茶苷以形成莱苞迪苷g的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
94.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜茶苷以形成蛇菊苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
95.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜茶苷以形成蛇菊苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
96.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷a以形成蛇菊苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
97.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷a以形成蛇菊苷c的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
98.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷b以形成蛇菊苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
99.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷b以形成蛇菊苷c的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
100.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷b以形成莱苞迪苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
101.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷以形成莱苞迪苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转
移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
102.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷以形成莱苞迪苷e的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
103.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷以形成莱苞迪苷e2的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
104.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷g以形成莱苞迪苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
105.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷g以形成莱苞迪苷e4的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
106.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷g以形成莱苞迪苷e6的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
107.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷a以形成莱苞迪苷e的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
108.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷a以形成莱苞迪苷e4的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
109.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷a以形成莱苞迪苷e3的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
110.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷b以形成莱苞迪苷e2的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基
转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
111.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷b以形成莱苞迪苷e6的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
112.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷b以形成莱苞迪苷e3的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
113.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷c以形成莱苞迪苷e3的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
114.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷a以形成莱苞迪苷d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
115.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷a以形成莱苞迪苷i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
116.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e以形成莱苞迪苷d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
117.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e以形成莱苞迪苷am的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
118.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e2以形成莱苞迪苷i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
119.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e2以形成莱苞迪苷am的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
120.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e4以形成莱苞迪苷d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
121.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e4以形成莱苞迪苷d7的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
122.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e6以形成莱苞迪苷i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
123.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e6以形成莱苞迪苷d7的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
124.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e3以形成莱苞迪苷am的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
125.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e3以形成莱苞迪苷d7的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
126.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷d以形成莱苞迪苷m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
127.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷i以形成莱苞迪苷m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在
又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
128.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷am以形成莱苞迪苷m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
129.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷am以形成莱苞迪苷m4的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
130.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷am以形成莱苞迪苷m5的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
131.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷d7以形成莱苞迪苷m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
132.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
133.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
134.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1c的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸
序列同一性的ugt。
135.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
136.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1e的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
137.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1f的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
138.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1g的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
139.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1h的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
140.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
141.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1j的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
142.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1k的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖
基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
143.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1l的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
144.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
145.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1n的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
146.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1o的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
147.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1p的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
148.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1q的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1
具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
149.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1r的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
150.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1s的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
151.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1t的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
152.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
153.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
154.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2c的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
155.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡
糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
156.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2e的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
157.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2f的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
158.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2g的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
159.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2h的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
160.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
161.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2j的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt1 1，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
162.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2k的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
163.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2l的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡
糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
164.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
165.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2n的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
166.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2o的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
167.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2p的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
168.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2q的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
169.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2r的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡
糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
170.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2s的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
171.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷1q的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
172.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m5以形成莱苞迪苷1m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
173.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m5以形成莱苞迪苷2m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
174.任选地，本发明的方法还包括再循环udp以提供udp
‑
葡萄糖。在一个实施方案中，该方法包括通过提供再循环催化剂和再循环底物来再循环udp，使得使用催化量的udp
‑
葡糖基转移酶和udp
‑
葡萄糖进行甜菊醇和/或甜菊醇糖苷底物到目标甜菊醇糖苷的生物转化。
175.在一个实施方案中，再循环催化剂为蔗糖合酶susy_at或与susy_at具有＞85％的氨基酸序列同一性的蔗糖合酶。
176.在一个实施方案中，用于udp
‑
葡萄糖再循环催化剂的再循环底物为蔗糖。
177.任选地，本发明的方法还包括使用转糖苷酶，该转糖苷酶使用低聚糖或多糖作为糖供体来修饰受体目标甜菊醇糖苷分子。非限制性示例包括环糊精糖基转移酶(cgtase)、呋喃果糖苷酶、淀粉酶、转化酶、葡糖蔗糖酶、β
‑
h
‑
果糖苷酶、β
‑
果糖苷酶、蔗糖酶、果糖基转化酶、碱性转化酶、酸性转化酶、呋喃果糖苷酶。在一些实施方案中，将葡萄糖和除葡萄糖之外的糖(包括但不限于果糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖、脱氧葡萄糖、半乳糖)转移至受体目标甜菊醇糖苷。在一个实施方案中，受体甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r和/或莱苞迪苷2s。在另一个实施方案中，受体甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m4。在另一个实施方案中，受体甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m5。在另一个实施方案中，受体甜菊醇糖苷是svg7。
178.任选地，本发明的方法还包括将目标甜菊醇糖苷与培养基分离以提供高度纯化的目标甜菊醇糖苷组合物。目标甜菊醇糖苷可通过至少一种合适的方法分离，诸如例如结晶、通过膜分离、离心、提取、色谱分离或此类方法的组合。
179.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷可在微生物内产生。在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷可在培养基中分泌出来。在另一个实施方案中，可从培养基中连续去除所释放的甜菊醇糖苷。在又一个实施方案中，在转化反应完成后分离目标甜菊醇糖苷。
180.在一个实施方案中，分离产生包含基于无水重量计大于约80重量％的目标甜菊醇糖苷的组合物，即，高度纯化的甜菊醇糖苷组合物。在另一个实施方案中，分离产生包含大于约90重量％的目标甜菊醇糖苷的组合物。在具体实施方案中，该组合物包含大于约95重量％的目标甜菊醇糖苷。在其他实施方案中，该组合物包含大于约99重量％的目标甜菊醇糖苷。
181.目标甜菊醇糖苷可为任何多晶形或无定形形式，包括水合物、溶剂化物、无水形式或它们的组合。
182.纯化的目标甜菊醇糖苷可作为甜味剂、风味调节剂、具有改性特性的风味剂和/或抑泡剂用于消费类产品中。合适的消费产品包括但不限于食物、饮料、药物组合物、烟草产品、营养组合物、口腔卫生组合物和化妆品组合物。
附图说明
183.图1a至图1t分别示出了一些svg7甜菊醇糖苷莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s和莱苞迪苷1t的化学结构。
184.图2a至图2s分别示出了一些svg7甜菊醇糖苷莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷
2q、莱苞迪苷2r和莱苞迪苷2s的化学结构。
185.图3a至图3b分别示出了莱苞迪苷m4和莱苞迪苷m5的化学结构。
186.图4a至图4t示出了产生莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s和莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r和莱苞迪苷2s、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5以及来自甜菊醇的各种甜菊醇糖苷和各种中间甜菊醇糖苷的途径。
187.图5a至图5t示出了使用酶ugts12和ugt76g1由莱苞迪苷a分别生物催化产生莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m和莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s和莱苞迪苷1t，同时经由蔗糖合酶susy_at将udp再循环成udp
‑
葡萄糖。
188.图6a至图6t示出了使用酶ugts12和ugt76g1由蛇菊苷分别生物催化产生莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和莱苞迪苷1q，同时经由蔗糖合酶susy_at将udp再循环成udp
‑
葡萄糖。
189.图7a至图7b示出了使用酶ugts12和ugt76g1由蛇菊苷分别生物催化产生莱苞迪苷m4和莱苞迪苷m5，同时经由蔗糖合酶susy_at将udp再循环成udp
‑
葡萄糖。
190.图8a至图8t示出了使用酶ugts12和ugt76g1由莱苞迪苷am分别生物催化产生莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和莱苞迪苷1q，同时经由蔗糖合酶susy_at将udp再循环成udp
‑
葡萄糖。
191.图9a至图9b示出了使用酶ugts12和ugt76g1由莱苞迪苷am分别生物催化产生莱苞迪苷m4和莱苞迪苷m5，同时经由蔗糖合酶susy_at将udp再循环成udp
‑
葡萄糖。
192.图10a至图10t示出了使用酶ugts12和ugt76g1由莱苞迪苷m4分别生物催化产生莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和莱苞迪苷1q，同时经由蔗糖合酶susy_at将udp再循环成udp
‑
葡萄糖。
193.图11a至图11b示出了使用酶ugts12和ugt76g1由莱苞迪苷m5分别生物催化产生莱苞迪苷1m和莱苞迪苷2m，同时经由蔗糖合酶susy_at将udp再循环成udp
‑
葡萄糖。
194.图12a示出了蛇菊苷的hplc色谱图。保留时间为20.958分钟的峰对应于蛇菊苷。保留时间为20.725分钟的峰对应于莱苞迪苷a。32.925分钟处的峰对应于莱苞迪苷b。33.930分钟处的峰对应于甜菊醇双糖苷。
195.图12b示出了由蛇菊苷生物催化产生svg7分子的产物的hplc色谱图。5.089分钟处的峰对应于莱苞迪苷2m。5.350分钟处的峰对应于莱苞迪苷m5。6.459分钟处的峰对应于莱苞迪苷2a。9.825分钟处的峰对应于莱苞迪苷am。13.845分钟处的峰对应于莱苞迪苷m。32.974分钟处的峰对应于莱苞迪苷b。33.979分钟处的峰对应于甜菊醇双糖苷。
196.图12c示出了通过hplc纯化后莱苞迪苷2a的hplc色谱图。保留时间为6.261分钟的峰对应于莱苞迪苷2a。
197.图12d示出了通过hplc纯化后莱苞迪苷2m的hplc色谱图。保留时间为5.197分钟的峰对应于莱苞迪苷2m。
198.图12e示出了通过hplc纯化后莱苞迪苷m5的hplc色谱图。保留时间为5.242分钟的峰对应于莱苞迪苷m5。
199.图13a示出了莱苞迪苷2a的1h nmr光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
200.图13b示出了莱苞迪苷2a的hsqc光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
201.图13c示出了莱苞迪苷2a的h，h cosy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
202.图13d示出了莱苞迪苷2a的hmbc光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
203.图13e示出了莱苞迪苷2a的hsqc
‑
tocsy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
204.图13f示出了莱苞迪苷2a的1d
‑
noesy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
205.图13g示出了莱苞迪苷2a的lc色谱图。
206.图13h示出了莱苞迪苷2a的质谱。
207.图14a示出了莱苞迪苷2m的1h nmr光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
208.图14b示出了莱苞迪苷2m的hsqc光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
209.图14c示出了莱苞迪苷2m的h，h cosy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
210.图14d示出了莱苞迪苷2m的hmbc光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
211.图14e示出了莱苞迪苷2m的hsqc
‑
tocsy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
212.图14f示出了莱苞迪苷2m的1d
‑
noesy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
213.图14g示出了莱苞迪苷2m的lc色谱图。
214.图14h示出了莱苞迪苷2m的质谱。
215.图15a示出了莱苞迪苷m5的1h nmr光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
216.图15b示出了莱苞迪苷m5的hsqc光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
217.图15c示出了莱苞迪苷m5的h，h cosy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
218.图15d示出了莱苞迪苷m5的hmbc光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
219.图15e示出了莱苞迪苷m5的hsqc
‑
tocsy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
220.图15f示出了莱苞迪苷m5的1d
‑
noesy光谱(500mhz，吡啶
‑
d5)。
221.图15g示出了莱苞迪苷m5的lc色谱图。
222.图15h示出了莱苞迪苷m5的质谱。
具体实施方式
223.本发明提供了一种用于制备包含目标甜菊醇糖苷的组合物的方法，该方法通过使包含有机底物的起始组合物与微生物细胞和/或酶制剂接触，从而产生包含目标甜菊醇糖苷的组合物。
224.本发明的一个目的是提供由各种起始组合物制备目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7、或合成的甜菊醇糖苷的有效生物催化方法。
225.起始组合物
226.如本文所用，“起始组合物”是指含有一种或多种包含至少一个碳原子的有机化合物的任何组合物(通常为水溶液)。
227.在一个实施方案中，起始组合物选自甜菊醇、甜菊醇糖苷、多元醇和各种碳水化合物。
228.起始组合物甜菊醇糖苷选自甜菊醇、甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4和/或莱苞迪苷m5、或存在于甜叶菊植物中的甜菊醇的其他糖苷；合成的甜菊醇糖苷，例如酶促葡糖基化甜菊醇糖苷；以及它们的组合。
229.在一个实施方案中，起始组合物是甜菊醇。
230.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是甜菊醇单糖苷。
231.在又一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是甜菊醇单糖苷a。
232.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是甜菊醇双糖苷。
233.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是甜菊醇双糖苷d。
234.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是甜茶苷。
235.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是甜菊醇双糖苷a。
236.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是甜菊醇双糖苷b。
237.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷b。
238.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是蛇菊苷。
239.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷g。
240.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是蛇菊苷a。
241.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是蛇菊苷b。
242.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是蛇菊苷c。
243.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷a。
244.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e。
245.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e2。
246.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e4。
247.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e6。
248.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e3。
249.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷d。
250.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷i。
251.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷am。
252.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷d7。
253.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m。
254.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m4。
255.在另一个实施方案中，起始组合物甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m5。
256.术语“多元醇”是指含有多于一个羟基基团的分子。多元醇可以是分别含有2个、3个和4个羟基基团的二醇、三醇或四醇。多元醇还可含有多于四个羟基基团，诸如五醇、六醇、七醇等，其分别包含5个、6个或7个羟基基团。此外，多元醇也可为糖醇、多元醇、或为碳水化合物的还原形式的多元醇，其中羰基基团(醛或酮、还原糖)已被还原为伯羟基基团或仲羟基基团。多元醇的示例包括但不限于赤藓醇、麦芽糖醇、甘露糖醇、山梨醇、乳糖醇、木糖醇、肌醇、异麦芽酮糖醇、丙二醇、甘油、苏糖醇、半乳糖醇、氢化异麦芽酮糖、还原型低聚异麦芽糖、还原型低聚木糖、还原型低聚龙胆糖、还原型麦芽糖糖浆、还原型葡萄糖糖浆、氢化淀粉水解物、聚葡糖醇和糖醇、或能够被还原的任何其他碳水化合物。
257.术语“碳水化合物”是指通式(ch2o
)
n的被多个羟基基团取代的醛或酮化合物(其中n为3
‑
30)，以及它们的低聚物和聚合物。此外，本发明的碳水化合物可在一个或多个位置处被取代或脱氧。如本文所用，碳水化合物涵盖未改性的碳水化合物、碳水化合物衍生物、取代的碳水化合物和改性的碳水化合物。如本文所用，短语“碳水化合物衍生物”、“取代的碳水化合物”和“改性的碳水化合物”是同义的。改性的碳水化合物意指其中至少一个原子已被添加、移除、或取代、或它们的组合的任何碳水化合物。因此，碳水化合物衍生物或取代的碳水化合物包括取代和未取代的单糖、二糖、低聚糖和多糖。碳水化合物衍生物或取代的碳水化合物任选地可在任何对应的c位置处脱氧，并且/或者被一个或多个部分取代，该一个或多个部分诸如氢、卤素、卤代烷基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺基、巯基、亚氨基、磺酰基、次磺酰基、亚磺酰基、氨磺酰基、烷氧羰基、羧酰氨基、膦酰基、氧膦基、磷酰基、膦基、硫酯、硫醚、肟基、肼基、氨甲酰基、磷基、膦酸基或任何其他可行的官能团，前提条件是碳水化合物衍生物或取代的碳水化合物用于改善甜味剂组合物的甜味。
258.可根据本发明使用的碳水化合物的示例包括但不限于塔格糖、海藻糖、半乳糖、鼠李糖、各种环糊精、环状低聚糖、各种类型的麦芽糖糊精、葡聚糖、蔗糖、葡萄糖、核酮糖、果糖、苏阿糖、阿拉伯糖、木糖、来苏糖、阿洛糖、阿卓糖、甘露糖、艾杜糖、乳糖、麦芽糖、转化糖、异海藻糖、新海藻糖、异麦芽酮糖、赤藓糖、脱氧核糖、古洛糖、艾杜糖、塔罗糖、赤藓酮糖、木酮糖、阿洛酮糖、松二糖、纤维二糖、支链淀粉、葡糖胺、甘露糖胺、岩藻糖、葡糖醛酸、葡糖酸、葡糖酸
‑
内酯、阿比可糖、半乳糖胺、甜莱低聚糖、低聚异麦芽糖(异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖等)、低聚木糖(木三糖、木二糖等)、木糖封端的低聚糖、低聚龙胆糖(龙胆二糖、龙胆三糖、龙胆四糖等)、山梨糖、黑曲霉低聚糖、帕拉金糖低聚糖、低聚果糖(蔗果三糖、蔗
果四糖等)、麦芽四醇、麦芽三醇、麦芽低聚糖(麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖、麦芽六糖、麦芽七糖等)、淀粉、菊粉、菊粉低聚糖、乳果糖、蜜二糖、棉子糖、核糖、异构化液体糖诸如高果糖玉米糖浆、偶联糖和大豆低聚糖。另外，如本文所用的碳水化合物可为d
‑
构型或l
‑
构型。
259.起始组合物可以是合成的或纯化的(部分地或完全地)、可商购获得的或制备的。
260.在一个实施方案中，起始组合物是甘油。
261.在另一个实施方案中，起始组合物是葡萄糖。
262.在另一个实施方案中，起始组合物是鼠李糖。
263.在又一个实施方案中，起始组合物是蔗糖。
264.在又一个实施方案中，起始组合物是淀粉。
265.在另一个实施方案中，起始组合物是麦芽糖糊精。
266.在又一个实施方案中，起始组合物是纤维素。
267.在又一个实施方案中，起始组合物是直链淀粉。
268.起始组合物的有机化合物充当用于产生目标甜菊醇糖苷的底物，如本文所述。
269.目标甜菊醇糖苷
270.本发明方法的目标甜菊醇糖苷可以是可通过本文所公开的方法制备的任何甜菊醇糖苷。在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷选自甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s、svg7、或存在于甜叶菊植物中的甜菊醇的其他糖苷；合成的甜菊醇糖苷，例如酶促葡糖基化甜菊醇糖苷；以及它们的组合。
271.在一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是甜菊醇单糖苷。
272.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是甜菊醇单糖苷a。
273.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是甜菊醇双糖苷。
274.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是甜菊醇双糖苷d。
275.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是甜茶苷。
276.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是甜菊醇双糖苷a。
277.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是甜菊醇双糖苷b。
278.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷b。
279.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是蛇菊苷。
280.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷g。
281.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是蛇菊苷a。
282.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是蛇菊苷b。
283.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是蛇菊苷c。
284.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷a。
285.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e。
286.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e2。
287.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e4。
288.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e6。
289.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷e3。
290.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷d。
291.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷i。
292.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷am。
293.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷d7。
294.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m。
295.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m4。
296.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m5。
297.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1a。
298.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1b。
299.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1c。
300.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1d。
301.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1e。
302.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1f。
303.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1g。
304.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1h。
305.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1i。
306.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1j。
307.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1k。
308.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1l。
309.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1m。
310.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1n。
311.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1o。
312.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1p。
313.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1q。
314.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1r。
315.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1s。
316.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1t。
317.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2a。
318.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2b。
319.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2c。
320.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2d。
321.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2e。
322.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2f。
323.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2g。
324.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2h。
325.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2i。
326.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2j。
327.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2k。
328.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2l。
329.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2m。
330.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2n。
331.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2o。
332.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2p。
333.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2q。
334.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2r。
335.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2s。
336.在另一个实施方案中，目标甜菊醇糖苷是svg7。
337.目标甜菊醇糖苷可为任何多晶形或无定形形式，包括水合物、溶剂化物、无水形式或它们的组合。
338.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生甜菊醇单糖苷的生物催化方法。
339.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生甜菊醇单糖苷a的生物催化方法。
340.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生甜菊醇双糖苷的生物催化方法。
341.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生甜菊醇双糖苷d的生物催化方法。
342.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生甜茶苷的生物催化方法。
343.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生甜菊醇双糖苷a的生物催化方法。
344.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生甜菊醇双糖苷b的生物催化方法。
345.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷b的生物催化方法。
346.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生蛇菊苷的生物催化方法。
347.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷g的生物催化方法。
348.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生蛇菊苷a的生物催化方法。
349.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生蛇菊苷b的生物催化方法。
350.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生蛇菊苷c的生物催化方法。
351.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷a的生物催化方法。
352.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷e的生物催化方法。
353.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷e2的生物催化方法。
354.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷e4的生物催化方法。
355.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷e6的生物催化方法。
356.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷e3的生物催化方法。
357.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷d的生物催化方法。
358.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷i的生物催化方法。
359.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷am的生物催化方法。
360.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷d7的生物催化方法。
361.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷e3的生物催化方法。
362.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷m的生物催化方法。
363.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷m4的生物催化方法。
364.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷m5的生物催化方法。
365.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1a的生物催化方法。
366.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1b的生物催化方法。
367.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1c的生物催化方法。
368.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1d的生物催化方法。
369.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1e的生物催化方法。
370.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1f的生物催化方法。
371.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1g的生物催化方法。
372.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1h的生物催化方法。
373.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1i的生物催化方法。
374.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1j的生物催化方法。
375.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1k的生物催化方法。
376.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1l的生物催化方法。
377.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1m的生物催化方法。
378.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1n的生物催化方法。
379.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1o的生物催化方法。
380.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1p的生物催化方法。
381.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1q的生物催化方法。
382.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1r的生物催化方法。
383.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1s的生物催化方法。
384.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷1t的生物催化方法。
385.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2a的生物催化方法。
386.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2b的生物催化方法。
387.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2c的生物催化方法。
388.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2d的生物催化方法。
389.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2e的生物催化方法。
390.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2f的生物催化方法。
391.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2g的生物催化方法。
392.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2h的生物催化方法。
393.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2i的生物催化方法。
394.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2j的生物催化方法。
395.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2k的生物催化方法。
396.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2l的生物催化方法。
397.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2m的生物催化方法。
398.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2n的生物催化方法。
399.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2o的生物催化方法。
400.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2p的生物催化方法。
401.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷２q的生物催化方法。
402.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2r的生物催化方法。
403.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生莱苞迪苷2s的生物催化方法。
404.在一个实施方案中，本发明为一种用于产生svg7的生物催化方法。
405.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1a的生物催化方法。
406.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1b的生物催化方法。
407.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1c的生物催化方法。
408.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1d的生物催化方法。
409.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1e的生物催化方法。
410.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1f的生物催化方法。
411.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1g的生物催化方法。
412.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1h的生物催化方法。
413.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1i的生物催化方法。
414.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1j的生物催化方法。
415.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1k的生物催化方法。
416.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1l的生物催化方法。
417.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1m的生物催化方法。
418.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1n的生物催化方法。
419.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1o的生物催化方法。
420.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1p的生物催化方法。
421.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组
合物产生莱苞迪苷1q的生物催化方法。
422.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1r的生物催化方法。
423.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1s的生物催化方法。
424.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1t的生物催化方法。
425.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2a的生物催化方法。
426.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2b的生物催化方法。
427.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2c的生物催化方法。
428.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2d的生物催化方法。
429.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2e的生物催化方法。
430.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2f的生物催化方法。
431.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2g的生物催化方法。
432.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2h的生物催化方法。
433.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2i的生物催化方法。
434.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2j的生物催化方法。
435.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2k的生物催化方法。
436.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2l的生物催化方法。
437.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2m的生物催化方法。
438.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2n的生物催化方法。
439.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2o的生物催化方法。
440.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2p的生物催化方法。
441.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2q的生物催化方法。
442.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2r的生物催化方法。
443.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2s的生物催化方法。
444.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1q的生物催化方法。
445.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷m4的生物催化方法。
446.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷m5的生物催化方法。
447.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2a的生物催化方法。
448.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2b的生物催化方法。
449.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2c的生物催化方法。
450.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2d的生物催化方法。
451.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2e的生物催化方法。
452.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2f的生物催化方法。
453.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2g的生物催化方法。
454.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2h的生物催化方法。
455.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2i的生物催化方法。
456.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2j的生物催化方法。
457.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2k的生物催化方法。
458.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2l的生物催化方法。
459.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2m的生物催化方法。
460.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组
合物产生莱苞迪苷2n的生物催化方法。
461.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2o的生物催化方法。
462.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2p的生物催化方法。
463.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2q的生物催化方法。
464.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2r的生物催化方法。
465.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2s的生物催化方法。
466.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1q的生物催化方法。
467.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷m4的生物催化方法。
468.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷m5的生物催化方法。
469.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2a的生物催化方法。
470.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2b的生物催化方法。
471.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2c的生物催化方法。
472.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2d的生物催化方法。
473.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2e的生物催化方法。
474.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2f的生物催化方法。
475.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2g的生物催化方法。
476.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2h的生物催化方法。
477.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2i的生物催化方法。
478.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2j的生物催化方法。
479.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2k的生物催化方法。
480.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2l的生物催化方法。
481.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2m的生物催化方法。
482.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2n的生物催化方法。
483.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2o的生物催化方法。
484.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2p的生物催化方法。
485.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2q的生物催化方法。
486.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2r的生物催化方法。
487.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2s的生物催化方法。
488.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1q的生物催化方法。
489.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m5和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1m的生物催化方法。
490.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m5和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷2m的生物催化方法。
491.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1a的生物催化方法。
492.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1b的生物催化方法。
493.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1c的生物催化方法。
494.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1d的生物催化方法。
495.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1e的生物催化方法。
496.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1f的生物催化方法。
497.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1g的生物催化方法。
498.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1h的生物催化方法。
499.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组
合物产生莱苞迪苷1i的生物催化方法。
500.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1j的生物催化方法。
501.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1k的生物催化方法。
502.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1l的生物催化方法。
503.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1m的生物催化方法。
504.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1n的生物催化方法。
505.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1o的生物催化方法。
506.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1p的生物催化方法。
507.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1q的生物催化方法。
508.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1r的生物催化方法。
509.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1s的生物催化方法。
510.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生莱苞迪苷1t的生物催化方法。
511.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生svg7的生物催化方法。
512.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生svg7的生物催化方法。
513.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含蛇菊苷、莱苞迪苷a和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生svg7的生物催化方法。
514.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷am和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生svg7的生物催化方法。
515.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生svg7的生物催化方法。
516.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m4和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生svg7的生物催化方法。
517.在一个具体实施方案中，本发明提供了由包含莱苞迪苷m5和udp
‑
葡萄糖的起始组合物产生svg7的生物催化方法。
518.任选地，本发明的方法还包括将目标甜菊醇糖苷与培养基分离以提供高度纯化的目标甜菊醇糖苷组合物。目标甜菊醇糖苷可通过任何合适的方法分离，诸如例如结晶、通过
膜分离、离心、提取、色谱分离或此类方法的组合。
519.在具体实施方案中，本文所述的方法得到高度纯化的目标甜菊醇糖苷组合物。如本文所用，术语“高度纯化的”是指具有基于无水重量(干重)计大于约80重量％的目标甜菊醇糖苷的组合物。在一个实施方案中，高度纯化的目标甜菊醇糖苷组合物含有基于无水重量(干重)计大于约90重量％的目标甜菊醇糖苷，诸如例如基于干重计大于约91％、大于约92％、大于约93％、大于约94％、大于约95％、大于约96％、大于约97％、大于约98％或大于约99％的目标甜菊醇糖苷含量。
520.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m4时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷m4含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m4时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
521.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m5时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷m5含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m5时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
522.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1a时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1a含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1a时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
523.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1b时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1b含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1b时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
524.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1c时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1c含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1c时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
525.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1d时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1d含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1d时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
526.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1e时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1e含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1e时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
527.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1f时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1f含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1f时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
528.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1g时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1g含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1g时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
529.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1h时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1h含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1h时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
530.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1i时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1i含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1i时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
531.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1j时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1j含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1j时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
532.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1k时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1k含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1k时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
533.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1l时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1l含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1l时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
534.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1m时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1m含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1m时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
535.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1n时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1n含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1n时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
536.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1o时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1o含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1o时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
537.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1p时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1p含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1p时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于
约95重量％含量的组合物。
538.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1q时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1q含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1q时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
539.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1r时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1r含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1r时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
540.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1s时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1s含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1s时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
541.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1t时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷1t含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1t时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
542.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2a时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2a含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2a时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
543.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2b时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2b含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2b时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
544.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2c时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2c含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2c时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
545.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2d时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2d含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2d时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
546.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2e时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2e含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2e时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
547.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2f时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2f含量的组合物。在另一个具体实施方案
中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2f时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
548.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2g时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2g含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2g时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
549.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2h时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2h含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2h时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
550.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2i时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2i含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2i时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
551.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2j时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2j含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2j时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
552.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2k时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2k含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2k时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
553.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2l时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2l含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2l时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
554.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2m时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2m含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2m时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
555.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2n时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2n含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2n时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
556.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2o时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2o含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2o时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
557.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2p时，本文所述的方法提供了
一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2p含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2p时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
558.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2q时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2q含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2q时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
559.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2r时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2r含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2r时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
560.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2s时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％莱苞迪苷2s含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是莱苞迪苷2s时，本文所述的方法提供了一种包含基于干重计大于约95重量％含量的组合物。
561.在一个实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是svg7时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约90重量％svg7含量的组合物。在另一个具体实施方案中，当目标甜菊醇糖苷是svg7时，本文所述的方法提供了一种具有基于干重计大于约95重量％svg7含量的组合物。
562.微生物和酶制剂
563.在本发明的一个实施方案中，使微生物(微生物细胞)和/或酶制剂与含有起始组合物的培养基接触以产生目标甜菊醇糖苷。
564.酶可以全细胞悬浮液、粗制裂解物、纯化酶或它们的组合的形式提供。在一个实施方案中，生物催化剂是能够将起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷的纯化酶。在另一个实施方案中，生物催化剂是包含能够将起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷的至少一种酶的粗制裂解物。在又一个实施方案中，生物催化剂是包含能够将起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷的至少一种酶的全细胞悬浮液。
565.在另一个实施方案中，生物催化剂是包含能够将起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷的酶的一种或多种微生物细胞。该酶可位于细胞表面上、细胞内部，或位于细胞表面上且在细胞内部。
566.用于将起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷的合适酶包括但不限于甜菊醇生物合成酶、ndp
‑
葡糖基转移酶(ngt)、adp
‑
葡糖基转移酶(agt)、cdp
‑
葡糖基转移酶(cgt)、gdp
‑
葡糖基转移酶(ggt)、tdp
‑
葡糖基转移酶(tdp)、udp
‑
葡糖基转移酶(ugt)。任选地，它可包括ndp
‑
再循环酶、adp
‑
再循环酶、cdp
‑
再循环酶、gdp
‑
再循环酶、tdp
‑
再循环酶和/或udp
‑
再循环酶。
567.在一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶包括甲羟戊酸(mva)途径酶。
568.在另一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶包括非甲羟戊酸2
‑
c
‑
甲基
‑
d
‑
赤藓醇
‑4‑
磷酸途径(mep/doxp)酶。
569.在一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶选自香叶基香叶基二磷酸合酶、柯巴基二
磷酸合酶、贝壳杉烯合酶、贝壳杉烯氧化酶、贝壳杉烯酸13
‑
羟化酶(kah)、甜菊醇合成酶、脱氧木酮糖5
‑
磷酸合酶(dxs)、d
‑1‑
脱氧木酮糖5
‑
磷酸还原异构酶(dxr)、4
‑
二磷酸胞苷
‑2‑
c
‑
甲基
‑
d
‑
赤藓醇合酶(cms)、4
‑
二磷酸胞苷
‑2‑
c
‑
甲基
‑
d
‑
赤藓醇激酶(cmk)、4
‑
二磷酸胞苷
‑2‑
c
‑
甲基
‑
d
‑
赤藓醇2，4
‑
环二磷酸合酶(mcs)、1
‑
羟基
‑2‑
甲基
‑
2(e)
‑
丁烯基4
‑
二磷酸合酶(hds)、1
‑
羟基
‑2‑
甲基
‑
2(e)
‑
丁烯基4
‑
二磷酸还原酶(hdr)、乙酰乙酰
‑
coa硫解酶、截短的hmg
‑
coa还原酶、甲羟戊酸激酶、磷酸甲羟戊酸激酶、甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶、细胞色素p450还原酶等。
570.udp
‑
葡糖基转移酶可以是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇和/或甜菊醇糖苷底物以提供目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。
571.在一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶和udp
‑
葡糖基转移酶在微生物细胞中产生。微生物细胞可为例如大肠杆菌、酵母属、曲霉菌属、毕赤酵母属、芽孢杆菌属、耶氏酵母属等。在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是合成的。
572.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶选自：与这些多肽具有基本的(＞85％、＞86％、＞87％、＞88％、＞89％、＞90％、＞91％、＞92％、＞93％、＞94％、＞95％、＞96％、＞97％、＞98％、＞99％)氨基酸序列同一性的ugt74g1、ugt85c2、ugt76g1、ugt91d2、ugts12、eugt11和ugt，以及编码这些ugt的分离的核酸分子。
573.在一个实施方案中，甜菊醇生物合成酶、ugt和udp
‑
葡萄糖再循环系统存在于一种微生物(微生物细胞)中。微生物可为例如大肠杆菌、酵母属、曲霉菌属、毕赤酵母属、芽孢杆菌属、耶氏酵母属。
574.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇或在c13处带有
‑
oh官能团的任何起始甜菊醇糖苷，以得到在c13处具有
‑
o
‑
葡萄糖β吡喃葡萄糖苷糖苷键的目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2，或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
575.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇或在c19处带有
‑
cooh官能团的任何起始甜菊醇糖苷，以得到在c19处具有
‑
coo
‑
葡萄糖β
‑
吡喃葡萄糖苷糖苷键的目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1，或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
576.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c19侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
2吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
577.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c19侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的键糖苷键处带有至少一个β1
→
3吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
578.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c19侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
4吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
579.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c19侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
6吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
580.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c13侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
2吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
581.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c13侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的键糖苷键处带有至少一个β1
→
3吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
582.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c13侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
4吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
583.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到任何起始甜菊醇糖苷的c13侧上的任何现有葡萄糖，以得到目标甜菊醇糖苷的任何udp
‑
葡糖
基转移酶，该目标甜菊醇糖苷具有在新形成的糖苷键处带有至少一个β1
→
6吡喃葡萄糖苷糖苷键的至少一个附加葡萄糖。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
584.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇以形成甜菊醇单糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
585.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇以形成甜菊醇单糖苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
586.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷以形成甜菊醇双糖苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
587.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷以形成甜菊醇双糖苷d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
588.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷以形成甜茶苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1，或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
589.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷a以形成甜茶苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
590.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷a以形成甜菊醇双糖苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
591.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇单糖苷a以形成甜菊醇双糖苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
592.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷以形成莱苞迪苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡
糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
593.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷以形成蛇菊苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1，或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
594.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷d以形成莱苞迪苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
595.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷d以形成莱苞迪苷g的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
596.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜茶苷以形成蛇菊苷的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
597.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜茶苷以形成莱苞迪苷g的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
598.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜茶苷以形成蛇菊苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
599.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜茶苷以形成蛇菊苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
600.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷a以形成蛇菊苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
601.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷a以形成蛇菊苷c的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
602.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊
醇双糖苷b以形成蛇菊苷b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
603.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷b以形成蛇菊苷c的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
604.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷b以形成莱苞迪苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt74g1或与ugt74g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
605.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷以形成莱苞迪苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
606.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷以形成莱苞迪苷e的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
607.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷以形成莱苞迪苷e2的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
608.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷g以形成莱苞迪苷a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
609.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷g以形成莱苞迪苷e4的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
610.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷g以形成莱苞迪苷e6的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
611.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷a以形成莱苞迪苷e的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
612.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷a以形成莱苞迪苷e4的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
613.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷a以形成莱苞迪苷e3的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
614.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷b以形成莱苞迪苷e2的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
615.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷b以形成莱苞迪苷e6的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
616.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到蛇菊苷b以形成莱苞迪苷e3的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
617.在一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到甜菊醇双糖苷c以形成莱苞迪苷e3的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt85c2或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt或与ugt85c2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
618.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷a以形成莱苞迪苷d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
619.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷a以形成莱苞迪苷i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖
基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
620.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e以形成莱苞迪苷d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
621.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e以形成莱苞迪苷am的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
622.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e2以形成莱苞迪苷i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
623.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e2以形成莱苞迪苷am的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
624.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e4以形成莱苞迪苷d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
625.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e4以形成莱苞迪苷d7的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
626.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e6以形成莱苞迪苷i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
627.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e6以形成莱苞迪苷d7的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
628.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e3以形成莱苞迪苷am的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡
糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
629.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷e3以形成莱苞迪苷d7的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
630.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷d以形成莱苞迪苷m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
631.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷i以形成莱苞迪苷m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
632.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷am以形成莱苞迪苷m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
633.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷am以形成莱苞迪苷m4的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
634.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷am以形成莱苞迪苷m5的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
635.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷d7以形成莱苞迪苷m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
636.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
637.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
638.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1c的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
639.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
640.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1e的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
641.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1f的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
642.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1g的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
643.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1h的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
644.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
645.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1j的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
646.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1k的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
647.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1l的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
648.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
649.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1n的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
650.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1o的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1
具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
651.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1p的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
652.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1q的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
653.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1r的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
654.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1s的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
655.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m以形成莱苞迪苷1t的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
656.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2a的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实
施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
657.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2b的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
658.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2c的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
659.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2d的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
660.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2e的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
661.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2f的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
662.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2g的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
663.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2h的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
664.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2i的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实
施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
665.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2j的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
666.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2k的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
667.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2l的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
668.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
669.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2n的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
670.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2o的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
671.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2p的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡
糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
672.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2q的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
673.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2r的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
674.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷2s的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
675.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m4以形成莱苞迪苷1q的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
676.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m5以形成莱苞迪苷1m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与
ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
677.在另一个实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是能够将至少一个葡萄糖单元添加到莱苞迪苷m5以形成莱苞迪苷2m的任何udp
‑
葡糖基转移酶。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugts12，或与ugts12具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在另一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是eugt11，或与eugt11具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在又一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt91d2，或与ugt91d2具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。在一个具体的实施方案中，udp
‑
葡糖基转移酶是ugt76g1，或与ugt76g1具有＞85％氨基酸序列同一性的ugt。
678.任选地，本发明的方法还包括再循环udp以提供udp
‑
葡萄糖。在一个实施方案中，该方法包括通过提供再循环催化剂和再循环底物来再循环udp，使得使用催化量的udp
‑
葡糖基转移酶和udp
‑
葡萄糖进行甜菊醇和/或甜菊醇糖苷底物到目标甜菊醇糖苷的生物转化。
679.在一个实施方案中，再循环催化剂为蔗糖合酶susy_at或与susy_at具有＞85％的氨基酸序列同一性的蔗糖合酶。
680.在一个实施方案中，用于udp
‑
葡萄糖再循环催化剂的再循环底物为蔗糖。
681.任选地，本发明的方法还包括使用转糖苷酶，该转糖苷酶使用低聚糖或多糖作为糖供体来修饰受体目标甜菊醇糖苷分子。非限制性示例包括环糊精糖基转移酶(cgtase)、呋喃果糖苷酶、淀粉酶、转化酶、葡糖蔗糖酶、β
‑
h
‑
果糖苷酶、β
‑
果糖苷酶、蔗糖酶、果糖基转化酶、碱性转化酶、酸性转化酶、呋喃果糖苷酶。在一些实施方案中，将葡萄糖和除葡萄糖之外的糖(包括但不限于果糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖、脱氧葡萄糖、半乳糖)转移至受体目标甜菊醇糖苷。在一个实施方案中，受体甜菊醇糖苷是莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r和/或莱苞迪苷2s。在另一个实施方案中，受体甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m4。在另一个实施方案中，受体甜菊醇糖苷是莱苞迪苷m5。在另一个实施方案中，受体甜菊醇糖苷是svg7。
682.在另一个实施方案中，能够将至少一个葡萄糖单元添加到起始组合物甜菊醇糖苷的udp
‑
葡糖基转移酶与选自以下geninfo标识编号列表，优选地来自表1和表2中给出的组的ugt具有＞85％的氨基酸序列同一性。
683.684.685.[0686][0687]
表1
[0688]
[0689]
[0690][0691]
表2
[0692][0693]
[0694]
本发明的一个实施方案是包含酶(即，能够将起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷的酶)的微生物细胞。因此，本发明方法的一些实施方案包括使微生物与含有起始组合物的培养基接触，以提供包含至少一种目标甜菊醇糖苷的培养基。
[0695]
微生物可以是具有将起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷所必需的酶的任何微生物。这些酶在微生物的基因组内编码。
[0696]
合适的微生物包括但不限于大肠杆菌、酵母属、曲霉菌属、毕赤酵母属、芽孢杆菌属、耶氏酵母属等。
[0697]
在一个实施方案中，微生物在与起始组合物接触时是自由的。
[0698]
在另一个实施方案中，微生物在与起始组合物接触时是固定的。例如，微生物可固定至由无机或有机材料制成的固体载体。适于固定微生物的固相载体的非限制性示例包括衍生的纤维素或玻璃、陶瓷、金属氧化物或膜。微生物可例如通过共价连接、吸附、交联、截留或封装而固定至固相载体。
[0699]
在又一个实施方案中，能够将起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷的酶从微生物分泌出来并进入反应培养基中。
[0700]
任选地纯化目标甜菊醇糖苷。从反应培养基中纯化目标甜菊醇糖苷可通过至少一种合适的方法来实现，以提供高度纯化的目标甜菊醇糖苷组合物。合适的方法包括结晶、通过膜分离、离心、提取(液相或固相)、色谱分离、(制备或分析型)hplc或此类方法的组合。
[0701]
用途
[0702]
根据本发明获得的高度纯化的目标糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可“原样”使用或与其他甜味剂、风味剂、食物成分以及它们的组合组合使用。
[0703]
风味剂的非限制性示例包括但不限于酸橙、柠檬、橙、水果、香蕉、葡萄、梨、菠萝、芒果、莓、苦杏仁、可乐、肉桂、糖、棉花糖、香草以及它们的组合。
[0704]
其他食物成分的非限制性示例包括但不限于酸化剂、有机酸和氨基酸、着色剂、增量剂、改性淀粉、树胶、质构剂、防腐剂、咖啡因、抗氧化剂、乳化剂、稳定剂、增稠剂、胶凝剂以及它们的组合。
[0705]
根据本发明获得的高度纯化的目标糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱
苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可以各种多晶形形式制备，包括但不限于水合物、溶剂化物、无水、无定形形式以及它们的组合。
[0706]
根据本发明获得的高度纯化的目标糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可作为高强度天然甜味剂掺入到食品、饮料、药物组合物、化妆品、口香糖、桌面产品、谷物、乳制品、牙膏和其他口腔组合物等中。
[0707]
在一些实施方案中，本发明的高度纯化的目标糖苷以约0.0001重量％至约12重量％，诸如例如约0.0001重量％、约0.0005重量％、约0.001重量％、约0.005重量％、约0.01重量％、约0.05重量％、约0.1重量％、约0.5重量％、约1.0重量％、约1.5重量％、约2.0重量％、约2.5重量％、约3.0重量％、约3.5重量％、约4.0重量％、约4.5重量％、约5.0重量％、约5.5重量％、约6.0重量％、约6.5重量％、约7.0重量％、约7.5重量％、约8.0重量％、约8.5重量％、约9.0重量％、约9.5重量％、约10.0重量％、约10.5重量％、约11.0重量％、约11.5重量％或约12.0重量％的量存在于食品、饮料、药物组合物、化妆品、口香糖、桌面产品、谷物、乳制品、牙膏和其他口腔组合物等中。
[0708]
在一个具体实施方案中，甜味剂以约0.0001重量％至约8重量％，诸如例如约0.0001重量％至约0.0005重量％、约0.0005重量％至约0.001重量％、约0.001重量％至约0.005重量％、约0.005重量％至约0.01重量％、约0.01重量％至约0.05重量％、约0.05重量％至约0.1重量％、约0.1重量％至约0.5重量％、约0.5重量％至约1重量％、约1重量％至约2重量％、约2重量％至约3重量％，约3重量％至约4重量％、约4重量％至约5重量％、约5重量％至约6重量％、约6重量％至约7重量％、以及约7重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0709]
根据本发明获得的高度纯化的目标糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱
苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s、svg7和/或它们的组合可用作甜味化合物，或它可与至少一种天然存在的高强度甜味剂诸如杜尔可苷a、杜尔可苷b、杜尔可苷c、杜尔可苷d、莱苞迪苷a2、莱苞迪苷a3、莱苞迪苷a4、莱苞迪苷b2、莱苞迪苷c、莱苞迪苷c2、莱苞迪苷c3、莱苞迪苷c4、莱苞迪苷c5、莱苞迪苷c6、莱苞迪苷d2、莱苞迪苷d3、莱苞迪苷d4、莱苞迪苷d5、莱苞迪苷d6、莱苞迪苷d8、莱苞迪苷e5、莱苞迪苷e7、莱苞迪苷f、莱苞迪苷f2、莱苞迪苷f3、莱苞迪苷h、莱苞迪苷h2、莱苞迪苷h3、莱苞迪苷h4、莱苞迪苷h5、莱苞迪苷h6、莱苞迪苷i2、莱苞迪苷i3、莱苞迪苷j、莱苞迪苷k、莱苞迪苷k2、莱苞迪苷ka、莱苞迪苷l、莱苞迪苷m2、莱苞迪苷m3、莱苞迪苷n、莱苞迪苷n2、莱苞迪苷n3、莱苞迪苷n4、莱苞迪苷n5、莱苞迪苷o、莱苞迪苷o2、莱苞迪苷o3、莱苞迪苷o4、莱苞迪苷q、莱苞迪苷q2、莱苞迪苷q3、莱苞迪苷r、莱苞迪苷s、莱苞迪苷t、莱苞迪苷t1、莱苞迪苷u、莱苞迪苷u2、莱苞迪苷v、莱苞迪苷v2、莱苞迪苷v3、莱苞迪苷w、莱苞迪苷w2、莱苞迪苷w3、莱苞迪苷y、莱苞迪苷z1、莱苞迪苷z2、甜菊醇双糖苷c、甜菊醇双糖苷e、蛇菊苷d、蛇菊苷e、蛇菊苷e2、蛇菊苷f、蛇菊苷g、蛇菊苷h、罗汉果苷、甜味蛋白、新橙皮苷二氢查耳酮、甘草酸及其盐、索马甜、紫苏亭、皮尔南甘素、无患子倍半萜苷、白云参苷、糙苏苷i、二甲基
‑
六氢芴
‑
二羧酸、相思子苷、巴西甘草甜素、肉质雪胆皂苷、青钱柳苷、蝶卡苷、聚波朵苷a、巴西木素、赫尔南杜尔辛、菲络杜辛、菝葜苷、根皮苷、三叶苷、二氢黄酮醇、二氢槲皮素
‑3‑
乙酸酯、新落新妇苷、反式
‑
肉桂醛、莫纳甜、莫纳甜盐、其他吲哚衍生的甜味剂、落蕨素a、苏木精、应乐果甜蛋白、欧亚水龙骨甜素、蝶卡苷a、蝶卡苷b、马槟榔甜蛋白、培它丁、奇异果素、仙茅甜蛋白、neoculin、绿原酸、洋蓟素、罗汉果甜味剂，罗汉果苷v、赛门苷、siratose以及它们的组合一起使用。
[0710]
在一个具体实施方案中，甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可用于甜味剂组合物中，该甜味剂组合物包含选自以下物质的化合物：杜尔可苷a、杜尔可苷b、杜尔可苷c、杜尔可苷d、莱苞迪苷a2、莱苞迪苷a3、莱苞迪苷a4、莱苞迪苷b2、莱苞迪苷c、莱苞迪苷c2、莱苞迪苷c3、莱苞迪苷c4、莱苞迪苷c5、莱苞迪苷c6、莱苞迪苷d2、莱苞迪苷d3、莱苞迪苷d4、莱苞迪苷d5、莱苞迪苷d6、莱苞迪苷d8、莱苞迪苷e5、莱苞迪苷e7、莱苞迪苷f、莱苞迪苷f2、莱苞迪苷f3、莱苞迪苷h、莱苞迪苷h2、莱苞迪苷h3、莱苞迪苷h4、莱苞迪苷h5、莱苞迪苷h6、莱苞迪苷i2、莱苞迪苷i3、莱苞迪苷j、莱苞迪苷k、莱苞迪苷k2、莱苞迪苷ka、莱苞迪苷l、莱苞迪苷m2、莱苞迪苷m3、莱苞迪苷n、莱苞迪苷n2、莱苞迪苷n3、莱苞迪苷n4、莱苞迪苷n5、莱苞迪苷o、莱苞迪
苷o2、莱苞迪苷o3、莱苞迪苷o4、莱苞迪苷q、莱苞迪苷q2、莱苞迪苷q3、莱苞迪苷r、莱苞迪苷s、莱苞迪苷t、莱苞迪苷t1、莱苞迪苷u、莱苞迪苷u2、莱苞迪苷v、莱苞迪苷v2、莱苞迪苷v3、莱苞迪苷w、莱苞迪苷w2、莱苞迪苷w3、莱苞迪苷y、莱苞迪苷z1、莱苞迪苷z2、甜菊醇双糖苷c、甜菊醇双糖苷e、蛇菊苷d、蛇菊苷e、蛇菊苷e2、蛇菊苷f、蛇菊苷g、蛇菊苷h、nsf
‑
02、罗汉果苷v、siratose、罗汉果、阿卢糖、阿洛糖、d
‑
塔格糖、赤藓醇以及它们的组合。
[0711]
高度纯化的目标糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7也可与合成的高强度甜味剂诸如三氯蔗糖、安塞蜜、天冬甜素、阿力甜、糖精、新橙皮苷二氢查耳酮、环己基氨基磺酸钠、纽甜、甘素、suosan爱德万甜、它们的盐、以及它们的组合组合使用。
[0712]
此外，高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可与天然甜味剂抑制剂诸如匙羹藤酸、勿甜素、率树抑甜物、降甜剂等组合使用。甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7也可与各种鲜味增强剂组合。甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、
蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可与鲜味和甜味氨基酸诸如谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、赖氨酸、色氨酸以及它们的组合混合。
[0713]
高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可与一种或多种添加剂组合使用，该至少一种添加剂选自碳水化合物、多元醇、氨基酸及其对应的盐、聚氨基酸及其对应的盐、糖酸及其对应的盐、核苷酸、有机酸、无机酸、包括有机酸盐和有机碱盐的有机盐、无机盐、苦味化合物、风味剂和风味成分、收敛剂化合物、蛋白质或蛋白质水解产物、表面活性剂、乳化剂、类黄酮、醇、聚合物以及它们的组合。
[0714]
高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可与多元醇或糖醇组合。术语“多元醇”是指含有多于一个羟基基团的分子。多元醇可以是分别含有2个、3个和4个羟基基团的二醇、三醇或四醇。多元醇还可含有多于四个羟基基团，诸如五醇、六醇、七醇等，其分别包含5个、6个或7个羟基基团。此外，多元醇也可为糖醇、多元醇、或为碳水化合物的还原形式的多元醇，其中羰基基团(醛或酮、还原糖)已被还原为伯羟基基团或仲羟基基团。多元醇的示例包括但不限于赤藓醇、麦芽糖醇、甘露糖醇、山梨醇、乳糖醇、木糖醇、
肌醇、异麦芽酮糖醇、丙二醇、甘油、苏糖醇、半乳糖醇、氢化异麦芽酮糖、还原型低聚异麦芽糖、还原型低聚木糖、还原型低聚龙胆糖、还原型麦芽糖糖浆、还原型葡萄糖糖浆、氢化淀粉水解物、聚葡糖醇和糖醇、或能够被还原且不会不利地影响甜味剂组合物的味道的任何其他碳水化合物。
[0715]
高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可与低热量甜味剂诸如例如d
‑
塔格糖、l
‑
糖、l
‑
山梨糖、l
‑
阿拉伯糖以及它们的组合组合。
[0716]
高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7也可与各种碳水化合物组合。术语“碳水化合物”通常是指通式(ch2o)
n
的被多个羟基基团取代的醛或酮化合物(其中n为3
‑
30)，以及它们的低聚物和聚合物。此外，本发明的碳水化合物可在一个或多个位置处被取代或脱氧。如本文所用，碳水化合物涵盖未改性的碳水化合物、碳水化合物衍生物、取代的碳水化合物和改性的碳水化合物。如本文所用，短语“碳水化合物衍生物”、“取代的碳水化合物”和“改性的碳水化合物”是同义的。改性的碳水化合物意指其中至少一个原子已被添加、移除、或取代、或它们的组合的任何碳水化合物。因此，碳水化合物衍生物或取代的碳水化合物包括取代和未取代的单糖、二糖、低聚糖和多糖。碳水化合物衍生物或取代的碳水化合物任选地可在任何对应的c位置处脱氧，并且/或者被一个或多个部分取代，该一个或多个部分诸如氢、卤素、卤代烷基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺基、巯基、亚氨基、磺酰基、次磺酰基、亚磺酰基、氨磺酰基、烷氧羰基、羧酰氨基、膦酰基、氧膦基、磷酰基、膦基、硫酯、硫醚、肟基、肼基、氨甲酰基、磷基、膦酸基或任何其他可行的官能团，前提条件是碳水化合物衍生物或取代的碳水化合物用于改善甜味剂组合物的甜味。
[0717]
可根据本发明使用的碳水化合物的示例包括但不限于阿洛酮糖、松二糖、阿洛糖、
塔格糖、海藻糖、半乳糖、鼠李糖、各种环糊精、环状低聚糖、各种类型的麦芽糖糊精、葡聚糖、蔗糖、葡萄糖、核酮糖、果糖、苏阿糖、阿拉伯糖、木糖、来苏糖、阿卓糖、甘露糖、艾杜糖、乳糖、麦芽糖、转化糖、异海藻糖、新海藻糖、异麦芽酮糖、赤藓糖、脱氧核糖、古洛糖、艾杜糖、塔罗糖、赤藓酮糖、木酮糖、阿洛酮糖、松二糖、纤维二糖、支链淀粉、葡糖胺、甘露糖胺、岩藻糖、葡糖醛酸、葡糖酸、葡糖酸
‑
内酯、阿比可糖、半乳糖胺、甜莱低聚糖、低聚异麦芽糖(异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖等)、低聚木糖(木三糖、木二糖等)、木糖封端的低聚糖、低聚龙胆糖(龙胆二糖、龙胆三糖、龙胆四糖等)、山梨糖、黑曲霉低聚糖、帕拉金糖低聚糖、低聚果糖(蔗果三糖、蔗果四糖等)、麦芽四醇、麦芽三醇、麦芽低聚糖(麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖、麦芽六糖、麦芽七糖等)、淀粉、菊粉、菊粉低聚糖、乳果糖、蜜二糖、棉子糖、核糖、异构化液体糖诸如高果糖玉米糖浆、偶联糖和大豆低聚糖。另外，如本文所用的碳水化合物可为d
‑
构型或l
‑
构型。
[0718]
根据本发明获得的高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可与各种生理活性物质或功能性成分组合使用。功能性成分通常分类为以下类别：诸如类胡萝卜素、膳食纤维、脂肪酸、皂草苷、抗氧化剂、营养品、类黄酮、异硫氰酸酯、酚、植物甾醇和固烷醇(植物固醇和植物甾烷醇)；多元醇；益生元、益生菌；植物雌激素；大豆蛋白；硫化物/硫醇；氨基酸；蛋白质；维生素；以及矿物质。功能性成分也可基于它们的健康有益效果来分类，诸如心血管、降胆固醇和抗炎有益效果。示例性功能性成分提供于wo2013/096420中，其内容据此以引用方式并入本文。
[0719]
根据本发明获得的高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可作为高强度甜味剂施用，以产生具有改善的味道特征的零热量、低热量或糖尿病饮料和食物产品。它还可用于饮料、食品、药物和其中不能使用糖的其他产品中。此外，高度纯
化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7不仅可用作饮料、食品和专用于人类食用的其他产品的甜味剂，还可用作具有改善特征的动物饲料和草料的甜味剂。
[0720]
根据本发明获得的高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可作为抑泡剂施用，以产生零热量、低热量或糖尿病饮料和食物产品。
[0721]
其中高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可用作甜味化合物的消费类产品的示例包括但不限于酒精饮料，诸如伏特加、葡萄酒、啤酒、白酒和清酒等；天然果汁；清凉饮料；碳酸软饮料；低糖饮料；零卡路里饮料；低卡路里饮料和食物；酸奶饮料；速溶果汁；速溶咖啡；粉末类型的速溶饮料；罐装产品；糖浆；发酵大豆糊剂；大豆酱；醋；调味品；蛋黄酱；番茄酱；咖喱；汤；速溶肉汤；粉状大豆酱；醋粉；各种类型的饼干；大米饼干；薄脆饼干；面包；巧克力；焦糖；糖果；口香糖；果冻；布丁；蜜饯和腌菜；鲜奶油；果酱；橘子酱；甘佩斯；奶粉；冰淇淋；果汁冰糕；填装在瓶中的蔬菜和水果；罐装熟豆；甜汁中烹煮肉和食物；农业蔬莱食物产品；海产品；火腿；香肠；鱼肉火腿；鱼肉香肠；鱼酱；酥炸鱼
产品；干海产品；冷冻食物产品；腌渍海藻；腌渍肉；烟草；医药产品；以及许多其他产品。原则上，它可具有无限应用。
[0722]
其中高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可用作风味调节剂或具有改性特性的风味剂的消费类产品的示例包括但不限于酒精饮料，诸如伏特加、葡萄酒、啤酒、白酒和清酒等；天然果汁；清凉饮料；碳酸软饮料；低糖饮料；零卡路里饮料；低卡路里饮料和食物；酸奶饮料；速溶果汁；速溶咖啡；粉末类型的速溶饮料；罐装产品；糖浆；发酵大豆糊剂；大豆酱；醋；调味品；蛋黄酱；番茄酱；咖喱；汤；速溶肉汤；粉状大豆酱；醋粉；各种类型的饼干；大米饼干；薄脆饼干；面包；巧克力；焦糖；糖果；口香糖；果冻；布丁；蜜饯和腌菜；鲜奶油；果酱；橘子酱；甘佩斯；奶粉；冰淇淋；果汁冰糕；填装在瓶中的蔬菜和水果；罐装熟豆；甜汁中烹煮肉和食物；农业蔬菜食物产品；海产品；火腿；香肠；鱼肉火腿；鱼肉香肠；鱼酱；酥炸鱼产品；干海产品；冷冻食物产品；腌渍海藻；腌渍肉；烟草；医药产品；以及许多其他产品。原则上，它可具有无限应用。
[0723]
在制造诸如食品、饮料、药品、化妆品、桌面产品和口香糖之类的产品期间，可使用常规方法，诸如混合、捏合、溶解、腌制、渗透、渗滤、喷淋、雾化、输注和其他方法。
[0724]
此外，在本发明中获得的高度纯化的目标甜菊醇糖苷甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可以干燥或液体形式使用。
[0725]
高度纯化的目标甜菊醇糖苷可在食物产品的热处理之前或之后添加。高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪
苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7的量取决于使用目的。如上所论述，它可单独添加或与其他化合物组合添加。
[0726]
本发明还涉及使用甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7作为甜味增强剂的饮料中的甜味增强，其中甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7以等于或低于它们相应甜味识别阈值的浓度存在。
[0727]
如本文所用，术语“甜味增强剂”是指能够增强或强化对组合物诸如饮料中甜味的感知的化合物。术语“甜味增强剂”与术语“甜味增效剂”、“甜味放大剂”和“甜味强化剂”同义。
[0728]
如本文通常所用，术语“甜味识别阈值浓度”是人类味觉可感知的甜味化合物的最低已知浓度，通常为约1.0％蔗糖当量(1.0％se)。一般来讲，甜味增强剂可增强或加强甜味剂的甜味，而当以等于或低于给定甜味增强剂的甜味识别阈值浓度存在时，其本身不提供任何明显的甜味；然而，甜味增强剂本身可在高于其甜味识别阈值浓度的浓度下提供甜味。甜味识别阈值浓度是特定增强剂所特有的，并且可基于饮料基质而变化。甜味识别阈值浓度可容易地通过味道测试来确定，该测试增加给定增强剂的浓度，直到检测到给定饮料基质中大于1.0％的蔗糖当量。认为提供约1.0％蔗糖当量的浓度是甜味识别阈值。
[0729]
在一些实施方案中，甜味剂以约0.0001重量％至约12重量％，诸如例如约0.0001
重量％、约0.0005重量％、约0.001重量％、约0.005重量％、约0.01重量％、约0.05重量％、约0.1重量％、约0.5重量％、约1.0重量％、约1.5重量％、约2.0重量％、约2.5重量％、约3.0重量％、约3.5重量％、约4.0重量％、约4.5重量％、约5.0重量％、约5.5重量％、约6.0重量％、约6.5重量％、约7.0重量％、约7.5重量％、约8.0重量％、约8.5重量％、约9.0重量％、约9.5重量％、约10.0重量％、约10.5重量％、约11.0重量％、约11.5重量％或约12.0重量％的量存在于饮料中。
[0730]
在一个具体实施方案中，甜味剂以约0.0001重量％至约10重量％，诸如例如约0.0001重量％至约0.0005重量％、约0.0005重量％至约0.001重量％、约0.001重量％至约0.005重量％、约0.005重量％至约0.01重量％、约0.01重量％至约0.05重量％、约0.05重量％至约0.1重量％、约0.1重量％至约0.5重量％、约0.5重量％至约1重量％、约1重量％至约2重量％、约2重量％至约3重量％，约3重量％至约4重量％、约4重量％至约5重量％、约5重量％至约6重量％、约6重量％至约7重量％、约7重量％至约8重量％、约8重量％至约9重量％、或约9重量％至约10重量％的量存在于饮料中。在一个具体实施方案中，甜味剂以约0.5重量％至约10重量％的量存在于饮料中。在另一个具体实施方案中，甜味剂以约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0731]
在一个实施方案中，甜味剂是传统的含热量甜味剂。合适的甜味剂包括但不限于蔗糖、果糖、葡萄糖、高果糖玉米糖浆和高果糖淀粉糖浆。
[0732]
在另一个实施方案中，甜味剂是赤藓醇。
[0733]
在另一个实施方案中，甜味剂是稀有糖。合适的稀有糖包括但不限于d
‑
阿洛糖、d
‑
阿洛酮糖、d
‑
核糖、d
‑
塔格糖、l
‑
葡萄糖、l
‑
岩藻糖、l
‑
阿拉伯糖、d
‑
松二糖、d
‑
明串珠菌二糖以及它们的组合。
[0734]
预期甜味剂可单独使用，或与其他甜味剂组合使用。
[0735]
在一个实施方案中，稀有糖是d
‑
阿洛糖。在一个更具体的实施方案中，d
‑
阿洛糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0736]
在另一个实施方案中，稀有糖是d
‑
阿洛酮糖。在一个更具体的实施方案中，d
‑
阿洛酮糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0737]
在另一个实施方案中，稀有糖是d
‑
核糖。在一个更具体的实施方案中，d
‑
核糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0738]
在另一个实施方案中，稀有糖是d
‑
塔格糖。在一个更具体的实施方案中，d
‑
塔格糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0739]
在另一个实施方案中，稀有糖是l
‑
葡萄糖。在一个更具体的实施方案中，l
‑
葡萄糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0740]
在一个实施方案中，稀有糖是l
‑
岩藻糖。在一个更具体的实施方案中，l
‑
岩藻糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0741]
在另一个实施方案中，稀有糖是l
‑
阿拉伯糖。在一个更具体的实施方案中，l
‑
阿拉伯糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0742]
在另一个实施方案中，稀有糖为d
‑
松二糖。在一个更具体的实施方案中，d
‑
松二糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0743]
在另一个实施方案中，稀有糖是d
‑
明串珠菌二糖。在一个更具体的实施方案中，d
‑
明串珠菌二糖以约0.5重量％至约10重量％，诸如例如约2重量％至约8重量％的量存在于饮料中。
[0744]
与不存在甜味增强剂的对应饮料相比，以等于或低于其甜味识别阈值的浓度添加甜味增强剂增加了包含甜味剂和甜味增强剂的饮料的所检测到的蔗糖当量。此外，在不存在任何甜味剂的情况下，可通过超过含有相同浓度的至少一种甜味增强剂的溶液的可检测甜味的量来增强甜味。
[0745]
因此，本发明还提供了一种用于增强包含甜味剂的饮料的甜味的方法，该方法包括提供包含甜味剂的饮料并添加选自甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7、或它们的组合的甜味增强剂，其中甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7以等于或低于它们的甜味识别阈值的浓度存在。
[0746]
以等于或低于甜味识别阈值的浓度向含有甜味剂的饮料中添加甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷2q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7可使所检测到的蔗糖当量增加约1.0％至约5.0％，诸如例如约1.0％、约1.5％、约2.0％、约2.5％、约3.0％、约3.5％、约4.0％、约4.5％或约5.0％。
[0747]
以下实施例示出了用于制备高度纯化的目标甜菊醇糖苷具体地甜菊醇单糖苷、甜菊醇单糖苷a、甜菊醇双糖苷、甜菊醇双糖苷d、甜茶苷、甜菊醇双糖苷a、甜菊醇双糖苷b、莱苞迪苷b、蛇菊苷、莱苞迪苷g、蛇菊苷a、蛇菊苷b、蛇菊苷c、莱苞迪苷a、莱苞迪苷e、莱苞迪苷e2、莱苞迪苷e4、莱苞迪苷e6、莱苞迪苷e3、莱苞迪苷d、莱苞迪苷i、莱苞迪苷am、莱苞迪苷d7、莱苞迪苷m、莱苞迪苷m4、莱苞迪苷m5、莱苞迪苷1a、莱苞迪苷1b、莱苞迪苷1c、莱苞迪苷1d、莱苞迪苷1e、莱苞迪苷1f、莱苞迪苷1g、莱苞迪苷1h、莱苞迪苷1i、莱苞迪苷1j、莱苞迪苷1k、莱苞迪苷1l、莱苞迪苷1m、莱苞迪苷1n、莱苞迪苷1o、莱苞迪苷1p、莱苞迪苷1q、莱苞迪苷1r、莱苞迪苷1s、莱苞迪苷1t、莱苞迪苷2a、莱苞迪苷2b、莱苞迪苷2c、莱苞迪苷2d、莱苞迪苷2e、莱苞迪苷2f、莱苞迪苷2g、莱苞迪苷2h、莱苞迪苷2i、莱苞迪苷2j、莱苞迪苷2k、莱苞迪苷2l、莱苞迪苷2m、莱苞迪苷2n、莱苞迪苷2o、莱苞迪苷2p、莱苞迪苷２q、莱苞迪苷2r、莱苞迪苷2s和/或svg7的本发明的优选实施方案。应当理解，本发明不限于实施例中列出的材料、比例、条件和工序，这些仅为例示性的。
[0748]
实施例
[0749]
实施例1
[0750]
用于生物催化方法的工程化酶的蛋白质序列
[0751]
seq id 1：
[0752]
＞susy_at，变体pm1
‑
54
‑2‑
e05(工程化蔗糖合酶；wt基因的来源：拟南芥)
[0753][0754][0755]
seq id 2：
[0756]
＞ugts12，变体0234(工程化葡糖基转移酶；wt基因的来源：番茄)
[0757][0758]
seq id 3：
[0759]
＞ugt76g1，变体0042(工程化葡糖基转移酶；wt基因的来源：甜叶菊)
[0760][0761]
实施例2
[0762]
seq id 1的susy_at变体的表达和制剂
[0763]
将编码seq id 1的susy_at变体(实施例1)的基因克隆到表达载体ple1a17(prsf
‑
1b的衍生物，novagen)中。所得质粒用于转化大肠杆菌bl21(de3)细胞。
[0764]
在37℃下将细胞在补充有卡那霉素(50mg/l)的zym505培养基(f.william studier，“protein expression and purification”，第41卷，2005年，第207
‑
234页)中培养。在对数期通过iptg(0.2mm)诱导基因表达并在30℃和200rpm下进行16
‑
18小时。
[0765]
通过离心(3220
×
g，20分钟，4℃)收获细胞，并用细胞裂解缓冲液(100mm tris
‑
hcl，ph 7.0；2mm mgcl2、dna核酸酶20u/ml、溶菌酶0.5mg/ml)重悬浮至200的光密度(在600nm处测量(od
600
))。然后通过超声破碎细胞，并且通过离心(18000
×
g，40分钟，4℃)从细胞碎片中分离粗制提取物。通过过滤通过0.2μm过滤器对上清液进行灭菌并用蒸馏水50∶50稀释，得到酶活性制剂。
[0766]
对于susy_at的酶活性制剂，以单位表示的活性定义如下：1mu的susy_at在1分钟内将超过1nmol的蔗糖转化成果糖。测定的反应条件为30℃、50mm磷酸钾缓冲液(ph 7.0)、t0时400mm蔗糖、3mm mgcl2和15mm尿苷二磷酸(udp)。
[0767]
实施例3
[0768]
seq id 2的ugts12变体的表达和制剂
[0769]
将编码seq id 2的ugts12变体(实施例1)的基因克隆到表达载体ple1a17(prsf
‑
1b的衍生物，novagen)中。所得质粒用于转化大肠杆菌bl21(de3)细胞。
[0770]
在37℃下将细胞在补充有卡那霉素(50mg/l)的zym505培养基(f.william studier，“protein expression and purification”，第41卷，2005年，第207
‑
234页)中培养。在对数期通过iptg(0.1mm)诱导基因表达并在30℃和200rpm下进行16
‑
18小时。
[0771]
通过离心(3220
×
g，20分钟，4℃)收获细胞，并用细胞裂解缓冲液(100mm tris
‑
hcl，ph 7.0；2mm mgcl2、dna核酸酶20u/ml、溶菌酶0.5mg/ml)重悬浮至200的光密度(在
600nm处测量(od
600
))。然后通过超声破碎细胞，并且通过离心(18000
×
g，40分钟，4℃)从细胞碎片中分离粗制提取物。通过过滤通过0.2μm过滤器对上清液进行灭菌并用1m蔗糖50∶50稀释，得到酶活性制剂。
[0772]
对于ugts12的酶活性制剂，以单位表示的活性定义如下：1mu的ugts12在1分钟内将超过1nmol的莱苞迪苷a(reb a)转化成莱苞迪苷d(reb d)。测定的反应条件为30℃、50mm磷酸钾缓冲液(ph 7.0)、t0时10mm reb a、500mm蔗糖、3mm mgcl2、0.25mm尿苷二磷酸(udp)和3u/ml的susy_at。
[0773]
实施例4
[0774]
seq id 3的ugt76g1变体的表达和制剂
[0775]
将编码seq id 3的ugt76g1变体(实施例1)的基因克隆到表达载体ple1a17(prsf
‑
1b的衍生物，novagen)中。所得质粒用于转化大肠杆菌bl21(de3)细胞。
[0776]
在37℃下将细胞在补充有卡那霉素(50mg/l)的zym505培养基(f.william studier，“protein expression and purification”，第41卷，2005年，第207
‑
234页)中培养。在对数期通过iptg(0.1mm)诱导基因表达并在30℃和200rpm下进行16
‑
18小时。
[0777]
通过离心(3220
×
g，20分钟，4℃)收获细胞，并用细胞裂解缓冲液(100mm tris
‑
hcl，ph 7.0；2mm mgcl2、dna核酸酶20u/ml、溶菌酶0.5mg/ml)重悬浮至200的光密度(在600nm处测量(od
600
))。然后通过超声破碎细胞，并且通过离心(18000
×
g，40分钟，4℃)从细胞碎片中分离粗制提取物。通过过滤通过0.2μm过滤器对上清液进行灭菌并用1m蔗糖50∶50稀释，得到酶活性制剂。
[0778]
对于ugt76g1的酶活性制剂，以单位表示的活性定义如下：1mu的ugt76g1在1分钟内将超过1nmol的莱苞迪苷d(reb d)转化成莱苞迪苷m(reb m)。测定的反应条件为30℃、50mm磷酸钾缓冲液(ph 7.0)、t0时10mm reb d、500mm蔗糖、3mm mgcl2、0.25mm尿苷二磷酸(udp)和3u/ml的susy_at。
[0779]
实施例5
[0780]
在单釜反应中合成svg7，同时添加ugts12、susy_at和ugt76g1。
[0781]
利用以下三种酶(参见实施例1、2、3和4)在单釜反应中由蛇菊苷(参见图12a)直接合成各种svg7分子：ugts12(seq id 2的变体)、susy_at(seq id 1的变体)和ugt76g1(seq id 3的变体)。
[0782]
最终反应溶液含有348u/l ugts12、1341u/l susy_at、10u/l ugt76g1、47mm蛇菊苷、0.32mm尿苷二磷酸(udp)、0.99m蔗糖、3.9mm mgcl2和磷酸钾缓冲液(ph 6.6)。首先，将206ml蒸馏水与0.24g mgcl2.6h2o、102g蔗糖、9.8ml 1.5m磷酸钾缓冲液(ph 6.6)和15g蛇菊苷混合。将反应混合物的最终体积调节至300ml。
[0783]
在组分溶解之后，将温度调节至45℃，并添加ugts12、susy_at、ugt76g1和39mg udp。将反应混合物在45℃摇动器上温育24小时。在12小时、24小时和36小时添加另外的39mg udp。通过hplc分析反应结束(48小时)时的reb m5、reb 2a、reb 2m和各种svg7的含量。
[0784]
实施例6
[0785]
hplc分析
[0786]
为了进行分析，通过使用17％h3po4将反应混合物调节至ph 5.5使生物转化样品失
活，然后煮10分钟。将所得样品过滤，将滤液稀释10倍并用作hplc分析的样品。hplc测定在agilent hp 1200 hplc系统上进行，该系统由泵、柱温箱、自动进样器、能够背景校正的uv检测器和数据采集系统构成。使用agilent poroshell 120 sb
‑
c18(4.6mm
×
150mm，2.7μm)，在40℃下分离分析物。流动相由两种预混物组成：
[0787]
‑
含有75％10mm磷酸盐缓冲液(ph 2.6)和25％乙腈的预混物1，和
[0788]
‑
含有68％10mm磷酸盐缓冲液(ph 2.6)和32％乙腈的预混物2。
[0789]
洗脱梯度从预混物1开始，在12.5分钟时变为50％的预混物2，在13分钟时变为100％的预混物2。总运行时间为45分钟。柱温保持在40℃下。进样体积为5μl。通过uv在210nm处检测莱苞迪苷物质。
[0790]
表3示出了每个时间点处蛇菊苷向所识别的莱苞迪苷物质的转化(面积百分比)。起始材料蛇菊苷和反应混合物在48小时的色谱图分别在图12a和图12b中示出。本领域的技术人员将会知道，保留时间可偶尔随溶剂和/或设备的变化而变化。
[0791]
表3
[0792]
蛇菊苷到reb m5(保留时间5.350)、reb 2a(保留时间6.459)、reb 2m(保留时间5.089)和各种svg7的生物转化
[0793]
[0794][0795]
实施例7
[0796]
莱苞迪苷m5、2a、2m和各种svg7的纯化
[0797]
通过用h3po4将ph调节至ph 5.5，使300ml实施例5的反应混合物(48小时后)失活，然后煮10分钟，并过滤。将滤液装载到含有500ml ywd03(cangzhou yuanwei，china)树脂的用水预平衡的柱中。用2.5l水洗涤树脂，并弃去来自该步骤的水流出物。
[0798]
通过用2.5l 70％v/v乙醇/水洗脱，从ywd03树脂柱洗脱甜菊醇糖苷。收集来自该步骤的流出物并在60℃下真空干燥，得到20g干燥的固体产物。将该样品溶解于水中，并使用下表4中列出的条件通过hplc进行进一步分馏和分离。
[0799]
根据保留时间将来自多次运行的对应于各种化合物的hplc级分合并。将级分冷冻干燥。
[0800]
表4
[0801]
hplc的条件
[0802]
柱agilent prodigy 3u ods(3)100a(4.6mm
×
250mm，3微米)温度40℃流动相等度
‑
水77％、乙腈23％流速0.5ml/min进样量10ul停止时间45分钟自动进样器温度环境检测210nm处的uv
[0803]
通过实施例6中所述的分析型hplc方法评估所获得级分的纯度。所纯化莱苞迪苷2a的色谱图在图12c中示出。所纯化莱苞迪苷2m的色谱图在图12d中示出。所纯化莱苞迪苷m5的色谱图在图12e中示出。
[0804]
实施例8
[0805]
莱苞迪苷2a的结构鉴定
[0806]
nmr实验在bruker 500mhz光谱仪上进行，其中样品溶解于吡啶
‑
d5中。连同来自样品的信号，观察到来自吡啶
‑
d5的在δ
c 123.5ppm、135.5ppm、149.9ppm和δ
h 7.19ppm、7.55ppm、8.71ppm处的信号。
[0807]
在吡啶
‑
d5中记录的莱苞迪苷2a的1h
‑
nmr谱证实了样品的优异品质(参见图13a)。hsqc(参见图13b)示出了糖区中存在外亚甲基基团，在h，h
‑
cosy中可观察到与c
‑
15具有远程偶联(图13c)。通过hmbc检测季碳原子(c
‑
13、c
‑
16和c
‑
19)的其他深视野信号(图13d)。hsqc、hmbc和h，h
‑
cosy中信号的相关性表明存在具有以下苷元结构的甜菊醇糖苷：
[0808][0809]
hsqc和hmbc的相关性显示存在七个异头信号，标记为1i、1ii、1iii、1iv、1v、1vi和1vii。约8hz的异头质子的耦合常数、它们的糖键的宽信号和异头质子的noe
‑
相关性允许将这七种糖鉴定为β
‑
d
‑
吡喃葡萄糖苷。
[0810]
来自hsqc和hmbc的组合数据显示出糖
‑
糖键和糖
‑
苷元键。通过使用hsqc
‑
tocsy(图13e)和noesy(图13f)的组合来确认糖序列的分配。
[0811]
总之，来自上述nmr实验的结果用于分配莱苞迪苷2a的结构的质子和碳的化学位移(参见表5)。
[0812]
表5
[0813]
莱苞迪苷2a的化学位移
[0814][0815]
表5(续)
[0816]
莱苞迪苷2a的化学位移
[0817][0818][0819]
表5(续)
[0820]
莱苞迪苷2a的化学位移
[0821][0822]
所有nmr结果的相关性表明莱苞迪苷2a具有连接到甜菊醇苷元的七个β
‑
d
‑
葡萄糖，如以下化学结构所示：
[0823][0824]
莱苞迪苷2a的lcms(图13g和图13h)分析显示m/z 1451.6处的[m
‑
h]
‑
离子与预期分子式c
62
h
100
o
38
具有良好的一致性([c
62
h
99
o
38
]
‑
单一同位素离子的计算值：1451.6)。ms数据确认莱苞迪苷2a具有分子式c
62
h
100
o
38
。lcms分析在表6中列出的以下条件下进行。
[0825]
表6
[0826]
lcms分析的条件
[0827][0828][0829]
实施例9
[0830]
莱苞迪苷2m的结构鉴定
[0831]
nmr实验在bruker 500mhz光谱仪上进行，其中样品溶解于吡啶
‑
d5中。连同来自样品的信号，观察到来自吡啶
‑
d5的在δ
c 123.5ppm、135.5ppm、149.9ppm和δ
h 7.19ppm、7.55ppm、8.71ppm处的信号。
[0832]
在吡啶
‑
d5中记录的莱苞迪苷2m的1h
‑
nmr谱证实了样品的优异品质(参见图14a)。hsqc(参见图14b)示出了糖区中存在外亚甲基基团，在h，h
‑
cosy中可观察到与c
‑
15具有远程偶联(图14c)。通过hmbc检测季碳原子(c
‑
13、c
‑
16和c
‑
19)的其他深视野信号(图14d)。hsqc、hmbc和h，h
‑
cosy中信号的相关性表明存在具有以下苷元结构的甜菊醇糖苷：
[0833][0834]
hsqc和hmbc的相关性显示存在七个异头信号，标记为1i、1ii、1iii、1iv、1v、1vi和
1vii。约8hz的异头质子的耦合常数、它们的糖键的宽信号和异头质子的noe
‑
相关性允许将这七种糖鉴定为β
‑
d
‑
吡喃葡萄糖苷。
[0835]
来自hsqc和hmbc的组合数据显示出糖
‑
糖键和糖
‑
苷元键。通过使用hsqc
‑
tocsy(图14e)和noesy(图14f)的组合来确认糖序列的分配。
[0836]
总之，来自上述nmr实验的结果用于分配莱苞迪苷2m的结构的质子和碳的化学位移(参见表7)。
[0837]
表7
[0838]
莱苞迪苷2m的化学位移
[0839][0840]
表7(续)
[0841]
莱苞迪苷2m的化学位移
[0842][0843]
表7(续)
[0844]
莱苞迪苷2m的化学位移
[0845][0846]
所有nmr结果的相关性表明莱苞迪苷2m具有连接到甜菊醇苷元的七个β
‑
d
‑
葡萄糖，如以下化学结构所示：
[0847][0848]
莱苞迪苷2m的lcms(图14g和图14h)分析显示m/z 1451.6处的[m
‑
h]
‑
离子与预期分子式c
62
h
100
o
38
具有良好的一致性([c
62
h
99
o
38
]
‑
单一同位素离子的计算值：1451.6)。ms数据确认莱苞迪苷2m具有分子式c
62
h
100
o
38
。lcms分析在表6中列出的条件下进行。
[0849]
实施例10
[0850]
莱苞迪苷m5的结构鉴定
[0851]
nmr实验在bruker 500mhz光谱仪上进行，其中样品溶解于吡啶
‑
d5中。连同来自样品的信号，观察到来自吡啶
‑
d5的在δ
c 123.5ppm、135.5ppm、149.9ppm和δ
h 7.19ppm、7.55ppm、8.71ppm处的信号。
[0852]
在吡啶
‑
d5中记录的莱苞迪苷m5的1h
‑
nmr谱证实了样品的优异品质(参见图15a)。hsqc(参见图15b)示出了糖区中存在外亚甲基基团，在h，h
‑
cosy中可观察到与c
‑
15具有远程偶联(图15c)。通过hmbc检测季碳原子(c
‑
13、c
‑
16和c
‑
19)的其他深视野信号(图15d)。hsqc、hmbc和h，h
‑
cosy中信号的相关性表明存在具有以下苷元结构的甜菊醇糖苷：
[0853][0854]
hsqc和hmbc的相关性显示存在六个异头信号，标记为1i、1ii、1iii、1iv、1v和1vi。约8hz的异头质子的耦合常数、它们的糖键的宽信号和异头质子的noe
‑
相关性允许将这六种糖鉴定为β
‑
d
‑
吡喃葡萄糖苷。
[0855]
来自hsqc和hmbc的组合数据显示出糖
‑
糖键和糖
‑
苷元键。通过使用hsqc
‑
tocsy(图15e)和noesy(图15f)的组合来确认糖序列的分配。
[0856]
总之，来自上述nmr实验的结果用于分配莱苞迪苷m5的结构的质子和碳的化学位移(参见表8)。
[0857]
表8
[0858]
莱苞迪苷m5的化学位移
[0859][0860][0861]
表8(续)
[0862]
莱苞迪苷m5的化学位移
[0863][0864][0865]
表8(续)
[0866]
莱苞迪苷m5的化学位移
[0867][0868]
所有nmr结果的相关性表明莱苞迪苷m5具有连接到甜菊醇苷元的六个β
‑
d
‑
葡萄糖，如以下化学结构所示：
[0869][0870]
莱苞迪苷m5的lcms(图15g和图15h)分析显示m/z1289.6处的[m
‑
h]
‑
离子与预期分子式c
56
h
90
o
33
具有良好的一致性([c
56
h
89
o
33
]
‑
单一同位素离子的计算值：1289.5，误差＜0.05％)。ms数据确认莱苞迪苷m5具有分子式c
56
h
90
o
33
。lcms分析在表6中列出的条件下进行。
[0871]
虽然已详细描述了本发明及其优点，但应当理解，在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围的情况下可对本文进行各种改变、替换和更改。此外，本专利申请的范围并非旨在限于说明书中所述的本发明的具体实施方案。从本发明的公开内容中，本领域的普通技术人员将容易理解，根据本发明可利用与本文所述的相应实施方案执行基本上相同的功能或实现基本上相同的结果的目前存在的或以后将开发的组合物、工艺、方法
和步骤。
再多了解一些
本文用于企业家、创业者技术爱好者查询，结果仅供参考。
