作为葡萄糖激酶活化剂的吡咯烷酮衍生物及其制备方法和用途与流程

1.本发明属于医药技术领域。具体地，本发明涉及一类吡咯烷酮衍生物化合物及其制备方法和用途。这些化合物以及包含它们的药物组合物可作为葡萄糖激酶活化剂用于治疗代谢疾病和紊乱。


背景技术：

2.糖尿病由于其增加的流行率及相关的健康风险而成为主要的公共健康问题。此疾病的特征在于制造及利用碳水化合物过程中的代谢缺陷，从而导致无法维持适当的血糖水平。根据病因和临床表现不同，糖尿病主要分为4种类型：胰岛素依赖型(ⅰ型)，非胰岛素依赖型(ⅱ型)，营养不良相关型和继发型糖尿病。其中ⅱ型糖尿病(t2d)患者占糖尿病总人数的90％以上。因此，t2d治疗药物的研究是重点和热点。目前，临床常用的t2d治疗药物有二甲双胍类，磺酰脲类，胰岛素类，噻唑烷二酮类，α
‑
葡萄糖苷酶抑制剂类，二肽基肽酶
‑ⅳ
抑制剂类和钠
‑
葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂类等药物。这些药物具有良好的治疗效果，但长期治疗存在不同程度的安全性问题，如：增加体重，胃肠道反应，心血管副作用，低血糖，泌尿系统感染等，而且在很多情况下即使联合用药也难以达到理想的血糖控制目标，因此临床上急需具有全新作用机制的糖尿病治疗药物。
3.葡萄糖激酶(gk)又称己糖激酶ⅳ或己糖激酶d，是四种己糖激酶之一，分子量约52kda的单体酶，在atp和mg2 参与下，催化葡萄糖磷酸化为葡萄糖
‑6‑
磷酸，主要存在于胰岛α/β细胞，肝细胞，葡萄糖敏感的下丘脑腹内侧神经元，胃肠道k/l细胞，垂体促性腺细胞，对维持体内血糖的平衡发挥重要作用[magnuson m，matschinsky f，matschinsky f，magnuson m.，frontiers in diabetes,第16卷，第1
‑
17页，2004]。gk活性不会被其催化代谢产物葡萄糖
‑6‑
磷酸抑制，保证了其活性主要受葡萄糖浓度的控制。
[0004]
由此可知，葡萄糖激酶可作为葡萄糖传感器发挥作用，对于葡萄糖体内稳态具有重要作用。另一方面，可想到多数ⅱ型糖尿病患者有可能利用葡萄糖激酶传感器体系进行血糖调节。由于葡萄糖激酶活化物质可望具有促进胰腺β细胞分泌胰岛素的作用和肝脏摄取亢进并抑制糖释放的作用，因而可考虑将其用作ⅱ型糖尿病患者的治疗药物。
[0005]
为了减少相同靶点的现有技术报道的药物普遍存在的一些不良反应，需要开发全新结构的化合物作用于该特定的靶点，以便发现更好的药物以增强患者用药的依从性。


技术实现要素：

[0006]
本发明的目的是提供一种具有通式(ⅰ)结构的吡咯烷酮类葡萄糖激酶活化剂化合物，制备所述吡咯烷酮类葡萄糖激酶活化剂化合物的方法，所述吡咯烷酮类葡萄糖激酶活化剂化合物的用途以及包含所述吡咯烷酮类葡萄糖激酶活化剂化合物的药物组合物。
[0007]
式(ⅰ)化合物可以含有一个或多个不对称碳原子，并且其存在形式可以是旋光纯对映异构体，例如外消旋物的对映异构体混合物，旋光纯非对映异构体，非对映异构体混合
物，非对映异构体的外消旋物或非对映异构体的外消旋物的混合物。可以通过例如外消旋物的拆分，通过不对称合成或不对称色谱法(使用手性吸附剂或洗脱剂的色谱法)，获得旋光活性形式。本发明包括所有这些形式。
[0008]
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
[0009]
一方面，本发明提供一种式(ⅰ)结构的化合物或其可药用的盐：
[0010][0011]
其中：
[0012]
x为o，s，nh，n(c1‑9烷基)，n(被羟基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基)，n(未取代的或独立地被氟，氯，羟基单
‑
或二
‑
取代的苯基)，n(未取代的或独立地被氟，氯，羟基单
‑
或二
‑
取代的喹啉基)或n(未取代的或独立地被氟，氯，羟基单
‑
或二
‑
取代的异喹啉基)；
[0013]
r1选自未取代的或独立地被以下基团单
‑
、二
‑
或三
‑
取代的苯基，吡啶基，萘基，喹啉基和异喹啉基：氟，氯，氰基，c1‑9‑
烷氧基，被羟基和/或氨基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基，羟基，羧基，氨基，氨基羰基，氨基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，c1‑9‑
烷基羰基，c1‑9‑
烷基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，c1‑9‑
烷基羰基氨基，c1‑9‑
烷基羰基氨基
‑
c1‑9‑
烷基，c1‑9‑
烷氧基羰基氨基，c1‑9‑
烷基磺酰基或氨基磺酰基；
[0014]
r2选自：
[0015]
‑
h，
[0016]
‑
羟基，
[0017]
‑
氨基，
[0018]
‑
c1‑9‑
烷基或被羟基和/或氨基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基，
[0019]
‑
c1‑9‑
卤代烷基，
[0020]
c1‑9‑
烷氧基，
[0021]
‑
c1‑9‑
烷氧基
‑
c1‑9烷基，
[0022]
c1‑9‑
烷基羰基，
[0023]
c1‑9‑
烷基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0024]
氨基羰基，
[0025]
氨基羰基
‑
c1‑9烷基，
[0026]
c1‑9‑
烷基羰基氨基，
[0027]
c1‑9‑
烷基羰基氨基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0028]
‑
杂环基，
[0029]
‑
杂环基
‑
c1‑9‑
烷基；
[0030]
环a选自苯基、吡啶基或吡嗪基；
[0031]
r3和r4相互独立地为氢，氟，氯，羟基，被羟基和/或氨基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基，羧基，三氟甲基，氨基，氨基羰基，氨基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，c1‑9‑
烷基羰基，c1‑9‑
烷基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，c1‑9‑
烷基羰基氨基，c1‑9‑
烷基羰基氨基
‑
c1‑9‑
烷基，c1‑9‑
烷基磺酰基或氨基磺酰基；不同时为氢；
[0032]
r5选自：
[0033]
‑
c1‑9‑
烷基或被羟基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基，
[0034]
‑
c1‑9‑
卤代烷基，
[0035]
c1‑9‑
烷氧基，
[0036]
‑
c1‑9‑
烷氧基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0037]
c1‑9‑
烷基羰基，
[0038]
‑
c1‑9‑
羰基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0039]
‑
环烷基，其是未取代的或是独立地被羟基单
‑
或二
‑
取代的，
[0040]
‑
环烷基
‑
c1‑9‑
烷基，其是未取代的或是独立地被羟基单
‑
或二
‑
取代的，
[0041]
‑
杂环基，
[0042]
‑
杂环基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0043]
并且其中，
[0044]“环烷基”是指3至10个碳原子的一价单碳环或多碳环基团，
[0045]“杂环基”选自吗啉基，哌嗪基，哌啶基，吡咯烷基，四氢吡喃基，四氢呋喃基或1,3
‑
二烷基。
[0046]
在一个优选的实施方案中，本发明涉及式(ⅰ)化合物或其可药用的盐，其中：
[0047]
x为o，nh，n(c1‑9烷基)，n(未取代的或独立地被氟，氯，羟基单
‑
或二
‑
取代的苯基)或n(未取代的或独立地被氟，氯，羟基单
‑
或二
‑
取代的喹啉基)；
[0048]
r1选自未取代的或独立地被取代基团单
‑
或二
‑
取代的苯基，吡啶基，喹啉基；所述取代基团选自氟，氯，c1‑9‑
烷氧基，被羟基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基，羟基，氨基羰基，氨基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，c1‑9‑
烷基羰基，c1‑9‑
烷基羰基氨基，c1‑9‑
烷氧基羰基氨基或c1
‑9‑
烷基磺酰基；
[0049]
r2选自：
[0050]
‑
h，
[0051]
‑
羟基，
[0052]
‑
c1‑9‑
烷基或被羟基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基，
[0053]
‑
c1‑9‑
烷氧基
‑
c1‑9烷基，
[0054]
c1‑9‑
烷基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0055]
氨基羰基，
[0056]
c1‑9‑
烷基羰基氨基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0057]
‑
杂环基，
[0058]
环a选自苯基或吡啶基；
[0059]
r3和r4相互独立地为氢，氟，氯，羟基，被羟基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基，三氟甲基，氨基羰基，氨基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，c1‑9‑
烷基羰基，c1‑9‑
烷基羰基氨基，c1‑9‑
烷基磺酰基或氨基磺酰基；不同时为氢；
[0060]
r5选自：
[0061]
‑
c1‑9‑
烷基或被羟基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基，
[0062]
‑
c1‑9‑
烷氧基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0063]
‑
c1‑9‑
烷基羰基
‑
c1‑9‑
烷基，
[0064]
‑
环烷基，其是未取代的或是独立地被羟基单
‑
或二
‑
取代的，
[0065]
环烷基
‑
c1‑9‑
烷基，其是未取代的或是独立地被羟基单
‑
或二
‑
取代的，
[0066]
‑
杂环基。
[0067]
在更优选的实施方案中，本发明涉及具有下式的式(ⅰa)化合物或其可药用的盐：
[0068][0069]
其中：
[0070]
z选自c和n；
[0071]
z为c时，r
a
和r
b
相互独立地为f，cl，h，ch3o
‑
，且当z为n时：r
a
为cl，r
b
为h；
[0072]
r3和r4相互独立地为f，cl，h或ch3so2‑
，且二者不同时为h；当r3和r4均不为h时，二者不相邻。
[0073]
进一步优选的是具有式(ⅰa)结构的化合物或其可药用的盐，其中：
[0074]
z选自c和n；
[0075]
z为c时，r
a
和r
b
相互独立地为f，cl，h，ch3o
‑
，且当z为n时：r
a
为cl，r
b
为h；
[0076]
r3和r4相互独立地为f或h，且二者不同时为h；当r3和r4均为f时，二者不相邻。
[0077]
特别优选的是如下化合物：
[0078][0079][0080]
另一方面，本发明提供一种制备式(ⅰ)结构化合物的方法，该方法包括以下步骤：
[0081]
(1)式1化合物在碱存在下与式2化合物反应，得到式3化合物；
[0082]
(2)式3化合物使用卤化剂处理，得到式4化合物；
[0083]
(3)式4化合物在碱存在下，与式5化合物或该化合物的酸式盐反应，得到式6化合物；
[0084]
(4)式6化合物水解后得到式7化合物；
[0085]
(5)式7化合物在偶联剂存在下，与式8化合物反应得到式(ⅰ)化合物；
[0086]
其中，r1，r2，r3，r4和r5的定义如上所述；r6和r7选自甲基或乙基；x为o，y为氯或溴：
[0087][0088]
优选地，在步骤(1)中，所述碱为三乙烯二胺(dabco)；在步骤(2)中，所述卤化剂为n
‑
氯代琥珀酰亚胺(ncs)或n
‑
溴代琥珀酰亚胺(nbs)；在步骤(3)中，所述酸式盐为盐酸盐，所述碱为三乙胺(tea)或n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea)；在步骤(4)中，所述水解反应在碱如氢氧化锂或氢氧化锂一水合物的作用下进行；在步骤(5)中，所述偶联剂为1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl)或苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop)或草酰氯；
[0089]
其中，式8化合物可选用如下两种方法之一制备：
[0090]
方法一包括以下步骤：
[0091]
(1)式9化合物在碱存在下，与式10化合物反应得到式11化合物；
[0092]
(2)式11化合物在碱存在下，脱去乙酰基得到式8化合物；
[0093][0094]
其中，r2，r3，r4和y的定义如前所述；
[0095]
优选地，在步骤(1)中，所述碱为碳酸钠或碳酸钾；在步骤(2)中，所述碱为氢氧化钠或氢氧化钾；
[0096]
方法二步骤：
[0097]
将式12化合物在碱存在下，直接与式10化合物反应得到式8化合物；
[0098][0099]
其中，r2，r3，r4和y的定义如前所述；
[0100]
优选地，在上述步骤中，所述碱为碳酸钠或碳酸钾。
[0101]
再一方面，本发明提供另一种制备式(ⅰ)结构化合物的方法，该方法包括以下步骤：
[0102]
(1)式5化合物在碱存在下与式13化合物反应，得到式14化合物；
[0103]
(2)式14化合物在碱性条件下水解，得到式15化合物；
[0104]
(3)式15化合物在偶联剂存在下，与式8化合物反应得到式16化合物；
[0105]
(4)式16化合物在甲磺酸和冰乙酸作用下，与式2化合物反应得到式(ⅰ)化合物；
[0106][0107]
其中，r1，r2，r3，r4，r5，r6，r7和y的定义如上所述；x为nh，n(c1‑9烷基)，n(被羟基单
‑
或二
‑
取代的c1‑9‑
烷基)，n(未取代的或独立地被氟，氯，羟基单
‑
或二
‑
取代的苯基)，n(未取代的或独立地被氟，氯，羟基单
‑
或二
‑
取代的喹啉基)或n(未取代的或独立地被氟，氯，羟基单
‑
或二
‑
取代的异喹啉基)；
[0108]
优选地，在步骤(1)中，所述碱为三乙胺或n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea)；在步骤(2)中，所述碱为氢氧化钠或氢氧化钾；在步骤(3)中，所述偶联剂为1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl)或苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop)或草酰氯；
[0109]
其中，式8化合物可用如前所述的方法制备；式5化合物和式13化合物可以为市售化学原料或者按照本领域内常规方法制备。
[0110]
再一方面，本发明提供式(ⅰ)结构的化合物在制备用于预防和/或治疗代谢疾病和紊乱，如糖尿病的药物中的用途。
[0111]
又一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含本发明所述的式(ⅰ)结构的化合物和药学上可接受的载体或赋形剂。
[0112]
式(ⅰ)化合物可以含有一个或多个不对称碳原子，并且其存在形式可以是旋光纯对映异构体，例如外消旋物的对映异构体混合物、旋光纯非对映异构体、非对映异构体混合物、非对映异构体的外消旋物或非对映异构体的外消旋物的混合物。可以通过例如外消旋物的拆分，通过不对称合成或不对称色谱法(使用手性吸附剂或洗脱剂的色谱法)，获得旋光活性形式。本发明包括所有这些形式。
[0113]
如本文所用，术语“药用盐”是指包括无机或有机碱和无机或有机酸在内的可药用的无毒碱或酸制备而成的式(ⅰ)化合物的盐。无机碱盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。来自可药用的有机无毒碱的盐包括伯胺盐、仲胺盐和叔胺盐，具有取代基的胺包括天然产生的具有取代基的胺、环胺、以及碱性
pharmaceutical sciences(e.w.martin著)中。在任何情况下，这样的组合物将含有与适宜的载体在一起的有效量的活性化合物，以制备用于给受试者适宜给药的适宜剂量形式。
具体实施方式
[0119]
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。需要说明的是，下述实施例仅是用于说明，而并非用于限制本发明。本领域技术人员根据本发明的教导所做出的各种变化均应在本技术权利要求所要求的保护范围之内。
[0120]
化合物的结构是通过核磁共振氢谱(1h
‑
nmr)和/或质谱(ms)来确定的。nmr位移(δ)以10
‑6(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker av400型核磁共振波谱仪。
[0121]
ms的测定是用thermo scientific(esi)质谱仪进行的。
[0122]
柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
[0123]
本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买于百灵威科技，阿拉丁科技等公司。
[0124]
氮气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氮气气球。
[0125]
实施例中如无特殊说明，反应在氮气氛下进行。
[0126]
实施例中如无特殊说明，溶液是指水溶液。
[0127]
实施例中如无特殊说明，反应温度是室温。
[0128]
室温为最适宜的反应温度，为20～30℃。
[0129]
实施例1化合物
ⅰ‑
1的合成
[0130][0131]
a.
[0132]
将3
‑
氨基吡唑(1.22g，14.68mmol)在乙酸乙酯(10ml)中的溶液加热到45℃，然后于该温度下缓慢滴加乙酸酐(1.35g，13.21mmol)，滴加完毕后，于该温度保持6h。将混合物冷却至25℃，加入乙酸乙酯(20ml)，并且于该温度保持2h，然后将溶液过滤得到不溶物，得到纯品9
‑
1(1.80g，98％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c5h7n3o[m]

125，测量值[m h]

126。
[0133]
b.
[0134]
将化合物9
‑
1(1.65g，13.19mmol)和2,4
‑
二氟苄溴(3.01g，14.53mmol)在n，n
‑
二甲基甲酰胺(dmf，50ml)中的悬浮液用碳酸钠(3.50g，32.98mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持5h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且
由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品11
‑
1(2.19g，66％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
11
f2n3o[m]

251，测量值[m h]

252。
[0135]
c.
[0136]
将化合物11
‑
1(2.00g，7.96mmol)加入到氢氧化钠(0.96g，24.01mmol)和水(2.81g，155.98mmol)和乙醇(25ml)配成的溶液中，然后将混合物加热至回流，并且于该温度保持8h。将混合物冷却至25℃，浓缩至干，加入水(20ml)，用乙酸乙酯(3
×
30ml)萃取，将合并的乙酸乙酯部分用硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到纯品8
‑
1(1.53g，92％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
10
h9f2n3[m]

209，测量值[m h]

210。
[0137]
d.
[0138]
在氮气气氛下，向2
‑
氯苯酚(2.46g，19.13mmol)和2
‑
丁炔酸乙酯(1.79.g，15.92mmol)在乙腈(15ml)中的搅拌混合物中，逐渐加入三乙烯二胺(dabco，0.64g，5.74mmol)，在加入完成后，将混合物在回流下搅拌8h。在反应完成后，向混合物中加入水(10ml)和甲基叔丁基醚(20ml)，在搅拌下用浓盐酸调节水相的ph＜3，再将有机相用氢氧化钠水溶液(1mol/l，2
×
10ml)洗涤，并用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品3
‑
1(2.65g，69％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
13
clo3[m]

240，测量值[m h]

241。
[0139]
e.
[0140]
在氮气气氛下，向溶解于四氯化碳(25ml)中的化合物3
‑
1(2.63g，10.91mmol)的搅拌混合物中，加入n
‑
溴代琥珀酰亚胺(nbs，3.34g，18.55mmol)和过氧化苯甲酰(bpo，0.57g，1.63mmol)。在加入完成后，将混合物在回流下搅拌20h。将反应混合物冷却至室温，将琥珀酰亚胺通过过滤除去并且将溶剂在真空中除去，将得到的粗制产物由柱色谱(0％至50％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品4
‑
1(3.31g，95％):lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
12
brclo3[m]

318，测量值[m 2h]

320。
[0141]
f.
[0142]
在氮气气氛下，向溶解于乙腈(50ml)中的化合物5
‑
1(1.82g，9.82mmol)的搅拌混合物中，加入n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.37g，10.18mmol)。在加入完成后，将混合物于100℃搅拌2h。将反应物冷却至25℃，并且用n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.37g，10.18mmol)处理且加热至100℃，在此时，慢慢地加入在乙腈(12ml)中的4
‑
1(2.85g，8.91mmol)。在加入完成后，将反应混合物加热至100℃并且搅拌20h。将反应混合物冷却至25℃，过滤并且浓缩。将剩余物用二氯甲烷稀释且用2n盐酸水溶液，饱和氯化钠溶液洗涤并且用硫酸镁干燥。将得到的粗制产物由柱色谱(0％至50％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品6
‑
1(1.87g，62％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
17
h
20
clno4[m]

337，测量值[m h]

338。
[0143]
g.
[0144]
向化合物6
‑
1(1.56g，4.62mmol)在四氢呋喃(15ml)中的搅拌混合物中，加入在水(7ml)中的氢氧化锂(235mg，5.56mmol)。在加入完成后，将混合物于25℃搅拌1h。将反应混合物倾倒入水和二乙醚中并且进行层分离。用2n盐酸水溶液使水层为酸性并且用二氯甲烷萃取。将合并的二氯甲烷部分用饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到纯品7
‑
1(1.38g，92％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
16
h
18
clno4[m]

323，测量值[m h]

324。
[0145]
h.
[0146]
将化合物7
‑
1(0.761g，2.01mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙
基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl，0.42g，2.19mmol)和1
‑
羟基苯并三氮唑(hobt,0.32g，2.37mmol)处理，将反应混合物于25℃搅拌15min，接着加入化合物8
‑
1(0.42g，2.01mmol)，将反应混合物于25℃，在氮气保护下搅拌12h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，水洗，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，柱色谱(30％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
1(0.77g，76％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
25
clf2n4o3[m]

514，测量值[m h]

515,1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δppm 0.89(m，6h)1.40
‑
1.45(m，1h)1.51
‑
1.58(m，1h)1.69
‑
1.77(m，1h)4.18(d,1h)4.58(d,1h)4.77(s,1h)4.85(t,1h)5.54(d,2h)6.46(d,1h)7.05
‑
7.09(m,1h)7.22
‑
7.37(m,3h)7.43
‑
7.51(m,2h)7.64(d,1h)7.72(d,1h)10.79(s,1h)。
[0147]
实施例2化合物
ⅰ‑
2的合成
[0148][0149]
a.
[0150]
将3
‑
乙酰氨基吡唑(如在实施例1中制备，1.55g，12.40mmol)和2
‑
氟
‑4‑
氯苄氯(2.45g，13.66mmol)在n，n
‑
二甲基甲酰胺(dmf，60ml)中的悬浮液用碳酸钾(4.28g，31.00mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持5h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品11
‑
2(2.26g，68％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
11
clfn3o[m]

267，测量值[m h]

268。
[0151]
b.
[0152]
将化合物11
‑
2(2.02g，7.56mmol)加入到氢氧化钠(0.90g，22.5mmol)和水(2.67g，148.18mmol)和乙醇(24ml)配成的溶液中，然后将混合物加热至回流，并且于该温度保持6h。将混合物冷却至25℃，浓缩至干，加入水(20ml)，用乙酸乙酯(3
×
30ml)萃取，将合并的乙酸乙酯部分用硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到纯品8
‑
2(1.59g，93％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
10
h9clfn3[m] 225，测量值[m h] 226。
[0153]
c.
[0154]
在氮气气氛下，向2
‑
氯苯酚(2.07g，16.14mmol)和2
‑
丁炔酸甲酯(1.32g，13.43mmol)在乙腈(15ml)中的搅拌混合物中，逐渐加入三乙烯二胺(dabco，0.54g，4.84mmol)，在加入完成后，将混合物在回流下搅拌6h。在反应完成后，向混合物中加入水(10ml)和二乙醚(20ml)，在搅拌下用浓盐酸调节水相的ph＜3，再将有机相用氢氧化钠水溶液(1mol/l，2
×
10ml)洗涤，并用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品3
‑
2(2.34g，77％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
11
clo3[m]

226，测量值[m h]

227。
[0155]
d.
[0156]
在氮气气氛下，向溶解于四氯化碳(30ml)中的化合物3
‑
2(2.22g，9.79mmol)的搅拌混合物中，加入n
‑
氯代琥珀酰亚胺(ncs，2.22g，16.65mmol)和偶氮二异丁腈(aibn，0.24g，1.46mmol)。在加入完成后，将混合物在回流下搅拌18h。将反应混合物冷却至室温，将琥珀酰亚胺通过过滤除去并且将溶剂在真空中除去，将得到的粗制产物由柱色谱(0％至80％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品4
‑
2(2.57g，86％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
10
brclo3[m]

304，测量值[m 2h]

306。
[0157]
e.
[0158]
将化合物5
‑
1(1.22g，6.73mmol)在乙腈(20ml)中的悬浮液用三乙胺(0.96ml，6.89mmol)处理。然后将混合物加热至60℃，并且于该温度保持1h。然后，经由注射器滴加另外的n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.14ml，6.89mmol)，接着滴加在乙腈中的4
‑
2(1.87g，6.12mmol)然后在氮气下，将混合物通过下降进入保持在100℃的预热油浴中而加热至回流15h。将混合物冷却至25℃，并且将沉淀的n，n
‑
二异丙基乙铵盐酸盐过滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品6
‑
1(1.30g，63％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
17
h
20
clno4[m]

337，测量值[m h]

338。
[0159]
f.
[0160]
向在四氢呋喃(10ml)中含有化合物6
‑
1(1.16g，3.43mmol)的溶液，用一水合氢氧化锂(180.1mg，4.22mmol)在水(7ml)中的水溶液处理。将混合物于25℃搅拌2h，然后将其用2n盐酸水溶液酸化。将混合物用二氯甲烷(2
×
20ml)萃取。将合并后的有机层用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品7
‑
1(1.07g，96％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
16
h
18
clno4[m]

323，测量值[m h]

324。
[0161]
g.
[0162]
将化合物7
‑
1(0.51g，1.58mmol)，化合物8
‑
2(0.39g，1.74mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，0.84g1.90mmol)，三乙胺(0.56g，5.53mmol)于二氯甲烷(10ml)中，氮气保护下室温下搅拌24h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，用2n盐酸，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，由柱色谱(10％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
2(0.66g，79％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
25
cl2fn4o3[m]

530，测量值[m h]

531,δppm 0.88(m，6h)1.40
‑
1.46(m，1h)1.52
‑
1.58(m，1h)1.69
‑
1.77(m，1h)4.16(d,1h)4.55(d,1h)4.76(s,1h)4.86(t,1h)5.56(d,2h)6.47(d,1h)7.03
‑
7.07(m,1h)7.22
‑
7.41(m,3h)7.44
‑
7.52(m,2h)7.63(d,1h)7.72(d,1h)10.80(s,1h)。
[0163]
实施例3化合物
ⅰ‑
3的合成
[0164][0165]
a.
[0166]
在氮气气氛下，向2
‑
氯苯酚(1.71g，15.26mmol)和2
‑
丁炔酸乙酯(1.43.g，12.70mmol)在乙腈(15ml)中的搅拌混合物中，逐渐加入三乙烯二胺(dabco，0.51g，4.58mmol)，在加入完成后，将混合物在回流下搅拌10h。在反应完成后，向混合物中加入水(10ml)和甲基叔丁基醚(20ml)，在搅拌下用浓盐酸调节水相的ph＜3，再将有机相用氢氧化钠水溶液(1mol/l，2
×
10ml)洗涤，并用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品3
‑
3(2.08g，73％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
13
fo3[m]

224，测量值[m h]

225。
[0167]
b.
[0168]
在氮气气氛下，向溶解于四氯化碳(25ml)中的化合物3
‑
3(1.99g，8.88mmol)的搅拌混合物中，加入n
‑
溴代琥珀酰亚胺(nbs，2.72g，15.10mmol)和偶氮二异丁腈(aibn,0.22g，1.33mmol)。在加入完成后，将混合物在回流下搅拌20h。将反应混合物冷却至室温，将琥珀酰亚胺通过过滤除去并且将溶剂在真空中除去，将得到的粗制产物由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品4
‑
3(2.34g，87％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
12
brfo3[m]

302，测量值[m 2h]

304。
[0169]
c.
[0170]
将化合物5
‑
1(1.93g，8.73mmol)在乙腈(20ml)中的悬浮液用n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.48ml，8.94mmol)处理。然后将混合物加热至回流，并且于该温度保持2h。然后，经由注射器滴加另外的n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.48ml，8.94mmol)，接着滴加在乙腈中的化合物4
‑
3(2.41g，7.94mmol)然后在氮气下，将混合物通过下降进入保持在100℃的预热油浴中而加热至回流18h。将混合物冷却至25℃，并且将沉淀的n，n
‑
二异丙基乙铵盐盐酸盐过滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品6
‑
2(1.71g，67％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
17
h
20
fno4[m]

321，测量值[m h]

322。
[0171]
d.
[0172]
向在四氢呋喃(10ml)中含有化合物6
‑
2(1.61g，5.01mmol)的溶液，用一水合氢氧化锂(244.4mg，5.73mmol)在水(10ml)中的水溶液处理。将混合物于25℃搅拌3h，然后将其用2n盐酸水溶液酸化。将混合物用二氯甲烷(2
×
20ml)萃取。将合并后的有机层用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品7
‑
2(1.43g，93％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
16
h
18
fno4[m]

307，测量值[m h]

308。
[0173]
e.
[0174]
向化合物7
‑
2(0.26g,0.85mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入草酰氯(0.12,0.94mmol)，并滴加1滴n,n
‑
二甲基甲酰胺，在加入完成后，将混合物于40℃氮气保护下搅拌2h。然后在冰水浴冷却下，加入化合物8
‑
1(如在实施例1中制备，0.20g,0.94mmol)，n,n
‑
二异丙基乙胺(dipea，0.16g,1.28mmol)，4
‑
二甲氨基吡啶(dmap,0.1g,0.82mmol)，在加入完成后，将混合物升温回流，氮气保护下搅拌48h。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。由柱色谱(10％至85％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
3(0.18g，38％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
25
f3n4o3[m]

498，测量值[m h]

499,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.90(dd，6h)1.43(m，1h)1.55(m，1h)1.71(m，1h)4.18(d,1h)4.58(d,1h)4.77(s,1h)4.86(t,1h)5.30(d,2h)6.49(d,1h)7.13
‑
7.16(m,1h)7.19
‑
7.24(m,1h)7.33
‑
7.38(m，1h)7.43
‑
7.51(m,3h)7.63(t,1h)7.73(d,1h)10.80(s,1h)。
[0175]
实施例4化合物
ⅰ‑
4的合成
[0176][0177]
a.
[0178]
将化合物12(0.94g，11.30mmol)和化合物10
‑
3(2.58g，12.45mmol)在乙腈(50ml)中的悬浮液用碳酸钾(3.91g，28.28mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持8h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至50％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到纯品8
‑
3(1.35g，57％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
10
h9f2n3[m]

209，测量值[m h]

210。
[0179]
b.
[0180]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.28g，0.85mmol)，化合物8
‑
3(0.19g，0.93mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，0.41g，0.93mmol)，n,n
‑
二异丙基乙胺(dipea，0.27g，2.13mmol)于二氯甲烷(10ml)中，氮气保护下室温下搅拌24h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，由柱色谱(10％至60％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
4(0.23g，53％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
25
clf2n4o3[m]

514，测量值[m h]

515，1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.89(dd，6h)1.45(m，1h)1.57(m，1h)1.71(m，1h)4.23(d,1h)4.60(d,1h)4.71(s,1h)4.88(t,1h)5.34(d,2h)6.51(d,1h)7.09
‑
7.14(m,1h)7.22
‑
7.29(m,1h)7.35
‑
7.40(m，2h)7.49
‑
7.54(m,3h)7.66(d,1h)10.71(s,1h)。
[0181]
实施例5化合物
ⅰ‑
5的合成
[0182][0183]
a.
[0184]
将化合物12(0.77g，9.27mmol)和化合物8
‑
4(2.11g，10.21mmol)在乙腈(40ml)中的悬浮液用碳酸钠(2.46g，23.18mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持6h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至50％甲
醇/二氯甲烷)纯化，得到纯品8
‑
4(1.18g，61％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
10
h9f2n3[m]

209，测量值[m h]

210。
[0185]
b.
[0186]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.30g，0.85mmol)，化合物8
‑
4(0.21g，1.02mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，0.45g，1.02mmol)，n,n
‑
二异丙基乙胺(dipea，0.27g，2.13mmol)于二氯甲烷(10ml)中，氮气保护下室温下搅拌24h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，由柱色谱(10％至60％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
5(0.34g，77％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
25
clf2n4o3[m]

544，测量值[m h]

545,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm0.91(dd，6h)1.47(m，1h)1.59(m，1h)1.73(m，1h)4.25(d,1h)4.63(d,1h)4.74(s,1h)4.89(t,1h)5.36(d,2h)6.55(d,1h)7.09
‑
7.14(m,1h)7.19(m,1h)7.23
‑
7.31(m,2h)7.35
‑
7.40(m，2h)7.49
‑
7.54(m,2h)10.71(s,1h)。
[0187]
实施例6化合物
ⅰ‑
6的合成
[0188][0189]
a.
[0190]
将化合物9
‑
1(1.46g，11.66mmol)和化合物10
‑
5(2.66g，12.85mmol)在n，n
‑
二甲基甲酰胺(dmf，50ml)中的悬浮液用碳酸钾(4.03g，29.15mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持6h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品11
‑
3(1.99g，68％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
11
f2n3o[m]

251，测量值[m h]

252。
[0191]
b.
[0192]
将化合物11
‑
3(1.88g，7.48mmol)加入到氢氧化钾(1.27g，22.57mmol)和水(2.64g，146.62mmol)和乙醇(25ml)配成的溶液中，然后将混合物加热至回流，并且于该温度保持5h。将混合物冷却至25℃，浓缩至干，加入水(20ml)，用乙酸乙酯(3
×
30ml)萃取，并且用硫酸镁干燥。然后滤去不溶物，将上清液浓缩至干，得到纯品8
‑
5(1.47g，94％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
10
h9f2n3[m]

209，测量值[m h]

210。
[0193]
c.
[0194]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.51g，2.01mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl，0.42g，2.19mmol)和1
‑
羟基苯并三氮唑(hobt，0.32g，2.37mmol)处理，将反应混合物于25℃搅拌15min，接着加入化合物
ⅷ‑
3(0.42g，2.01mmol)，将反应混合物于25℃，在氮气保护下搅拌12h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，水洗，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，柱色谱(30％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
6(0.61g，68％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
26
f2n4o3[m]

480，测量值[m h]

481,1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δppm 0.92(dd，6h)1.45(m，1h)1.57(m，1h)1.75(m，1h)4.19(d,1h)4.60(d,1h)4.78(s,1h)4.88(t,1h)5.32(d,2h)6.52(d,1h)7.14
‑
7.17(m,1h)7.20
‑
7.24(m,1h)7.35
‑
7.39(m，1h)7.46
‑
7.52(m,3h)7.65(t,1h)7.74(d,1h)10.83(s,1h)。
[0195]
实施例7化合物
ⅰ‑
7的合成
[0196][0197]
a.
[0198]
在氮气气氛下，向2
‑
氯
‑3‑
甲氧基苯酚(2.00g，16.14mmol)和2
‑
丁炔酸甲酯(1.32g，13.43mmol)在乙腈(15ml)中的搅拌混合物中，逐渐加入三乙烯二胺(dabco，0.54g，4.84mmol)，在加入完成后，将混合物在回流下搅拌6h。在反应完成后，向混合物中加入水(10ml)和二乙醚(20ml)，在搅拌下用浓盐酸调节水相的ph＜3，再将有机相用氢氧化钠水溶液(1mol/l，2
×
10ml)洗涤，并用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品3
‑
4(2.21g，74％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
14
o4[m]

270，测量值[m h]

271。
[0199]
b.
[0200]
在氮气气氛下，向溶解于四氯化碳(30ml)中的化合物3
‑
4(2.18g，9.79mmol)的搅拌混合物中，加入n
‑
溴琥珀酰亚胺(nbs，3.00g，16.65mmol)和过氧化苯甲酰(bpo，0.51g，1.46mmol)。在加入完成后，将混合物在回流下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，将琥珀酰亚胺通过过滤除去并且将溶剂在真空中除去，将得到的粗制产物由柱色谱(0％至80％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品4
‑
4(2.56g，87％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
13
bro4[m]

300，测量值[m 2h]

302。
[0201]
c.
[0202]
在氮气气氛下，向溶解于乙腈(40ml)中的化合物5
‑
2(1.61g，8.67mmol)的搅拌混合物中，加入n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.21g，8.99mmol)。在加入完成后，将混合物于100℃搅拌2h。将反应物冷却至25℃，并且用n，n
‑
二异丙基乙胺(1.21g，8.99mmol)处理且加热至100℃，在此时，慢慢地加入在乙腈(10ml)中的化合物4
‑
4(2.75g，7.87mmol)。在加入完成后，将反应混合物加热至100℃并且搅拌18h。将反应混合物冷却至25℃，过滤并且浓缩。将剩余物用二氯甲烷稀释且用2n盐酸水溶液，饱和氯化钠溶液洗涤并且用硫酸镁干燥。将得到的粗制产物由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品6
‑
3(1.64g，60％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
19
h
25
no5[m]

347，测量值[m h]

348。
[0203]
d.
[0204]
向化合物6
‑
3(1.57g，4.51mmol)在四氢呋喃(15ml)中的搅拌混合物中，加入在水
(7ml)中的氢氧化锂(230mg，5.43mmol)。在加入完成后，将混合物于25℃搅拌1.5h。将反应混合物倾倒入水和甲基叔丁基醚中并且进行层分离。用2n盐酸水溶液使水层为酸性并且用二氯甲烷萃取。将合并的二氯甲烷部分用饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到纯品7
‑
3(1.52g，95％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
17
h
21
no5[m]

319，测量值[m h]

320。
[0205]
e.
[0206]
将化合物7
‑
3(0.27g，0.85mmol)，化合物8
‑
1(如在实施例1中制备，0.19g，0.93mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，0.41g，0.93mmol)，n,n
‑
二异丙基乙胺(dipea，0.27g，2.13mmol)于二氯甲烷(10ml)中，氮气保护下室温下搅拌24h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，由柱色谱(10％至60％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
7(0.33g，76％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
27
h
28
f2n4o4[m]

510，测量值[m h]

511,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.88(m，6h)1.40
‑
1.46(m，1h)1.52
‑
1.58(m，1h)1.69
‑
1.77(m，1h)3.71(s,3h)4.16(d,1h)4.55(d,1h)4.76(s,1h)4.86(t,1h)5.56(d,2h)6.47(d,1h)7.03
‑
7.07(m,1h)7.22
‑
7.41(m,3h)7.44
‑
7.52(m,2h)7.63(d,1h)7.72(d,1h)10.80(s,1h)。
[0207]
实施例8化合物
ⅰ‑
8的合成
[0208][0209]
a.
[0210]
将化合物9
‑
1(1.50g，11.99mmol)和化合物10
‑
6(2.68g，13.19mmol)在二氯甲烷(50ml)中的悬浮液用碳酸钾(2.49g，17.99mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持6h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至50％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品11
‑
4(2.34g，79％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
13
h
14
fn3o[m]

247，测量值[m h]

248。
[0211]
b.
[0212]
将化合物11
‑
4(2.30g，9.31mmol)加入到氢氧化钾(1.57g，27.94mmol)和水(3.35g，186.20mmol)和乙醇(30ml)配成的溶液中，然后将混合物加热至回流，并且于该温度保持8h。将混合物冷却至室温，浓缩至干，加入水(50ml)，用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取，将合并的乙酸乙酯部分用无水硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到纯品8
‑
6(1.38g，72％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
12
fn3[m]

205，测量值[m h]

206。
[0213]
c.
[0214]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.30g，0.93mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl，0.21g，1.12mmol)和1
‑
羟基苯
并三氮唑(hobt，0.18g，1.30mmol)处理，将反应混合物于25℃搅拌30min，接着加入化合物8
‑
6(0.21g，1.02mmol)，将反应混合物于室温在氮气保护下搅拌24h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，水洗，用无水硫酸钠干燥并浓缩，柱色谱(20％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，提供纯品
ⅰ‑
8(0.25g，53％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
26
clfn4o3[m]

510，测量值[m h]

511,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.90(dd，6h)1.40
‑
1.46(m，1h)1.52
‑
1.60(m，1h)1.70
‑
1.77(m，1h)4.18(d,1h)4.56(d,1h)4.77(s,1h)4.86(q,1h)5.51(q,1h)6.46(d,1h)7.12
‑
7.16(m,2h)7.23
‑
7.27(m，2h)7.33
‑
7.37(m,1h)7.43
‑
7.51(m,2h)7.63(d,1h)7.74(,1h)10.79(s,1h)。
[0215]
实施例9化合物
ⅰ‑
9的合成
[0216][0217]
a.
[0218]
在氮气气氛下，向3
‑
羟基
‑2‑
氯吡啶(2.02g，15.56mmol)和2
‑
丁炔酸乙酯(1.46g，12.95mmol)在乙腈(20ml)中的搅拌混合物中，逐渐加入三乙烯二胺(dabco，0.52g，4.67mmol)，在加入完成后，将混合物在回流下搅拌24h。在反应完成后，向混合物中加入水(15ml)和甲基叔丁基醚(25ml)，在搅拌下用浓盐酸调节水相的ph＜3，再将有机相用氢氧化钠水溶液(1mol/l，2
×
15ml)洗涤，并用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品3
‑
5(2.00g，64％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
12
clo3[m]

241，测量值[m h]

242。
[0219]
b.
[0220]
在氮气气氛下，向溶解于四氯化碳(25ml)中的化合物3
‑
5(2.01g，8.31mmol)的搅拌混合物中，加入n
‑
溴琥珀酰亚胺(nbs，2.54g，14.13mmol)和偶氮二异丁腈(aibn，0.20g，1.24mmol)。在加入完成后，将混合物在回流下搅拌20h。将反应混合物冷却至室温，将琥珀酰亚胺通过过滤除去并且将溶剂在真空中除去，将得到的粗制产物由柱色谱(0％至80％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品4
‑
5(2.29g，86％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
11
brclo3[m]

319，测量值[m 2h]

321。
[0221]
c.
[0222]
将化合物5
‑
1(1.22g，6.73mmol)在乙腈(20ml)中的悬浮液用n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.14ml，6.89mmol)处理。然后将混合物加热至60℃，并且于该温度保持1h。然后，经由注射器滴加另外的n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.14ml，6.89mmol)，接着滴加在乙腈中的4
‑
5(1.96g，6.12mmol)然后在氮气下，将混合物通过下降进入保持在100℃的预热油浴中而加热至回流48h。将混合物冷却至25℃，并且将沉淀的n，n
‑
二异丙基乙铵盐盐酸盐过滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品6
‑
4(1.43g，69％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
16
h
19
cln2o4[m]

338，测量值[m h]

339。
[0223]
d.
[0224]
向在四氢呋喃(10ml)中含有6
‑
4(1.16g，3.43mmol)的溶液，用一水合氢氧化锂(180.1mg，4.22mmol)在水(7ml)中的水溶液处理。将混合物于25℃搅拌3h，然后将其用2n盐酸水溶液酸化。将混合物用二氯甲烷(2
×
20ml)萃取。将合并后的有机层用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品7
‑
4(0.96g，86％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
15
h
17
cln2o4[m]

324，测量值[m h]

325。
[0225]
e.
[0226]
将化合物7
‑
4(0.51g，1.58mmol)，化合物8
‑
1(如在实施例1中制备，0.36g，1.74mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，0.84g，1.90mmol)，三乙胺(tea，0.56g，5.53mmol)于二氯甲烷(10ml)中，氮气气氛下室温下搅拌24h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，用2n盐酸，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，由柱色谱(10％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
9(0.59g，72％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
25
h
24
clf2n5o3[m]

515，测量值[m h]

516,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.88(dd，6h)1.46(m，1h)1.52(m，1h)1.61(m，1h)4.01(d,1h)4.36(d,1h)4.67(m,1h)5.33(s,1h)5.58(s,2h)6.51(d,1h)6.61
‑
6.90(m,4h)7.21
‑
7.30(m,2h)7.71(m,1h)10.60(s,1h)。
[0227]
实施例10化合物
ⅰ‑
10的合成
[0228][0229]
a.
[0230]
将3
‑
氨基吡唑(0.94g，11.30mmol)和化合物10
‑
4(2.35g，12.45mmol)在乙腈(50ml)中的悬浮液用碳酸钾(3.91g，28.28mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持8h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至50％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到纯品8
‑
7(1.23g，57％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
10
h
10
fn3[m]

191，测量值[m h]

192。
[0231]
b.
[0232]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.30g,0.93mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl，0.21g，1.12mmol)和1
‑
羟基苯并三氮唑(hobt，0.18g，1.30mmol)处理，将反应混合物于25℃搅拌30min，接着加入化合物8
‑
7(0.20g，1.02mmol)，将反应混合物于室温在氮气保护下搅拌24h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，水洗，用无水硫酸钠干燥并浓缩，柱色谱(20％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
10(0.45g，53％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
26
clfn4o3[m]

496，测量值[m h]

497,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.90(dd，6h)1.42
‑
1.46(m，1h)1.52
‑
1.59(m，1h)1.70
‑
1.77(m，1h)4.18(d,1h)4.58(d,1h)4.77(s,1h)4.86(q,1h)5.19(s,2h)6.46(d,1h)7.15(t,2h)7.25
‑
7.28(m，2h)7.33
‑
7.37(m,1h)7.43
‑
7.50(m,2h)7.63(d,1h)7.73(d,1h)10.77(s,1h)。
[0233]
实施例11化合物
ⅰ‑
11的合成
[0234][0235]
a.
[0236]
将化合物5
‑
1(16.60g,84.83mmol)，三乙胺(tea，16.00g，0.158mol)和乙腈(200ml)，室温搅拌2h，然后加入化合物13
‑
1(15.04g,91.38mmol)，在氮气气氛下，于70
‑
80℃搅拌48h。反应体系减压浓缩至干，加入300ml二氯甲烷溶解，先后用1n盐酸(200ml)，水(200ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到纯品14
‑
1(13.71g，67％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
19
no4[m]

241，测量值[m h]

242。
[0237]
b.
[0238]
将化合物14
‑
1(8.20g，33.99mmol)加入到甲醇(190ml)中，搅拌溶解，然后加入氢氧化钠(5.44g，0.136mol)和水(50ml)配成的溶液，室温搅拌5h后，将体系减压浓缩至干，残留物加水(200ml)溶解，用二氯甲烷(3
×
100ml)萃取，水相用1n盐酸调节体系ph＜3，再用二氯甲烷(2
×
100ml)萃取，用无水硫酸钠干燥并浓缩用乙酸乙酯(20ml)超声打浆过滤得到纯品15(4.10g，53％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
17
no4[m]

227，测量值[m h]

228。
[0239]
c.
[0240]
将化合物15(3.60g,15.84mmol)在二氯甲烷(40ml)中的溶液用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl，0.39g，2.08mmol)和1
‑
羟基苯并三氮唑(hobt，0.35g，2.53mmol)处理，将反应混合物于25℃搅拌30min，接着加入化合物8
‑
1(如在实施例1中制备，3.00g，14.34mmol)，将反应混合物于室温在氮气保护下搅拌24h，用二氯甲烷(100ml)稀释，水(3
×
300ml)洗，用无水硫酸钠干燥并浓缩，柱色谱(20％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品16
‑
1(5.26g，79％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
21
h
24
f2n4o3[m]

418，测量值[m h]

419。
[0241]
d.
[0242]
将化合物16
‑
1(0.24g，0.57mmol)，化合物2
‑
1(0.08g，0.57mmol)和冰乙酸(3ml)，搅拌溶解后升温，在80℃下加入甲磺酸(0.11g，1.14mmol)，然后在80℃下搅拌1h，体系减压浓缩至干，残留物用二氯甲烷(10ml)溶解，10％碳酸钠水溶液(2
×
20ml)洗，水(3
×
20ml)洗，无水硫酸钠干燥并浓缩，柱色谱(20％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
11(0.15g，49％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
29
h
28
f2n6o2[m]

530，测量值[m h]

531,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.90(dd，6h)1.40(m，1h)1.51(m，1h)1.66(m，1h)4.00(d,1h)4.31(d,1h)4.61(m,1h)5.38(s,1h)5.55(s,2h)6.50(d,1h)6.71
‑
7.17(m,4h)7.32
‑
8.09(m,4h)
7.72(m,1h)8.89(s,1h)8.95(d,1h)10.60(s,1h)。
[0243]
实施例12化合物
ⅰ‑
12的合成
[0244][0245]
a.
[0246]
将化合物5
‑
2(16.60g，84.83mmol)，n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，20.42g，0.158mol)和乙腈(200ml)，室温搅拌2h，然后加入化合物13
‑
2(91.38mmol)，氮气保护下于70
‑
80℃搅拌48h。反应体系减压浓缩至干，加入二氯甲烷(300ml)溶解，先后用1n盐酸(200ml)，水(200ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到纯品14
‑
2(13.43g，62％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
13
h
21
no4[m]

255，测量值[m h]

256。
[0247]
b.
[0248]
将化合物14
‑
2(8.68g，33.99mmol)和甲醇(200ml)，搅拌溶解。然后加入氢氧化钾(7.63g，0.136mol)和水(50ml)配成的溶液，，室温搅拌5h。将体系减压浓缩至干，残留物加水(200ml)溶解，用二氯甲烷(3
×
100ml)萃取，水相用1n盐酸调节体系ph＜3，再用二氯甲烷(2
×
100ml)萃取，用无水硫酸钠干燥并浓缩，用乙酸乙酯(20ml)超声打浆过滤得到纯品15(4.48g,58％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
17
no4[m]

227，测量值[m h]

228。
[0249]
c.
[0250]
将化合物15(3.60g,15.84mmol)，化合物8
‑
1(如在实施例1中制备，3.00g，14.34mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，6.92g，15.66mmol)，三乙胺(tea，4.61g，45.57mmol)于二氯甲烷(80ml)中，在室温下搅拌24h。反应完毕，用二氯甲烷(100ml)稀释，水(3
×
300ml)洗，用无水硫酸钠干燥并浓缩，残留物用正己烷/乙酸乙酯(3:1)柱层析纯化，得到纯品16
‑
1(4.38g，73％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
21
h
24
f2n4o3[m]

418，测量值[m h]

419。
[0251]
d.
[0252]
将化合物16
‑
1(0.24g，0.57mmol)，化合物2
‑
2(0.10g，0.57mmol)和冰乙酸(3ml)，搅拌溶解后升温，在80℃下加入甲磺酸(0.11g，1.14mmol)，然后在80℃下搅拌1h，体系减压浓缩至干，残留物用二氯甲烷(10ml)溶解，10％碳酸钾水溶液(2
×
20ml)洗，水(3
×
20ml)洗，无水硫酸钠干燥并浓缩，柱色谱(20％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
11(0.14g，44％)：：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
32
h
31
f2n5o2[m]

555，测量值[m h]

556,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.90(dd,6h)1.34(s,1h)1.66(t,1h)1.87(t,1h)4.32(dd,1h)4.47(dd,1h)4.88(s,1h)4.92
‑
4.95(m,1h)5.55(s,1h)6.68(d,1h)6.97
‑
7.21(m,2h)7.28(m,1h)7.33
‑
7.35(m，2h)7.39
‑
7.47(m，8h)7.53(d，1h)7.80(d,1h)10.96(s,1h)。
[0253]
实施例13化合物
ⅰ‑
13的合成
[0254][0255]
a.
[0256]
在氮气气氛下，向4
‑
c1
‑9‑
烷基磺酰基苯酚(2.63g，15.26mmol)和2
‑
丁炔酸乙酯(1.43.g，12.70mmol)在乙腈(15ml)中的搅拌混合物中，逐渐加入三乙烯二胺(0.51g，4.58mmol)，在加入完成后，将混合物在回流下搅拌10h。在反应完成后，向混合物中加入水(10ml)和甲基叔丁基醚(20ml)，在搅拌下用浓盐酸调节水相的ph＜3，再将有机相用氢氧化钠水溶液(1mol/l，2
×
10ml)洗涤，并用硫酸镁干燥并且浓缩，提供纯品3
‑
6(2.31g，64％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
13
h
16
o5s[m]

284，测量值[m h]

285。
[0257]
b.
[0258]
在氮气气氛下，向溶解于四氯化碳(25ml)中的化合物3
‑
6(2.52g，8.88mmol)的搅拌混合物中，加入n
‑
溴琥珀酰亚胺(nbs，2.72g，15.10mmol)和偶氮二异丁腈(0.22g，1.33mmol)。在加入完成后，将混合物在回流下搅拌20h。将反应混合物冷却至室温，将琥珀酰亚胺通过过滤除去并且将溶剂在真空中除去，将得到的粗制产物由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品4
‑
6(2.71g，84％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
13
h
15
bro5s[m]

362，测量值[m 2h]

364。
[0259]
c.
[0260]
将化合物5
‑
2(1.71g，8.73mmol)在乙腈(20ml)中的悬浮液用n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.48ml，8.94mmol)处理。然后将混合物加热至回流，并且于该温度保持2h。然后，经由注射器滴加另外的n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.48ml，8.94mmol)，接着滴加在乙腈中的化合物4
‑
6(2.88g，7.94mmol)然后在氮气下，将混合物通过下降进入保持在100℃的预热油浴中而加热至回流18h。将混合物冷却至25℃，并且将沉淀的n，n
‑
二异丙基乙铵盐盐酸盐过滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品6
‑
5(1.95g，62％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
19
h
25
no6s[m]

395，测量值[m h]

396。
[0261]
d.
[0262]
向在四氢呋喃(10ml)中含有化合物6
‑
5(1.98g，5.01mmol)的溶液，用一水合氢氧化锂(244.4mg，5.73mmol)在水(10ml)中的水溶液处理。将混合物于25℃搅拌3h，然后将其用2n盐酸水溶液酸化。将混合物用二氯甲烷(2
×
20ml)萃取。将合并后的有机层用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品7
‑
5(1.40g，76％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
17
h
21
no6s[m]

367，测量值[m h]

368。
[0263]
e.
[0264]
向化合物7
‑
5(0.31g,0.85mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入草酰氯(0.12,
0.94mmol)，并滴加1滴n,n
‑
二甲基甲酰胺，在加入完成后，将混合物于40℃氮气保护下搅拌2h。然后在冰水浴冷却下，加入化合物8
‑
1(如在实施例1中制备，0.20g,0.94mmol)、n,n
‑
二异丙基乙胺(dipea，0.16g,1.28mmol)、4
‑
二甲氨基吡啶(dmap，0.1g,0.82mmol)，在加入完成后，将混合物升温回流，氮气保护下搅拌48h。向反应混合物中加入二氯甲烷稀释，饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。由柱色谱(10％至85％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
13(0.20g，42％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
27
h
28
f2n4o5s[m]

558，测量值[m h]

559,1h
‑
nmrδppm 0.99(dd，6h)1.38(m，1h)1.51(m，1h)1.71(m，1h)3.37(s,3h)3.79(d,1h)4.11(d,1h)4.40(m,1h)5.12(s,1h)5.57(s,2h)6.50(d,1h)6.85
‑
6.90(m,3h)7.55
‑
7.73(m,5h)10.56(s,1h)。
[0265]
实施例14化合物
ⅰ‑
14的合成
[0266][0267]
a.
[0268]
将3
‑
氨基吡唑(0.83g，9.94mmol)和化合物10
‑
7(2.82g，10.96mmol)在乙腈(40ml)中的悬浮液用碳酸钾(3.44g，24.89mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持8h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至50％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到纯品8
‑
8：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h9f4n3[m]

259，测量值[m h]

260。
[0269]
b.
[0270]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.30g,0.93mmol)，化合物8
‑
8(0.26g，1.02mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，0.45g，1.02mmol)，三乙胺(tea，0.24g，2.33mmol)于二氯甲烷(10ml)中，氮气保护下室温搅拌过夜。将反应混合物用二氯甲烷稀释，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，由柱色谱(10％至60％乙酸乙酯/石油醚)纯化，提供纯品
ⅰ‑
14(0.39g，74％)，为类白色泡沫状固体：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
27
h
25
clf4n4o3[m]

564，测量值[m h]

565，1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.89(dd，6h)1.39(m，1h)1.55(m，1h)1.74(m，1h)4.18(d,1h)4.59(d,1h)4.78(s,1h)4.86(m,1h)5.40(s,2h)6.52(d,1h)7.02
‑
7.06(m，1h)7.34
‑
7.37(m,1h)7.43
‑
7.55(m,3h)7.62
‑
7.67(m,2h)7.77(d,1h)10.82(s,1h)。
[0271]
实施例15化合物
ⅰ‑
15的合成
[0272][0273]
a.
[0274]
将3
‑
氨基吡唑(0.77g，9.27mmol)和化合物10
‑
8(2.44g，10.21mmol)在乙腈(40ml)中的悬浮液用碳酸钠(2.46g，23.18mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持6h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至50％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到纯品8
‑
9(1.25g，56％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
10
f3n3[m]

241，测量值[m h]

242。
[0275]
b.
[0276]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.30g,0.93mmol)，化合物8
‑
9(如在实施例2中制备，0.25g，1.02mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，0.45g，1.02mmol)，三乙胺(tea，0.24g，2.33mmol)于二氯甲烷(10ml)中，氮气保护下室温搅拌过夜。将反应混合物用二氯甲烷稀释，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，由柱色谱(10％至60％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
15(0.41g，81％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
27
h
26
clf3n4o3[m]

546，测量值[m h]

547，1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.90(dd，6h)1.23(m，1h)1.57(m，1h)1.73(m，1h)4.19(d,1h)4.59(d,1h)4.78(s,1h)4.85(m,1h)5.33(s,2h)6.50(d,1h)7.34
‑
7.41(m,3h)7.43
‑
7.52(m,2h)7.64(m,1h)7.72(d,2h)7.79(d,1h)10.80(s,1h)。
[0277]
实施例16化合物
ⅰ‑
16的合成
[0278][0279]
a.
[0280]
在氮气气氛下，向2
‑
氯
‑6‑
氟苯酚(2.24g，15.26mmol)和2
‑
丁炔酸乙酯(1.43.g，12.70mmol)在乙腈(15ml)中的搅拌混合物中，逐渐加入三乙烯二胺(dabco，0.51g，4.58mmol)，在加入完成后，将混合物在回流下搅拌10h。在反应完成后，向混合物中加入水(10ml)和甲基叔丁基醚(20ml)，在搅拌下用浓盐酸调节水相的ph＜3，再将有机相用氢氧化钾水溶液(1mol/l，2
×
10ml)洗涤，并用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品3
‑
7(2.33g，71％)：
lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
12
clf2o3[m]

242，测量值[m h]

243。
[0281]
b.
[0282]
在氮气气氛下，向溶解于四氯化碳(25ml)中的化合物4
‑
7(2.15g，8.88mmol)的搅拌混合物中，加入n
‑
溴琥珀酰亚胺(nbs，2.72g，15.10mmol)和偶氮二异丁腈(aibn，0.22g，1.33mmol)。在加入完成后，将混合物在回流下搅拌20h。将反应混合物冷却至室温，将琥珀酰亚胺通过过滤除去并且将溶剂在真空中除去，将得到的粗制产物由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品4
‑
7(2.46g，82％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
12
h
11
brclfo3[m]

336，测量值[m 2h]

338。
[0283]
c.
[0284]
在氮气气氛下，向溶解于乙腈(40ml)中的化合物5
‑
1(1.50g，8.06mmol)的搅拌混合物中，加入n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.13g，8.36mmol)。在加入完成后，将混合物于100℃搅拌3h。将反应物冷却至25℃，并且用n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.21g，8.99mmol)处理且加热至100℃，在此时，慢慢地加入在乙腈(15ml)中的4
‑
7(2.47g，7.32mmol)。在加入完成后，将反应混合物加热至100℃并且搅拌20h。将反应混合物冷却至25℃，过滤并且浓缩。将剩余物用二氯甲烷稀释且用2n盐酸水溶液，饱和氯化钠溶液洗涤并且用硫酸镁干燥。将得到的粗制产物由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品6
‑
6(1.31g，53％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
17
h
19
clfno4[m]

258，测量值[m h]

259。
[0285]
d.
[0286]
向在四氢呋喃(10ml)中含有化合物6
‑
6(1.78g，5.01mmol)的溶液，用氢氧化锂(137.2mg，5.73mmol)在水(10ml)中的水溶液处理。将混合物于25℃搅拌3h，然后将其用2n盐酸水溶液酸化。将混合物用二氯甲烷(2
×
20ml)萃取。将合并后的有机层用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品7
‑
6(1.18g，69％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
16
h
17
clfno4[m]

341，测量值[m h]

342。
[0287]
e.
[0288]
将化合物7
‑
6(0.53g,1.54mmol)，化合物8
‑
1(如在实施例1中制备，0.35g，1.69mmol)，苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基
‑
三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(bop，0.75g，1.69mmol)，n,n
‑
二异丙基乙胺(dipea，0.50g，3.85mmol)于二氯甲烷(15ml)中，氮气保护下室温搅拌过夜。将反应混合物用二氯甲烷稀释，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤并浓缩，由柱色谱(10％至75％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
16(0.31g，38％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
24
clf3n4o3[m]

532，测量值[m h]

533,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm0.88(dd，6h)1.46(m，1h)1.52(m，1h)1.61(m，1h)4.01(d,1h)4.36(d,1h)4.67(m,1h)5.33(s,1h)5.58(s,2h)6.51(d,1h)6.61
‑
6.90(m,4h)7.11
‑
7.16(m,2h)7.71(m,1h)10.60(s,1h)。
[0289]
实施例17化合物
ⅰ‑
17的合成
[0290][0291]
a.
[0292]
在氮气气氛下，向3
‑
羟基
‑6‑
氟吡啶(2.16g，19.13mmol)和2
‑
丁炔酸乙酯(1.79.g，15.92mmol)在乙腈(15ml)中的搅拌混合物中，逐渐加入三乙烯二胺(dabco，0.64g，5.74mmol)，在加入完成后，将混合物在回流下搅拌8h。在反应完成后，向混合物中加入水(10ml)和甲基叔丁基醚(20ml)，在搅拌下用浓盐酸调节水相的ph＜3，再将有机相用氢氧化钠水溶液(1mol/l，2
×
10ml)洗涤，并用硫酸镁干燥并且浓缩，得到纯品3
‑
8(2.50g，70％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
12
fno3[m]

225，测量值[m h]

226。
[0293]
b.
[0294]
在氮气气氛下，向溶解于四氯化碳(25ml)中的化合物3
‑
8(2.46g，10.91mmol)的搅拌混合物中，加入n
‑
溴琥珀酰亚胺(nbs，3.34g，18.55mmol)和过氧化苯甲酰(0.57g，1.63mmol)。在加入完成后，将混合物在回流下搅拌24h。将反应混合物冷却至室温，将琥珀酰亚胺通过过滤除去并且将溶剂在真空中除去，将得到的粗制产物由柱色谱(0％至50％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品4
‑
8(2.79g，84％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
11
brfno3[m]

303，测量值[m 2h]

305。
[0295]
c.
[0296]
在氮气气氛下，向溶解于乙腈(50ml)中的5
‑
2(1.43g，9.82mmol)的搅拌混合物中，加入n，n
‑
二异丙基乙胺(dipea，1.37g，10.18mmol)处理且加热至100℃，在此时，慢慢地加入在乙腈(12ml)中的化合物4
‑
8(2.71g，8.91mmol)。在加入完成后，将反应混合物加热至100℃并且搅拌20h。将反应混合物冷却至25℃，过滤并且浓缩。将剩余物用二氯甲烷稀释且用2n盐酸水溶液，饱和氯化钠溶液洗涤并且用硫酸镁干燥。将得到的粗制产物由柱色谱(0％至50％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品6
‑
8(1.49g，52％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
16
h
19
fn2o4[m]

322，测量值[m h]

323。
[0297]
d.
[0298]
向化合物6
‑
8(1.49g，4.62mmol)在四氢呋喃(15ml)中的搅拌混合物中，加入在水(7ml)中的氢氧化锂(235mg，5.56mmol)。在加入完成后，将混合物于25℃搅拌1h。将反应混合物倾倒入水和二乙醚中并且进行层分离。用2n盐酸水溶液使水层为酸性并且用二氯甲烷萃取。将合并的二氯甲烷部分用饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到
纯品7
‑
8(1.31g，92％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
15
h
17
fn2o4[m]

308，测量值[m h]

309。
[0299]
e.
[0300]
将化合物7
‑
8(0.62g，2.01mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl，0.42g，2.19mmol)和1
‑
羟基苯并三氮唑(hobt,0.32g，2.37mmol)处理，将反应混合物于25℃搅拌15min，接着加入化合物8
‑
1(如在实施例1中制备，0.42g，2.01mmol)，将反应混合物于25℃，在氮气保护下搅拌12h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，水洗，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，柱色谱(30％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
17freebase(0.51g，51％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
25
h
24
f3n5o3[m]

499，测量值[m h]

500
[0301]
f.
[0302]
将化合物
ⅰ‑
17freebase(0.51g，1.02mmol)于二氯甲烷(3ml)中溶解，冰水浴下向其中滴加氯化氢的乙醇溶液，浓干后加无水乙醚打浆，得到纯品
ⅰ‑
17(0.15g，21％)，为类白色粉末：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
25
h
25
clf3n5o3[m]

499，测量值[m h]

500,1h_nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ1h_nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.90(dd，6h)1.43(m，1h)1.59(m，1h)1.77(m，1h)4.23(d,1h)4.56(d,1h)4.78(s,1h)4.82(m,1h)5.44(s,2h)6.56(d,1h)7.38
‑
7.52(m，4h)7.66(m,2h)7.86(d,1h)10.79(s,1h)。
[0303]
实施例18化合物
ⅰ‑
18的合成
[0304][0305]
a.
[0306]
将化合物9
‑
1(如在实施例1中制备，1.50g，11.99mmol)和化合物10
‑
9(2.68g，13.19mmol)在二氯甲烷(50ml)中的悬浮液用碳酸钾(2.49g，17.99mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持6h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至50％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品11
‑
5(2.33g，72％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
13
h
14
fn3o[m]

247，测量值[m h]

248。
[0307]
b.
[0308]
将化合物11
‑
5(2.30g，9.31mmol)加入到氢氧化钾(1.57g，27.94mmol)和水(3.35g，186.20mmol)和乙醇(30ml)配成的溶液中，然后将混合物加热至回流，并且于该温度保持8h。将混合物冷却至室温，浓缩至干，加入水(50ml)，用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取，将合并的乙酸乙酯部分用无水硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到纯品8
‑
10(1.38g，72％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
12
fn3[m]

205，测量值[m h]

206。
[0309]
c.
[0310]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.30g，0.93mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc
·
hcl，0.21g，1.12mmol)和1
‑
羟基苯并三氮唑(hobt，0.18g，1.30mmol)处理，将反应混合物于25℃搅拌30min，接着加入化合物8
‑
10(0.21g，1.02mmol)，将反应混合物于室温在氮气保护下搅拌24h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，水洗，用无水硫酸钠干燥并浓缩，柱色谱(20％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到纯品
ⅰ‑
18(0.45g，53％)：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
26
h
26
clfn4o3[m]

510，测量值[m h]

511,1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δppm 0.90(dd，6h)1.40
‑
1.46(m，1h)1.52
‑
1.60(m，1h)1.70
‑
1.77(m，1h)4.18(d,1h)4.56(d,1h)4.77(s,1h)4.86(q,1h)5.51(q,1h)6.46(d,1h)7.12
‑
7.16(m,2h)7.23
‑
7.27(m，2h)7.33
‑
7.37(m,1h)7.43
‑
7.51(m,2h)7.63(d,1h)7.74(,1h)10.79(s,1h)。
[0311]
实施例19化合物
ⅰ‑
19的合成
[0312][0313]
a.
[0314]
将化合物9
‑
1(如在实施例1中制备，1.46g，11.66mmol)和化合物10
‑
10(3.20g，12.85mmol)在n，n
‑
二甲基甲酰胺(dmf，50ml)中的悬浮液用碳酸钾(4.03g，29.15mmol)处理，然后将混合物加热至50℃，并且于该温度保持6h。将混合物冷却至25℃，并且将不溶物滤出。将上清液浓缩并且由柱色谱(0％至100％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到化合物11
‑
6(2.33g，68％)，为淡黄色粉末：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
13
h
15
n3o3s[m]

293，测量值[m h]

294。
[0315]
步骤5.化合物8
‑
11的合成
[0316]
将化合物11
‑
6(2.19g，7.48mmol)加入到氢氧化钾(1.27g，22.57mmol)和水(2.64g，146.62mmol)和乙醇(25ml)配成的溶液中，然后将混合物加热至回流，并且于该温度保持5h。将混合物冷却至25℃，浓缩至干，加入水(20ml)，用乙酸乙酯(3
×
30ml)萃取，并且用硫酸镁干燥。然后滤去不溶物，将上清液浓缩至干，得到化合物8
‑
11(1.77g，94％)，为淡黄色粉末：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
11
h
13
n3o2s[m]

251，测量值[m h]

252。
[0317]
步骤6.化合物
ⅰ‑
19的合成
[0318]
将化合物7
‑
1(如在实施例1中制备，0.65g，2.01mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(edc，0.42g，2.19mmol)和1
‑
羟基苯并三氮唑(hobt，0.32g，2.37mmol)处理，将反应混合物于25℃搅拌15min，接着加入化合物8
‑
11(0.51g，2.01mmol)，将反应混合物于25℃，在氮气保护下搅拌12h。将反应混合物用二氯甲烷稀释，水洗，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，柱色谱(30％至70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到化合物
ⅰ‑
19(0.76g，68％)，为浅黄色粉末：lr
‑
es
‑
ms m/z计算值c
27
h
29
cln4o5s[m]

556，测量值[m h]

557,1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δppm 0.93(dd，6h)1.42
‑
1.46(m，1h)1.52
‑
1.59(m，1h)1.70
‑
1.77(m，1h)3.39(s,3h)4.18(d,1h)4.58(d,1h)4.77(s,1h)4.86(q,1h)5.19(s,2h)6.46(d,1h)7.15(t,2h)7.25
‑
7.28(m，2h)7.33
‑
7.37(m,1h)7.43
‑
7.50(m,2h)7.63(d,1h)7.73(d,1h)10.77(s,1h)。
[0319]
实施例20
[0320]
参照文献cn102007118a中实施例66的方法b，合成如下对照化合物。
[0321][0322]
实施例21
[0323]
体外葡萄糖激酶活性
[0324]
在384孔板(购自perkin elmer公司)中，先后加入10μl待测化合物溶液(终浓度0.5μm)或dmso对照，15μl含有50mm hepes、100mm kcl、5mm mgcl2、5mm dtt、0.75μg/ml重组葡萄糖激酶(由中国科学院上海药物所李佳课题组通过大肠杆菌表达系统表达纯化)、8mm葡萄糖的缓冲液(ph7.4)，室温放置摇床上震荡5min后，继续加入15μl含有1u/ml葡萄糖
‑6‑
磷酸脱氢酶、10mm atp、1mm nadp的缓冲液开始反应，45min后于340nm波长(envision多功能酶标仪，购自perkin elmer公司)下测定产物nadph的吸光度(od)值，减去空白对照组背景od值，并将待测化合物组与dmso组比较，计算激动活性百分率(％)。结果见表1。
[0325]
除特别指出外，上述试验所需常规试剂均购自国药集团化学试剂有限公司。
[0326]
表1实施例中的化合物的体外葡萄糖激酶活性结果
[0327]
实施例化合物活性数据(％)1
ⅰ‑
1116.092
ⅰ‑
2206.833
ⅰ‑
3229.344
ⅰ‑
4186.395
ⅰ‑
5223.116
ⅰ‑
6174.367
ⅰ‑
7131.868
ⅰ‑
8184.069
ⅰ‑
9337.2510
ⅰ‑
10126.4811
ⅰ‑
11204.9612
ⅰ‑
12432.3813
ⅰ‑
13168.72
14
ⅰ‑
14237.0515
ⅰ‑
15316.4916
ⅰ‑
16288.3117
ⅰ‑
17201.95181
‑
18185.58
[0328]
以上结果表明，本发明的化合物对葡萄糖激酶具有很好的激活作用。
[0329]
实施例22
[0330]
体内葡萄糖激酶活性
[0331]
采用雄性昆明小鼠(购自北京华阜康公司)，6
‑
8周龄，spf级，体重为20～22g，每组5只，试验前适应性饲养2天，试验前禁食16h，并按空腹血糖值随机分组。各组按15mg/kg剂量单次灌胃给予各待测化合物或空白溶媒(含0.5％吐温pbs，ph＝7.4)，给药体积为0.2ml/10g。给药0.5h后，动物按2.5g/kg腹腔注射葡萄糖溶液(浓度为0.125g/ml)，给药体积为0.1ml/10g，于给糖后1.0h，将动物进行剪尾尖采血，血糖仪(购自abbott公司)测定读数。通过比较待测化合物处理的小鼠和空白溶媒处理的小鼠在研究期间内的血糖值来分析结果。
[0332]
下表提供代表数量的本发明化合物在15mg/kg剂量下，相对溶媒对照组于正常昆明小鼠糖负荷后1.0h的血糖降低率(％)：
[0333]
表2本发明化合物对正常小鼠糖负荷后1.0h的血糖降低率结果
[0334]
[0335][0336]
实施例23
[0337]
体内降血糖活性(多次给药)
[0338]
采用雄性ob/ob模型小鼠(购自北京华阜康公司)，7周龄，spf级，体重为35～40g，试验前适应性饲养3周，适应期最后一天测定小鼠空腹血糖，并将模型组动物按照空腹血糖随机分组给药。其中，化合物d
‑
1为阳性对照，并设置基因型wt/wt为空白对照，每组均为5只。上述各组按30mg/kg剂量灌胃给予各待测化合物或空白溶媒(含0.5％吐温pbs，ph＝7.4)，给药体积为0.2ml/10g，每日一次，连续21次。末次给药前动物禁食16h，测定空腹血糖；末次给药后0.5h，动物按1g/kg腹腔注射葡萄糖溶液(浓度为0.1g/ml)，给药体积为0.1ml/10g(空白对照组给予等体积溶媒)，于给糖后0.5h，将动物进行剪尾尖采血，血糖仪(购自abbott公司)测定读数。通过比较待测化合物处理的小鼠和空白对照组、模型对照组小鼠在研究期间内的血糖值来分析结果，见表3。
[0339]
表3多次给予化合物对ob/ob模型小鼠血糖的作用
[0340][0341]
**
：与模型对照组相比p＜0.01；
*
：与模型对照组相比p＜0.05
[0342]
△△
：与空白对照组相比p＜0.01；
△
：与空白对照组相比p＜0.05
[0343]
上述测定结果表明，与模型组比较，以实施例1，实施例3，实施例9和实施例16中所制备的化合物
ⅰ‑
1，化合物
ⅰ‑
3，化合物
ⅰ‑
9和化合物
ⅰ‑
16多次给药后空腹血糖值均有降低，且空腹血糖值低于化合物d
‑
1组空腹血糖值；与模型组比较，以实施例1，实施例3，实施例9和实施例16中所制备的化合物化合物
ⅰ‑
1，化合物
ⅰ‑
3，化合物
ⅰ‑
9和化合物
ⅰ‑
16和化合物d
‑
1多次给药后糖负荷0.5h后的血糖值均明显降低(具有统计学意义)，其中，化合物
ⅰ‑
1，化合物
ⅰ‑
3，化合物
ⅰ‑
9和化合物
ⅰ‑
16组与空白对照组的血糖值相当，而化合物d
‑
1组的血糖值降低到明显低于空白对照组的血糖值(具有统计学意义)。