GLP-1受体激动剂的制作方法

glp-1受体激动剂
技术领域
1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一类glp-1受体激动剂化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，含有所述化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的药物组合物及制剂，以及所述化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的用途。


背景技术：

2.糖尿病，已成为现代社会严重威胁人类健康与生命的重要疾病之一。此疾病是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合症，目前已辨认出两种主要的糖尿病形式，即1型和2型。1型糖尿病(t1d)在身体免疫系统破坏胰脏β细胞时发展，临床治疗以补充胰岛素为主。2型糖尿病(通常称为t2dm)占患病群体的95％以上，经常始于胰岛素抗性或当胰岛素生产不足以维持可接受的葡萄糖含量的时候。胰岛素抗性是2型糖尿病发生和发展过程中的关键因素。
3.t2dm最常与高血糖症和胰岛素抗性相关联，与t2dm相关联的其它疾病包括肝脏胰岛素抗性、葡萄糖耐受不良、糖尿病神经病变、糖尿病肾病变、糖尿病视网膜病变、肥胖症、血脂异常症、高血压、高胰岛素血症和非酒精性脂肪肝病(nafld)等。
4.胰高血糖素样肽1受体(glp-1r)属于七次跨膜g蛋白偶联受体的b1家族。其天然激动剂配体为glp-1(胰高血糖素样肽-1)，是由人胰岛高血糖素基因编码并由肠道l细胞分泌的一种肽类激素，属于肠促胰岛素家族。生理条件下，glp-1以葡萄糖依赖性方式刺激胰岛素分泌、同时抑制胰高血糖素分泌，使餐后血糖降低并维持恒定水平。glp-1还具有神经调节功能，可抑制胃排空、降低食欲及刺激β细胞增生。在非临床试验中，glp-1通过刺激对葡萄糖依赖性胰岛素分泌重要的基因转录及通过促进β细胞新生而促进持续的β细胞能力(meier等人的biodrugs.2003；17(2):93-102)。另外，glp-1在心血管系统中也有重要作用。它具有降低血压和扩张血管的作用，急性注射glp-1能在心肌肥大实验中改善左心室的收缩功能。它还能在心肌缺血后再灌注的情况下减轻心肌细胞的损伤(j.hypertens，2003,21:1125-1135；am j physiol endocrinol metab,2004,287:e1209 e1215；circulation,2004,110:955-961；diabetes,2005,54:146-151)。
5.目前，已上市的glp-1r药物和在研药物主要集中在多肽类似物。但由于多肽药物口服生物利用率低、易于降解等缺点，研发具有更高生物利用度、具有良好的生物稳定性的新型非肽类glp-1r激动剂，对于治疗由glp-1r介导的相关疾病具有重要意义。


技术实现要素：

6.本发明要解决的技术问题是提供一种结构新颖的、对glp-1受体具有良好激动作用的化合物。进一步的，该类化合物可用于制备治疗和/或预防由glp-1r所介导的疾病或相关疾病的药物。
7.本发明的技术方案如下：
8.在一方面，本发明提供了如下通式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其立
体异构体，
[0009][0010]
其中，x1、x2、x3、x4、x5分别独立地选自-c(r3)-或-n-；
[0011]
y、z分别独立地选自-n-或-c(r2)-；
[0012]
每一l1分别独立地选自-c(r4r5)-、-n(r4)-、-o-或-s-；
[0013]
r1选自任选被1～4个q1取代的下列基团：3-10元环烷基、3-10元杂环烷基、6-10元芳基或5-10元杂芳基；
[0014]
环a选自任选被1～4个q2取代的3-10元杂环烷基或5-10元杂芳基；
[0015]
环b选自任选被1～4个q3取代的6-10元芳基或5-10元杂芳基；
[0016]
每一q1、每一q2、每一q3分别独立地选自卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、c
1-6
烷基氨基、c
1-6
烷氧基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、卤代c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷硫基、羟基c
1-6
烷氧基、羟基c
1-6
烷硫基、氨基c
1-6
烷氧基或氨基c
1-6
烷硫基；
[0017]
每一r2、r3、r4、r5分别独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、c
1-6
烷基氨基、c
1-6
烷氧基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、卤代c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、氰基c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷硫基、羟基c
1-6
烷氧基、羟基c
1-6
烷硫基、氨基c
1-6
烷氧基或氨基c
1-6
烷硫基；
[0018]
p、m、n各自独立地选自0、1、2、3或4。
[0019]
在某些实施方案中，所述的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，
[0020]
x1、x2、x3分别独立地选自-c(r3)-或-n-；
[0021]
x4、x5分别独立地选自-n-；
[0022]
y、z分别独立地选自-n-或-ch-；
[0023]
每一l1分别独立地选自-c(r4r5)-、-n(r4)-、-o-或-s-；
[0024]
r1选自任选被1～4个q1取代的下列基团：3-10元杂环烷基或5-10元杂芳基；
[0025]
环a选自任选被1～4个q2取代的3-7元杂环烷基或5-8元杂芳基；
[0026]
环b选自任选被1～4个q3取代的苯基或5-6元杂芳基；
[0027]
每一q1、每一q2、每一q3分别独立地选自卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、c
1-6
烷基氨基、c
1-6
烷氧基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、卤代c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷硫基、羟基c
1-6
烷氧基、羟基c
1-6
烷硫基、氨基c
1-6
烷氧基或氨基c
1-6
烷硫基；
[0028]
每一r2、r3、r4、r5各自独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基或卤代c
1-6
烷硫基；
[0029]
p、m、n各自独立地选自0、1、2、3或4。
[0030]
在某些实施方案中，所述的x1、x2、x3分别独立地选自-c(r3)-；
[0031]
每一r3各自独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基或卤代c
1-6
烷硫基。
[0032]
在某些实施方案中，所述的x1、x2、x3分别独立地选自-c(r3)-；
[0033]
每一r3各自独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或三氟甲氧基。
[0034]
在某些实施方案中，所述的x1、x2、x3分别独立地选自-c(r3)-；
[0035]
每一r3各自独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基或三氟甲基。
[0036]
在某些实施方案中，所述的x4、x5分别独立地选自-n-。
[0037]
在某些实施方案中，所述的y、z分别独立地选自-n-或-ch-，且y、z中至少一个选自-n-。
[0038]
在某些实施方案中，所述的每一l1分别独立地选自-c(r4r5)-或-o-；
[0039]
每一r4、r5分别独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基或卤代c
1-6
烷硫基。
[0040]
在某些实施方案中，所述的每一l1分别独立地选自-c(r4r5)-或-o-；
[0041]
每一r4、r5分别独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或三氟甲氧基。
[0042]
在某些实施方案中，所述的每一l1分别独立地选自-c(r4r5)-或-o-；
[0043]
每一r4、r5分别独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基或三氟甲基。
[0044]
在某些实施方案中，所述的r1选自任选被1～4个q1取代的下列基团：3-10元杂环烷基或5-10元杂芳基；每一q1分别独立地选自卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、c
1-6
烷基氨基、c
1-6
烷氧基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基、卤代c
1-6
烷基、羟基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷硫基、羟基c
1-6
烷氧基、羟基c
1-6
烷硫基、氨基c
1-6
烷氧基或氨基c
1-6
烷硫基。
[0045]
在某些实施方案中，所述的r1选自任选被1～4个q1取代的下列基团：3-6元杂环烷基或5-6元杂芳基；每一q1分别独立地选自卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基或卤代c
1-6
烷硫基。
[0046]
在某些实施方案中，所述的r1选自任选被1～3个q1取代的下列基团：氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吡咯烷基、哌啶基、噁唑烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、1,3-恶嗪烷、六氢嘧啶基、哌嗪基、1,4-二氧杂环己烷基、吗啉基、硫代吗啉基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、1,2,4-噁唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、1,2,4-三嗪基或吡嗪基；
[0047]
每一q1分别独立地选自氟、氯、溴、碘、羟基、氰基、氨基、硝基、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1,1,1-三氟乙基、1,1,1-三氟异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、1,1,1-三氟乙氧基或1,1,1-三氟异丙氧基。
[0048]
在某些实施方案中，所述的r1选自任选被1～3个q1取代的下列基团：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吡咯烷基、氮杂环丁烷基、哌啶基、1,4-二氧杂环
三氟异丙氧基。
[0059]
在某些实施方案中，环b选自任选被1～3个q3取代的如下基团：
[0060][0061]
每一q3分别独立地选自氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基。
[0062]
在某些实施方案中，每一r2分别独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基或卤代c
1-6
烷硫基。
[0063]
在某些实施方案中，每一r2分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲基氨基、二甲基氨基、三氟甲基、三氟乙基、羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、1-羟基丙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、1-羟基异丙基、氨基甲基、1-氨基乙基、2-氨基乙基、1-氨基丙基、2-氨基丙基、3-氨基丙基、1-氨基异丙基、氰基甲基、1-氰基乙基、1-氰基丙基、1-氰基异丙基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、一氟甲氧基甲基、二氟甲氧基甲基、三氟甲氧基甲基、一氟甲氧基乙基、二氟甲氧基乙基或三氟甲氧基乙基。
[0064]
在某些实施方案中，每一r2分别独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、三氟乙基、羟基甲基、1-羟基乙基、1-羟基丙基、氨基甲基、1-氨基乙基、1-氨基丙基、氰基甲基、1-氰基乙基、1-氰基丙基、1-氰基异丙基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、二氟甲氧基甲基、三氟甲氧基甲基、二氟甲氧基乙基或三氟甲氧基乙基。
[0065]
在某些实施方案中，每一r2分别独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基或三氟甲基。
[0066]
在某些实施方案中，p、m、n各自独立地选自0、1、2或3。
[0067]
在某些优选的实施方案中，m为1。
[0068]
在某些优选的实施方案中，n为0或1。
[0069]
在某些优选的实施方案中，p为2或3。
[0070]
本发明中各技术方案之间可以相互组合形成新的技术方案，所形成的新的技术方案同样包括在本发明的范围之内。
[0071]
在本发明某些实施方案，具体优选的通式(i)所述的化合物、其药学上可接受的盐及其立体异构体，选自如下化合物：
[0072][0073][0074]
本发明还提供了一种药物组合物，其含有前述通式(i)所述的化合物、其药学上可
接受的盐或其立体异构体，及一种或多种药用载体和/或稀释剂；所述药物组合物可以制成临床上或药学上可接受的任一剂型，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂、注射剂(包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液)、栓剂、吸入剂或喷雾剂等。
[0075]
在本发明的某些实施方案中，上述药物制剂可以以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者或受试者。用于口服给药时，所述药物组合物可制成口服制剂，例如可以制成常规的口服固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，上述药物制剂也可制成注射剂、包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配置注射剂时，可以不加入附加剂，也可以根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，所述药物组合物可制成栓剂等。用于经肺给药时，所述药物组合物可制成吸入剂或喷雾剂等。
[0076]
本发明的药物组合物或药物制剂中可用的药用载体和/或稀释剂可以是药物制剂领域中任何常规的载体和/或稀释剂，特定载体和/或稀释剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。
[0077]
在另一方面，本发明还涉及前述通式(i)所述化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体在制备预防和/或治疗glp-1r介导的疾病及相关疾病的药物中的用途，所述药物可与一种或多种其他药物联用以预防或治疗glp-1r介导的疾病及相关疾病。所述疾病及相关疾病包括糖尿病及其相关疾病、nafld及其相关疾病和心血管疾病及其相关疾病。
[0078]
进一步的，本发明还涉及含有前述通式(i)所述化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的药物制剂在制备药物中的用途，所述药物可与一种或多种药物联用以治疗及/或预防glp-1r所介导的疾病及相关疾病。
[0079]
在另一方面，本发明涉及的含有前述通式(i)所述化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的药物可以单独给药，或者与一种或多种第二治疗剂联合使用。因此，在某些实施方案中，所述的药物组合物还含有一种或多种第二治疗剂。在某些实施方案中，所述第二治疗剂选自降糖类药物、抗肥胖药物和/或治疗nash的药物等。
[0080]
在某些实施方案中，待组合的各成分(例如，本发明的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体与第二治疗剂)可同时给药或依次顺序地分开用药。例如，可以在施用本发明化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体之前、同时或之后，施用第二治疗剂。此外，待组合的各成分还可以以同一制剂形式或以分开的不同制剂的形式联合给药。
[0081]
在另一方面，本发明还提供了一种治疗glp-1r介导的疾病及相关疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的前述通式(i)所述的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，前述制剂或药物组合物；所述glp-1r介导的疾病及相关疾病如上定义。
[0082]
所述的“有效量”是指能够减轻、延缓、抑制或治愈受试者病症的药物剂量。给药剂量的大小与药物给药方式、药剂的药代动力学、疾病的严重程度、受试者的个性体征(性别、体重、身高、年龄)等来确定。
[0083]
【定义和一般术语】
[0084]
在本技术的说明书和权利要求书中，化合物都是依据化学结构式而命名，如果表
示同一化合物时化合物的命名和化学结构式不符，以化学结构为准。
[0085]
在本发明中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员通常理解的含义，然而为了更好的理解本发明，下面提供了部分术语的定义。当本发明所提供的术语的定义和解释与本领域技术人员所通常理解的含义不符的时候，以本发明所提供的术语的定义和解释为准。
[0086]
本发明所述的“卤素”是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
[0087]
本发明所述的“c
1-6
烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包括例如“c
1-4
烷基”、“c
1-3
烷基”、“c
1-2
烷基”、“c
2-6
烷基”、“c
2-5
烷基”、“c
2-4
烷基”、“c
2-3
烷基”、“c
3-6
烷基”、“c
3-5
烷基”、“c
3-4
烷基”等，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基(丙基)、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。本发明所述的“c
1-4
烷基”指c
1-6
烷基中的含有1-4个碳原子的具体实例。
[0088]
本发明所述的“c
1-6
烷氧基”是指“c
1-6
烷基-o
-”
，所述的“c
1-6
烷基”如前文所定义。
[0089]
本发明所述的“c
1-4
烷氧基”是指“c
1-4
烷基-o
-”
，所述的“c
1-4
烷基”如前文所定义。
[0090]
本发明所述的“c
1-6
烷硫基”是指“c
1-6
烷基-s
-”
，所述的“c
1-6
烷基”如前文所定义。
[0091]
本发明所述的“c
1-4
烷硫基”是指“c
1-4
烷基-s
-”
，所述的“c
1-4
烷基”如前文所定义。
[0092]
本发明所述的“羟基c
1-6
烷基、氨基c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基”是指c
1-6
烷基中的一个或多个氢分别被一个或多个羟基、氨基或卤素所取代。所述的“c
1-6
烷基”如前文所定义。
[0093]
本发明所述“羟基c
1-6
烷氧基、氨基c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷氧基”是指“c
1-6
烷氧基”中的一个或多个氢被一个或多个羟基、氨基或卤素所取代。
[0094]
本发明所述“羟基c
1-6
烷硫基、氨基c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷硫基”是指“c
1-6
烷硫基”中的一个或多个氢被一个或多个羟基、氨基或卤素所取代。
[0095]
本发明所述的“c
1-6
烷基氨基、二(c
1-6
烷基)氨基”分别是指c
1-6
烷基-nh-、
[0096]
本发明所述的“6-10元芳基”包括“6-8元单环芳基”和“8-10元稠环芳基”。
[0097]
本发明所述的“6-8元单环芳基”是指含有6-8个环碳原子的单环芳基，其实例包括但不限于：苯基、环辛四烯基等；优选苯基。
[0098]
本发明所述的“8-10元稠环芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环碳原子的、不饱和的、具有芳香性的环状基团，优选“9-10元稠环芳基”，具体实例如萘基等。
[0099]
本发明所述的“5-10元杂芳基”包括“5-8元单环杂芳基”和“8-10元稠杂芳基”。
[0100]
本发明所述的“5-8元单环杂芳基”是指含有5-8个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的单环环状基团。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。“5-8元单环杂芳基”包括例如“5-7元单环杂芳基”、“5-6元单环杂芳基”、“5-6元含氮单环杂芳基”、“6元含氮单环杂芳基”等，所述的“含氮杂芳基”中的杂原子至少含有一个氮原子，例如，仅包含1个或2个氮原子，或者，包含一个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)，或者，包含2个氮原
子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)。“5-8元单环杂芳基”的具体实例包括但不仅限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、氮杂环庚三烯基、1,3-二氮杂环庚三烯基、氮杂环辛四烯基等。所述“5-6元单环杂芳基”是指5-8元杂芳基中含有5-6个环原子的具体实例。
[0101]
本发明所述的“8-10元稠杂芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的、不饱和的具有芳香性的环状结构。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。包括“9-10元稠杂芳基”，“8-9元稠杂芳基”，“含1-2个杂原子的9-10元稠杂芳基，所述杂原子选自氮、氧或硫”等，其稠和方式可以为苯并5-6元杂芳基、5-6元杂芳基并5-6元杂芳基等；具体实例包括但不限于：吡咯并吡咯、吡咯并呋喃、吡唑并吡咯、吡唑并噻吩、呋喃并噻吩、吡唑并噁唑、苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、喹啉基、2-喹啉酮基、4-喹啉酮基、1-异喹啉酮基、异喹啉基、吖啶基、菲啶基、苯并哒嗪基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、嘌呤基、萘啶基等。
[0102]
本发明所述的“3-10元环烷基”包括“3-7元单环环烷基”和“8-10元稠环环烷基”。
[0103]
本发明所述的“3-7元单环环烷基”是指含有3-7个环原子的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环环状基团，其实例包括但不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环己烯等。
[0104]
本发明所述的“8-10元稠环环烷基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的含有8-10个环原子的、饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，其实例包括但不限于：等。
[0105]
本发明所述的“3-10元杂环基”包括“3-7元单杂环基”和“8-10元稠杂环基”。
[0106]
本发明所述的“3-7元杂环基”是指至少含有一个杂原子(例如，含有1个、2个、3个、4个或5个)的且环原子数为3-7个的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环环状基团，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。本发明所述的“3-7元单杂环基”包括“3-7元饱和单杂环基”和“3-7元部分饱和单杂环基”。优选地，本发明所述的“3-7元单杂环基”含有1-3个杂原子；优选地，本发明所述的“3-7元单杂环基”含有1-2个杂原子，且所述的杂原子选自氮原子和/或氧原子；优选地，本发明所述的“3-7元单杂环基”含有1个氮原子。所述“3-7元单杂环基”优选“3-6元单杂环基”、“4-7元单杂环基”、“4-6元单杂环基”、“6-8元单杂环基”、“5-7元单杂环基”、“5-6元单杂环基”、“3-6元饱和单杂环基”、“5-6元饱和单杂环基”、“3-6元含氮单杂环基”、“3-6元饱和含氮单杂环基”、“5-6元含氮单杂环基”、“5-6元饱和含氮单杂环基”等。例如，仅包含1个或2个氮原子，或者，包含一个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)。“3-7元单杂环基”的具体实例包括但不仅限于：氮杂环丙烷基、2h-氮杂环丙
烷基、二氮杂环丙烷基、3h-二氮杂环丙烯基、氮杂环丁烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、1,4-二氧杂环己二烯基、四氢呋喃基、二氢吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氢咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氢吡唑基、2,5-二氢噻吩基、四氢噻吩基、4,5-二氢噻唑基、噻唑烷基、哌啶基、四氢吡啶基、哌啶酮基、四氢吡啶酮基、二氢哌啶酮基、哌嗪基、吗啉基、4,5-二氢噁唑基、4,5-二氢异噁唑基、2,3-二氢异噁唑基、噁唑烷基、2h-1,2-噁嗪基、4h-1,2-噁嗪基、6h-1,2-噁嗪基、4h-1,3-噁嗪基、6h-1,3-噁嗪基、4h-1,4-噁嗪基、4h-1,3-噻嗪基、6h-1,3-噻嗪基、2h-吡喃基、2h-吡喃-2-酮基、3,4-二氢-2h-吡喃基等。
[0107]
本发明所述“8-10元稠杂环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的含有8-10个环原子的、且至少一个环原子为杂原子的、饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，所述的稠环中其中一个环可以为芳香性环，但稠环整体不具备芳香性，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代，包括但不限于“8-9元稠杂环基”、“9-10元稠杂环基”等；所述“8-10元稠杂环基”具体实例包括但不仅限于：吡咯烷基并环丙基、环戊基并氮杂环丙基、吡咯烷基并环丁基、吡咯烷基并哌啶基、吡咯烷基并哌嗪基、吡咯烷基并吗啉基、哌啶基并吗啉基、苯并吡咯烷基、苯并环戊基、苯并环己基、苯并四氢呋喃基、苯并吡咯烷基、嘧啶并四氢吡喃基；四氢咪唑并[4,5-c]吡啶基、3,4-二氢喹唑啉基、1,2-二氢喹喔啉基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2h-色原烯基、2h-色原烯-2-酮基、4h-色烯基、4h-色烯-4-酮基、4h-1,3-苯并噁嗪基、4,6-二氢-1h-呋喃并[3,4-d]咪唑基、3a,4,6,6a-四氢-1h-呋喃并[3,4-d]咪唑基、4,6-二氢-1h-噻吩并[3,4-d]咪唑基、4,6-二氢-1h-吡咯并[3,4-d]咪唑基、八氢-苯并[d]咪唑基、十氢喹啉基、六氢噻吩并咪唑基、六氢呋喃并咪唑基、4,5,6,7-四氢-1h-苯并[d]咪唑基、八氢环戊烯并[c]吡咯基、4h-1,3-苯并噁嗪基等。
[0108]
本发明所述的“碳原子、氮原子或硫原子被氧代”是指形成c＝o、n＝o、s＝o或so2的结构。
[0109]
本发明所述“任选被取代”是指被取代基上的一个或多个氢原子可以被一个或多个取代基“取代”或“不取代”的两种情形。
[0110]
本发明所述的“药学上可接受的盐”指化合物中存在的酸性官能团(例如-cooh、-oh、-so3h等)与适当的无机或者有机阳离子(碱)形成的盐，包括与碱金属或碱土金属形成的盐、铵盐，以及与含氮有机碱形成的盐；以及化合物中存在的碱性官能团(例如-nh2等)与适当的无机或者有机阴离子(酸)形成的盐，包括与无机酸或有机酸(例如羧酸等)形成的盐。
[0111]
本发明所述的“立体异构体”是指当本发明化合物含有一个或多个不对称中心，因而可作为外消旋体和外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单一非对映异构体。本发明化合物可以有不对称中心，这类不对称中心各自独立地产生两个光学异构体。本发明的范围包括所有可能的光学异构体和它们的混合物。本发明所述的化合物若含有烯烃双键，除非特别说明，包括顺式异构体和反式异构体。本发明所述的化合物可以以互变异构体(官能团异构体的一种)形式存在，其通过一个或多个双键位移而具有不同的氢的连接点，例如，酮和它的烯醇形式是酮-烯醇互变异构体。各互变异构体及其混合物都包括在本发明的范围中。所有化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、内消旋体、顺反异
构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物等，均包括在本发明范围中。
[0112]
本发明所述的“剂型”指将药物制成的适用于临床使用的形式，包括但不限于散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂、注射剂(包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液)、喷雾剂、气雾剂、粉雾剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂、含漱剂或栓剂，更优选散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、注射剂、软膏剂、含漱剂或栓剂。
[0113]
本技术中所引用的参考文件中的技术方案，均包含在本发明的公开范围内，可以用于解释本发明的内容。
[0114]
发明的有益效果
[0115]
1、本发明式(i)化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体具有优异的glp-1受体激动作用，能被安全的用于治疗glp-1r所介导的疾病或相关疾病。
[0116]
2、本发明式(i)化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体具有良好的生物稳定性，生物利用度高，展现出良好的药代动力学性质，具有很好的临床应用前景。
[0117]
3、本发明式(i)化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体显示出较低的毒性，耐药性好，安全性高。
具体实施方案
[0118]
下面将结合具体实施方式对本发明技术方案进行描述，对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
[0119]
1本发明化合物的制备实施例
[0120]
制备例中，缩写所代表的含义如下：
[0121]
tfa：三氟乙酸
ꢀꢀ
k2co3：碳酸钾
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
dcm：二氯甲烷
[0122]
meoh：甲醇
ꢀꢀꢀꢀꢀ
pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯 cs2co3：碳酸铯
[0123]
ea：乙酸乙酯
ꢀꢀꢀ
johnphos：2-(二叔丁基膦)联苯 lioh﹒h2o：一水合氢氧化锂
[0124]
thf：四氢呋喃
ꢀꢀ
pe：石油醚
[0125]
tbuxphospd-g3：甲烷磺酸(2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(ii)
[0126]
实施例1.(s)-2-((4-(6-((5-氰基-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-甲基(甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸的制备(化合物1-1)
[0127]
1.(s)-4-硝基-3-((氧杂环丁-2-基甲基)氨基)苯甲酸甲酯的制备
[0128][0129]
将3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(3.5g,17mmol)，(s)-氧杂环丁-2-甲胺(2.0g,23mmol)，三乙胺(6.8mg,68mmol)，dmf(10ml)，thf(10ml)，25℃反应4h。反应完毕，加入饱和碳酸氢钠溶液(20ml)，ea(3*30ml)萃取三次，合并ea，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，经正相制备色谱分离(pe:ea＝3:1)得产品3.2g，收率71.1％。
1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯的制备
[0143][0144]
将1-(6-氯吡啶-2-基)哌嗪三氟乙酸盐(600mg粗品)，(s)-2-(氯甲基)-1-(氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(464mg,1.7mmol)，碳酸钾(1.16g,8.4mmol)，溶于乙腈(10ml)，于50℃反应8h，反应完毕，旋干，经正相制备色谱分离(pe/ea，ea＝0～100％)得目标化合物550mg，两步产率71.8％。
[0145]
7.(s)-2-(((4-(6-((5-氰基-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁烷-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯的制备
[0146][0147]
将(s)-2-(((4-(6-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)甲基-1-氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(150mg,0.33mmol)，4-氟-5-(羟甲基)噻吩-2-腈(78mg,0.49mmol)，pd2(dba)3(30mg,0.033mmol)，johnphos(20mg,0.066mmol)，cs2co3(215mg,0.66mmol)，溶于1,4-二氧六环(8ml)，n2保护下，于100℃反应10h，反应完毕，旋干，经c18反相制备色谱分离(meoh:h2o＝4:5)得目标化合物90mg，收率47.4％。
[0148]
8.(s)-2-((4-(6-((5-氰基-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-甲基(甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸的制备(化合物1-1)
[0149][0150]
将(s)-2-(((4-(6-((5-氰基-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁烷-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(50mg,0.087mmol)，lioh﹒h2o(15mg,0.35mmol)，溶于thf(5ml)，加水(2.5ml)，于40℃反应2h。反应完毕，经稀盐酸调ph＝5～6，加ea萃取三次(3*10ml)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，经制备板分离(dcm:meoh＝40:3)得目标化合物7mg，收率11.3％。
[0151]
分子式:c
28
h
27
fn6o4s 分子量:562.6 lc-ms(m/e):563.2(m h

)
[0152]1h-nmr(400mhz,cd3od)δ:8.35(s,1h),7.97-7.99(d,1h,j＝8.0hz),7.70-7.68(d,
1h,j＝8.0hz),7.56(s,1h),7.46-7.48(d,1h,j＝8.0hz),6.32-6.34(d,1h,j＝8.0hz),6.07-6.09(d,1h,j＝8.0hz),5.49(s,2h),5.28(m,1h),4.7-4.9(m,2h),4.6-4.7(m,1h),4.4-4.5(m,1h),4.10-4.14(d,1h j＝16.0hz),3.99-4.03(d,1h,j＝16.0hz),3.66(s,4h),2.8-2.9(m,1h),2.70(s,4h),2.5-2.6(m,1h)。
[0153]
实施例2.(s)-2-((4-(6-((5-氰基-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-甲基(甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸的制备(化合物2-1)
[0154]
1. 2-氯-6-(哌啶-4-基)吡啶三氟乙酸盐的制备
[0155][0156]
将4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg,1.7mmol)，tfa(2ml)，溶于dcm(3ml)，于20℃反应3h，反应完毕，旋干，得粗品550mg。
[0157]
2.(s)-2-(((4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)甲基-1-氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯的制备
[0158][0159]
将2-氯-6-(哌啶-4-基)吡啶三氟乙酸盐(550mg粗品)，(s)-2-(氯甲基)-1-(氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(494mg,1.7mmol)，k2co3(1.16g,8.4mmol)，溶于乙腈(10ml)，于50℃反应8h，反应完毕，旋干，经正相制备色谱分离(dcm:meoh＝20:1)得目标化合物523mg，产率67.8％。
[0160]
3.(s)-2-(((4-(6-((5-氰基-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁烷-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯的制备
[0161][0162]
将(s)-2-(((4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)甲基-1-氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(215mg,0.55mmol)，4-氟-5-(羟甲基)噻吩-2-腈(130mg,0.83mmol)，pd2(dba)3(50mg,0.055mmol)，johnphos(32.8mg,0.11mmol)，cs2co3(358mg,1.1mmol)，溶于1,4-二氧六环(10ml)，n2保护下，于105℃反应8h，反应完毕，旋干，经c18反
相制备色谱分离(meoh:h2o＝9:1)得目标化合物215mg，收率68％。
[0163]
4.(s)-2-((4-(6-((5-氰基-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-甲基(甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸的制备(化合物2-1)
[0164][0165]
将(s)-2-(((4-(6-((5-氰基-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁烷-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(195mg,0.34mmol)，lioh﹒h2o(28mg,0.68mmol)，溶于thf(10ml)，加水(5ml)，于40℃反应1h。反应完毕，经稀盐酸调节ph＝5～6，加ea萃取三次(3*10ml)，合并有机相，无水na2so4干燥，过滤，旋干，经制备板分离(dcm:meoh＝40:3)得目标化合物20mg，收率10.5％。
[0166]
分子式:c
29
h
28
fn5o4s 分子量:561.6 lc-ms(m/e):562.2(m h

)
[0167]1h-nmr(400mhz,cd3od)δ:8.30(s,1h),7.95-7.97(d,1h,j＝8.0hz),7.65-7.67(d,1h,j＝8.0hz),7.58-7.62(m,1h),7.57(s,1h),6.87-6.89(d,1h,j＝8.0hz),6.61-6.63(d,1h,j＝8.0hz),5.55(s,2h),5.24-5.27(m,1h),4.7-4.8(t,2h),4.6-4.7(m,1h),4.4-4.5(m,1h),4.10-4.14(d,1h,j＝16.0hz),3.99-4.03(d,1h,j＝16.0hz),3.16-3.19(d,1h,j＝12.0hz),3.05-3.08(d,1h,j＝12.0hz),2.73-2.81(m,2h),2.41-2.54(m,3h),1.96-1.98(d,4h,j＝8.0hz)。
[0168]
实施例3.(s)-2-(((4-(6-((5-氰基-3-氟-4-甲基噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸的制备(化合物4-1)
[0169]
(1)(3-氟噻吩-2-基)甲醇的制备
[0170][0171]
3-氟噻吩-2-羧酸甲酯(3g,18.7mmol)溶于四氢呋喃(50ml)中，冷却至0℃，加入四氢铝锂(1.1g,29mmol)，0℃反应0.5小时。加入水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，有机相饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到产物(2.2g，89％)。
[0172]
(2)(5-溴-3-氟噻吩-2-基)甲醇的制备
[0173][0174]
(3-氟噻吩-2-基)甲醇(2.2g,16.6mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(35ml)中，加入n-溴代丁二酰亚胺(3.2g,18.0mmol)，20℃下反应2h，浓缩反应液，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝0-15％)得到产物(2.6g,74％)。
[0175]
(3)2-((5-溴-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)四氢-2h-吡喃的制备
[0176][0177]
(5-溴-3-氟噻吩-2-基)甲醇(2.6g,12.3mmol)溶于二氯甲烷(25ml)，依次加入二氢吡喃(2.1g,25.0mmol)，一水合对甲苯磺酸(106mg,0.56mmol)，20℃反应16h,浓缩反应液，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝0-15％)得到产物(3.1g，85％)。
[0178]
(4)4-氟-5-((((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)甲基)噻吩-2-腈的制备
[0179][0180]
2-((5-溴-3-氟噻吩-2-基)甲氧基)四氢-2h-吡喃(3.1g,10.5mmol)溶于四氢呋喃/水(5/25ml)，加入氰化锌(1.5g,12.8mmol)，tbuxphospd-g3(834mg，1.0mmol)，氮气保护，40℃反应8小时。乙酸乙酯萃取反应液，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝0-15％)得到产物(2.2g，86％)。
[0181]
(5)4-氟-3-甲基-5-((((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)甲基)噻吩-2-甲腈的制备
[0182][0183]
4-氟-5-((((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)甲基)噻吩-2-腈(2.2g,9.0mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，氮气保护，冷却至-45℃，滴加1m tmpmgcllicl(17.9ml,17.9mmol),-45℃反应1小时，加入碘甲烷(8.9g,62.7mmol)，-45℃反应2小时。加入饱和氯化钠溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，有机相饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝0-15％)得到产物(1.2g，52％)。
[0184]
(6)4-氟-5-(羟甲基)-3-甲基噻吩-2-腈的制备
[0185][0186]
4-氟-3-甲基-5-((((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)甲基)噻吩-2-甲腈(1.2g,4.7mmol)，溶于甲醇(30ml)中，加入一水合对甲苯磺酸(997mg,5.2mmol)，20℃反应16小时。三乙胺调节ph＝7，浓缩反应液，乙酸乙酯萃取，水洗，饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品810mg。
[0187]
(7)甲基(s)-2-(((4-(6-((5-氰基-3-氟-4-甲基噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸盐的制备
[0188][0189]
4-氟-5-(羟甲基)-3-甲基噻吩-2-腈(112mg粗品)溶于二氧六环(20ml)，加入(s)-2-(((4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(198mg,0.44mmol)，pd2(dba)3(40mg,0.044mmol)，johnphos(27mg,0.09mmol)，碳酸铯(287mg,0.88mmol)，氮气保护，105℃反应8小时。浓缩反应液，柱层析(meoh/h2o＝0-85％)得到产物(153mg，收率59％)。
[0190]
(8)(s)-2-(((4-(6-((5-氰基-3-氟-4-甲基噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸的制备
[0191][0192]
甲基(s)-2-(((4-(6-((5-氰基-3-氟-4-甲基噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸盐(153mg,0.26mmol)溶于四氢呋喃/水(8/3ml)，加入一水合氢氧化锂(22mg,0.52mmol)，20℃反应8小时，1m盐酸调节ph＝7，浓缩反应液，制备板分离(meoh/dcm＝1/8)得到产物(22.8mg，15％)。
[0193]
分子式:c
30
h
30
fn5o4s 分子量:575.7 lc-ms(m/e):576.1(m h

)
[0194]1h-nmr(400mhz,cd3od)δ:8.28(s,1h),7.99-7.89(m,1h),7.71-7.52(m,2h),6.92-6.85(m,1h),6.65-6.55(m,1h),5.52(s,2h),5.31-5.20(m,1h),4.75-4.41(m,3h),4.15-3.92(m,2h),3.38-3.22(m,1h),3.18-2.95(m,2h),2.85-2.64(m,2h),2.58-2.31(m,3h),2.25(s,3h),2.05-1.85(m,4h)。
[0195]
实施例4.(s)-2-((4-(6-((5-氰基-4-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁烷-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸的制备(化合物5-1)
[0196]
(1)3-氟-5-碘噻吩-2-羧酸甲酯的制备
[0197][0198]
将3-氟噻吩-2-羧酸甲酯(6.0g,37.5mmol)溶于四氢呋喃(50ml)中，氮气保护下-45℃加入2,2,6,6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂络合物四氢呋喃溶液(1m,63.7ml,63.7mmol)，-45℃下反应0.5小时，加入碘(10.1g,39.7mmol)的四氢呋喃(15ml)溶液，-45℃下反应0.5小时，饱和食盐水(50ml)淬灭，乙酸乙酯(100ml)萃取，有机相无水硫酸钠干燥，旋干得粗品直接用于下一步。
[0199]
(2)3-氟-5-碘噻吩-2-羧酸的制备
[0200][0201]
将3-氟-5-碘噻吩-2-羧酸甲酯的上步粗品溶于甲醇(75ml)与水(75ml)中，加入氢氧化锂一水合物(11g,262.5mmol)，70℃下反应0.5小时，2n盐酸调节ph至3，乙酸乙酯(100ml)萃取，饱和食盐水(50ml)洗涤，有机相无水硫酸钠干燥，旋干得粗品直接用于下一步。
[0202]
(3)3-氟-5-碘噻吩-2-羰基氯的制备
[0203][0204]
将3-氟-5-碘噻吩-2-羧酸的上步粗品溶于二氯甲烷(150ml)中，加入dmf(0.1ml)，25℃下慢慢滴加草酰氯(9.5g,75.0mmol)，加入完毕25℃反应0.5小时，旋干得粗品直接用于下一步。
[0205]
(4)3-氟-5-碘噻吩-2-羧酰胺的制备
[0206][0207]
将3-氟-5-碘噻吩-2-羰基氯的上步粗品20℃下滴加到25％氨水(100ml)中，乙酸乙酯(100ml)萃取，饱和食盐水(50ml)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干得粗品直接用于下一步。
[0208]
(5)3-氟-5-碘噻吩-2-腈的制备
[0209][0210]
将3-氟-5-碘噻吩-2-羧酰胺的上步粗品，三乙胺(11.4g,112.5mmol)溶于二氯甲烷(100ml)中，0℃加入三氟乙酸酐(11.8g,56.2mmol)，25℃下反应1小时，饱和食盐水(50ml)淬灭，有机相无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝0-10％)得到产物(5.5g,五步收率58.0％)。
[0211]
(6)3-氟-5-甲酰基噻吩-2-腈的制备
[0212][0213]
将3-氟-5-碘噻吩-2-腈(2.5g,9.9mmol)溶于thf(30ml)中，氮气保护下-78℃加入异丙基氯化镁(2m,5.4ml,10.9mmol)，-78℃下反应1小时，加入dmf(1.5g,20.5mmol)，-78℃下反应1小时，饱和氯化铵(100ml)淬灭，乙酸乙酯(100ml)萃取，有机相无水硫酸钠干燥，旋
干，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝0-10％)得到产物(470mg,30.7％)。
[0214]
(7)3-氟-5-(羟甲基)噻吩-2-腈的制备
[0215][0216]
将3-氟-5-甲酰基噻吩-2-腈(470mg,3.0mmol)溶于乙醇(35ml)中，0℃加入硼氢化钠(181mg,4.8mmol)，20℃下反应1小时，饱和食盐水(50ml)淬灭，乙酸乙酯(100ml)萃取，有机相无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝0-30％)得到产物(450mg,94.6％)。
[0217]
(8)叔丁基(s)-2-((4-(6-((5-氰基-4-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁烷-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸酯的制备
[0218][0219]
将叔丁基(s)-2-((4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸酯(400mg,0.8mmol),3-氟-5-(羟甲基)噻吩-2-腈(190mg,1.2mmol)，碳酸铯(521mg,1.6mmol)，2-(二叔丁基膦)联苯(48mg,0.16mmol)与三二亚苄基丙酮二钯(73mg,0.08mmol)溶于1,4-二氧六环(20ml)中，氮气保护下105℃反应16小时，抽滤，滤液旋干，中压反相制备(甲醇/水＝0-60％)得到产物(230mg,46.3％)。
[0220]
(9)(s)-2-((4-(6-((5-氰基-4-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁烷-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸的制备
[0221][0222]
将叔丁基(s)-2-((4-(6-((5-氰基-4-氟噻吩-2-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)甲基)-1-(氧杂环丁烷-2-基甲基)-1h-苯并[d]咪唑-6-羧酸酯(230mg，0.37mmol)溶于二氯甲烷(20ml)与三氟乙酸(5ml)中，25℃下反应5小时，饱和碳酸氢钠调节ph至6-7，有机相无水硫酸钠干燥，旋干，中压反相制备(乙腈/水＝0-40％)得到产物(76mg,36.3％)。
[0223]
分子式：c
29
h
28
fn5o4s 分子量：561.6 lc-ms(m/e)：561.9(m h

)
[0224]1hnmr(400mhz,cdcl3):δ:8.10(s,1h),8.03(d,j＝7.6,1h),7.80(d,j＝8.0,1h),7.55-7.45(m,1h),6.87(s,1h),6.80(d,j＝7.2,1h),6.61(d,j＝8.4,1h),5.47(s,2h),5.25-5.15(m,1h),4.75-4.55(m,3h),4.45-4.35(m,1h),4.06(s,2h),3.20-3.10(m,2h),2.80-2.60(m,2h),2.50-2.30(m,3h),2.00-1.80(m,4h)。
[0225]
2本发明化合物的药理活性试验
[0226]
以下通过药理实验例进一步阐述本发明化合物的有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。
[0227]
实验例1：本发明化合物的体外细胞学活性一
[0228]
供试品：本发明化合物，其结构式、制备方法见实施例。
[0229]
1.实验目的
[0230]
利用glp1r受体camp实验，测定待测化合物对glp1r受体是否有激动剂活性。
[0231]
2.实验材料及仪器设备
[0232]
2.1实验试剂耗材
[0233][0234][0235]
2.2实验仪器设备
[0236][0237]
3.实验方法
[0238]
3.1细胞培养及试剂配制
[0239]
1)细胞株：flpin-293-glp1r
[0240]
2)完全培养基:dmem 10％胎牛血清 1倍青霉素链霉素 200μg/ml潮霉素
[0241]
3)实验缓冲液:1倍hbss 20mm hepes 0.1％bsa 500μm ibmx
[0242]
3.2 glp1r受体活性测定
[0243]
3.2.1 细胞培养和种板
[0244]
1)将hek293-glp1r细胞株培养于37℃,5％co2环境下的完全培养基中；
[0245]
2)胰蛋白酶消化处理后将细胞重悬于实验缓冲液中，接种到384细胞培养板中，接种密度为20,000每孔，接种体积为15μl。
[0246]
3.2.2活性的检测
[0247]
1)将化合物用实验缓冲液稀释；
[0248]
2)每孔加入5μl的化合物，37℃培养30分钟；
[0249]
3)冻融camp-d2和anti-camp-eu
3
，用实验缓冲液将其稀释20倍；
[0250]
4)加入10μl camp-d2至实验孔，然后加入10μl anti-camp-eu
3
至实验孔中；
[0251]
5)将反应板于室温200g离心30s，25℃静置1h后，利用envision收集数据。
[0252]
3.3数据分析
[0253]
利用graphpad非线性拟合公式计算化合物ec
50
。
[0254]
3.4实验结果
[0255]
表1本发明化合物glp-1r激动剂活性
[0256][0257][0258]
结论：由表1可见，本发明化合物1-1和化合物2-1对glp-1r具有良好的激动活性。
[0259]
实验例2：本发明化合物的体外细胞学活性二
[0260]
缩略语中文全称glp1r胰高血糖素样肽1受体camp环磷酸腺苷fbs胎牛血清pbs磷酸盐缓冲液bsa牛血清白蛋白ibmx1-甲基-3-异丁基黄嘌呤dmso二甲基亚砜hbss平衡盐溶液tryple缓冲液buffer普通缓冲液lysis buffer裂解缓冲液
[0261]
供试品：本发明化合物，其结构式、制备方法见实施例。
[0262]
实验试剂：
[0263][0264][0265]
1.实验方法:
[0266]
1.1细胞培养及试剂配制
[0267]
4)细胞株：flpin-293-glp1r
[0268]
5)完全培养基:dmem 10％胎牛血清 1*青霉素链霉素 200μg/ml潮霉素
[0269]
6)实验缓冲液:1*hbss 20mm hepes 0.1％bsa 500μm ibmx
[0270]
1.2待测化合物信息
[0271][0272]
1.3glp1r受体活性测定
[0273]
1.3.1细胞培养和种板
[0274]
1)将hek293-glp1r细胞株培养于37℃,5％co2环境下的完全培养基中；
[0275]
2)tryple消化处理后将细胞重悬于实验缓冲液中，种到384细胞培养板中，接种密度为20,000每孔，接种体积为15μl。
[0276]
1.3.2活性的检测
[0277]
1)将化合物用buffer稀释；
[0278]
2)每孔加入5μl的化合物，37℃培养30分钟；
[0279]
3)冻融camp-d2和anti-camp-eu
3
，用lysis buffer将其稀释20倍。
[0280]
4)加入10μl camp-d2至实验孔，然后加入10μl anti-camp-eu
3
至实验孔中。
[0281]
5)将反应板于室温200g离心30s，25℃静置1h后，利用envision收集数据。
[0282]
1.4数据分析
[0283]
利用graphpad非线性拟合公式计算化合物ec
50
:
[0284]
y＝bottom (top-bottom)/(1 10^((logec
50-x)*hillslope))
[0285]
x:化合物浓度log值；y:activation％；bottom:最低值；top:最高值；hillslope:斜率
[0286]
2.实验结果
[0287]
表2本发明化合物体外细胞学活性数据
[0288][0289]
3.实验结论
[0290]
对于camp实验，本发明化合物均对glp-1r展现出激动活性，且化合物4-1活性较优。
[0291]
实验例3：本发明化合物的药代动力学实验一
[0292]
1.供试品 本发明化合物，其结构式、制备方法见实施例。
[0293]
2.实验动物 cd-1小鼠，6只/剂量。
[0294]
3.供试品溶液准备
[0295]
(1)静脉推注给药(iv)：取化合物2-1(2.52mg)，加入dmso(二甲基亚砜)70.0μl，涡旋溶解，然后加入peg400 116.0μl，涡旋混匀，最后加入28％hp-β-cd溶液2.14ml，涡旋混匀，50℃保温20min即得澄清溶液，浓度为1mg/ml。
[0296]
(2)口服给药(po)：取化合物2-1(3.96mg)，于组织研磨器中，加入3.66ml溶媒2％hpc 0.1％吐温80，以1200rpm的转速研磨均匀，即得终浓度为1mg/ml均匀混悬液。
[0297]
4.实验方法
[0298]
4.1给药
[0299]
供试品静脉推注给药(iv)，给药剂量为5mg/kg，给药体积5ml/kg；
[0300]
口服给药(po)，给药剂量为10mg/kg，给药体积10ml/kg。
[0301]
4.2采血
[0302]
给药后于0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h，进行眼眶采血，每个剂量的6只动物分成两组，交替采血，每个时间点每只动物采取100μl左右全血，在8000rpm的高速离心机中离心6min分离血浆，血浆于-80℃冰箱冻存。
[0303]
4.3血浆样品分析
[0304]
采用蛋白沉淀法：取10μl血浆至96孔深孔板中，加入200μl含内标的乙腈溶液，内标为tbtm(甲苯磺丁脲)，浓度为50ng/ml。涡旋10min，然后4000转/分钟离心20min，取100μl上清液，加入100μl水，涡旋3min；lc-ms/ms分析。
[0305]
4.4实验结果
[0306]
表3本发明化合物的小鼠pk评价结果(iv)
[0307][0308]
表4本发明化合物的小鼠pk评价结果(po)
[0309][0310]
注：t
1/2
代表半衰期；t
max
代表达峰时间；c
max
代表最大的血药浓度值；auc
last
代表药时曲线下面积0
→
t；cl代表清除率；mrt代表平均滞留时间；vss代表表观分布容积。
[0311]
4.5实验结论
[0312]
表3、表4实验数据表明，静脉注射或口服本发明化合物在生物体内具有较高的暴露量，具有适宜的半衰期和清除率，展现出良好的药代动力学性质，具有很好的临床应用前景。
[0313]
实验例4：本发明化合物的药代动力学实验二
[0314]
1.供试品：本发明化合物，其结构式、制备方法见实施例。
[0315]
2.实验动物：cd-1小鼠，雌性，数量＝6/给药方式/化合物，从北京维通利华实验动物技术有限公司购买动物生产许可证号：scxk(京)2016-0006。
[0316]
3.供试品药液配制
[0317]
3.1化合物4-1溶液的配制
[0318]
(1)静脉推注给药(iv)：取化合物4-1(2.13mg)，加入peg400溶液97.5μl，涡旋溶解，然后加入28％hp-β-cd溶液1.85ml，涡旋混匀，50℃保温20min，过0.45μm滤膜，即得浓度为1mg/ml的澄清溶液。
[0319]
(2)口服给药(po)：取化合物4-1(3.34mg)置于组织研磨器中，加入3.06ml溶媒2％hpc 0.1％吐温80，以1200rpm转速研磨均匀，即得浓度为1mg/ml的均匀混悬液。
[0320]
3.2化合物5-1溶液的配制
[0321]
(1)静脉推注给药(iv)：取化合物5-1(1.86mg)，加入peg400溶液91.5μl，涡旋溶解，然后加入28％hp-β-cd溶液1.74ml，涡旋混匀，50℃保温10min，即得浓度为1mg/ml的澄清溶液。
[0322]
(2)口服给药(po)：称取化合物5-1(3.17mg)置于组织研磨器中，加入3.12ml溶媒2％hpc 0.1％吐温80，以1000rpm转速研磨均匀，即得浓度为1mg/ml的均匀混悬液。
[0323]
4.实验方法
[0324]
4.1给药
[0325]
静脉推注给药(iv)，给药剂量为5mg/kg，给药体积5ml/kg；
[0326]
口服给药(po)，给药剂量为10mg/kg，给药体积10ml/kg。
[0327]
4.2采血
[0328]
给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h，具体按下表所示方式采血。
[0329][0330]
每个时间点每只动物通过眼内眦采集全血约50μl，放置到含有edta-k2抗凝剂的抗凝管中，在4℃条件下8000转/分钟离心6分钟得到血浆样品，血浆于-80℃冰箱冻存。
[0331]
4.3血浆样品分析
[0332]
采用蛋白沉淀法：取血浆样品20μl，加入内标(含甲苯磺丁脲50ng/ml的乙腈溶液)200μl，涡旋10min后，然后4000转/分钟离心20分钟，取上清液100μl，再加入100μl水，涡旋混匀3min后，lc-ms/ms分析。
[0333]
4.4实验结果
[0334]
表5本发明化合物cd1小鼠pk评价结果
[0335][0336]
auc
0-t
代表药时曲线下面积0
→
t；cl代表清除率；v
ss
表示稳态表观分布容积；t
1/2
代表末端消除半衰期；t
max
代表达峰时间；c
max
代表达峰浓度；f％代表绝对生物利用度。
[0337]
4.5实验结论
[0338]
由表5的数据可知，本发明化合物具有较高的暴露量和生物利用度，因此具有良好的药代动力学性质。