一种适用于谷氨酸棒杆菌的高强度启动子及应用的制作方法

技术特征：
1.一种启动子，其特征在于，核苷酸序列如seq id no.1～18任一所示。2.含有权利要求1所述启动子的表达载体。3.根据权利要求2所述的表达载体，其特征在于，将seq id no.1所示的启动子与质粒可操作性连接，获得所述表达载体；所述质粒包括但不限于pec-xk99e、pxz10145、pxmj19、pjyw-4或pjyw-5。4.含有权利要求1所述启动子或权利要求2～3任一所述表达载体的微生物细胞。5.一种重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，在谷氨酸棒杆菌(corynebacterium glutamicum)基因组上引入权利要求1所述的启动子或含有权利要求2～3任一所述的表达载体。6.根据权利要求5所述的重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，以谷氨酸棒杆菌atcc 13032为宿主细胞，含连接有seq id no.1所示启动子、seq id no.20所示高丝氨酸乙酰基转移酶基因的载体pec-xk99e。7.权利要求1所述的启动子在强化基因或蛋白质表达方面的应用。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述基因包括但不限于参与微生物生长或代谢的基因；所述蛋白质为内源蛋白或外源蛋白。9.权利要求1所述的启动子在提高谷氨酸棒杆菌生产o-乙酰-l-高丝氨酸方面的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，将seq id no.1所示的启动子、seq id no.20所示的编码高丝氨酸乙酰基转移酶的基因与载体pec-xk99e连接，转化至产高丝氨酸的谷氨酸棒杆菌中，获得重组谷氨酸棒杆菌；再将重组谷氨酸棒杆菌在25-37℃、150-250rpm条件下培养至少36h。

技术总结
本发明公开了一种适用于谷氨酸棒杆菌的高强度启动子及应用，属于生物工程技术领域。本发明从谷氨酸棒杆菌中筛选获得了18个可提高蛋白表达强度的启动子。本发明筛选获得的启动子可导入至生产氨基酸的微生物中，经证实，在谷氨酸棒杆菌中，该启动子可强化基因的表达量，使其涉及的目标产物产量提高2～10倍甚至更高，具有重要的工业化应用价值。具有重要的工业化应用价值。具有重要的工业化应用价值。


技术研发人员：周景文 陈坚 李宁 曾伟主 堵国成
受保护的技术使用者：江南大学
技术研发日：2020.04.07
技术公布日：2021/10/11