一种含益生菌的茶饮料在淡斑美白养颜中的应用的制作方法

1.本发明涉及饮料生产技术领域，更具体的说是涉及一种含益生菌的茶饮料在淡斑美白养颜中的应用。


背景技术：

2.在各种亚洲文化中，较浅的肤色一直与年轻和美丽联系在一起。皮肤颜色受到许多内在因素的影响，包括皮肤类型和遗传背景，以及外在因素；外在因素包括工作压力大、熬夜、上网、风沙日晒等。在生理条件下，色素沉着可以保护皮肤免受有害的紫外线伤害。然而，过多的黑色素产生会导致广泛的美学问题，包括黄褐斑、雀斑色素沉着，这可能给人民带来精神不振、没有勇气，使人们出现自我评价低、个性敏感、猜疑、抑郁以及敌对等负面情绪。因此，健康美容美白已经成为一种社会需要。
3.酪氨酸酶是黑色素合成过程中的重要关键酶。氨基酸在酪氨酸酶的作用下生成多巴，然后经过一系列化学反应最终生成黑色素。另外，紫外线辐射能够增加人体内活性氧(ros)。ros能够促进酪氨酸的连续氧化，导致黑色素的产生增加。因此，目前美白剂主要集中在研究酪氨酸酶活性的抑制剂和ros清除剂(即抗氧化剂)。
4.目前市场上美白养颜的保健品和护肤品很多，然而它们价格通常昂贵，以及一些护肤品会引起皮肤接触性皮炎、刺激性、和敏感性等问题；而具有美白养颜的饮料较少。基于此，针对人们对更高生活品质和健康的追求，急需发明一种具有美白养颜功能的饮料，这样可以在日常生活中随时饮用，保持肌肤润泽，具有广阔的市场前景。
5.茶叶中的茶多酚、类胡萝卜素、儿茶素等成分具有抗氧化功能。另外，益生菌是活的微生物，当以足够的量施用时，会给宿主带来健康益处。益生菌的使用已经与一些健康有益效果相关，包括肠道菌群的调节、氧化还原平衡、免疫应答、脑神经调节等。大量实验研究表明，双歧杆菌属和乳杆菌属的物种的代谢物具有淡斑美白养颜的功效。
6.因此，提供一种含益生菌的茶饮料在淡斑美白养颜中的应用是本领域技术人员亟需解决的问题。


技术实现要素：

7.有鉴于此，本发明提供了一种含益生菌的茶饮料在淡斑美白养颜中的应用，茶饮料为将益生菌与中国传统茶组合制备。
8.为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
9.一种含益生菌的茶饮料在淡斑美白养颜中的应用。
10.进一步，所述茶饮料按重量份计，由以下原料组成：鼠李糖乳杆菌nx
‑
21
‑
3份、植物乳杆菌nx
‑
11
‑
4份、干酪乳杆菌ls011
‑
3份、动物双歧杆菌nx
‑
61
‑
3份、嗜酸乳杆菌la
‑
031
‑
4份、茶包120
‑
160份、绵白糖450
‑
520份、圆苞车前子壳120
‑
180份和低聚果糖120
‑
180份。
11.进一步，所述鼠李糖乳杆菌nx
‑
2的保藏编号为cgmcc no.20110(参见专利202010699218.6)；所述植物乳杆菌nx
‑
1的保藏编号为cgmcc no.20109(参见专利
202010699291.3)；所述干酪乳杆菌ls01的保藏编号为cgmcc no.22006；所述动物双歧杆菌nx
‑
6的保藏编号为cgmcc no.20114(参见专利202010699202.5)；所述嗜酸乳杆菌la
‑
03的保藏编号为cgmcc no.22239。
12.干酪乳杆菌ls01，保藏编号为cgmcc no.22006，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称cgmcc，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2021年03月15日，分类命名为干酪乳杆菌lactobacillus casei。
13.嗜酸乳杆菌la
‑
03，保藏编号为cgmcc no.22239，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称cgmcc，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2021年04月25日，分类命名为嗜酸乳杆菌lactobacillus acidophilus。
14.进一步，所述鼠李糖乳杆菌nx
‑
2为1
×
10
11
cfu/g；所述植物乳杆菌nx
‑
1为1
×
10
11
cfu/g；所述干酪乳杆菌ls01为1
×
10
11
cfu/g；所述嗜酸乳杆菌la
‑
03为1
×
10
11
cfu/g；所述动物双歧杆菌nx
‑
6为1
×
10
10
cfu/g。
15.进一步，所述茶包为绿研茉莉茶包或蜜桃乌龙茶包。
16.优选地，所述茶包为绿研茉莉茶包。
17.进一步，所述茶饮料的制备方法如下：
18.(1)将绵白糖置于粉碎机中粉碎后，过50
‑
70目筛，备用；
19.(2)按所述重量份数称取各原料，将除茶包以外的原料投入三维混料机中混合均匀；设置转速10
‑
30r/min，时间30
‑
50min；
20.(3)将步骤(2)混合均匀的原料加入饮料袋中，再放入茶包，封口。
21.进一步，所述的一种含益生菌的茶饮料的饮用方法：往饮料袋里面加入35～40℃温水，摇晃2min后即可饮用。
22.进一步，所述的一种含益生菌的茶饮料在降低黑色素含量中的应用。
23.进一步，所述的一种含益生菌的茶饮料在降低酪氨酸酶活性中的应用。
24.经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一种含益生菌的茶饮料在淡斑美白养颜中的应用，茶饮料可显著降低斑马鱼体内黑色素的含量和酪氨酸酶的活性，具备应用于体内淡斑美白养颜的潜能。
附图说明
25.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
26.图1附图为本发明实施例1
‑
4的茶饮料对斑马鱼体内黑色素含量影响的直观图；
27.图2附图为本发明实施例1
‑
4的茶饮料对斑马鱼体内黑色素含量影响的统计图；
28.图3附图为本发明实施例1
‑
4的茶饮料对斑马鱼体内酪氨酸酶活性的影响。
具体实施方式
29.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完
整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
30.鼠李糖乳杆菌nx
‑
2、植物乳杆菌nx
‑
1、干酪乳杆菌ls01、动物双歧杆菌nx
‑
6、嗜酸乳杆菌la
‑
03来自广东南芯医疗科技有限公司；鼠李糖乳杆菌nx
‑
2、植物乳杆菌nx
‑
1、干酪乳杆菌ls01、嗜酸乳杆菌la
‑
03均为1
×
10
11
cfu/g；动物双歧杆菌nx
‑
6为1
×
10
10
cfu/g；绿研茉莉茶包、蜜桃乌龙茶包来自贵州铜仁净茶茶业有限公司；绵白糖来自广西金绣球食品有限责任公司；圆苞车前子壳来自广州莆阳国际贸易有限公司；低聚果糖来自河南旗诺食品配料有限公司。
31.氢氧化钠、左旋多巴和脱氧胆酸钠均购自上海麦克林生化科技有限公司。
32.实施例1
33.一种淡斑美白的益生菌与中国传统茶组合的茶饮料，按重量份计，由以下原料组成：鼠李糖乳杆菌nx
‑
21份、植物乳杆菌nx
‑
11份、干酪乳杆菌ls011份、动物双歧杆菌nx
‑
61份、嗜酸乳杆菌la
‑
031份、绿研茉莉茶包120份、绵白糖450份、圆苞车前子壳120份、低聚果糖120份。
34.上述茶饮料的制备方法，包括以下步骤：
35.(1)将绵白糖置于粉碎机中粉碎后，并过60目筛，备用；
36.(2)按上述重量份数称取各原料，将除绿研茉莉茶包以外的原料投入三维混料机中混合均匀；设置转速20r/min，时间40min，混料过程中不定期检测物料是否有结块现象；
37.(3)将上述混合均匀的原料加入饮料袋中，再放入绿研茉莉茶包，封口。
38.实施例2
39.一种淡斑美白的益生菌与中国传统茶组合的茶饮料，按重量份计，由以下原料组成：鼠李糖乳杆菌nx
‑
21.5份、植物乳杆菌nx
‑
12份、干酪乳杆菌ls011份、动物双歧杆菌nx
‑
61.5份、嗜酸乳杆菌la
‑
031.5份、绿研茉莉茶包150份、绵白糖490份、圆苞车前子壳140份、低聚果糖140份。
40.上述茶饮料的制备方法，包括以下步骤：
41.(1)将绵白糖置于粉碎机中粉碎后，并过50目筛，备用；
42.(2)按上述重量份数称取各原料，将除绿研茉莉茶包以外的原料投入三维混料机中混合均匀；设置转速10r/min，时间50min，混料过程中不定期检测物料是否有结块现象；
43.(3)将上述混合均匀的原料加入饮料袋中，再放入绿研茉莉茶包，封口。
44.实施例3
45.一种淡斑美白的益生菌与中国传统茶组合的茶饮料，按重量份计，由以下原料组成：鼠李糖乳杆菌nx
‑
23份、植物乳杆菌nx
‑
14份、干酪乳杆菌ls013份、动物双歧杆菌nx
‑
63份、嗜酸乳杆菌la
‑
034份、绿研茉莉茶包160份、绵白糖520份、圆苞车前子壳180份、低聚果糖180份。
46.上述茶饮料的制备方法，包括以下步骤：
47.(1)将绵白糖置于粉碎机中粉碎后，并过70目筛，备用；
48.(2)按上述重量份数称取各原料，将除绿研茉莉茶包以外的原料投入三维混料机中混合均匀；设置转速30r/min，时间30min，混料过程中不定期检测物料是否有结块现象；
49.(3)将上述混合均匀的原料加入饮料袋中，再放入绿研茉莉茶包，封口。
50.实施例4
51.一种淡斑美白的益生菌与中国传统茶组合的茶饮料，按重量份计，由以下原料组成：鼠李糖乳杆菌nx
‑
23份、植物乳杆菌nx
‑
14份、干酪乳杆菌ls013份、动物双歧杆菌nx
‑
63份、嗜酸乳杆菌la
‑
034份、蜜桃乌龙茶包160份、绵白糖520份、圆苞车前子壳180份、低聚果糖180份。
52.上述茶饮料的制备方法，包括以下步骤：
53.(1)将绵白糖置于粉碎机中粉碎后，并过70目筛，备用；
54.(2)按上述重量份数称取各原料，将除蜜桃乌龙茶包以外的原料投入三维混料机中混合均匀；设置转速30r/min，时间30min，混料过程中不定期检测物料是否有结块现象；
55.(3)将上述混合均匀的原料加入饮料袋中，再放入蜜桃乌龙茶包，封口。
56.试验例实施例1
‑
4的茶饮料对斑马鱼体内的黑色素含量和酪氨酸酶活性的影响
57.挑选发育至4dpf(days post fertilization)的健康野生型ab系斑马鱼置于6孔细胞培养板中，每孔20条鱼。实验设置空白对照组、茶饮料干预组，每组分别设6个复孔。空白对照组加入pbs，茶饮料干预组加入20％茶饮料(分别将实施例1、实施例2、实施例3和实施例4步骤(2)混匀后的原料与打开的茶包混合均匀，分别取出18.55g，各加入40℃温水200ml，摇晃2min后，过滤茶渣(因先将茶包打开，取出茶，再混匀，为了避免茶渣影响外观和口感，先过滤)，冷却至室温，然后用pbs将茶饮料稀释至20％(v/v))，每孔5ml；28℃孵育48h后，用体视显微镜观察斑马鱼色素沉着情况并拍照记录(图1)；用pbs冲洗两遍后，收集每孔的斑马鱼置于1.5ml离心管，将离心管中的水吸干后，加入150μl脱氧胆酸钠溶液(5mg/ml)，将离心管用超声波破碎仪在冰浴中处理，工作5s、间隔8s，超声破碎10次，12000
×
g，4℃离心10min，收集上清液至另外一只1.5ml离心管中。
58.黑色素含量的检测：向上述有沉淀的离心管中加入150μl naoh溶液，在100℃水浴锅中水浴加热10min，并震动使离心管中黑色素充分溶解。取100μl溶液置于96孔板中，用酶标仪于405nm波长处测定吸光度(od)。设置溶剂调零组(未有斑马鱼)。按下列公式计算斑马鱼体内黑色素的含量:
[0059][0060]
结果见图2。
[0061]
酪氨酸酶活力的检测：取100μl上述上清液置于96孔板中，同时加入100μl左旋多巴溶液(5mmol/l)，置于37℃孵育1h。用酶标仪于475nm波长处测定吸光度(od)。设置溶剂调零组(未有斑马鱼)。按下列公式计算斑马鱼体内酪氨酸酶的活性:
[0062][0063]
结果见图3。
[0064]
采用spss 19.0软件统计处理数据，实验数据均用数据表示，用单因素
方差分析。与空白对照组相比：
*
p<0.05，
**
p<0.01，
***
p<0.005。
[0065]
由图1可知，空白组对照组的斑马鱼体内有大量黑色素沉着，而实施例1、实施例2、实施例3和实施例4茶饮料组斑马鱼体内的黑色素沉着明显减少。
[0066]
由图2可知，实施例1、实施例2、实施例3和实施例4茶饮料组斑马鱼体内的黑色素含量分别72.00
±
4.95％、59.94
±
4.69％、46.32
±
4.09％和67.61
±
6.95％，与空白对照组(100
±
8.05％)相比较均有显著性差异(p<0.01)。另外，由图3可知，实施例1、实施例2、实施例3和实施例4茶饮料组斑马鱼体内的酪氨酸酶活性分别68.71
±
3.81％、50.70
±
3.43％、43.21
±
3.61％和74.46
±
4.73％，与空白对照组(100
±
4.51％)相比较均有显著性差异(p<0.01)。因此，上述结果表明茶饮料可显著降低斑马鱼体内的黑色素含量和酪氨酸酶活性，表现出良好淡斑美白美颜的作用。
[0067]
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。