毡毛青霉DZ-9-67及其在杜仲叶总黄酮提取中的应用的制作方法

技术特征：
1.毡毛青霉(penicillium velutinum)dz
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67，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：gdmcc no:61728，保藏日期2021年6月21日，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；邮编510070。2.一种权利要求1所述毡毛青霉dz
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67在杜仲叶总黄酮提取中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述应用的方法为：杜仲叶粉中加入无菌蔗糖水溶液，接种毡毛青霉dz
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67孢子，于28
–
30℃发酵2
–
3d，发酵物加入乙醇水溶液中浸提后再进行超声提取，抽滤，滤液浓缩后，获得浓缩物，真空干燥，获得杜仲叶总黄酮粗提物。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的无菌蔗糖水溶液浓度为3
–
5g/l，无菌蔗糖水溶液体积用量以杜仲叶粉重量计为1.0
–
1.5ml/g，所述毡毛青霉dz
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67孢子接种量以杜仲叶粉重量计为5
×
107–7×
107个/g。5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述杜仲叶粉是将成熟的绿色杜仲叶烘干粉碎后过20目筛获得。6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述乙醇水溶液体积浓度50％
–
70％，所述乙醇水溶液用量以发酵前杜仲叶粉重量计为15
–
25ml/g。7.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述超声提取是在50℃的超声波清洗机中，200
–
300w超声提取30
–
60min。8.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述毡毛青霉dz
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67孢子以孢子液的形式加入，所述孢子液的制备方法为：低温保藏的毡毛青霉dz
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67接种于pda平板培养基，于28
–
30℃恒温培养1.5
–
2d后，加入无菌生理盐水于培养皿中，用接种环搅动使孢子悬浮，获得孢子液；所述的pda平板培养基终浓度组成为：马铃薯200g/l，葡萄糖20g/l，琼脂20g/l，溶剂为自来水，ph自然。9.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述浓缩物的制备方法为：发酵物加入体积浓度50％
–
70％乙醇水溶液中，搅拌均匀后置于60
–
70℃水浴中浸提2
–
4h，然后转入50℃的超声波清洗机中，200
–
300w超声提取30
–
60min；超声醇提结束后，趁热抽滤，将滤液45℃减压浓缩至原体积的1/15
–
1/25，获得浓缩物；所述乙醇水溶液用量以发酵前杜仲叶粉重量计为15
–
25ml/g。10.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述真空干燥为：50℃、0.1mpa条件下真空干燥至恒重。

技术总结
本发明公开了一种毡毛青霉DZ


技术研发人员：陈虹 张建芬 柯薇 陆胤
受保护的技术使用者：浙江树人学院（浙江树人大学）
技术研发日：2021.07.26
技术公布日：2021/10/29