含有非洲猪瘟病毒肽及蛋白的免疫原性组合物及疫苗以及其用途的制作方法

技术特征：

1.一种免疫原性组合物，其含有：

(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段；和/或

(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段；和/或

(c)病毒或细菌载体，优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体，其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段；以及

(d)可选存在地，一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂，所述一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用。

2.一种疫苗或医药组合物，其含有：

(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段；和/或

(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段；和/或

(c)病毒或细菌载体，优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体，其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段；以及

(d)一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂，所述一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用；

(e)可选存在地，该疫苗或医药组合物进一步含有佐剂。

3.如权利要求1的免疫原性组合物或如权利要求2的疫苗或医药组合物，其中根据(a)，所述一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列，优选是由以下氨基酸序列组成：与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510)；

优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)；且

最优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。

4.如权利要求1-3中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中根据(b)，所述一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列，优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段：与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510)；

优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)；且

最优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。

5.如权利要求1-4中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中根据(b)，所述编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列，优选是由以下核酸序列组成：与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的核酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ ID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ ID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ ID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ ID NO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899)；

优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)；且

最优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。

6.如权利要求1-5中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中根据(c)，所述病毒或细菌载体选自由以下组成的组：非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属(Lawsonia spp.)、沙门氏菌属(Salmonella spp.)。

7.如权利要求1-6中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中根据(c)，所述病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列，优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段：与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510)；

优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)；且

最优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。

8.如权利要求1-7中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中根据(c)，所述病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段，其中所述一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列，优选是由以下核酸序列组成：与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的核酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ ID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ ID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ ID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ ID NO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899)；

优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)；且

最优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。

9.如权利要求1-8中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中所述ASFV多肽为ASFV全长蛋白，所述ASFV全长蛋白优选是由含有以下，更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码：任何可能的开放读码框(ORF)；甚至更优选是由含有以下，最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码：具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。

10.如权利要求1-9中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中所述非洲猪瘟病毒选自由以下组成的组：BA71、BA71ΔCD2和/或Georgia2007/1病毒株。

11.如权利要求1-10中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中所述免疫原性组合物或所述疫苗或所述医药组合物或所述任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征，优选是由在猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征，更优选是由在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征。

12.如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其用于减少或预防猪科动物，优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒，优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病的方法中、或用于治疗和/或预防至少一种非洲猪瘟病毒，优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的方法中，其中优选地，所述由至少一种非洲猪瘟病毒，优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病或所述至少一种非洲猪瘟病毒，优选是病原性非洲猪瘟病毒感染选自由以下组成的组：非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。

13.如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其用于使猪科动物，优选是猪免疫，以对抗至少一种非洲猪瘟病毒，优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物，优选是猪中造成的临床疾病的方法中，所述方法含有以下步骤：向所述猪科动物，优选是猪施用如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其中所述免疫原性组合物或所述疫苗或所述医药组合物不会造成临床感染症状，但能诱导使所述猪科动物，优选是猪对所述至少一种非洲猪瘟病毒，优选是所述至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应，其中所述临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组：非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。

14.如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其用于对猪科动物，优选是猪进行初免-加强型免疫，以针对由所述猪科动物，优选是猪中的至少一种非洲猪瘟病毒，优选至少一种病原性非洲猪瘟病毒造成的临床疾病的方法中，所述方法含有以下步骤：向所述猪科动物，优选是猪施用一次或两次含有如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物，其包含：(i)作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段；或(ii)病毒载体，优选是重组和/或非天然存在的病毒载体，其含有作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段(初免步骤)；且随后-在初免一次或两次之后，向所述猪科动物，优选是猪施用减毒活非洲猪瘟病毒，优选是BA71ΔCD2(加强步骤)；其中所述免疫原性组合物及所述减毒活非洲猪瘟病毒彼此独立地不会造成临床感染症状，但能诱导使所述猪科动物，优选是猪对所述至少一种非洲猪瘟病毒，优选是所述至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应，其中优选地，所述临床疾病或临床感染症状选自由以下组成的组：非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。

15.一种试剂盒，其用于猪科动物，优选是猪进行疫苗接种，以针对猪科动物，优选是猪中与至少一种非洲猪瘟病毒，优选是病原性非洲猪瘟病毒相关联的疾病和/或降低与至少一种非洲猪瘟病毒，优选是病原性非洲猪瘟病毒相关联或由至少一种非洲猪瘟病毒，优选是病原性非洲猪瘟病毒造成的一或多种临床症状的发生率或严重程度，所述试剂盒含有：

(a)能够将疫苗施用至所述猪科动物的分配器；及

(b)如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物；以及

(c)可选存在地，说明书小册；

其中所述疾病或临床症状优选是选自由以下组成的组：非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。

16.一种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段，其含有以下氨基酸序列，优选是由以下氨基酸序列组成：与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510)；

优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)；且

最优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。

17.如权利要求16的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段，其中所述非洲猪瘟病毒多肽，优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列，优选是由以下氨基酸序列组成：与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722)、M448R(SEQ ID NO:568、566)、D1133L(SEQ ID NO:297、295)、CP312R(SEQ ID NO:274、272)、A240L(SEQ ID NO:854、853)、A238L(SEQ ID NO:23、21)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、K145R(SEQ ID NO:526、524)、B475L(SEQ ID NO:66、65)、H339R(SEQ ID NO:468、466)、I226R(SEQ ID NO:489、487)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP2475(SEQ ID NO:256)、G1211R(SEQ ID NO:432、430)、M1249L(SEQ ID NO:562、561)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732)、P1192R(SEQ ID NO:817、816)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702)、EP424R(SEQ ID NO:389、388)、C475L(SEQ ID NO:201、200)、B602L(SEQ ID NO:75、74)、CP530R(SEQ ID NO:278、277)、D339L(SEQ ID NO:322、321)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493)、I73R(SEQ ID NO:504、503)、DP238L(SEQ ID NO:327、326)、I9R(SEQ ID NO:513、512)；且/或

其中所述非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列，优选是由以下氨基酸序列组成：与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:25)、A238L(SEQ ID NO:19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:570)、K145R(SEQ ID NO:523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:320)、I243L(SEQ ID NO:492、491)、I73R(SEQ ID NO:502)、DP238L(SEQ ID NO:325)、I9R(SEQ ID NO:511、510)。

18.一种编码如权利要求16至17中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。

19.一种编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段，其含有以下核酸序列，优选是由以下核酸序列组成：与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的核酸序列：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ ID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ ID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ ID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ ID NO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899)；

优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)；且

最优选是选自由以下组成的组：MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。

20.如权利要求16至17中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段，或如权利要求18至19中任一项的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段，其中所述免疫原性组合物或所述疫苗或所述医药组合物或所述任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征，优选是由在猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征，更优选是由在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征。

21.如权利要求16至17中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段，或如权利要求18至19中任一项的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽，优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段，其中所述ASFV多肽为ASFV全长蛋白，优选是由含有以下，更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码：任何可能的开放读码框(ORF)；甚至更优选是由含有以下、最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码：具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。

22.一种病毒或细菌载体，其优选是选自由以下组成的组：非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属、沙门氏菌属，所述病毒或细菌载体含有一种、两种、三种或更多种如权利要求18至19中任一项的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。

23.一种载体，优选是表达载体，其含有一种、两种、三种或更多种如权利要求18至19中任一项的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。

24.如权利要求22的病毒或细菌载体或如权利要求23的载体，其含有三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段，优选是选自EP402R、CP312R及A240L(多重表位-I，ME-I)，更优选是含有以下、最优选是由以下组成：选自由SEQ ID NO:855组成的组的核酸序列；或含有十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段，优选是选自D1133L、G1211R、M1249L、MGF505-9R、P1192R、CP2475L(p150)、B475L、EP424R、H339R、I226R、K145R、MGF505-1R及CP2475L(p37)(多重表位-II，ME-II)，更优选是含有以下、最优选是由以下组成：选自由SEQ ID NO:856组成的组的核酸序列。

25.一种宿主细胞，优选是哺乳动物宿主细胞，其含有如权利要求22或24的病毒或细菌载体或如权利要求23-24中任一项的载体。

技术总结
本发明是关于非洲猪瘟病毒(ASFV)肽和/或多肽以及其免疫原性片段、对应的编码AFSV寡核苷酸和/或多核苷酸以及其免疫原性片段、免疫原性组合物、疫苗以及其用途。

技术研发人员：V·尼科林;E·S·蒙特;F·R·冈萨雷斯;L·B·卡莫斯;J·A·科利亚多米根斯;
受保护的技术使用者：勃林格殷格翰动物保健有限公司;
技术研发日：2020.03.26
技术公布日：2021.10.22