一种菲牛蛭配合饲料的制作方法

1.本发明属于水产养殖技术领域，具体的说，涉及一种菲牛蛭配合饲料。


背景技术：

2.菲牛蛭是特色药用动物资源，其唾液腺分泌的天然水蛭素是最强的天然抗凝血酶物质，对治疗心脑血管疾病尤其是血栓类疾病有较高的疗效。菲牛蛭中水蛭素是最主要的活性组分，也是迄今发现的最强的天然凝血酶抑制剂，其主要有65
‑
66个氨基酸组成的活性多肽。水产动物利用饲料蛋白质，主要是利用饲料的氨基酸从而合成自身的氨基酸，饲料蛋白水平、氨基酸组成对水产动物的生长有密切的影响。
3.目前菲牛蛭人工养殖中主要以饲喂动物新鲜血液为主，新鲜血液作为菲牛蛭的天然饲料来源，容易污染变质且对水体环境造成的污染也较大，存在生物风险。人工饲料中主要饲料蛋白源大都是选用血浆蛋白粉和血球蛋白粉，以这两种饲料蛋白源配制的人工饲料在一定程度上解决了菲牛蛭的饲料问题，但其投喂效果低于血液。当血浆蛋白粉和血球蛋白粉的添加量增加时，摄食效果提升，但溶解效果逐渐降低，菲牛蛭会出现吐血现象，随后呈现身体卷曲发皱的现象，且出现死亡率上升的现象。现有菲牛蛭人工配合饲料未从菲牛蛭的营养需要及氨基酸平衡角度考虑，不能实现最佳的饲养。


技术实现要素：

4.本发明的目的是针对菲牛蛭现有人工配合饲料存在的不足，提供菲牛蛭人工配合饲料，充分考虑菲牛蛭的食物习性、营养需要和消化特点，合理制定菲牛蛭配合饲料中蛋白质、小肽、氨基酸的营养水平，选用菲牛蛭易消化吸收的常规饲料原料进行合理配伍，满足菲牛蛭人工养殖条件下的营养需要。配合饲料利用率，该配合饲料所用原料稳定。
5.为实现上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：
6.所述菲牛蛭配合饲料中蛋白水平范围为9.78％～11.17％，小肽水平范围为1.48％～2.5％。
7.所述的菲牛蛭配合饲料包括猪血清、鸡蛋蛋白、苏氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、色氨酸、谷胱甘肽、甘氨酸、精氨酸、食盐和水。各原料的配比为：按重量百分比计，猪血清40.00％、鸡蛋蛋白16.09～30.59％、苏氨酸0.49～0.55％、蛋氨酸0.095～0.10％、赖氨酸0.20～0.33％、色氨酸0.06～0.07、谷胱甘肽1.48～2.5％、甘氨酸0.50％、精氨酸0.50％、食盐0.40％、水25.68～39.99％；所有原料的重量百分比之和为100％。
8.水产动物利用饲料蛋白质，主要是利用饲料的氨基酸合成自身的氨基酸，因此饲料蛋白及其氨基酸组成对水产动物的生长性能有密切的影响。蛋白质营养实质上是氨基酸营养，蛋白质营养价值取决于其氨基酸的组成是否平衡，饲料蛋白源的氨基酸组成与动物的氨基酸需要模式越一致则说明饲料蛋白源的氨基酸平衡性越好。
9.本发明提供菲牛蛭人工配合饲料，充分考虑菲牛蛭的食物习性、营养需要、氨基酸平衡和消化特点，合理制定了菲牛蛭配合饲料中蛋白质、小肽和氨基酸水平，选用菲牛蛭易
消化吸收的常规饲料原料进行配伍，所用原料稳定，易于配制。该配合饲料蛋白源氨基酸平衡度高，溶解度高，菲牛蛭摄食效果好。饲喂该配合饲料后，菲牛蛭的生长性能及抗凝血酶活性均有所提高，成活率高，饲养过程中无吐血现象出现，说明该配合饲料符合菲牛蛭人工养殖条件下的营养需要。
附图说明
10.图1是不同饲料蛋白源蛋白质溶解度比较分析；
11.图2是饲料蛋白源与菲牛蛭的灰色关联度；
12.图3是不同饲料蛋白源摄食量比较；
13.图4是菲牛蛭身体卷曲发皱现象；
14.图5是不同饲料对菲牛蛭总摄食量的影响；
15.图6是不同饲料对菲牛蛭全期增重的影响；
16.图7是不同饲料对菲牛蛭日均增重的影响；
17.图8是不同饲料对菲牛蛭期末体重的影响；
18.图9是不同饲料对菲牛蛭增重率的影响；
19.图10是不同饲料对菲牛蛭饲料系数的影响；
20.图11是不同饲料对菲牛蛭特定生长率的影响；
21.图12是不同饲料对菲牛蛭成活率的影响；
22.图13是不同饲料对菲牛蛭蛋白质效率的影响；
23.图14是蛋白与小肽水平对总摄食量的交互作用图；
24.图15是蛋白与小肽水平对全期增重的交互作用图；
25.图16是蛋白与小肽水平对日均增重的交互作用图；
26.图17是蛋白与小肽水平对期末体重的交互作用图；
27.图18是蛋白与小肽水平对增重率的交互作用图；
28.图19是蛋白与小肽水平对特定生长率的交互作用；
29.图20是各生长性能指标与饲料蛋白水平关系图；
30.图21是各生长性能指标与饲料小肽水平关系图；
31.图22是不同饲料中对菲牛蛭中抗凝血酶活性的比较分析；
32.图23是蛋白与小肽水平对抗凝活性成分交互作用图；
33.图24是抗凝活性成分与饲料蛋白水平关系图；
34.图25是抗凝活性成分与小肽水平关系图。
具体实施方式
35.为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将对本发明的优选实施例进行详细的说明，以方便技术人员理解。
36.菲牛蛭氨基酸平衡的饲料蛋白源比较分析
37.1.不同饲料蛋白源水溶性粗蛋白质含量比较分析
38.从图1中可看出，不同饲料蛋白源蛋白质溶解度存在显著差异(p<0.05)；大豆分离蛋白、豆粕、鱼粉间蛋白质溶解度差异不显著(p>0.05)；大豆浓缩蛋白、豆粕、鱼粉间蛋白质
溶解度差异不显著(p>0.05)；奶粉、牛肉、猪肉间蛋白质溶解度差异不显著(p>0.05)；猪肉、鸡肉间蛋白质溶解度差异不显著(p>0.05)；猪血、血球蛋白粉、猪血清间蛋白质溶解度差异不显著(p>0.05)；猪血、血球蛋白粉、全蛋间蛋白质溶解度差异不显著(p>0.05)，蛋白质溶解度以鸡蛋蛋白最高，与猪血清差异不显著(p>0.05)。猪血、血球蛋白粉、猪血清、鸡蛋蛋白、全蛋5种原料的蛋白溶解度均在10％以上，血浆蛋白粉和鸡蛋蛋黄蛋白质溶解度在9％以上，是蛋白质溶解度较高的7种原料，其余8种原料蛋白质溶解度较低。
39.2.不同饲料蛋白源氨基酸灰色关联度分析
40.按照灰色关联分析方法，以菲牛蛭的蛭体氨基酸组成为参考样本，15种参评饲料蛋白源的氨基酸组成一个灰色系统，计算出15种蛋白饲料中每种氨基酸与对应菲牛蛭蛭体中氨基酸的关联系数γ
0i
(k)，见表1。
41.表1参评饲料蛋白源与菲牛蛭蛭体氨基酸平衡的灰色关联系数
[0042][0043]
从表1中可以看出，蛋白原料中的每种氨基酸与蛭体氨基酸的关联系数存在较大差异，关联系数越接近1表明该种氨基酸与菲牛蛭蛭体对应的氨基酸的关联度越高。
[0044]
将表1中每种饲料蛋白源的氨基酸关联系数求平均值，得到每种饲料蛋白源的灰色关联度，见表2。
[0045]
表2饲料蛋白源氨基酸与菲牛蛭蛭体氨基酸灰色关联度
[0046][0047]
从表2和图2中可以看出：15种饲料蛋白源与菲牛蛭蛭体氨基酸灰色关联度从高到低依次为：牛肉>大豆浓缩蛋白>血浆蛋白粉>猪肉>鸡肉>鱼粉>鸡肉蛋白>猪血清>大豆分离
蛋白>全蛋>猪血>血球蛋白粉>豆粕>奶粉>鸡蛋蛋黄。其中牛肉、大豆浓缩蛋白、血浆蛋白粉、猪肉、鸡肉、鱼粉、猪血清七种原料与菲牛蛭蛭体氨基酸关联度均在0.8以上。
[0048]
3.菲牛蛭对饲料蛋白源的摄食效果比较分析
[0049]
选择参评饲料蛋白源氨基酸关联度和蛋白质溶解高的血浆蛋白粉、血球蛋白粉、猪血、猪血清、鸡蛋蛋白、鸡蛋蛋黄、全蛋共7种饲料蛋白源，饲料蛋白源参考血液的水分与干物质的比例2：8进行单独配制，使其蛋白接近于血液的蛋白质含量，所有原料用高速匀浆机匀浆后灌入人工肠衣进行饲喂，摄食效果按设定的十分制进行打分评价，评定方法见表3。7种饲料蛋白源的的摄食效果进行比较见表4。
[0050]
表3菲牛蛭对饲料蛋白源摄食效果评分表
[0051][0052]
表4菲牛蛭对单一饲料蛋白源摄食效果比较
[0053][0054][0055]
为了比较菲牛蛭对各种单一饲料蛋白源的摄食量，分别对有摄食现象的血浆蛋白粉、血球蛋白粉、猪血、猪血清、鸡蛋蛋白、全蛋共6种原料进行摄食量比较，见图3。
[0056]
从图3中可以看出，菲牛蛭对7种原料的摄食量存在显著的差异(p<0.05)，各试验组菲牛蛭的摄食量从大到小依次为：猪血清、血浆蛋白粉、鸡蛋蛋白、猪血、血球蛋白粉、全蛋。相对较高的为猪血清、鸡蛋蛋白和血浆蛋白粉。全蛋的摄食量是最低的。菲牛蛭对猪血清的摄食量显著高于其余6种饲料蛋白源，分别比血浆蛋白粉、鸡蛋蛋白、猪血、血球蛋白粉、全蛋高3.69g(p<0.05)、4.81g(p<0.05)、9.83g(p<0.05)、10.34g(p<0.05)、14.84g(p<0.05)。
[0057]
4.不同饲料蛋白源摄食效果及添加量分析
[0058]
4.1不同血浆蛋白粉添加量的摄食效果比较
[0059]
分别对不同添加量的血浆蛋白粉的溶解形态进行观察，见表5。
[0060]
表5血浆蛋白粉摄食效果比较
[0061][0062]
从表5中可以看出，随着血浆蛋白粉的增加，溶解效果逐渐降低，血浆蛋白粉添加量大于15％时，摄食效果最好，但是饲料出现明显的结块现象。通过饲喂血浆蛋白粉，发现菲牛蛭摄食血浆蛋白粉后会出现吐血现象，随后呈现身体卷曲发皱的现象(见图4)，而且出现死亡率上升的现象。
[0063]
4.2不同猪血清白添加量的摄食效果比较
[0064]
在添加5％血浆蛋白粉的基础上，分别添加10％、20％、30％、40％、50％的猪血清，比较不同添加浓度对菲牛蛭的摄食效果，见表6。
[0065]
表6不同猪血清添加浓度摄食效果比较
[0066][0067]
从表6中可以看出，随着猪血清添加量的增加，菲牛蛭的摄食效果逐渐增强，摄食量逐渐增加，猪血清添加量大于40％时，摄食效果较好。
[0068]
4.3不同鸡蛋蛋白添加量的摄食效果比较
[0069]
在40％猪血清的基础上，分别添加10％、20％、30％、40％、50％、60％的鸡蛋白，比较不同添加浓度对菲牛蛭的摄食效果。见表7
[0070]
表7鸡蛋蛋白摄食效果比较
[0071][0072]
从表7中可以看出，鸡蛋蛋白与猪血清的溶解效果比较好，在10％
‑
60％的添加范围内，而且摄食效果比较好，试验菲牛蛭能迅速聚集饲料周围，表现出较好的摄食行为。
[0073]
综上所述，猪血清和鸡蛋蛋白适合作为菲牛蛭的饲料蛋白源，猪血清的最佳添加量≥40％，鸡蛋蛋白的添加量在10％
‑
60％之间均有较好的摄食效果。
[0074]
实施例
[0075]
以猪血清、鸡蛋蛋白作为饲料蛋白源，谷胱甘肽作为小肽源，在考虑lys、met、thr、trp四种氨基酸的模式为lys:met:thr:trp＝100:11.92:81.48:14.00的基础上，配制了25种菲牛蛭配合饲料(实例1
‑
25)。分析饲料蛋白水平与小肽(谷胱甘肽)添加量(2
×
5)对菲牛蛭的影响。试验采用双因素试验设计，蛋白水平设8％、9％、10％、11％、12％共5个蛋白水平，小肽(谷胱甘肽)设0.5％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％共5个添加水平进行交叉分组试验，共分为25个处理，每个处理3个重复，共75个重复，每个重复20尾菲牛蛭，共计1500尾菲牛蛭。(如表8、表9所示)
[0076]
表8试验设计表
[0077][0078]
表9各实例饲料配方及组成(鲜样％)
[0079][0080][0081]
饲料现配现用，饲料称量完成后用玻璃棒进行搅拌，并用高速匀浆机进行匀浆，直至饲料无固形物残留，再将配制完成后的饲料灌至长约20cm的人造肠衣中进行饲喂。饲喂时保证饲料足量，自由采食，最佳投喂时间为5h时，投喂频率为10天/次。
[0082]
实施例分析
[0083]
1.不同饲料对菲牛蛭生长性能的影响
[0084]
由组间结果分析可知(图5
‑
13)，不同饲料显著影响菲牛蛭的总摄食量(p<0.05)、全期增重(p<0.05)、日均增重(p<0.05)、期末体重(p<0.05)、增重率(p<0.05)、饲料系数(p<0.05)、特定生长率(p<0.05)、成活率(p<0.05)、蛋白质效率(p<0.05)。
[0085]
蛋白与小肽水平对菲牛蛭的生长性能指标影响主效应分析，见表10。
[0086]
表10蛋白与小肽水平对菲牛蛭的生长性能指标影响主效应分析
[0087][0088]
注：相同水平因素下，同列数据肩注不同小写字母表示差异显著(p<0.05)，小写字母相同或无字母代表差异不显著(p>0.05)。
[0089]
由因子间结果分析可知(表9)，饲料中不同蛋白水平显著影响菲牛蛭的生长性能指标(p<0.05)。随着饲料蛋白水平的增加，菲牛蛭的总摄食量、全期增重、平均日增重、期末体重、特定生长率、成活率、增重率、蛋白质效率呈现上升又下降的趋势，而饲料系数呈现下降又上升的趋势。饲料小肽水平显著影响菲牛蛭的总摄食量和成活率(p<0.05)，对菲牛蛭的全期增重、平均日增重、期末体重、特定生长率、增重率，蛋白质效率没有显著影响(p>0.05)。
[0090]
饲料小肽水平显著影响菲牛蛭的总摄食量和成活率(p<0.05)，对菲牛蛭的全期增重、平均日增重、期末体重、特定生长率、增重率，蛋白质效率没有显著影响(p>0.05)。
[0091]
由eta2值可知，蛋白水平、小肽水平和蛋白
×
小肽对菲牛蛭的总摄食量、全期增重、日均增重、期末体重、特定生长率、饲料系数、增重率的主效应影响为饲料蛋白水平>蛋白
×
小肽交互作用>小肽水平，而成活率的影响程度则为饲料小肽水平>蛋白水平>蛋白
×
小肽交互作用。
[0092]
通过为了筛选蛋白与小肽水平的最佳组合，分别绘制饲料蛋白水平和饲料小肽水平的对菲牛蛭总摄食量、全期增重、日均增重、期末体重、特定生长率、增重率的交互作用图，可获知蛋白与小肽水平的最佳组合，见图14
‑
19。
[0093]
2.蛋白水平对菲牛蛭生长性能影响规律分析
[0094]
饲料中不同蛋白水平显著影响菲牛蛭的生长性能指标(p<0.05)。由于饲料蛋白水平与各生长性能指标间呈现显著的回归关系(p<0.05)，可分别对其进行回归分析并找出最优回归方程，通过对总摄食量、全期增重、日均增重、期末体重、增重率、饲料系数、特定生长率、成活率、蛋白质效率9项生长性能指标与饲料蛋白水平进行回归分析，分别以饲料蛋白水平为自变量x，对应蛋白水平点的生长性能指标为因变量y，建立回归关系数学模型，回归方程拟合见图20。
[0095]
饲料蛋白与小肽水平交互作用菲牛蛭的总摄食量、全期增重、日均增重、期末体重、增重率、特定生长率的影响是一致的，即10％蛋白水平和2.0％的小肽水平组合菲牛蛭总摄食量、全期增重、日均增重、期末体重、增重率最高、特定生长率最低。
[0096]
从图20中可以看出，饲料蛋白水平与菲牛蛭的总摄食量、全期增重、日均增重、期末体重、增重率、饲料系数、特定生长率、成活率、蛋白质效率均呈现的显著的三次曲线关系，饲料蛋白水平与菲牛蛭的总摄食量回归方程为y＝4.160 4.416x
‑
2.449(x
‑
10)2‑
0.166(x
‑
10)3，(r2＝0.781)。在饲料蛋白水平为10.83％时，菲牛蛭获得最高的总摄食量50.20g/条；
[0097]
饲料蛋白水平与菲牛蛭的全期增重的回归方程为：y＝1.538 0.619x
‑
0.644(x
‑
10)2‑
0.007(x
‑
10)3，(r2＝0.781)。在饲料蛋白水平为10.48％时，菲牛蛭获得最高的全期增重7.88g/条。
[0098]
饲料蛋白水平与菲牛蛭的日均增重的回归方程为：y＝17.094 6.877x
‑
7.161(x
‑
10)2‑
0.075(x
‑
10)3，(r2＝0.781)，在饲料蛋白水平为10.48％时，菲牛蛭获得最高的全期增重87.51mg/条；
[0099]
饲料蛋白水平与菲牛蛭的期末体重的回归方程为：y＝2.249 0.646x
‑
0.637(x
‑
10)2‑
0.001(x
‑
10)3，(r2＝0.819)，在饲料蛋白水平为10.51％时，菲牛蛭获得最高的全期增重8.873g/条。
[0100]
饲料蛋白水平与菲牛蛭的增重率的回归方程为：y＝433.849 36.116x
‑
70.874(x
‑
10)2‑
7.345(x
‑
10)3，(r2＝0.878)，在饲料蛋白水平为10.25％时，菲牛蛭获得最高的增重率799.49％。
[0101]
饲料蛋白水平与菲牛蛭的饲料系数的回归方程为：y＝5.575 0.064x
‑
0.361(x
‑
10)2‑
0.071(x
‑
10)3，(r2＝0.999)，在饲料蛋白水平为9.91％时，菲牛蛭获得最低的饲料系数6.21。
[0102]
饲料蛋白水平与菲牛蛭的特定生长率的回归方程为：y＝5.575 0.064x
‑
0.361(x
‑
10)2‑
0.071(x
‑
10)3，(r2＝0.999)，在饲料蛋白水平为9.78％时，菲牛蛭获得最低的特定生长率1.69。
[0103]
饲料蛋白水平与菲牛蛭的成活率的回归方程为：y＝65.841 2.466x
‑
0.555(x
‑
10)2‑
0.282(x
‑
10)3，(r2＝0.827)，在饲料蛋白水平为11.17％时，菲牛蛭获得最高的成活率92.17％。
[0104]
饲料蛋白水平与菲牛蛭的蛋白质效率的回归方程为：y＝218.633
‑
1.643x
‑
8.526(x
‑
10)2 1.647(x
‑
10)3，(r2＝0.992)，在饲料蛋白水平为9.91％时，菲牛蛭获得最高的蛋白质效率202.28％。
[0105]
从以上回归分析可以看出，各生长性能指标与饲料蛋白水平回归关系为强相关，以总摄食量、全期增重、日均增重、期末体重、增重率、饲料系数、特定生长率、成活率、蛋白质效率9项为纵坐标，发现随着日粮中蛋白质水平的增加，日粮蛋白水平与菲牛蛭的生长性能指标呈现三项式曲线模型，当饲料蛋白质水平在9.78％～11.17％，菲牛蛭可以获得最佳的生长性能指标。
[0106]
3.小肽(谷胱甘肽)水平对菲牛蛭生长性能的影响规律
[0107]
饲料中不同小肽水平显著影响菲牛蛭的总摄食量和成活率生长性能指标(p<0.05)。由于饲料小肽水平与总摄食量和成活率呈现显著的回归关系(p<0.05),可分别对其进行回归分析并找出最优回归方程，通过对总摄食量、成活率2项生长性能指标与饲料小肽水平进行回归分析，分别以饲料小肽水平为自变量x，对应小肽水平点的生长性能指标为因
变量y，建立回归关系数学模型，回归方程拟合，见图3
‑
22。
[0108]
从图21中可以看出饲料小肽水平与菲牛蛭的总摄食量的关系呈现显著的四项式曲线模型，y＝52.734
‑
4.828x
‑
12.797(x
‑
1.5)2 5.609(x
‑
1.5)3 10.182(x
‑
1.5)4，(r2＝0.999)，当按抛物线回归法，菲牛蛭饲料蛋白含量在抛物线的拐点处获得最高总摄食量，在饲料小肽水平为1.48％时，菲牛蛭获得最高的总摄食量52.73g/条；饲料小肽水平与菲牛蛭的成活率的关系呈现显著的正相关，y＝86.615 3.181x，r2＝0.976，随着饲料小肽的增加，菲牛蛭的成活率显著的增加(p<0.05)。饲料小肽添加范围在1.48％～2.5％之间，菲牛蛭可以获得较高的摄食量和成活率。
[0109]
4.不同饲料对菲牛蛭中抗凝血酶活性的影响
[0110]
采用凝血酶滴定法测定，水蛭素可与凝血酶以1∶1比例结合，而凝血酶已有标准的国际单位nih，因此可以用抗凝血酶活力单位atu来表示水蛭素的活性，即1个atu等于中和1个nih凝血酶的水蛭素量。
[0111]
从图22中可以看出，不同饲料显著影响菲牛蛭中的抗凝血酶活性(p<0.05)，2、3、25组间抗凝活性成分差异不显著(p>0.05)，3、4组间差异不显著(p>0.05)，4、5组间差异不显著(p>0.05)，5、6、22、24组间差异不显著(p>0.05)，7、8、20组间差异不显著(p>0.05)，7、8、23组间差异不显著(p>0.05)，19、21、23组间差异不显著(p>0.05)，9、18、19、21组间差异不显著(p>0.05)，10、11、17组间差异不显著(p>0.05)，10、11、18组间差异不显著(p>0.05)，12、14、15组间差异不显著(p>0.05)，13、14组间差异不显著(p>0.05)，菲牛蛭中抗凝活性以13组含量最高，显著高于其余24组(p<0.05)。组1抗凝血酶活性是最低的，显著低于其余24组饲料的抗凝活性(p<0.05)。
[0112]
菲牛蛭中抗凝血酶活性成分的影响因素主效应分析，见表11。
[0113]
表11蛋白与小肽水平对菲牛蛭抗凝血酶活性的主效应分析绝干样dry sample％
[0114][0115]
从表11结果分析可知，饲料中不同蛋白添加水平显著影响菲牛蛭中的抗凝血酶活性(p<0.05)。从饲料蛋白添加水平看，随着饲料蛋白水平的增加，菲牛蛭中的抗凝血酶活性呈现先上升又下降的趋势。抗凝活性成分以10％蛋白水平组最高(p<0.05)。
[0116]
饲料小肽水平对菲牛蛭中抗凝血酶活性有显著影响(p>0.05)，随着饲料小肽水平的增加，菲牛蛭中的抗凝血酶活性呈现先上升又下降的趋势。菲牛蛭中抗凝血酶活性显著
的降低(p<0.05)。0.5％、1.0％和2.5％小肽水平组间抗凝活性成分差异不显著(p>0.05)，1.0％、2.0％小肽水平组间抗凝血酶活性差异不显著(p>0.05)，1.5％、2.0％小肽水平组这3个小肽添加组间对抗凝血酶活性没有显著影响(p>0.05)。抗凝血酶活性以1.5％小肽水平组最高，比0.5％、1.0％、2.5％小肽水平组高11.33atu/g(p<0.05)、6.66atu/g(p<0.05)、10.02atu/g(p<0.05)。
[0117]
由eta2值可知，菲牛蛭中的抗凝血酶活性的影响程度为蛋白水平>蛋白水平与小肽水平的交互作用>小肽水平。
[0118]
饲料蛋白水平和小肽水平的交互作用显著影响菲牛蛭中抗凝血酶活性(p<0.05)。绘制饲料蛋白水平和小肽水平的对抗凝血酶活性的交互作用图，见下图23。
[0119]
从图23中可以看出，10％的蛋白水平与1.5％的小肽添加水平组合时，菲牛蛭中抗凝血酶活性最高，8％的蛋白水平与0.5％的小肽添加水平组合时，菲牛蛭中抗凝血酶活性最低。
[0120]
综上所述，不同饲料显著影响菲牛蛭中抗凝活性成分(p<0.05)。饲料蛋白与小肽水平对菲牛蛭中抗凝活性成分均有影响，其影响程度为蛋白水平>蛋白
×
小肽>小肽水平，10％的蛋白水平与1.5％的小肽添加水平组合时，菲牛蛭中抗凝活性成分含量最高。饲料蛋白水平在10.21％
‑
10.38％时，可以获得较高的抗凝活性成分含量。
[0121]
5.菲牛蛭抗凝活性成分与饲料蛋白水平的影响规律
[0122]
饲料中不同蛋白水平显著影响菲牛蛭的抗凝血酶活性(p<0.05)。分别对饲料蛋白水平与抗凝血酶活性进行回归分析，并找出最优回归方程。分别以饲料蛋白水平为自变量x，对应蛋白水平点的抗凝血酶活性为因变量y，建立回归关系数学模型，通过对抗凝血酶活性与饲料蛋白水平进行回归分析，回归方程拟合见图24。
[0123]
6.菲牛蛭中抗凝活性成分与饲料小肽水平间预测模型研究
[0124]
饲料中不同小肽水平显著影响菲牛蛭的抗凝血酶活性(p<0.05)。分别对饲料蛋白水平与抗凝血酶活性进行回归分析，并找出最优回归方程，分别以饲料小肽水平为自变量x，对应小肽水平点的抗凝血酶活性为因变量y，通过对抗凝血酶活性与饲料小肽水平进行回归分析，建立回归关系数学模型，回归方程拟合见图25。
[0125]
从图25中可以看出，饲料小肽水平与抗凝血酶活性、相对灰度值间散点比较分散，回归分析后发现相互间不存在呈现显著的回归关系(p>0.05)，无法建立二者间的回归方程。
[0126]
综上所述，不同饲料显著影响菲牛蛭生长性能和抗凝血酶活性，菲牛蛭人工配合饲料的最适蛋白水平范围为9.78％～11.17％，小肽水平范围为1.48％～2.5％。
[0127]
在此营养水平范围内，菲牛蛭配合饲料原料包括猪血清、鸡蛋蛋白、苏氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、色氨酸、谷胱甘肽、甘氨酸、精氨酸、食盐和水。各种原料的配比为：猪血清40.00％；鸡蛋蛋白16.09～30.59％；苏氨酸0.49～0.55％；蛋氨酸0.095～0.10％；赖氨酸0.20～0.33％；色氨酸0.06～0.07；谷胱甘肽1.48～2.5％；甘氨酸0.50％；精氨酸0.50％；食盐0.40％；水25.68～39.99％；所有原料的重量百分比之和为100％。
[0128]
本发明提供菲牛蛭人工配合饲料，充分考虑菲牛蛭的食物习性、营养需要、氨基酸平衡和消化特点，合理制定了菲牛蛭配合饲料中蛋白质、小肽和氨基酸水平，选用菲牛蛭易消化吸收的常规饲料原料进行配伍，所用原料稳定，易于配制。该配合饲料蛋白源氨基酸平
衡度高，溶解度高，菲牛蛭摄食效果好。饲喂该配合饲料后，菲牛蛭的生长性能及抗凝血酶活性均有所提高，成活率高，饲养过程中无吐血现象出现，说明该配合饲料符合菲牛蛭人工养殖条件下的营养需要。
[0129]
最后说明的是，以上优选实施例仅用于说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。