一种检测有害物质的方法与流程

技术特征：
1.一种定量确定怀疑存在于原始样品中的3
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单氯丙二醇(3
‑
mcpd)、3
‑
mcpd酯、缩水甘油和缩水甘油酯的合计量的方法，所述方法包括：(a)测量组合样品的光学特性，所述组合样品包括含有吡啶环的合适化合物与从怀疑包含3
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mcpd、3
‑
mcpd酯、缩水甘油和缩水甘油酯中的一种或多种的原始样品获得的包含3
‑
mcpd、3
‑
mcpd酯、缩水甘油、缩水甘油酯中的一种或多种的第一样品的反应产物，并且通过比较测量的光学特性与一个或多个标准或校准曲线来定量确定3
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mcpd、3
‑
mcpd酯、缩水甘油和缩水甘油酯的合计量。2.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：(b)通过测量3
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单氯丙二醇样品的光学特性来定量确定原始样品中3
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单氯丙二醇和3
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mcpd酯的量，所述3
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单氯丙二醇样品包括含有吡啶环的合适化合物与从怀疑包含3
‑
mcpd、3
‑
mcpd酯、缩水甘油和缩水甘油酯中的一种或多种的原始样品获得的包含3
‑
单氯丙二醇和/或3
‑
mcpd酯的第二样品的反应产物，其中所述第二样品已被处理以去除存在于所述原始样品中的任何缩水甘油和缩水甘油酯。3.根据权利要求2所述的方法，其中，原始样品中缩水甘油酯和/或缩水甘油的量通过以下确定：从步骤(a)中确定的合计量中减去步骤(b)中确定的3
‑
单氯丙二醇和/或3
‑
mcpd酯的量。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述含有吡啶环的合适化合物独立地选自：(i)式i的化合物：其中：r1表示no2、cn、so3r4、co2r5、conr6r7；r2和r3独立地表示卤素、c1‑4烷基或or8；r4至r7独立地表示c1‑
10
烷基；以及r8表示c1‑4烷基；(ii)式ii的化合物:
其中：x表示h c1‑4烷基、
–
cooh或coor
9a
；y表示h、c1‑4烷基、or
9b
或nr
10
r
11
、so3r
12
、cn、no2、co2r
13
、conr
14
r
15
；z表示h、cor
16
或
‑
(ch2)
n
ar；w表示h、ch2or
17
；v表示h、c1‑4烷基、
–
cooh或coor
18
；r
9a
和r
9b
至r
18
表示h或c1‑4烷基；ar表示芳香族环体系；以及n为1至10；或(iii)式iii的化合物:其中，a和bb表示h、c1‑4烷基、or
19
或nr
20
r
21
、so3r
22
、cn、no2、co2r
23
、conr
24
r
25
；以及r
19
至r
25
表示h或c1‑4烷基，前提是当a为h时，则bb不为h，以及当bb为h时，则a不为h。5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述含有吡啶环的合适化合物选自：6.根据权利要求4所述的方法，其中，所述式i的化合物为4
‑
(4
‑
硝基苄基)吡啶。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述组合样品通过以下获得：(ai)在水性溶剂混合物的存在下，使含有吡啶环的合适化合物与从怀疑包含3
‑
mcpd、3
‑
mcpd酯、缩水甘油和缩水甘油酯中的一种或多种的原始样品获得的第一样品反应，以提供反应样品；(bi)通过添加显色剂在样品中显色以提供显色样品；以及(ci)通过以下来分离含有吡啶环的合适化合物与3
‑
mcpd、3
‑
mcpd酯、缩水甘油和缩水甘油酯中的一种或多种的反应产物：将有机溶剂与所述显色样品混合，然后使所述有机溶剂和水性溶剂分层并收集有机层作为所述组合样品。8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述水性溶剂混合物包括水和缓冲剂，其中所述水性溶剂混合物的ph为4至7，任选地，其中所述缓冲剂为柠檬酸钠缓冲剂。9.根据权利要求7或权利要求8所述的方法，其中，所述显色剂为无机碱水溶液，任选地，其中：(ia)所述显色剂为碳酸钾水溶液；和/或(ib)所述显色剂的浓度为500nm至1m；和/或(ic)以足以提供具有至少11的ph值的所述显色样品的量添加所述无机碱水溶液。10.根据权利要求7至9中任一项所述的方法，其中，向所述显色样品中添加的所述有机溶剂选自苯乙酮、二乙醚、甲苯、乙酸乙酯中的一种或多种，任选地，其中所述有机溶剂为乙酸乙酯。11.根据权利要求2至10中任一项所述的方法，其中，所述3
‑
单氯丙二醇样品通过以下获得：(aii)在水性溶剂混合物的存在下，使含有吡啶环的合适化合物与从怀疑包含3
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mcpd、3
‑
mcpd酯、缩水甘油和缩水甘油酯中的一种或多种的原始样品获得的第二样品反应，以提供反应样品，其中所述第二样品已被处理以去除存在于所述原始样品中的任何缩水甘油和缩水甘油酯；(bii)通过添加显色剂使所述反应样品显色以提供显色样品；(cii)通过以下来分离含有吡啶环的合适化合物与3
‑
单氯丙二醇和/或3
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mcpd酯的反应产物：将有机溶剂与所述显色样品混合，然后使所述有机溶剂和水性溶剂分层并收集有机层作为所述3
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单氯丙二醇样品。12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述水性溶剂混合物包括水和缓冲剂，其中所述水性溶剂混合物的ph为4至7，任选地，其中所述缓冲剂为柠檬酸钠缓冲剂。13.根据权利要求11或权利要求12所述的方法，其中，所述显色剂为无机碱水溶液，任选地，其中：(iia)所述显色剂为碳酸钾水溶液；和/或(iib)所述显色剂的浓度为500nm至1m。14.根据权利要求11至13中任一项所述的方法，其中，向所述显色样品中添加的所述有机溶剂选自苯乙酮、二乙醚、甲苯、乙酸乙酯中的一种或多种，任选地，其中所述有机溶剂为乙酸乙酯。15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述第一样品通过以下获得：(aiii)向原始样品中添加有机溶剂以形成溶解的样品；
(biii)向所述溶解的样品中添加溶解于具有3至5个碳原子的伯醇的碱，或添加具有3至5个碳原子的醇盐，以形成碱性样品；(ciii)向所述碱性样品中添加溶解于水的酸，并使所述样品进行混合以形成混合样品；(diii)使所述混合样品分离为有机溶剂层和水性层，并仅收集所述水性层；以及(eiii)向所述水性层添加缓冲剂以形成所述第一样品。16.根据权利要求15所述的方法，其中，向所述原始样品中添加的所述有机溶剂为异辛烷和/或氯仿。17.根据权利要求15或权利要求16所述的方法，其中：(iiia)所述碱为氢氧化物(例如氢氧化钠或氢氧化钾)，和/或所述具有3至5个碳原子的伯醇为1
‑
丁醇，任选地，其中所述氢氧化钾在所述具有3至5个碳原子的伯醇中的浓度为1至5wt/vol％；或者(iiib)所述醇盐为金属1
‑
丁醇盐(例如1
‑
丁醇钠或1
‑
丁醇钾)。18.根据权利要求15至17中任一项所述的方法，其中，所述溶解于水的酸不是盐酸，任选地，其中：(a)所述酸为乙酸或h2so4；和/或(b)所述酸在水中的浓度为1至3vol％。19.根据权利要求15至18中任一项所述的方法，其中，所述缓冲剂为柠檬酸钠缓冲剂，并且所述缓冲剂提供具有4至7的ph的所述第一样品。20.根据权利要求2至19中任一项所述的方法，其中，所述第二样品通过以下获得：(aa)向原始样品中添加有机溶剂以形成溶解的样品；(bb)使存在于所述溶解的样品中的任何缩水甘油和缩水甘油酯与酸和具有3至5个碳原子的伯醇反应以形成反应的样品；(cc)向所述反应的样品中添加溶解于具有3至5个碳原子的伯醇的碱以形成中和样品，或向所述反应的样品中添加醇盐碱以形成中和样品，其中所述醇盐具有3至5个碳原子；(dd)向碱性样品中添加溶解于水的酸，并使所述样品进行混合以形成混合样品；(ee)使所述混合样品分离为有机溶剂层和水性层，并仅收集所述水性层；以及(ff)向所述水性层添加缓冲剂以形成所述第二样品。21.根据权利要求20所述的方法，其中，向所述原始样品中添加的所述有机溶剂为异辛烷和/或氯仿。22.根据权利要求20或权利要求21所述的方法，其中，所述碱为氢氧化物(例如氢氧化钾或氢氧化钠)，和/或所述具有3至5个碳原子的伯醇为1
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丁醇，任选地，其中所述氢氧化钾在所述具有3至5个碳原子的伯醇中的浓度为1至5wt/vol％。23.根据权利要求20至22中任一项所述的方法，其中，在权利要求20的步骤(dd)中的所述溶解于水的酸不是盐酸，任选地，其中：(a)无机酸为乙酸或h2so4；和/或(b)所述酸在水中的浓度为1至3vol％。24.根据权利要求20至23中任一项所述的方法，其中，所述缓冲剂为柠檬酸钠缓冲剂，并且所述缓冲剂提供具有4至7的ph的所述第一样品。
25.根据权利要求20至24中任一项所述的方法，其中，在权利要求20的步骤(bb)中使用的所述酸和具有3至5个碳原子的伯醇分别为h2so4和1
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丙醇。26.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，测量的所述光学特性选自吸光度、透射率或反射率，任选地，其中测量的所述光学特性是吸光度。27.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述原始样品为食用油、食用脂肪或其组合。

技术总结
本发明涉及定量确定怀疑存在于原始样品中的3


技术研发人员：阿南萨
受保护的技术使用者：卡姆泰克诊断私人有限公司
技术研发日：2019.12.26
技术公布日：2021/9/24