一种检测恶臭假单胞菌的引物和方法及其应用与流程

技术特征：
1.一种检测恶臭假单胞菌的引物，其特征在于，包含上游引物pp1和下游引物pp2，其序列依次如seq id no.1～2所示。2.权利要求1所述引物在检测/鉴定恶臭假单胞菌中的应用。3.权利要求1所述引物在制备检测/鉴定恶臭假单胞菌的产品中的应用。4.根据权利要求2或3所述应用，其特征在于，所述引物用于检测水牛乳中的恶臭假单胞菌或用于制备检测水牛乳中的恶臭假单胞菌的产品。5.一种检测/鉴定恶臭假单胞菌的方法，其特征在于，包含以下步骤：s1.提取待测样品中的细菌基因组dna；s2.以步骤s1所得dna为模板，用seq id no.1～2所示引物进行pcr扩增；s3.将pcr产物进行凝胶电泳检测，若出现大小为241bp的单一条带，则表明所测样本中含有恶臭假单胞菌或所测样本为恶臭假单胞菌。6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，步骤s2中，pcr扩增体系为：2
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taq master mix 12.5μl，浓度为10μm的引物各0.5μl，模板dna各1μl，加ddh2o补至25μl。7.根据权利要求5所述方法，其特征在于，步骤s2中，pcr反应程序为：94℃预变性2min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，共30个循环；再72℃延伸5min。8.一种检测/鉴定恶臭假单胞菌的试剂盒，其特征在于，含有seq id no.1～2所示引物。9.权利要求8所述试剂盒在检测/鉴定恶臭假单胞菌中的应用。10.权利要求8所述试剂盒在检测水牛乳中恶臭假单胞菌中的应用。

技术总结
本发明公开了一种检测恶臭假单胞菌的引物和方法及其应用。本发明通过设计恶臭假单胞菌的PCR检测引物，并在该引物的基础上，建立了一种恶臭假单胞菌的PCR检测方法。所述PCR引物的特异性好，灵敏度高，最低核酸检测量为198.0


技术研发人员：韦盘秋 李玲 黄加祥 黄丽 曾庆坤
受保护的技术使用者：广西壮族自治区水牛研究所
技术研发日：2021.06.18
技术公布日：2021/10/18