一种crRNA及用于CRISPR-Cas12a检测人腺病毒核酸的方法与流程

技术特征：
1.一种用于crispr
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cas12a技术检测人腺病毒核酸的crrna分子，所述crrna分子的序列如seq id no.1所示。2.一种应用权利要求1所述crrna分子基于非诊断目的的crispr
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cas12a技术检测人腺病毒核酸的方法，所述方法包括以下步骤：(1)制备样本核酸模板；(2)使步骤(1)获取的核酸模板，cas12a蛋白、荧光基团和荧光淬灭基团双标记的单链dna探针，以及所述crrna分子在crispr
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cas12a技术检测体系里反应；(3)对步骤(2)的反应体系进行荧光强度的检测。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的样本核酸模板由pcr扩增方法制备。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述pcr扩增的上游引物的序列含有seq id no.8所示的序列，所述pcr扩增的下游引物的序列含有seq id no.9所示的序列。5.根据权利要求1
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4任一所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述单链dna探针的序列如seq id no.11所示。6.一种crispr
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cas12a技术检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的crrna分子，cas12a蛋白、荧光基团和荧光淬灭基团双标记的单链dna探针，以及序列含有seq id no.8所示序列的pcr扩增上游引物，序列含有seq id no.9的pcr扩增的下游引物。7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述pcr扩增的上游引物的序列由seq id no.8所示，所述pcr扩增的下游引物的序列由seq id no.9所示。8.根据权利要求6或7任一所述的试剂盒，其特征在于，所述dna探针的序列如seq id no.11所示。9.一种用于制备权利要求1所述crrna的上游dna单链和下游dna单链，其特征在于，所述上游dna单链的序列如seq id no.12所示，所述下游dna单链的序列如seq id no.13
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15任一所示。10.一种用于制备权利要求1所述crrna的方法，其特征在于，先使序列如seq id no.12所示的上游dna单链和序列如seq id no.13
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15中任一所示的下游dna单链进行杂交制备dna体外转录模板，再根据所述dna体外转录模板制备所述crrna。

技术总结
本发明提供了一种crRNA分子及用于CRISPR


技术研发人员：邱少富 刘鸿博 宋宏彬 王立贵 杜昕颖 向莹 杨明娟 杨超杰 刘洪波 王辉 王琪
受保护的技术使用者：中国人民解放军疾病预防控制中心
技术研发日：2021.06.29
技术公布日：2021/10/15