一种共提取不同样本的DNA和RNA的方法与流程

技术特征：
1.一种共提取不同样本的dna和rna的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，将临床样本加入到离心管中作为样本，向离心管中加naoh溶液液化样本；步骤二，在液化的样本中加入酶并研磨，离心，取上清液；步骤三，取离心管加入裂解液，离心后加入步骤二的上清液，振荡、离心、孵育、离心；所述裂解液包括：二硫苏糖醇和异硫酸氰胍；步骤四，在离心管中加入无水乙醇，混匀，加入磁珠，静置；步骤五，将离心管放置于磁力架上，待磁珠完全吸附至管壁后吸弃上清液；步骤六，将离心管中加入洗涤液，振荡，置于磁力架上，待磁珠完全吸附至管壁后吸弃上清液；步骤七，在离心管中加入80%乙醇，混匀后置于磁力架，待磁珠完全吸附至管壁后吸弃上清液，打开ep管，晾干；步骤八，在离心管中加入洗脱液，混匀后孵育，置于磁力架上，待磁珠完全吸附至管壁后吸取上清液于新的离心管中，即得到dna/rna混合液。2.根据权利要求1所述的一种共提取不同样本的dna和rna的方法，其特征在于，所述临床样本包括：血浆、肺泡灌洗液、脑脊液、脓肿抽液、痰液或拭子。3.根据权利要求1所述的一种共提取不同样本的dna和rna的方法，其特征在于，所述步骤二中的酶为蛋白酶k和溶菌酶；微生物样本与蛋白酶k的体积比为400:5，蛋白酶k的浓度≥30 units/mg protein。4.根据权利要求1所述的一种共提取不同样本的dna和rna的方法，其特征在于，所述步骤二中的研磨采用灭菌过的氧化锆研磨珠研磨。5.根据权利要求1所述的一种共提取不同样本的dna和rna的方法，其特征在于，所述裂解液为：10mg/ml糖原、0.025
‑
0.055m 二水合柠檬酸三钠、0.05
‑
0.08m二硫苏糖醇、0.01
‑
0.03m tris
‑
hcl、10% tritonx
‑
100、0.05m edta、10% n
‑
月桂酰基肌氨酸钠、2m 异硫酸氰胍和2%非离子表面活性剂。6.根据权利要求1所述的一种共提取不同样本的dna和rna的方法，其特征在于，所述磁珠为磁性纳米磁珠。7.根据权利要求1所述的一种共提取不同样本的dna和rna的方法，其特征在于，所述洗涤液为1
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wb洗涤液，成分为：3
‑
4m 异硫酸氰胍、0.01m tris
‑
hcl(ph=8.0)、0.2m 氯化钠和0.04m edta。8.根据权利要求1所述的一种共提取不同样本的dna和rna的方法，其特征在于，所述洗脱液为去核酸酶水。

技术总结
本发明公开了一种共提取不同样本的DNA和RNA的方法，属于分子生物学领域，方法包括如下步骤：步骤一，液化样本；步骤二，在液化的样本中加入酶；步骤三，加入裂解液，加入步骤二的上清液；裂解液包括：二硫苏糖醇和异硫酸氰胍；步骤四，加入无水乙醇，混匀加入磁珠；步骤五，吸弃离心管上清液；步骤六，将离心管中加入洗涤液，混匀后吸弃上清液；步骤七，在离心管中加入80%乙醇，混匀后弃上清液；步骤八，得到DNA/RNA混合液；本发明能够同时提取DNA/RNA，实现较全面地获取病原微生物，快速检测出感染源，增加病原识别的准确性。病原识别的准确性。病原识别的准确性。


技术研发人员：谷红仓 袁园园 许佩松 王云飞 车仙荣
受保护的技术使用者：杭州圣庭医疗科技有限公司
技术研发日：2021.07.23
技术公布日：2021/10/11