常温与低温均具有活性的生物保鲜剂及其制备方法与流程

技术特征：
1.常温与低温均具有活性的生物保鲜剂，其特征在于：包括以下按重量份计的组份：迷迭香提取物30-40份、石榴皮提取物20-30份、杨梅提取物30-40份、蜂胶乙醇提取液30-50份、两歧双歧杆菌10-20份、葡萄糖氧化酶10-20份、苹果多酚10-15份和去离子水300-400份。2.常温与低温均具有活性的生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：s1：制备迷迭香提取物、石榴皮提取液和杨梅提取物；s2：利用苹果幼果制备苹果多酚；s3：利用黑曲霉制备葡萄糖氧化酶；s4：制备蜂胶乙醇提取液；s5：按照重量份配比准备原料，将迷迭香提取物、石榴皮提取物、杨梅提取物、苹果多酚按组份配比并置入干净的混料机内，搅拌15-25min混合均匀得混合物a；s6：往混合物a内加入葡萄糖氧化酶、蜂胶乙醇提取液和两歧双歧杆菌搅拌10-15min混合均匀得混合物b；s7：将混合物b加入均质机内，加入去离子水，均质20-30min，得生物保鲜剂。3.根据权利要求2所述的常温与低温均具有活性的生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述s1中，迷迭香提取物的制备方法为：迷迭香洗净沥干，置于40-50℃干燥箱中烘干，用高速万能粉碎机粉碎，过40目筛，用85-95％乙醇回流提取1-3次，每次提取1-2h，回流温度为50-60℃，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；将所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；取乙酸乙酯萃取物用水溶解，过滤，用大孔树脂富集活性成分，先用10％乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分，再用90％乙醇洗脱12个柱体积，收集90％洗脱液，减压浓缩得到迷迭香提取物。4.根据权利要求2所述的常温与低温均具有活性的生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述s1中，石榴皮提取物的制备方法为：将石榴皮粉末用蒸馏水冷浸提取1-3次，每次1-2d，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将浸膏用适量的水溶解后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3-5次，合并萃取液，减压浓缩，分别得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取物；将正丁醇萃取物用硅胶拌样，65-75℃烘干，经硅胶色谱柱分离，依次用体积比为65:1、45:1、35:1、25:1、15:1、5:1的氯仿-甲醇洗脱，收集15:1洗脱部分，浓缩即得石榴皮提取物。5.根据权利要求2所述的常温与低温均具有活性的生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述s1中，杨梅提取物的制备方法为：选取新鲜杨梅果去核、打浆，加入果胶酶酶解12h；在酶解液内加入乙醇搅拌、过滤得滤液，减压蒸馏去除滤液中的乙醇得药液；药液过大孔树脂吸附柱，先用水冲洗吸附柱至洗出液无色，后用乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液经浓缩、干燥后得杨梅提取物。6.根据权利要求2所述的常温与低温均具有活性的生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述s2具体包括以下步骤：s21：制备原料，选取未熟、新鲜的苹果，洗净、切块、去核后，加入1％的抗坏血酸，经榨汁、抽滤处理后得到苹果渣；s22：将s21中得到的苹果渣，加入到60％-80％乙醇溶液中，并置于30℃水浴中振荡摇匀40min，得到苹果多酚的提取液；
s23：将s22中得到的提取液进行过滤操作，得到苹果多酚溶液；s24：将s23中得到的苹果多酚溶液减压回流，浓缩至无醇味，再将浓缩后的产物冷冻并干燥，得到苹果多酚。7.根据权利要求2所述的常温与低温均具有活性的生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述s3具体包括以下步骤：s31：培养黑曲霉：黑曲霉种子液按照6-8％的接种量含有发酵培养基的发酵罐中进行培养，培养温度为30-34℃，罐压为0.02-0.03mpa，风量为500-600l/h，培养时间为30-40h；s32：制备发酵液：将干酪乳杆菌种子液按照8-10％的接种量接入到发酵罐中，再添加甲醇，继续培养20-30h，通过流加氨水控制ph为7.2-7.8，得到发酵液；s33：制备粗酶液：以5000rpm离心5min，收集菌体沉淀，将菌体沉淀研磨粉碎，再添加五倍重量的0.1mol/l的磷酸缓冲液浸提，4℃浸提，完成后4℃、12000rpm离心20min，取上清液，即为粗酶液；s34：分离纯化：取粗酶液，过deae-sepharose离子交换层析柱，收集洗脱液，然后过superdex-200凝胶过滤层析柱，洗脱，收集洗脱液，透析脱盐，冷冻干燥得即得葡萄糖氧化酶。8.根据权利要求2所述的常温与低温均具有活性的生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述s4具体包括以下步骤：s41：将蜂胶置于2-8℃条件下冷冻12h，并通过高能万用粉碎机磨碎过筛；s42：向粉碎后的蜂胶颗粒加入浓度为75-95％的乙醇溶液，按蜂胶与乙醇比例为1:4-1:8(w/v)提取，经冷却、过滤，即得蜂胶乙醇提取液。

技术总结
本发明涉及一种水产品生物储藏技术领域，尤其是常温与低温均具有活性的生物保鲜剂及其制备方法，它包括以下按重量份计的组份：迷迭香提取物30-40份、石榴皮提取物20-30份、杨梅提取物30-40份、蜂胶乙醇提取液30-50份、两歧双歧杆菌10-20份、葡萄糖氧化酶10-20份、苹果多酚10-15份和去离子水300-400份，迷迭香提取物为天然的抗氧化剂；苹果多酚可抑制水产品贮藏期间的微生物生长；杨梅提取物中能防止水产品褪色；葡萄糖氧化酶，能够降低水产品表面的pH，抑制微生物的生长；蜂胶乙醇提取液，在水产品的表面形成一层保护膜；两歧双歧杆菌对鱼类的腐败菌具有良好的抑制效果；从而能够在常温与低温的环境下均具有活性，提高抗氧化性和抑制细菌的生长。抑制细菌的生长。


技术研发人员：刘海 黄琨 龚阳 陈旭文 唐彩珍 刘小杏
受保护的技术使用者：广西百嘉食品有限公司
技术研发日：2020.04.29
技术公布日：2021/10/28