一种采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱的方法与流程

1.本发明涉及生物培养技术领域，尤其是一种采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱的方法。


背景技术：

2.柑橘木虱属于同翅目木虱科，主要危害柑橘、橙、柚和九里香等芸香科植物，是一种全球广泛分布的重要传毒害虫，柑橘木虱主要危害芸香科植物的新芽嫩梢，成虫分散在叶和嫩芽上吸食，若虫群集在新梢、嫩芽和幼叶上为害，吸食芽梢汁液，被为害的嫩梢和嫩芽逐渐的萎缩枯干，新叶畸形易脱落，严重影响植物的生长，若虫分泌的白色分泌物洒布在枝叶上也影响植物的光合作用，并有可能引发煤污病，为了对柑橘木虱进行进一步的研究，需要培育足够多的柑橘木虱样本，野外捕捉的方式费时费力且不稳定性较大，所以现有的生物实验室中大多采用人工培育的方式对柑橘木虱进行人工培养。
3.申请号为cn201610909428.7的中国发明提供了一种橘木虱的人工饲养方法，该方案中采用自然生长的九里香作为柑橘木虱的饲养植株，九里香的种植周期较长，导致柑橘木虱的饲养周期长，且在柑橘木虱饲养过程中，无法完全保证九里香无虫害，九里香植株容易发生白粉病和红蜘蛛等病虫害，此种病虫害容易与柑橘木虱的存在发生竞争关系，从而影响柑橘木虱的存活率，饲养效果不佳，且单次饲养的柑橘木虱的数量十分有限，不方便对柑橘木虱进行后续的代系实验，实用性不佳。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱的方法，具有方便进行后续的代系实验，实用性更佳，能够保证九里香植株的表面洁净无虫害，防止九里香植株的白粉病等自身虫害与柑橘木虱发生竞争关系，有效保证柑橘木虱的存活率，饲养效果更佳的优点，以解决上述背景技术中提出的饲养周期长，病虫害容易与柑橘木虱的存在发生竞争关系，从而影响柑橘木虱的存活率，饲养效果不佳，且单次饲养的柑橘木虱的数量十分有限，不方便对柑橘木虱进行后续的代系实验，实用性不佳的问题。
5.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱的方法，包括以下步骤：
6.s1：配制九里香组织培养适宜培养基；
7.s2：九里香植株茎段处理，取生长健壮植株的茎段，切割成带2个分叉腋芽的片段，以75％酒精表面消毒5s后转入10％次氯酸钠溶液消毒2min，再用无菌水冲洗3次，最后置于0.1％氯化汞中消毒6min，无菌水冲洗4次，在无菌滤纸上将茎段表面水分吸干；
8.s3：九里香植株茎段培养，将经s2处理后的植株茎段接种到s1中制备的适宜培养基中进行培养，并对适宜培养基中的茎段的生长状态进行实时观察；
9.s4：柑橘木虱的一次转移，当适宜培养基中的茎段长出嫩芽嫩叶时，将柑橘木虱大龄若虫和成虫转移进去，并对适宜培养基中柑橘木虱大龄若虫和成虫的生长状态进行实时
观察；
10.s5：柑橘木虱的二次转移，当柑橘木虱的大龄若虫和成虫都发育至性成熟后，将柑橘木虱的成虫吸出并转移到含有嫩芽的九里香植株上，直至柑橘木虱的成虫在九里香植株上产卵。
11.优选的，配置s1中所述九里香组织培养适宜培养基时添加的材料有ms、6
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ba、iba、ga3和活性炭，其中ms为有机硅改性聚醚胶，6
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ba为6
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苄氨基嘌呤，iba为吲哚丁酸，ga3为赤霉素。
12.优选的，s3中所述植株茎段培养时，需要保持光照时间为14h/d，培养时长为15天。
13.本发明提出的一种采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱的方法，有益效果在于：
14.1、本发明在配制九里香组织培养适宜培养基后，取生长健壮植株的茎段，切割成带2个分叉腋芽的片段，对植株茎段进行处理后将其接种到适宜培养基中进行培养，当适宜培养基中的茎段长出嫩芽嫩叶时，将柑橘木虱大龄若虫和成虫转移进去，转移较多数量的柑橘木虱大龄若虫和成虫，以方便进行后续的代系实验，实用性更佳。
15.2、本发明当柑橘木虱的大龄若虫和成虫都发育至性成熟后，采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱，保证九里香植株的表面洁净无虫害，防止九里香植株的白粉病等自身虫害与柑橘木虱发生竞争关系，有效保证柑橘木虱的存活率，饲养效果更佳。
附图说明
16.图1为本发明提供的一种采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱的方法的步骤示意图。
具体实施方式
17.下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚；完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
18.请参阅图1，一种采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱的方法，包括以下步骤：
19.步骤一：配制九里香组织培养适宜培养基，配置九里香组织培养适宜培养基时添加的材料有ms、6
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ba、iba、ga3和活性炭，其中ms为有机硅改性聚醚胶，6
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ba为6
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苄氨基嘌呤，本配方中6
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苄氨基嘌呤的浓度为2.5mg/l，6
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苄氨基嘌呤的主要作用是促进芽的形成，也可以诱导愈伤组织发生，明显提高九里香植株的培育品质，iba为吲哚丁酸，本配方中吲哚丁酸的浓度为0.1mg/l，ga3为赤霉素，本配方中赤霉素的浓度为0.3mg/l，本配方中活性炭的浓度为1.5g/l。
20.步骤二：九里香植株茎段处理，取生长健壮植株的茎段，切割成带2个分叉腋芽的片段，以75％酒精表面消毒5s后转入10％次氯酸钠溶液消毒2min，再用无菌水冲洗3次，最后置于0.1％氯化汞中消毒6min，无菌水冲洗4次，在无菌滤纸上将茎段表面水分吸干。
21.步骤三：九里香植株茎段培养，将经步骤二处理后的植株茎段接种到步骤一中制备的适宜培养基中进行培养，并对适宜培养基中的茎段的生长状态进行实时观察，植株茎
段培养时，需要保持光照时间为14h/d，培养时长为15天。
22.步骤四：柑橘木虱的一次转移，当适宜培养基中的茎段长出嫩芽嫩叶时，将柑橘木虱大龄若虫和成虫转移进去，并对适宜培养基中柑橘木虱大龄若虫和成虫的生长状态进行实时观察，一次转移时的柑橘木虱大龄若虫和成虫数量可控，实际操作时可转移较多数量的柑橘木虱大龄若虫和成虫，以方便进行后续的代系实验。
23.步骤五：柑橘木虱的二次转移，当柑橘木虱的大龄若虫和成虫都发育至性成熟后，将柑橘木虱的成虫吸出并转移到含有嫩芽的九里香植株上，直至柑橘木虱的成虫在九里香植株上产卵，采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱，保证九里香植株的表面洁净无虫害，防止九里香植株的白粉病等自身虫害与柑橘木虱发生竞争关系，有效保证柑橘木虱的存活率。
24.工作原理：配制九里香组织培养适宜培养基后，取生长健壮植株的茎段，切割成带2个分叉腋芽的片段，以75％酒精表面消毒5s后转入10％次氯酸钠溶液消毒2min，再用无菌水冲洗3次，最后置于0.1％氯化汞中消毒6min，无菌水冲洗4次，在无菌滤纸上将茎段表面水分吸干，将处理后的植株茎段接种到适宜培养基中进行培养，并对适宜培养基中的茎段的生长状态进行实时观察，植株茎段培养时，需要保持光照时间为14h/d，培养时长为15天，当适宜培养基中的茎段长出嫩芽嫩叶时，将柑橘木虱大龄若虫和成虫转移进去，并对适宜培养基中柑橘木虱大龄若虫和成虫的生长状态进行实时观察，一次转移时的柑橘木虱大龄若虫和成虫数量可控，当柑橘木虱的大龄若虫和成虫都发育至性成熟后，将柑橘木虱的成虫吸出并转移到含有嫩芽的九里香植株上，直至柑橘木虱的成虫在九里香植株上产卵。
25.综上所述，本采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱的方法，配制九里香组织培养适宜培养基后，取生长健壮植株的茎段，切割成带2个分叉腋芽的片段，对植株茎段进行处理后将其接种到适宜培养基中进行培养，当适宜培养基中的茎段长出嫩芽嫩叶时，将柑橘木虱大龄若虫和成虫转移进去，转移较多数量的柑橘木虱大龄若虫和成虫，以方便进行后续的代系实验，实用性更佳，当柑橘木虱的大龄若虫和成虫都发育至性成熟后，将柑橘木虱的成虫吸出并转移到含有嫩芽的九里香植株上，直至柑橘木虱的成虫在九里香植株上产卵，采用组织培养的九里香来饲养柑橘木虱，保证九里香植株的表面洁净无虫害，防止九里香植株的白粉病等自身虫害与柑橘木虱发生竞争关系，有效保证柑橘木虱的存活率，饲养效果更佳。
26.以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。