乳化组合物的制作方法

1.本说明书涉及含有人参籽油以及人参子提取物的乳化组合物。


背景技术：

2.人参属于五加科人参属植物，从2000多年前开始，在韩国、中国、日本等地用作以预防疾病、延年益寿为目的的生药来使用。人参的迄今已知的功效以及效果为对中枢神经系统的作用、抗癌作用和抗癌活性、免疫功能调节作用、抗糖尿作用、肝功能亢进功效、心血管障碍改善以及抗动脉硬化作用、血压调节作用、更年期障碍改善以及影响骨质疏松的效果、抗压以及抗疲劳作用、抗氧化活性以及抗老化功效等。作为人参的代表性生理活性成分的人参皂苷(ginsenoside)均匀分布在人参的地上以及地下部分，在人参籽中也分布有相当量的人参皂苷。
3.对人参的主要成分以及药理作用进行过很多的研究，考虑到所述人参的药理功效，长时间服用人参时，期待可以预防各种成人病，减轻发病可能性。
4.然而，当为人参籽油或者由人参籽油作为主成分构成的组合物时，由于油的油腻感而难以服用，因此只能作为胶囊剂型来服用。另外，将水溶性成分作为主成分并含有人参籽油时，作为油脂成分的人参籽油与水溶性成分发生分离而存在产品的稳定性降低的问题。


技术实现要素：

5.在一方面，本发明提供一种作为油脂成分的人参籽油与水溶性成分均匀混合的稳定的乳化组合物。
6.在一方面，本发明提供一种乳化组合物，其含有人参籽油以及人参子提取物。
7.在示例性的一实现例中，所述乳化组合物为单相。
8.在示例性的一实现例中，可以是，所述人参包括选自由高丽人参(panax ginseng)、花旗参(panax quinquefolia)、田七参(panax notoginseng)、越南参(panax vietnamensis)、竹节参(panax japonicus)、秀丽人参(panax elegatior)、狭叶竹节参(panax wangianus)、羽叶三七(panax bipinnatifidus)以及假人参(panax pseudoginseng)组成的组中的一种以上。
9.在示例性的一实现例中，可以是，所述人参子提取物为水、c1‑
c6乙醇或者它们的混合溶剂的提取物。
10.在示例性的一实现例中，可以是，所述组合物相对于组合物总重量，含有0.001重量％至70重量％的所述人参籽油。
11.在示例性的一实现例中，可以是，所述组合物相对于组合物总重量，含有0.01重量％至60重量％的所述人参子提取物。
12.在示例性的一实现例中，可以是，所述人参籽油以及人参子提取物的重量比为1:2至1:100。
13.在示例性的一实现例中，可以是，所述组合物含有粘胶以及膳食纤维。
14.在示例性的一实现例中，可以是，所述粘胶包括选自由黄原胶(xanthan gum)、卡拉胶(carrageenans gum)、瓜尔胶(guar gum)、结冷胶(gellan gum)、槐豆胶(locust bean gum)、罗望子胶(tamarind gum)、阿拉伯胶(arabic gum)、蒟蒻、果胶、琼脂、木薯淀粉、糊精、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、海藻酸钠以及变性淀粉组成的组中的一种以上。
15.在示例性的一实现例中，可以是，所述膳食纤维含有选自由柑橘膳食纤维以及小麦膳食纤维组成的组中的一种以上。
16.在一方面，根据本发明的组合物其作为油脂成分的人参籽油与水溶性成分均匀混合，从而人参籽油和水溶性成分长时间不发生分离，因此稳定性优异。
附图说明
17.图1是比较根据本公开的一方面的实施例1以及比较例1的乳化稳定性的图。
18.图2是比较根据本公开的一方面的实施例2以及比较例2的乳化稳定性的图。
19.图3a至图3f是示出根据本公开的一方面的人参籽油以及人参子提取物的肌细胞内能量代谢促进效果的图表。
20.图4a及图4b是示出根据本公开的一方面的人参籽油以及人参子提取物的线粒体生成协同效应的图。
具体实施方式
21.以下详细说明本发明。
22.在一方面，本公开提供含有人参籽油以及人参子提取物的乳化组合物。在本公开的实施例中，组合物含有人参籽油以及人参子提取物，从而防止作为油脂成分的人参籽油和水溶性成分的分离，因此能够提供稳定的乳化组合物。
23.在一实现例中，所述乳化组合物可以为单相。在本说明书中，“单相”是指在乳化组合物中，油相和水相不分离而保持为一个相。
24.所述“油相(oil phase)”作为与水相不容易混合的相，在室温以及大气压下可以是作为液体的油、有机溶剂或者它们的混合物等。所述“水相(water phase)”作为与油相不容易混合的相，只要是可以使水溶性高分子易于溶解，则可以不受限制地使用。作为一例，可以包括净化水或者蒸馏水等的水、多元醇等。
25.在一实现例中，所述人参可以包括选自由高丽人参(panax ginseng)、花旗参(panax quinquefolia)、田七参(panax notoginseng)、越南参(panax vietnamensis)、竹节参(panax japonicus)、秀丽人参(panax elegatior)、狭叶竹节参(panax wangianus)、羽叶三七(panax bipinnatifidus)以及假人参(panax pseudoginseng)组成的组中的一种以上，但不限于此。
26.在本说明书中，作为获取“人参籽油”的方法，可以使用压榨法、超临界提取法、次临界提取法、微波提取法、超声波提取法等，然而只要是对本领域技术人员显而易见的方法，则不受限制。在制备本说明书的人参籽油时使用的人参籽将开裂人参籽之类的发芽或者未发芽的人参籽全部包括，也可以为鲜人参籽，也可以为通过日光干燥或者热风干燥进行干燥的人参籽。例如，利用压榨法时，可以将人参籽或者人参籽粉末放入榨油机中，在常
温(约15℃至25℃)下压榨3分钟至20分钟，得到人参籽油，所述榨油机只要是食品用榨油机，则可以不受限制地使用。利用超临界提取法时，可以将人参籽或者人参籽粉末放入超临界提取槽中，相对于1g的人参籽粉末添加50ml～1l的提取溶剂之后，供应超临界流体(例如，二氧化碳)，然后将提取槽的压力保持为300bar～500bar，提取3小时至4小时。
27.在一实现例中，对于所述人参籽油，可以根据需要进行提纯工艺。对于提纯工艺不作特别限定，可以使用本领域中公知的任意方法。作为一例，可以减压过滤，然后经过离子交换树脂或者硅胶柱色谱之后，进行冷冻干燥或者浓缩，从而去除溶剂。
28.在本说明书中，“人参子”可以是指人参生长过程中得到的果实。具体地，可以是指3年至5年生人参，更加具体地，在4年生的人参中7月中旬结果一周左右的果实。本说明书中使用的人参子其入手方法不受限制，也可以栽培使用或者在市面上购买使用。所述人参子相比通常使用的人参根，含有更多的维生素在内的矿物成分、人参皂苷，尤其是人参子中含有的人参皂苷的组分与人参根完全不同。更加具体地，人参子中，相比包含人参皂苷rb1、rb2、rc、rd等的pd(原人参二醇；protopanaxadiol)类人参皂苷，含有更多的包含人参皂苷re、rg1、rg2等的pt(原人参三醇；protopanaxatriol)类人参皂苷，因此相比人参根，能够表现出显著优异的效果。
29.在本说明书中，不论提取方法、提取溶剂、提取的成分或者提取物的形态，“人参子提取物”是包含以下物质的广义概念：将通过提取人参子的成分得到的物质全部包含，并且包含在提取该成分的过程中通过包括由热、酸(acid)、碱(base)、酶等处理的工艺的提取方法得到的物质，另外，将通过提取人参子的成分得到的物质进行提取之后，可以通过其他方法加工或者处理得到的物质全部包含。具体地，所述加工或者处理可以是将人参子提取物进一步发酵或者酶处理等。因此，本说明书的人参子提取物可以为发酵物。另外，本说明书中，人参子提取物可以为以下人参子的提取物，具体地，可以是鲜人参子的提取物或者人参子干燥物的提取物。本说明书中，鲜人参子、人参子的干燥物或者为了提取过程而可以使用的人参子的其他加工物(例如，发酵物、干燥粉碎物等)可以是彼此组分类似或者相同。因此，所述组分类似或者相同的鲜人参子或者人参子的干燥物或者人参子的其他加工物可以同样显示本说明书中公开的人参子提取物的效果以及用途。
30.在本说明书中，得到“人参子提取物”的提取方法可以利用加热提取、冷浸提取、回流冷却提取或者超声波提取等，然而只要是对本领域技术人员显而易见的提取法，则不受限制。制备本说明书的人参子提取物时使用的人参子可以使用人参子干燥物、人参子鲜果或者人参子粉末等，只要是由人参子鲜果制得的物质，则可以不受限制地使用。本说明书的人参子提取物可以为水、有机溶剂或者它们的混合溶剂的提取物。所述有机溶剂可以使用c1‑
c6乙醇、丙酮、己烷、乙酸乙酯、二氧化碳或者其中两个以上的混合有机溶剂，然而不限于此。本说明书的人参子提取物还含有将通过所述提取溶剂提取得到的提取物进行减压浓缩得到的物质。所述减压浓缩具体可以在35℃至50℃下进行，但不限于此。在所述范围的温度下进行减压浓缩时，本发明的人参子提取物中多种成分的协同效应优异。在如上所述的观点下，所述减压浓缩具体可以在36℃以上、37℃以上、38℃以上、39℃以上、40℃以上、41℃以上、42℃以上以及/或者49℃以下、48℃以下、47℃以下、46℃以下、45℃以下、44℃以下、43℃以下的条件下进行。另外，所述减压浓缩具体可以在600mmhg以上、620mmhg以上、640mmhg以上、650mmhg以上、660mmhg以上、680mmhg以上、700mmhg以上、720mmhg以上、
740mmhg以上以及/或者760mmhg以下、740mmhg以下、720mmhg以下、700mmhg以下、680mmhg以下、660mmhg以下、650mmhg以下、640mmhg以下、620mmhg以下、600mmhg以下的条件下进行。
31.在一实现例中，所述组合物可以相对于所述组合物总重量，含有0.001重量％至70重量％的所述人参籽油。含有超过70重量％的所述人参籽油时，组合物的稳定性可能降低。具体地，所述组合物可以含有0.001重量％以上、0.002重量％以上、0.003重量％以上、0.005重量％以上、0.007重量％以上、0.01重量％以上、0.02重量％以上、0.03重量％以上、0.05重量％以上、0.07重量％以上、0.1重量％以上、0.2重量％以上、0.3重量％以上、0.5重量％以上、0.7重量％以上、1重量％以上、1.1重量％以上、1.2重量％以上、1.3重量％以上、1.4重量％以上、1.5重量％以上、2重量％以上、3重量％以上、4重量％以上、5重量％以上、6重量％以上、7重量％以上、8重量％以上、9重量％以上、10重量％以上、11重量％以上、12重量％以上、13重量％以上、14重量％以上或者15重量％以上的同时，70重量％以下、69重量％以下、68重量％以下、67重量％以下、66重量％以下、65重量％以下、64重量％以下、63重量％以下、62重量％以下、61重量％以下、60重量％以下、59重量％以下、58重量％以下、57重量％以下、56重量％以下、55重量％以下、54重量％以下、53重量％以下、52重量％以下、51重量％以下、50重量％以下、49重量％以下、48重量％以下、47重量％以下、46重量％以下、45重量％以下、44重量％以下、43重量％以下、42重量％以下、41重量％以下或者40重量％以下的所述人参籽油。
32.在一实现例中，所述组合物可以相对于所述组合物总重量，含有0.01重量％至60重量％的所述人参子提取物。含有超过60重量％的所述人参子提取物时，因流动性不佳而有可能引起制备工艺上的不便。具体地，所述组合物可以含有0.01重量％以上、0.02重量％以上、0.03重量％以上、0.05重量％以上、0.07重量％以上、0.1重量％以上、0.2重量％以上、0.3重量％以上、0.5重量％以上、0.7重量％以上、1重量％以上、2重量％以上、3重量％以上、5重量％以上、7重量％以上、9重量％以上、10重量％以上、11重量％以上、12重量％以上、13重量％以上、14重量％以上、15重量％以上、16重量％以上、17重量％以上、18重量％以上、19重量％以上或者20重量％以上的同时，60重量％以下、59重量％以下、58重量％以下、57重量％以下、56重量％以下、55重量％以下、54重量％以下、53重量％以下、52重量％以下、51重量％以下、50重量％以下、48重量％以下、46重量％以下、44重量％以下、42重量％以下或者40重量％以下的所述人参子提取物。
33.在一实现例中，所述人参籽油以及人参子提取物的重量比可以为1:2至1:100、或者1:2至1:50、或者1:2至1:15、或者1:7至1:13、或者1:10。所述人参籽油以及人参子提取物的重量比超过所述范围时，油层发生分离而有可能降低剂型稳定性。
34.在一实现例中，所述组合物不含其他表面活性剂。本公开实质上提供不含表面活性剂也能稳定分散的乳化组合物。所述实质上不含表面活性剂是指可以使合成成分的表面活性剂最少化或者完全不含表面活性剂，是指相对于组合物总重量，含有1％以下，优选为0.5％以下，优选为0.1％，更加优选为0.01％以下。
35.在一实现例中，所述组合物还可以含有粘胶(gum)以及膳食纤维。
36.在一实现例中，所述粘胶可以含有选自由黄原胶(xanthan gum)、卡拉胶(carrageenans gum)、瓜尔胶(guar gum)、结冷胶(gellan gum)、槐豆胶(locust bean gum)、罗望子胶(tamarind gum)、阿拉伯胶(arabic gum)、蒟蒻、果胶、琼脂、木薯淀粉、糊
精、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、海藻酸钠以及变性淀粉组成的组中的一种以上。
37.在一实现例中，所述组合物可以相对于所述组合物总重量，含有0.001重量％至5重量％的所述粘胶。含有超过5重量％的所述粘胶时，产生大量的泡沫而可能引起饮用组合物时吞咽的不适。具体地，所述组合物可以含有0.001重量％以上、0.002重量％以上、0.003重量％以上、0.005重量％以上、0.007重量％以上、0.01重量％以上、0.02重量％以上、0.03重量％以上、0.04重量％以上、0.05重量％以上、0.06重量％以上、0.07重量％以上、0.08重量％以上、0.09重量％以上或者0.1重量％以上的同时，5重量％以下、4.9重量％以下、4.8重量％以下、4.7重量％以下、4.6重量％以下、4.5重量％以下、4.4重量％以下、4.3重量％以下、4.2重量％以下、4.1重量％以下、4重量％以下、3.9重量％以下、3.8重量％以下、3.7重量％以下、3.6重量％以下、3.5重量％以下、3.4重量％以下、3.3重量％以下、3.2重量％以下、3.1重量％、3重量％以下、2.9重量％以下、2.8重量％以下、2.7重量％以下、2.6重量％以下、2.5重量％以下、2.4重量％以下、2.3重量％以下、2.2重量％以下、2.1重量％以下或者2重量％以下的所述粘胶。
38.在一实现例中，所述膳食纤维可以含有选自由柑橘膳食纤维以及小麦膳食纤维而成的组中的一种以上。
39.在一实现例中，所述组合物可以相对于所述组合物总重量，含有0.001重量％至20重量％的所述膳食纤维。含有超过5重量％的所述膳食纤维时，产生大量的泡沫而有可能降低剂型稳定性。具体地，所述组合物可以含有0.001重量％以上、0.002重量％以上、0.003重量％以上、0.005重量％以上、0.007重量％以上、0.01重量％以上、0.02重量％以上、0.03重量％以上、0.04重量％以上、0.05重量％以上、0.06重量％以上、0.07重量％以上、0.08重量％以上、0.09重量％以上、0.1重量％以上、0.2重量％以上、0.3重量％以上、0.4重量％以上或者0.5重量％以上的同时，20重量％以下、19重量％以下、18重量％以下、17重量％以下、16重量％以下、15重量％以下、14重量％以下、13重量％以下、12重量％以下、11重量％以下、10重量％以下、9重量％以下、8重量％以下、7重量％以下、6重量％以下、5重量％以下、4.8重量％以下、4.6重量％以下、4.4重量％以下、4.2重量％以下、4重量％以下、3.8重量％以下、3.6重量％以下、3.4重量％以下、3.2重量％以下、3重量％以下、2.8重量％以下、2.6重量％以下、2.4重量％以下、2.2重量％以下或者2重量％以下的所述膳食纤维。
40.在一实现例中，所述人参子提取物可以为水、有机溶剂或者它们的混合溶剂的提取物。所述水可以包括蒸馏水或者净化水，所述有机溶剂可以为乙醇、丙酮、己烷、乙酸乙酯、二氧化碳或者其中两个以上的混合有机溶剂，但不限于此。所述乙醇可以为c1‑
c6低浓度乙醇。
41.在一实现例中，所述组合物可以为液状组合物。
42.在一实现例中，所述组合物可以为食品组合物。所述食品组合物的剂型不受特别限制，例如，可以剂型化为片剂、颗粒剂、丸剂、饮品剂之类的液剂、焦糖、凝胶、棒、茶包等。各个剂型的食品组合物除了有效成分之外，对于本领域中通常使用的成分，可以根据剂型或者使用目的，本领域技术人员可容易地进行适当的选择而配制，与其他原料同时使用时，可以发生协同效应。
43.根据一实现例的食品组合物可以含有多种营养剂、维生素、矿物质(电解质)、合成风味剂以及天然风味剂等的风味剂、着色剂以及促进剂(奶酪、巧克力等)、果胶酸以及其
盐、藻酸以及其盐、有机酸、保护性胶状增粘剂、ph调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、乙醇、碳酸饮料中使用的碳酸剂等。另外，根据一实现例的食品组合物可以含有天然果汁以及用于制备果汁饮料、蔬菜饮料的果肉。这些成分可以单独或者组合使用。所述添加剂的比率不是很重要，然而一般是对于根据一实现例的组合物100重量份，含有0重量份至约50重量份。
44.在一实现例中，所述组合物可以为肌肉能量代谢促进用组合物。
45.在一实现例中，所述组合物可以为脂肪氧化促进用组合物。
46.在一实现例中，所述组合物可以为线粒体增加以及激活用组合物。
47.在一方面，本公开提供一种含有乳化组合物的胶囊。所述胶囊可以为软胶囊或者硬胶囊。
48.在一方面，本公开提供一种用在肌肉能量代谢促进用组合物的制备中的人参籽油以及人参子提取物的用途。
49.在一方面，本公开提供一种用在脂肪氧化用组合物的制备中的人参籽油以及人参子提取物的用途。
50.在一方面，本公开提供一种用在线粒体增加以及激活用组合物的制备中的人参籽油以及人参子提取物的用途。
51.以下，通过实施例等更加详细说明本发明。本领域中具有通常知识的人应明确所述实施例仅是用于示例本发明，不应解释为本发明的范围受所述实施例限制。
52.[制备例1]人参籽油的制备
[0053]
收获鲜人参(panax ginseng c.a.meyer)子，分离出种子，收获人参籽。清洗收获的人参籽，去除异物之后，仅筛选出可以压榨的种子。将其干燥之后进行粉碎，去除杂质，放入到榨油机(ds
‑
1500，dasan食品产业器械，韩国)之后，进行压榨，提取出人参籽油原液。提纯经提取的人参籽油原液，进行过滤，制得人参籽油。
[0054]
[制备例2]人参子提取物的制备
[0055]
混合去除果皮的鲜人参(panax ginseng c.a.meyer)子的果肉以及果汁，制备人参子原料。向如上制备的1kg的人参子原料中加入3l的乙醇，在25℃下回流提取4小时之后，进行减压浓缩，制得人参子提取物。
[0056]
[制备例3]红参提取物的制备
[0057]
向提取器投入1kg的红参原料，并向提取器加入按照1:1的体积比混合的水和乙醇3l。在70℃下10小时内反复提取4次，将该提取液利用250目(mesh)的过滤器进行加压式过滤。将该液体转移到减压浓缩机中，在600mmhg、70℃温度下进行浓缩，转移到灭菌槽中，在83℃下蒸汽灭菌20分钟，制得红参提取物。
[0058]
[实施例1]
[0059]
按照以下表1的组分，制备作为人参籽油和人参子提取物的乳化组合物的实施例1。具体地，在制备例2的人参子提取物中添加制备例1的人参籽油，加温至70℃，利用agi混合器以200rpm进行搅拌。在净化水中加入向人参子提取物搅拌人参籽油的溶液，在80℃下利用agi混合器(或者均化器)以200rpm进行搅拌，制得实施例1。
[0060]
[表1]
[0061]
(单位：重量％)实施例1实施例2比较例1比较例2人参籽油2.52.52.52.5
人参子提取物2525
‑‑
红参提取物
‑‑
2525结冷胶
‑
0.1
‑
0.1柑橙膳食纤维
‑
0.4
‑
0.4净化水至100至100至100至100合计100100100100
[0062]
[实施例2]
[0063]
按照以上表1的组分，制备作为含有结冷胶和膳食纤维的人参籽油和人参子提取物的乳化组合物的实施例2。具体地，在制备例2的人参子提取物中添加制备例1的人参籽油，加温至70℃，利用agi混合器以200rpm进行搅拌。向净化水添加结冷胶和柑橘膳食纤维，加温至80℃，使结冷胶和柑橘膳食纤维发生水合作用。然后，将向所述人参子提取物搅拌人参籽油的溶液添加到使结冷胶和膳食纤维发生水和反应的净化水中，在80℃下利用agi混合器以200rpm进行搅拌，制得实施例2。
[0064]
[比较例1]
[0065]
按照以上表1的组分，制备比较例1的组合物。具体地，在制备例3的红参提取物添加制备例1的人参籽油，加温至70℃，利用agi混合器以200rpm进行搅拌。在净化水中加入向所述人参子提取物搅拌人参籽油的溶液，在80℃下利用agi混合器以200rpm进行搅拌，制得比较例1。
[0066]
[比较例2]
[0067]
按照以上表1的组分，制备含有结冷胶和膳食纤维的比较例2的组合物。具体地，在制备例3的红参提取物添加制备例1的人参籽油，加温至70℃，利用agi混合器以200rpm进行搅拌。在净化水中添加结冷胶和柑橘膳食纤维，加温至80℃，使结冷胶和柑橘膳食纤维发生水合作用。然后，将向所述人参子提取物搅拌人参籽油的溶液添加到使结冷胶和膳食纤维发生水合反应的净化水中，在80℃下利用agi混合器以200rpm进行搅拌，制得比较例2。
[0068]
[实验例1]乳化稳定性的确认
[0069]
确认刚制得实施例1、实施例2以及比较例1、比较例2之后的混合结果，在25℃下放置24小时之后，再次搅拌10秒，确认油相和水相是否发生分离，将该结果显示在表2、图1以及图2中。
[0070]
[表2]
[0071] 实施例1实施例2比较例1比较例2刚制备之后混合均匀混合均匀油相分离产生大量的泡沫放置24小时保持均匀性保持均匀性油相分离产生大量的泡沫
[0072]
如表2、图1以及图2的结果中所确认，含有人参籽油和人参子提取物的实施例1以及实施例2其油成分混合均匀，即便经过24小时，保持稳定的均匀性，可以确认为单相。与此相反地，含有人参籽油和红参提取物的比较例1以及比较例2其油成分与水溶性成分没有混合均匀，而油相分离，含有结冷胶的比较例2中，反而可以确认到产生大量的泡沫。
[0073]
[实验例2]人参皂苷的吸收量的测定
[0074]
为了测定人参皂苷吸收量，使实施例1、比较例1、人参子提取物(将制备例2利用净化水稀释4倍)以及红参提取物(将制备例3利用净化水稀释4倍)各自通过人体消化模拟系
统之后，测定移送至作为取自人体小肠细胞的caco
‑
2细胞(cell)(atcc公司)的人参皂苷的量。具体地，在所述人体消化模拟系统的唾液步骤(salivary phase)中，向试样(实施例1、比较例1、人参子提取物、红参提取物)添加淀粉酶(2ml)之后，在37℃、ph6.9下以100rpm搅拌3分钟，然后在胃步骤(gastric phase)中，向通过所述唾液步骤的试样添加胃蛋白酶(4ml)之后，在37℃、ph2(1m hcl)下以100rpm搅拌1小时进行消化。然后，作为小肠步骤(small intestinal phase)，向在以上步骤中消化的试样添加脂肪酶、胰液素、胆汁酸(bile acid)、淀粉葡萄糖苷酶(amyloglucosidase)之后，在37℃、ph5.3(1m nahco3)下以100rpm搅拌2小时。如上所述，将通过人体消化模拟系统的试样进行离心分离之后，取上层液稀释10倍，处理到dmem之后，利用所述经过处理的dmem，在trans well以37℃、5％co2的条件培养caco
‑
2细胞2小时。回收所述培养的caco
‑
2细胞之后，利用高效液相色谱法(hplc)，测定caco
‑
2细胞吸收的人参皂苷的量，将该结果显示在以下表3中。
[0075]
[表3]
[0076][0077]
如表3的结果中所确认，可以了解到含有人参籽油以及人参子提取物的实施例1中，其小肠细胞吸收的人参皂苷的含量最优异的同时，剂型稳定性卓越。
[0078]
[实验例3]基于人参籽油的添加，测定能量代谢相关基因的表达
[0079]
利用添加有10％的胎牛血清(fetal bovine serum；hyclone公司)、1％的青霉素/链霉素(penicillin/streptomycin；p/s；sigma aldrich公司)的dmem(dulbecco’s modified essential medium；sigma aldrich公司)，在5％co2、37℃的培养箱(incubator)中培养从atcc公司购入的取自老鼠的成肌细胞(myoblast)。在平板(plate)中成肌细胞达到100％，则通过血清饥饿(serum starvation)(添加有2％的马血清(horse serum；hyclone公司)、1％的p/s的dmem)方法分化一周，生成肌管细胞(myotube)。在完成分化的肌管细胞中，将制备例1的人参籽油(gs0)、制备例2的人参子提取物(gb)、制备例3的红参提取物(rg)进行单独(100ug/ml)或者组合(各个试样处理100μg/ml，试样的和为200μg/ml)处理16小时。阳性对照组使用了作为pparα激动剂(agonist)的促进肌肉能量代谢的非诺贝特(fenofibrate(100μm))。
[0080]
然后，利用试剂盒(trizol agent；invitrogen公司)从经过上述试样处理的肌管细胞中提取rna，利用revertaid第一链cdna合成试剂盒(revertaid 1st strand cdna synthesis kit)合成cdna。利用伯乐(bio
‑
rad)公司的cfx96热循环仪(thermocycler)分析q
‑
pcr(定量实时聚合酶链锁反应)，以亲环素(cyclophilin)表达量为基准，比较能量代谢相关基因(组织长链脂酰辅酶a氧化酶(acyl
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coa oxidase；aco)，肉碱脂酰转移酶
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1(carnitine
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palmitoyl transferase 1；cpt1)，过氧化物酶体增殖物激活受体α
(peroxisome proliferator
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activated receptorα；pparα)，pparγ辅助活化因子1α(pparγ
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coactivator 1α；pgc1α)，转录因子a线粒体(transcription factor a mitochondria；tfam)，解偶联蛋白3(uncoupling protein 3；ucp3))的相对表达量，并在图3a至图3f中示出(图3a至图3f中，gso表示人参籽油，gb表示人参子提取物，rg表示红参提取物，fano表示非诺贝特(fenofibrate))。
[0081]
如图3a至图3f所示，可以确认到相对于红参提取物，人参子提取物的脂肪氧化以及线粒体相关基因的表达量高，而人参籽油对肌细胞内脂质代谢并没有什么特别的影响。另外，确认红参提取物以及人参子提取物和人参籽油的协同效应，则确认到红参提取物通过人参籽油的添加而基因表达增加20～30％左右，与此相反地，人参子提取物中添加人参籽油时，则显示30～50％左右的增加效果。由此，确认到人参籽油使红参提取物以及人参子提取物的能量代谢促进效果加倍，所述协同效应相比红参提取物，在人参子提取物中更加显著。另外，在非诺贝特(fenofibrate)处理组中未观察到基于人参籽油处理的能量代谢的增加，从而可以了解到人参籽油的能量代谢促进协同效应在红参以及人参子中特殊显示。
[0082]
[实验例4]基于人参籽油的增加，观察肌细胞内线粒体的增加
[0083]
向通过与所述实验例4相同的方法分化的肌细胞按照相同的条件处理试样之后，利用pbs清洗2次，去除残留培养基。然后，利用线粒体绿色荧光探针(mitotracker green fm；invitrogen公司)将肌细胞处理30分钟，对线粒体进行染色。进一步进行pbs清洗工作3次，利用甲醛(formaldehyde；sigmal aldrich公司)固定细胞，通过荧光显微镜(evos m5000)进行观察，并在图4a及图4b中示出(图4a及图4b中，gso表示人参籽油，gb表示人参子提取物，rg表示红参提取物，fano表示非诺贝特(fenofibrate))。
[0084]
如图4a及图4b所示，与在所述实验例3中测定的线粒体生成相关基因(pgc1α，tfam)的表达增加的情况相同，通过处理人参子提取物产生的线粒体增加现象相比红参提取物处理组显著。尤其是，观察到一同处理人参子提取物和人参籽油的组中，线粒体密度以与阳性对照组(非诺贝特(fenofibrate))结果类似的程度增加，由此期待人参籽油实际上可以促进肌细胞内能量代谢。
[0085]
[剂型例1]健康饮料
[0086]
按照以下表4中记载的组分，通过通常的方法制备健康饮料。
[0087]
[表4]
[0088]
配制成分含量人参籽油2g人参子提取物20g结冷胶0.1g维生素a醋酸酯70μg维生素e1mg维生素b10.13mg维生素b20.15mg维生素b60.5mg维生素b120.2μg维生素c10mg
生物素10μg低聚糖2.5g净化水125ml
[0089]
按照通常制备健康饮料的方法混合所述成分，然后在80℃下搅拌约1小时之后，过滤制得的溶液，进行灭菌。
[0090]
[剂型例2]软胶囊剂
[0091]
混合50mg的人参籽油、320mg的人参子提取物、60mg的左旋肉碱、2mg的棕榈油、8mg的植物氢化油、4mg的黄蜂蜡以及6mg的软磷脂，按照通常的方法填充到1个胶囊中，制备软胶囊剂。
[0092]
[剂型例3]液剂
[0093]
按照通常的液剂制备方法混合2g的人参籽油、25g的人参子提取物、3g的异构化糖、1g的甘露醇、70ml的净化水之后，填充到褐色瓶中，进行灭菌，制备液剂。
[0094]
[剂型例4]饮品剂
[0095]
混合10g的人参籽油、100g的人参子提取物、10g的葡萄糖、0.6g的柠檬酸以及25g的液状低聚糖之后，添加500ml的净化水，向每瓶填充200ml。填充到瓶中之后，在130℃下杀菌4～5秒，制备饮品剂。
[0096]
本技术要求于2020年3月31日申请的大韩民国专利申请第10
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2020
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0039315号的优先权，该申请的整体内容将作为参考纳入本技术中。