抗CD73的抗体及其用途的制作方法

技术特征：
1.抗cd73(例如人cd73)抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗cd73抗体包含：seq id no：2、seq id no：6或seq id no：10所示重链可变区包含的hcdr1，hcdr2和hcdr3；seq id no：4、seq id no：8、seq id no：12或seq id no：14所示轻链可变区包含的lcdr1，lcdr2和lcdr3，优选地，根据imgt编号系统，所述抗cd73抗体包含：hcdr1，其包含seq id no：15所示的氨基酸序列，与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1个、2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，hcdr2，其包含seq id no：16所示的氨基酸序列，与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1个、2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，hcdr3，其包含seq id no：17所示的氨基酸序列，与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％，92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1个、2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，lcdr1，其包含seq id no：18所示的氨基酸序列，与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1个、2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，lcdr2，其包含seq id no：19所示的氨基酸序列，与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1个、2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，和lcdr3，其包含seq id no：20所示的氨基酸序列，与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1个、2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成。2.权利要求1所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段，所述抗体的重链可变区包含下述序列，或由下述序列组成：seq id no：2、seq id no：6或seq id no：10，与seq id no：2、seq id no：6或seq id no：10具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与seq id no：2、seq id no：6或seq id no：10所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列；并且所述抗体的轻链可变区包含下述序列，或由下述序列组成：
seq id no：4、seq id no：8、seq id no：12或seq id no：14，与seq id no：4、seq id no：8、seq id no：12或seq id no：14具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与seq id no：4、seq id no：8、seq id no：12或seq id no：14所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列。3.权利要求1或2所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no：2所示，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：4所示；所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no：6所示，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：8所示；所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no：10所示，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：12所示；或所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no：10所示，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：14所示。4.权利要求1或2所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体的重链恒定区序列如seq id no：21所示；轻链恒定区序列如seq id no：22所示；或重链恒定区为ig gamma
‑
1chain c region，accession：p01857，轻链恒定区为ig kappa chain c region，accession：p01834)。5.权利要求1或2所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体为单克隆抗体(优选重链氨基酸序列如seq id no：23所示，轻链氨基酸序列如seq id no：24)、人源化抗体、嵌合抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)。6.权利要求1或2所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段，所述抗原结合片段选自fab、fab
′
、f(ab
′
)2、fd、fv、dab、fab/c、互补决定区片段、单链抗体(例如，scfv)、人源化抗体、嵌合抗体或双特异性抗体。7.分离的多肽，其选自以下各项组成的组：(1)分离的多肽，其包含seq id no：15，seq id no：16和seq id no：17所示的序列，其中所述多肽作为抗cd73抗体的一部分，特异性结合cd73，所述抗体还包含seq id no：18；seq id no：19；seq id no：20所示的序列；(2)分离的多肽，其包含seq id no：18，seq id no：19和seq id no：20所示的序列，其中所述多肽作为抗cd73抗体的一部分，特异性结合cd73，所述抗体还包含seq id no：15，seq id no：16，和seq id no：17所示的序列；(3)分离的多肽，其包含seq id no：2、seq id no：6或seq id no：10所示的序列或与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，其中所述多肽作为抗cd73抗体的一部分，特异性结合cd73，所述抗体还分别对应包含seq id no：4、seq id no：8或seq id no：12所示的序列或与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、
93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列；(4)分离的多肽，其包含seq id no：4、seq id no：8或seq id no：12所示的序列或与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，其中所述多肽作为抗cd73抗体的一部分，特异性结合cd73，所述抗体还分别对应包含seq id no：2、seq id no：6或seq id no：10所示的序列或与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列；(5)分离的多肽，其包含seq id no：10所示的序列或与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，其中所述多肽作为抗cd73抗体的一部分，特异性结合cd73，所述抗体还分别对应包含seq id no：14所示的序列或与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列；(6)分离的多肽，其包含seq id no：14所示的序列或与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，其中所述多肽作为抗cd73抗体的一部分，特异性结合cd73，所述抗体还分别对应包含seq id no：10所示的序列或与所述序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列。8.核酸分子，其编码权利要求1
‑
6任一项所述的抗体或其抗原结合片段，或权利要求7所述分离的多肽。9.载体，其包含权利要求8所述的核酸分子。10.宿主细胞，其包含权利要求8所述的核酸分子，或权利要求9所述的载体。11.偶联物，其包含权利要求1
‑
6任一项所述的抗体或其抗原结合片段以及偶联部分，其中，所述偶联部分为纯化标签(如his标签)，可检测的标记；优选地，所述偶联部分为放射性同位素、荧光物质、化学发光物质、有色物质、聚乙二醇或酶。12.融合蛋白或多特异性抗体(优选双特异性抗体)，其包含权利要求1
‑
6任一项所述的
抗体或其抗原结合片段。13.试剂盒，其包括权利要求1
‑
6任一项所述的抗体或其抗原结合片段、权利要求11所述的偶联物或权利要求12所述的融合蛋白或多特异性抗体；优选地，所述试剂盒还包括第二抗体，其特异性识别所述抗体；任选地，所述第二抗体还包括可检测的标记，例如放射性同位素、荧光物质、化学发光物质、有色物质或酶；优选地，所述试剂盒用于检测cd73在样品中的存在或其水平。14.药物组合物，其包含权利要求1
‑
6任一项所述的抗体或其抗原结合片段、权利要求11所述的偶联物或权利要求12所述的融合蛋白或多特异性抗体；可选地，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。优选地，所述药物组合物为适于通过皮下注射、皮内注射、静脉内注射、肌内注射或病灶内注射施用的形式。15.权利要求1
‑
6任一项所述的抗体或其抗原结合片段、权利要求11所述的偶联物或权利要求12所述的融合蛋白或多特异性抗体在制备治疗和/或预防肿瘤(例如实体瘤，优选非小细胞肺癌、前列腺癌(包括转移性去势抵抗前列腺癌(mcrpc))、三阴性性乳腺癌、卵巢癌、结直肠癌(包括结直肠癌微卫星稳定(mss))、胃癌、黑色素癌、头颈癌、肾细胞癌或胰管腺癌)的药物中的用途，或者在制备用于诊断肿瘤的药物中的用途。16.杂交瘤细胞株，其选自：lt014，其保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏编号为cctcc no：c2018137。

技术总结
本发明涉及抗CD73抗体及其应用。具体地，所述抗体的重链可变区包含氨基酸序列如SEQ ID NOs：15


技术研发人员：王忠民 张鹏 李百勇 夏瑜
受保护的技术使用者：中山康方生物医药有限公司
技术研发日：2021.04.22
技术公布日：2021/10/23