一种苯并氮杂环类化合物、其制备方法及用途与流程

1.本发明涉及一种苯并氮杂环类化合物、其制备方法及用途。


背景技术：

2.组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,hdacs)能够催化组蛋白和非组蛋白的去乙酰化过程，和 组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferases,hats)共同调节细胞内乙酰化水平，从而调控基因的表达。 目前，已知哺乳动物hdacs有18个亚型，分为四类：i类(hdac1、hdac2、hdac3、hdac8)； ii类进一步分为iia(hdac4、hdac5、hdac7、hdac9)和iib(hdac6、hdac10)两个亚家族；iii 类(sirt1～sirt7)；iv类(hdac11)。
3.目前已上市的组蛋白去乙酰化酶抑制剂(hdaci)共有5个，分别为伏立诺他(vorinostat)、贝利司 他(belinostat)、帕比司他(panobinostat)、罗米地辛(romidepsin)和西达本胺(chidamide)，前三者均为广 谱型抑制剂，后两者选择性作用于i类亚型。伏立诺他和罗米地辛用于治疗皮肤t细胞淋巴瘤(ctcl)， 贝利司他和西达苯胺用于治疗复发及难治性外周t细胞淋巴瘤(ptcl)，帕比司他与硼替佐米和地塞 米松联用治疗多发性骨髓瘤(mm)。
4.尽管上述hdac抑制剂在临床上已取得良好疗效，但广谱hdac抑制剂普遍存在如下缺点：
5.(1)较强的毒副作用，如恶心、呕吐、骨髓抑制等；
6.(2)基因毒性；
7.(3)药代动力学特性差，生物利用度低、半衰期短等。
8.以上缺点既为肿瘤患者造成不便，也阻碍广谱hdac抑制剂在肿瘤治疗以外领域的应用。
9.目前hdacs亚型选择性抑制剂成为该领域的研究热点，其中，hdac6亚型抑制剂备受关注。 hdac6涉及的疾病领域非常广泛，包括肿瘤、神经退行性疾病、炎症、自身免疫应答、肿瘤及细菌 感染等。
10.药理学研究表明hdac6选择性抑制剂能够有效抑制胶质母细胞瘤细胞增殖并诱导其凋亡，且抑 制hdac6可以增强胶质母细胞瘤细胞对替莫唑胺的敏感性，提示二者有协同增效作用。具体而言， hdac6可以调节其乙酰化底物如热休克蛋白的活性，热休克蛋白作为分子伴侣可以参与修复错误折 叠蛋白及未折叠蛋白；同时，hdac6蛋白的znf-ubp结构域能以高亲和力结合泛素化的错误折叠蛋 白并促进其降解。hdac6的分子伴侣p97/vcp能使hdac6-泛素复合物分离，其二者之间的平衡能 影响细胞在内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ers)和未折叠蛋白质应答反应(unfolded proteinresponse,upr)期间错误折叠和未折叠蛋白的命运。因此，hdac6抑制剂tubastatin a和替莫唑胺 (tmz)的联合治疗逆转了hdac6和p97/vcp之间的比例、减弱热休克蛋白的激活，触发了未折叠 蛋白应答反应和内质网应激的促凋亡信号，并最终克服了内质网应激耐受，降低了tmz耐药胶质瘤 细胞的活力并诱导细胞凋亡。
11.与脑胶质瘤类似，阿尔兹海默症(ad)临床同样亟需有效治疗药物，研究发现hdac6在ad脑 的海马(增加91％)和皮质(增加52％)中表达水平显着增加，并且在含有nfts的神经元中微管蛋 白乙酰化降低。hdac6参与tau过度磷酸化的过程。hdac6与人脑组织中的tau相互作用，这种相 互作用由tau上的微管结合结构域和hdac6上的se14结构域介导。hdac6的抑制不影响其与tau 相互作用，但减弱tau的t231磷酸化，t231是tau功能的关键调节位点。hdac6抑制改善ad小鼠 的认知。以上研究表明中枢靶向性hdac6抑制剂有望开发成为全新的高效低毒的ad治疗药物。
12.文献(j.am.chem.soc.2010,132,31,10842-10846)报道了含咔唑结构的芳基异羟肟酸类hdac6 抑制剂tubastatin a具有中枢神经保护作用，其理化性质不佳、成药性差。
13.文献(acs chem.neurosci.2019,10,3,1679-1695)报道了含四氢喹啉结构的hdac6抑制剂 (ic
50
＝2.3nm)sw-100对认知障碍小鼠具有一定认知改善作用。
[0014][0015]
专利wo 2018200608a公开一类吲哚啉类化合物，其中化合物ii-ing-39对hdac6抑制 ic
50
＝21.5nm,弱于sw-100(ic
50
＝2.3nm)近1个数量级，且吲哚啉苯环上取代基对hdac6抑制活 性影响较大，例如其中硝基取代化合物ii-ing-57对hdac6抑制活性(ic
50
＝1.4nm)显著优于ii-ing
-ꢀ
39和ii-ing-44。
[0016][0017]
上述公开文献及专利提示：式中含氮原子的杂环结构的不同以及苯环上取代基差异影响化合物对 hdac6抑制活性，但影响程度及产生的药理效应不能预知，需经试验验证。


技术实现要素：

[0018]
本发明所要解决的技术问题是为了克服现有技术中hdac6抑制剂单一，特别是选
择性差的缺陷， 而提供了一种苯并氮杂环类化合物、其制备方法及用途。本发明提供的苯并氮杂环类化合物可作为组 蛋白去乙酰化酶抑制剂，具有hdac6选择性抑制作用，且具有高效、低毒、药代动力学特性理想等 特征，作为抗肿瘤或神经退行性疾病治疗剂有望满足临床需要。
[0019]
本发明是通过下述技术方案来解决上述技术问题的。
[0020]
本发明提供了一种如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐：
[0021][0022]
其中，
[0023]
环a(a侧表示与所示苯环并环连接)为7元杂环烷基；所述的7元杂环 烷基中，1个所示的n与所述的连接之外，还含有0-2个任选自n、o、s、s(＝o)和s(＝o)2的杂原子团；
[0024]
n为0、1、2、3或4；
[0025]
r2独立地为氢、羟基、c
1-c4烷基、c
1-c4烷基-o-、(r
a
r
b
)n-或o＝(当-ch
2-被取代时)；
[0026]
r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
独立地为氢、卤素、羟基、氰基或r
1-l-；
[0027]-l-独立地为连接键、-(c
1-c4烷基)-、-o-、-c(＝o)-或-s(＝o)
2-；
[0028]
r1独立地为c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、(r
c
r
d
)n-、3-7元杂环烷基或5-10元杂芳基， 或者，所述的c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、(r
c
r
d
)n-、3-7元杂环烷基和5-10元杂芳基被 一个或多个取代基r
e
取代；所述的3-7元杂环烷基和被一个或多个取代基r
e
取代的3-7元杂环烷基 里的3-7元杂环烷基中，杂原子团选自n、o、s、s(＝o)和s(＝o)2中的一种或多种，杂原子数为1-3 个；所述的5-10元杂芳基和被一个或多个取代基r
e
取代的5-10元杂芳基里的5-10元杂芳基中，杂 原子团选自n、o和s中的一种或多种，杂原子数为1-4个；r
e
独立地为羟基、卤素、氰基或c
1-c4烷基；当取代基为多个时，相同或不同；
[0029]
r
a
、r
b
、r
c
和r
d
独立地为氢或c
1-c4烷基；
[0030]
r
3a
、r
3b
、r
3c
、r
3d
、r4和r5独立地为氢、卤素、c
1-c4烷基或被一个或多个卤素取代的c
1-c4烷 基；当取代基为多个时，相同或不同；
[0031]
带“*”碳原子表示当为手性碳原子时，为s构型、r构型或它们的混合物。
[0032]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义(未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0033]
环a中与所述的连接的n位于并环连接的苯环的邻位、间位或对位；例如邻
位或对位； 又例如邻位。
[0034]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0035]
环a中，1个所示的n与所述的连接之外，还含有0-1个任选自n、o和s的杂原子团；
[0036]
例如，a侧为与所述的苯环并环连接。
[0037]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0038]
当r2独立地为c
1-c4烷基或c
1-c4烷基-o-时，所述的c
1-c4烷基和c
1-c4烷基-o-里的c
1-c4烷基 为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；例如甲基。
[0039]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0040]
当r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
独立地为卤素时，所述的卤素为氟、氯、溴或碘，例如氟、氯或溴；又例 如氟。
[0041]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0042]
当-l-独立地为-(c
1-c4烷基)-时，所述的-(c
1-c4烷基)-为亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚异 丙基、亚异丁基、亚仲丁基或亚叔丁基，例如亚甲基。
[0043]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0044]
当r1独立地为c
1-c6烷基、被一个或多个取代基r
e
取代的c
1-c6烷基时，所述的c
1-c6烷基和被 一个或多个取代基r
e
取代的c
1-c6烷基里的c
1-c6烷基独立地为c
1-c4烷基(例如甲基、乙基、正丙 基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基)；例如甲基。
[0045]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0046]
当r1独立地为c
3-c7环烷基、被一个或多个取代基r
e
取代的c
3-c7环烷基时，所述的c
3-c7环烷 基和被一个或多个取代基r
e
取代的c
3-c7环烷基里的c
3-c7环烷基独立地为环丙基、环丁基、环戊基、 环己基和环庚基；例如环丙基。
[0047]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0048]
当r1独立地为c
6-c
10
芳基、被一个或多个取代基r
e
取代的c
6-c
10
芳基时，所述的c
6-c
10
芳基和 被一个或多个取代基r
e
取代的c
6-c
10
芳基里的c
6-c
10
芳基独立地为苯基或萘基；例如苯基。
[0049]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0050]
当r1独立地为3-7元杂环烷基、被一个或多个取代基r
e
取代的3-7元杂环烷基时，所
述的3-7元 杂环烷基和被一个或多个取代基r
e
取代的3-7元杂环烷基里的3-7元杂环烷基独立地为5-6元杂环烷 基，其中，杂原子团选自n、o和s中的一种或多种，杂原子数为1-2个；例如哌啶基(又例如)。
[0051]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0052]
当r1独立地为5-10元杂芳基、被一个或多个取代基r
e
取代的5-10元杂芳基时，所述的5-10元 杂芳基和被一个或多个取代基r
e
取代的5-10元杂芳基里的5-10元杂芳基独立地为5-6元杂芳基，其 中，杂原子团选自n、o和s中的一种或多种，杂原子数为1-2个；例如吡啶基(又例如)。
[0053]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0054]
当r
e
独立地为卤素时，所述的卤素为氟、氯、溴或碘；例如氟或氯。
[0055]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0056]
当r
e
独立地为c
1-c4烷基时，所述的c
1-c4烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁 基、仲丁基或叔丁基；例如甲基。
[0057]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0058]
当r
a
、r
b
、r
c
和r
d
独立地为c
1-c4烷基时，所述的c
1-c4烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、 正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；例如甲基。
[0059]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0060]
当r
3a
、r
3b
、r
3c
、r
3d
、r4和r5独立地为c
1-c4烷基或被一个或多个卤素取代的c
1-c4烷基时， 所述的c
1-c4烷基和被一个或多个卤素取代的c
1-c4烷基里的c
1-c4烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙 基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；例如甲基。
[0061]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0062]
当r
3a
、r
3b
、r
3c
、r
3d
、r4和r5独立地为卤素或被一个或多个卤素取代的c
1-c4烷基时，所述的 卤素和被一个或多个卤素取代的c
1-c4烷基里的卤素为氟、氯、溴或碘，例如氟或氯。
[0063]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0064]
当r1独立地为c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、(r
c
r
d
)n-、3-7元杂环烷基或5-10元杂芳 基，且所述的c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、(r
c
r
d
)n-、3-7元杂环烷基和5-10元杂芳基被 取代基r
e
取代、r
e
独立地为卤素时，r
e
的个数为1、2或3个；
[0065]
例如三氟甲基。
[0066]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某
些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0067]
当r
3a
、r
3b
、r
3c
、r
3d
、r4和r5独立地为被一个或多个卤素取代的c
1-c4烷基时，卤素取代的个 数为被1至3个卤素取代；例如三氟甲基。
[0068]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0069]
环a为y为连接键、亚甲基或亚乙基(即环a为或)；例如y为连接键或
[0070]
x为c、n、o或s；a侧为与所述的苯环并环连接。
[0071]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0072]
n为0或1。
[0073]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0074]
r2独立地为氢、羟基、c
1-c4烷基、(r
a
r
b
)n-或o＝；
[0075]
例如，氢、羟基、c
1-c4烷基或o＝。
[0076]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0077]-l-独立地为连接键或-o-。
[0078]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0079]
r1独立地为c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、(r
c
r
d
)n-、3-7元杂环烷基或5-10元杂芳基； 例如c
1-c6烷基。
[0080]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义(未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0081]
r
1-l-为c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、(r
c
r
d
)n-、3-7元杂环烷基或5-10元杂芳基或c
1-c6烷基-o-； 例如c
1-c6烷基-o-。
[0082]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0083]
r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
独立地为氢、卤素或r
1-l-；
[0084]
例如r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
中的一个或两个独立地为卤素或r
1-l-，其余为氢；
[0085]
又例如，r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
中的一个或两个独立地为c
1-c6烷基-o-，其余为氢；或，r
1c
为卤 素，其余为氢；所述的卤素较佳地为氟。
[0086]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0087]
r4和r5独立地为氢或卤素；例如氢。
[0088]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0089]
r
a
、r
b
、r
c
和r
d
独立地为c
1-c4烷基。
[0090]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0091]
r
3a
、r
3b
、r
3c
和r
3d
独立地为氢或卤素；例如氢；
[0092]
例如r
3a
和r
3d
独立地为氢或卤素；r
3b
和r
3c
独立地为氢；
[0093]
又例如r
3a
为氢或卤素；r
3b
、r
3c
和r
3d
独立地为氢。
[0094]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0095]
式i苯并氮杂卓化合物，为式i-1或式i-2所示的苯并氮杂环类化合物：
[0096][0097]
其中，x1和x2独立地为(当r2为＝o时，为
[0098]
优选式i-1所示的苯并氮杂环类化合物。
[0099]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0100]
环a为7元杂环烷基；
[0101]
环a中与所述的连接的n位于所述苯环的邻位或对位；又例如邻位；
[0102]
n为0或1；
[0103]
r2独立地为氢、羟基、c
1-c4烷基、c
1-c4烷基-o-、(r
a
r
b
)n-或o＝；例如氢、羟基、c
1-c4烷基、 (r
a
r
b
)n-或o＝；又例如氢、羟基、c
1-c4烷基、或o＝；
[0104]
r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
独立地为氢、卤素或r
1-l-；
[0105]-l-独立地为连接键或-o-；
[0106]
r1独立地为c
1-c6烷基、c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、(r
c
r
d
)n-、3-7元杂环烷基或5-10元杂芳基；
[0107]
r4和r5独立地为氢或卤素；
[0108]
r
3a
、r
3b
、r
3c
和r
3d
独立地为氢或卤素；
[0109]
较佳地，r
1-l-为c
1-c6烷基-o-、c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、c
6-c
10
芳基-(c
1-c4烷基)-、(r
c
r
d
)n-、 3-7元杂环烷基或5-10元杂芳基。
[0110]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0111]
环a为y为连接键或x为c、n、o或s；
[0112]
n为0或1；
[0113]
r2独立地为氢、羟基、c
1-c4烷基、c
1-c4烷基-o-、(r
a
r
b
)n-或o＝；例如氢、羟基、c
1-c4烷基、 (r
a
r
b
)n-或o＝；又例如氢、羟基、c
1-c4烷基、或o＝；
[0114]
r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
独立地为氢、卤素、c
1-c6烷基-o-、c
3-c7环烷基、c
6-c
10
芳基、c
6-c
10
芳基
ꢀ-
(c
1-c4烷基)-、(r
c
r
d
)n-、3-7元杂环烷基或5-10元杂芳基；例如氢、氟或c
1-c6烷基-o-；
[0115]
r4和r5独立地为氢；
[0116]
r
3a
、r
3b
、r
3c
和r
3d
独立地为氢或卤素；例如r
3a
和r
3d
独立地为氢或卤素；r
3b
和r
3c
独立地为 氢；又例如r
3a
为氢或卤素；r
3b
、r
3c
和r
3d
独立地为氢。
[0117]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0118]
环a为x1独立地为
[0119]
n为0或1；
[0120]
r2独立地为氢、羟基、c
1-c4烷基或o＝；
[0121]
r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
独立地为氢、氟或c
1-c6烷基-o-；例如，r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
中的一个或两 个独立地为氟或c
1-c6烷基-o-，其余为氢；
[0122]
又例如，r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
中的一个或两个独立地为c
1-c6烷基-o-，其余为氢；或，r
1c
为氟， 其余为氢；
[0123]
r
3a
、r
3b
、r
3c
、r
3d
、r4和r5独立地为氢。
[0124]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0125]
环a为a侧为与所述的苯环并环 连接。
[0126]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0127]
r
1a
、r
1b
、r
1c
和r
1d
独立地为氢、氟、氯、溴、甲氧基、环丙基、苯基、例如氢、氟、甲氧基。
[0128]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0129]
r2独立地为氢、羟基、甲基、甲氧基、或o＝。
[0130]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0131]
r4和r5独立地为氢或氟；例如氢。
[0132]
在本发明某些优选实施方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物中的某些基团如下定义 (未提及的基团同本技术任一方案所述)，
[0133]
r
3a
、r
3b
、r
3c
和r
3d
独立地为氢或氟；
[0134]
例如，r
3a
为氢或氟；r
3b
、r
3c
和r
3d
独立地为氢。
[0135]
在本发明某一方案中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物选自如下任一结构：
[0136]
[0137][0138]
本发明中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐具有一个或多个手性 碳原子，因此可以分离得到光学纯度异构体，例如纯的对映异构体，或者外消旋体，或者混合异构体。 可以通过本领域的分离方法来获得纯的单一异构体，如手性结晶成盐，或者手性制备柱分离得到。
[0139]
本发明中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐可以以晶型或无定型 的形式存在。术语“晶型”是指其中的离子或分子是按照一种确定的方式在三维空间作严格周期性排列， 并具有间隔一定距离周期重复出现规律；因上述周期性排列的不同，可存在多种晶型，也即多晶型现 象。术语“无定型”是指其中的离子或分子呈现杂乱无章的分布状态，即离子、分子间不具有周期性排 列规律。
[0140]
本发明中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐如存在立体异构体， 则可以以单一的立体异构体或它们的混合物(例如外消旋体)的形式存在。术语“立体异构体”是指顺 反异构体或旋光异构体。这些立体异构体可以通过不对称合成方法或手性分离法(包括但不限于薄层 色谱、旋转色谱、柱色谱、气相色谱、高压液相色谱等)分离、纯化及富集，还可以通过与其它手性 化合物成键(化学结合等)或成盐(物理结合等)等方式进行手性拆分获得。术语“单一的立体异构体
”ꢀ
是指本发明化合物的一种立体异构体相对于该化合物的所有立体异构体的质量含量不低于95％。
[0141]
本发明中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐如存在互变异构体， 则可以以单一的互变异构体或它们的混合物的形式存在，较佳地以较稳定
的互变异构体为主的形式存 在。
[0142]
本发明还包括同位素标记的本发明所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的 盐，其中一个或多个原子被一个或多个具有特定原子质量或质量数的原子取代。可以掺入本发明化合 物中的同位素的实例包括但不限于氢，碳，氮，氧，氟，硫和氯的同位素(例如2h，3h，
13
c，
14
c， 15
n，
18
o，
17
o，
18
f，
35
s和
36
cl)。同位素标记的本发明化合物可用于化合物及其前药和代谢物的组织 分布的测定；用于此类测定的优选同位素包括3h和
14
c。此外，在某些情况下，用较重的同位素(例 如氘(2h或d))取代可以提供增加的代谢稳定性，这提供了治疗优势，例如增加的体内半衰期或减 少的剂量需求。
[0143]
本发明的同位素标记的化合物通常可以根据本文所述的方法通过用同位素标记的试剂取代非同 位素标记的试剂来制备。
[0144]
本发明中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐可通过包括与化学领 域公知方法相似的方法合成，其步骤和条件可参考本领域类似反应的步骤和条件，特别是根据本文说 明进行合成。起始原料通常是来自商业来源，例如aldrich或可使用本领域技术人员公知的方法(通 过scifinder、reaxys联机数据库得到)容易地制备。
[0145]
本发明中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐，也可以通过已制备 得到的所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐，采用本领域常规方法，经外 周修饰进而得到其他所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐。
[0146]
用于制备如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐的必要原料或试剂可以商购获 得，或者通过本领域已知的合成方法制备。如下实验部分所描述的方法，可以制备游离碱或者其加酸 所成盐的本发明的化合物。术语药学上可接受的盐指的是本文所定义的药学上可接受的盐，并且具有 母体化合物所有的作用。药学上可接受的盐可以通过在有机碱的合适的有机溶剂中加入相应的酸，根 据常规方法处理来制备药学上可接受的盐。
[0147]
成盐实例包括：对于碱加成盐，有可能通过在水性介质中使用碱金属或碱土金属氢氧化物或醇盐 (例如乙醇盐或甲醇盐)或适当碱性有机胺(例如二乙醇胺、胆碱或葡甲胺)处理具有适当酸性质子 的本发明化合物来制备碱金属(如钠、钾或锂)或碱土金属(如铝、镁、钙、锌或铋)的盐。
[0148]
或者，对于酸加成盐，与无机酸成盐，如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸；和有机酸所形成的 盐，如醋酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柃檬酸、乙磺酸、富马酸、葡庚糖酸、谷氨酸、乙醇酸、 羟基萘甲酸、2-羟基乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、草酸、丙酮酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、黏 糠酸、2-萘磺酸、丙酸、水杨酸、琥铂酸、酒石酸、柠檬酸、肉桂酸、对甲苯磺酸或三甲基乙酸。
[0149]“本发明的化合物”或“本发明所示的化合物“包括任何如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学 上可接受的盐。本发明的化合物也可以以水合物或溶剂化物形式存在。
[0150]
本发明还提供了一种如上所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物的制备方法，其包括如下步骤： 在溶剂中，将如式ii所示的化合物与羟胺进行如下所示的羟胺化反应，得到所述的如式i所示的苯并 氮杂环类化合物即可；
[0151][0152]
其中，*、环a、n、r2、r
1a
、r
1b
、r
1c
、r
1d
、r
3a
、r
3b
、r
3c
、r
3d
、r4和r5的定义均如上所述； r6为c
1-c6烷基(例如c
1-c4烷基：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁 基；又例如甲基或乙基)。
[0153]
所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物的制备方法中，所述的羟胺化化反应的条件和操作可为 本领域该类反应中常规的条件和操作；本发明中优选如下：
[0154]
其中，所述的溶剂可为醇类溶剂，例如甲醇和/或乙醇。
[0155]
所述的溶剂的用量以不影响反应即可，例如所述的如式ii所示的化合物与所述的溶剂的质量体 积比为0.1g/l-20g/l(例如5g/l-15g/l)。
[0156]
所述的如式ii所示的化合物与所述的羟胺的摩尔比可为1:5至1:50(例如1:40至1:48)。
[0157]
所示的羟胺化反应的温度可为室温至80℃(例如10-30℃)。
[0158]
所示的羟胺化反应的进程可采用本领域中的常规监测方法(例如tlc、hplc或nmr)进行检 测，一般以所述的如式ii所示的化合物消失或不再反应时作为反应终点。
[0159]
所述的制备方法还可包括后处理；所述的后处理可包括如下步骤：所述的羟胺化反应结束后，调 节ph至中性，浓缩，加入有机溶剂，水洗(除去羟胺)，有机相干燥，浓缩，分离纯化，即可；所述 的调节ph至中性可使用常规的酸，例如1n盐酸；所述的有机溶剂可为酯类溶剂，例如乙酸乙酯。 所述的分离纯化优选柱层析分离或结晶；所述的结晶的溶剂可为醇类溶剂(例如乙醇)和水的混合溶 剂。
[0160]
所述的制备方法还包括如下步骤，在溶剂中，在碱存在下，将如式iii所示的化合物与如式iv所 示的化合物进行如下所示的偶联反应，得到所述的如式ii所示的化合物即可；
[0161][0162]
其中，r6、*、环a、n、r2、r
1a
、r
1b
、r
1c
、r
1d
、r
3a
、r
3b
、r
3c
、r
3d
、r4和r5的定义均如上所 述；x为卤素(例如溴或氯)。
[0163]
所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物的制备方法中，所述的偶联化反应的条件和操作可为本 领域该类反应中常规的条件和操作；本发明中优选如下：
[0164]
其中，所述的溶剂可为酰胺类溶剂，例如n,n-二甲基甲酰胺(dmf)。
[0165]
所述的溶剂的用量以不影响反应即可，例如所示的如式ii所示的化合物与所述的溶剂的质量体 积比为1g/l-50g/l(例如35g/l-45g/l)。
[0166]
所述的如式iii所示的化合物与所述的如式iv所示的化合物的摩尔比可为0.8:1至1:0.8(例如 1:1)。
[0167]
所述的碱可为无机碱和/或有机碱，所述的无机碱可为碱金属碳酸盐，例如碳酸钠、碳酸钾和碳酸 锂中的一种或多种。
[0168]
所述的碱与所述的与所述的如式iv所示的化合物的摩尔比可为0.8:1至3:1(例如1:1至2:1，又 例如1.5:1)。
[0169]
所示的偶联反应的温度可为室温至150℃(例如80-120℃，又例如100℃)。
[0170]
所示的偶联反应的进程可采用本领域中的常规监测方法(例如tlc、hplc或nmr)进行检测， 一般以所述的如式iii所示的化合物或如式iv所示的化合物消失或不再反应时作为反应终点。
[0171]
所述的制备方法还可包括后处理；所述的后处理可包括如下步骤：所述的偶联反应结束后，加水， 有机溶剂萃取，有机相干燥，浓缩，分离纯化，即可；所述的有机溶剂可为酯类溶剂，例如乙酸乙酯。 所述的分离纯化优选柱层析分离或结晶；所述的柱层析的填料可为硅胶填料。
[0172]
本发明还提供了一种如式ii所示的化合物，
[0173][0174]
其中，r6、*、环a、n、r2、r
1a
、r
1b
、r
1c
、r
1d
、r
3a
、r
3b
、r
3c
、r
3d
、r4和r5的定义均如上所 述。
[0175]
在某一方案中，所述的如式ii所示的化合物可为如下任一结构：
[0176][0177]
本发明提供了一种药物组合物，其包括如上所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上 可接受的盐、和一种或多种药学上可接受的载体。在所述的药物组合物中，所述的如式i所示的苯并 氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐的用量可为治疗有效量。
[0178]
所述的药学上可接受的载体(药用辅料)可为药物生产领域中广泛采用的那些辅料。辅料主要用 于提供一个安全、稳定和功能性的药物组合物，还可以提供方法，使受试者接受给药后活性成分以所 期望速率溶出，或促进受试者接受组合物给药后活性成分得到有效吸收。所述的药用辅料可以是惰性 填充剂，或者提供某种功能，例如稳定该组合物的整体ph值或防止组合物活性成分的降解。所述的 药用辅料可以包括下列辅料中的一种或多种：粘合剂、助悬剂、乳化剂、稀释剂、填充剂、成粒剂、 胶粘剂、崩解剂、润滑剂、抗粘着剂、助流剂、润湿剂、胶凝剂、吸收延迟剂、溶解抑制剂、增强剂、 吸附剂、缓冲剂、螯合剂、防腐剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。
[0179]
本发明的药物组合物可根据公开的内容使用本领域技术人员已知的任何方法来制备。例如，常规 混合、溶解、造粒、乳化、磨细、包封、包埋或冻干工艺。
[0180]
本发明所述的药物组合物可以任何形式给药，包括注射(静脉内)、粘膜、口服(固体和液体制 剂)、吸入、眼部、直肠、局部或胃肠外(输注、注射、植入、皮下、静脉内、动脉内、肌内)给药。 本发明的药物组合物还可以是控释或延迟释放剂型(例如脂质体或微球)。固体口服制剂的实例包括 但不限于粉末、胶囊、囊片、软胶囊剂和片剂。口服或粘膜给药的液体制剂实例包括但不限于悬浮液、 乳液、酏剂和溶液。局部用制剂的实例包括但不限于乳剂、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、贴剂、糊剂、 泡沫剂、洗剂、滴剂或血清制剂。胃肠外给药的制剂实例包括但不限于注射用溶液、可以溶解或悬浮 在药学上可接受载体中的干制剂、注射用悬浮液和注射用乳剂。所述的药物组合物的其它合适制剂的 实例包括但不限于滴眼液和其他眼科制剂；气雾剂：如鼻腔喷雾剂或吸入剂；适于胃肠外给药的液体 剂型；栓剂以及锭剂。
[0181]
本发明还提供了一种如上所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐、或如 上所述的药物组合物在制备hdac抑制剂中的应用。所述的hdac较佳地为hdac6。
[0182]
在所述的应用中，所述的hdac抑制剂可用于哺乳动物生物体内；也可用于生物体外，主要作为 实验用途，例如：作为标准样或对照样提供比对，或按照本领域常规方法制成试剂盒，为hdac6的 抑制效果提供快速检测。
[0183]
本发明还提供了一种所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐或者如上所 述的药物组合物在制备药物中的应用。所述的药物可为用于预防和/或治疗癌症、神经疾病或自身免疫 疾病的药物；或者，所述的药物可为用于预防和/或治疗与hdac相关的疾病或病症的药物。
[0184]
本发明还提供了一种所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐或者如上所 述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗与hdac相关的疾病或病症的药物中的应用；所述的 hdac较佳地为hdac6；所述的与hdac相关疾病或病症可为癌症、神经疾病或自身免疫疾病；所 述的所述的药物可通过调节hdac表达和/或活性实现预防和/或治疗癌症、神经疾病或自身免疫疾病。
[0185]
本发明还提供了一种了预防和/或治疗癌症、神经疾病或自身免疫疾病(例如hdac相关的，所述 的hdac较佳地为hdac6)的方法，所述方法包括向有需要的个体，如人，施用治疗有效量的所述的 如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐或者如上所述的药物组合物。
[0186]
本文还提供了一种在体外或体内抑制细胞增殖或癌症的方法，所述方法包括使细胞与有效量的本 文所限定的所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐或者如上所述的药物组合 物接触。
[0187]
如上所述的癌症可为卵巢癌、结肠癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、胆囊癌、胃肠癌、头颈癌、子宫 颈癌、前列腺癌、肺癌、黑素瘤、生殖细胞肿瘤、妊娠滋养层肿瘤、胶质母细胞瘤、骨髓瘤、神经母 细胞源性cns肿瘤、单核细胞白血病、b细胞源性白血病、t细胞源性白血病、b细胞源性淋巴瘤、t细胞源性淋巴瘤和肥大细胞源性肿瘤，及其组合。
[0188]
如上所述的神经疾病可为神经变性疾病(例如，阿尔茨海默氏症、帕金森氏症、亨
廷顿氏舞蹈病、 肌萎缩侧索硬化症、脊髓小脑变性、雷特氏综合征)、周围神经病(例如腓骨肌萎缩症、巨大轴神经病 变(gan))，及其组合。
[0189]
如上所述的自身免疫疾病可为牛皮癣、炎性疾病(如骨关节炎、类风湿性关节炎、结肠炎)、和可 通过免疫调节治疗的病状(例如，多发性硬化症、自身免疫性糖尿病、狼疮、特应性皮炎、过敏、哮喘、 过敏性鼻炎、炎症性肠病)。
[0190]
当用作药物时，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐可以以药物组合 物的形式给药。这些组合物可根据药学领域熟知的方法制备，可以各种途径施用，视需要局部或系统 性治疗和要治疗的区域而定。给予可以是局部(包括表皮和透皮，眼部和粘膜，包括鼻内，阴道和直肠 递送)，肺(例如，通过粉末或气溶胶吸入或吹入，包括通过喷雾器；气管内或鼻内)，口服或胃肠外给 予形式。口服给药可以包括配制为每日一次或每日两次(bid)给药的剂型。胃肠外给药包括静脉内、动 脉内、皮下、腹膜内肌肉内或注射或输液；或颅内如鞘内或心室内给药。胃肠外给药可以单次推注剂 量形式，或可以是通过连续灌注泵。外用给药的药物组合物和制剂可包括透皮贴片、油膏剂、乳液、 软膏剂、凝胶、滴剂、栓剂、喷剂、液体和粉末。常规药学载体、水、粉末或油状基底、增稠剂等可 能是必须或需要的。
[0191]
如本文所用，术语“治疗”是指治疗性或缓解性措施。有益的或期望的临床结果包括但不限于： 全部或部分减轻与疾病或紊乱或病症有关的症状，减小疾病程度，稳定(即不恶化)疾病状态，延迟或 减缓疾病进展，缓解或减轻疾病状态(例如，疾病的一种或多种症状)，以及可检测或不可检测的缓解 (无论是部分还是全部)。“治疗”也可以指与不接受治疗的期望存活相比延长生存期。
[0192]
在某些实施方式中，所述的如式i所示的苯并氮杂环类化合物或其药学上可接受的盐或者如上所 述的药物组合物可用于预防如本文所限定的疾病和病症(例如，自身免疫性疾病、神经疾病和癌症)。 本文使用的术语“预防”意指全部或部分预防本文所述的疾病或病症或其症状的发作、复发或扩散。
[0193]
术语“药用辅料”或“赋形剂”是指药学上可接受的化学物质，例如药学领域的普通技术人员已 知的用于帮助给予药用的试剂。它是可以用于制备药物组分的化合物，通常是安全的、无毒的，且是 生物学或者其它方面所不可期望的，其包括对于兽用和人用药物可接受的赋形剂。通常的赋形剂包括 粘合剂、表面活性剂、稀释剂、崩解剂和润滑剂。
[0194]
除非另外说明，应当应用本文所使用的下列定义。出于本发明的目的，化学元素与元素周期表cas 版，和《化学和物理手册》，第75版，1994一致。此外，有机化学一般原理可参考"organic chemistry", thomas sorrell,university science books,sausalito:1999,和"march's advanced organic chemistry”bymichael b.smith and jerry march,john wiley&sons,new york:2007中的描述，其全部内容通过引用 并入本文。
[0195]
在本说明书中，可由本领域技术人员选择基团及其取代基以提供稳定的结构部分和化合物。当通 过从左向右书写的常规化学式描述取代基时，该取代基也同样包括从右向左书写结构式时所得到的在 化学上等同的取代基。
[0196]
在本文中定义的某些化学基团前面通过简化符号来表示该基团中存在的碳原子总数。例如，c
1-c6烷基是指具有总共1、2、3、4、5或6个碳原子的如下文所定义的烷基。简化符号中的碳原子总数不 包括可能存在于所述基团的取代基中的碳。
[0197]
在本文中，取代基中定义的数值范围如0至4、1-4、1至3等表明该范围内的整数，如1-6为1、 2、3、4、5、6。
[0198]
除前述以外，当用于本技术的说明书及权利要求书中时，除非另外特别指明，否则以下术语具有 如下所示的含义。
[0199]
术语“一种(个)或多种(个)”或“一种(个)或两种(个)以上”是指即1、2、3、4、5、6、 7、8、9或更多。
[0200]
术语“包括”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。
[0201]
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，包括重氢和氢的变体， 只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。
[0202]
一般而言，术语“取代的”表示所给结构中的一个或多个氢原子被具体取代基所取代。进一步地， 当该基团被1个以上所述取代基取代时，所述取代基之间是相互独立，即，所述的1个以上的取代基 可以是互不相同的，也可以是相同的。除非其他方面表明，一个取代基团可以在被取代基团的各个可 取代的位置进行取代。当所给出的结构式中不只一个位置能被选自具体基团的一个或多个取代基所取 代，那么取代基可以相同或不同地在各个位置取代。
[0203]
在本说明书的各部分，本发明公开化合物的取代基按照基团种类或范围公开。特别指出，本发明 包括这些基团种类和范围的各个成员的每一个独立的次级组合。术语“c
x-c
y
烷基"是指含有x至y个 碳原子的直链或支链饱和烃。例如，术语“c1～c6烷基”或“c
1-6
烷基”特别指独立公开的甲基、乙基、c3烷基、c4烷基、c5烷基和c6烷基；“c
1-4
烷基”特指独立公开的甲基、乙基、c3烷基(即丙基，包括 正丙基和异丙基)、c4烷基(即丁基，包括正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)。
[0204]
术语“卤素”选自于f，cl，br或i，尤其指f或cl。
[0205]
术语“烷氧基”是指基团-o-r
x
，其中，r
x
为如上文所定义的烷基。
[0206]
在本技术中，作为基团或是其它基团的一部分(例如用在卤素取代的烷基等基团中)，术语“烷基
”ꢀ
意指包括具有指定碳原子数目的支链和直链的饱和脂族烃基；，比如含有1至20个碳原子的直链或支 链饱和烃链；又例如，c
1-c6的烷基。如在“c1～c6烷基”中定义为包括在直链或者支链结构中具有1、 2、3、4、5、或者6个碳原子的基团。其中，丙基为c3烷基(包括同分异构体，例如正丙基或异丙 基)；丁基为c4烷基(包括同分异构体，例如正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基)；戊基为c5烷基(包 括同分异构体，例如正戊基、1-甲基-丁基、1-乙基-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、异戊基、叔 戊基或新戊基)；己基为c6烷基(包括同分异构体，例如正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲 基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2
-ꢀ
甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基)。此外，庚基为c7烷基(包括同分异构体， 例如正庚基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基)。辛 基为c8烷基(包括同分异构体，例如正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己 基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、 2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基)。壬基为c9烷基(包括同分异构体，例如正壬基、2-甲基-2
-ꢀ
乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2，2-二乙基戊基)。奎基为c
10
烷基(包括同分异构
体，例如正奎基、 3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基)。在某一实施方案中，所述的“烷基”优选含有1至6个碳原子的 直链或支链的烷基。在某一实施方案中，所述的“烷基”是指c
1-c6烷基。在某一实施方案中，所述的
ꢀ“
烷基”是指c
1-c4烷基。
[0207]
本文所用术语“部分”、“结构部分”、“化学部分”、“基团”、“化学基团”是指分子中的特定片段或官 能团。化学部分通常被认为是嵌入或附加到分子上的化学实体。
[0208]
当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到化学结构通式中包括但未具体提及的化 合物时，这种取代基可以通过其任何原子相键合。取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生 稳定的化合物的情况下才是被允许的。
[0209]
当所列举的基团中没有明确指明其具有取代基时，这种基团仅指未被取代。例如当“c1～c4烷基
”ꢀ
前没有“取代或未取代的”的限定时，仅指“c1～c4烷基”本身或“未取代的c1～c4烷基”。
[0210]
在本发明的各部分，描述了连接取代基。当该结构清楚地需要连接基团时，针对该基团所列举的 马库什变量应理解为连接基团。例如，如果该结构需要连接基团并且针对该变量的马库什基团定义列 举了“烷基”，则应该理解，该“烷基”代表连接的亚烷基基团。
[0211]
在一些具体的结构中，当烷基基团清楚地表示为连接基团时，则该烷基基团代表连接的亚烷基基 团，例如，基团“卤代-c1～c6烷基”中的c
1-c6烷基应当理解为c1～c6亚烷基。
[0212]
术语“亚烷基”表示从饱和的直链或支链烃基中去掉两个氢原子所得到的饱和的二价烃基基团。亚 烷基基团的实例包括亚甲基(-ch
2-)，亚乙基{包括-ch2ch
2-或-ch(ch3)-}，亚异丙基{包括
-ꢀ
ch(ch3)ch
2-或-c(ch3)
2-}等等。
[0213]
术语“环烷基”，指仅由碳原子和氢原子组成的饱和的单环或者多环碳环取代基，且其可经由任何 适宜的碳原子通过单键与分子的其余部分连接；当为多环时，可为并环连接、桥环连接或螺环连接(即， 碳原子上的两个偕氢被亚烷基取代)的并环体系、桥环体系或螺环体系。在某一方案中，典型的单环 环烷基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。
[0214]
术语“杂环烷基”，指具有杂原子的饱和的环状基团，含1个或多个独立选自n、o、s、s(＝o)和 s(＝o)2的杂原子，其余为碳组成的稳定的3-10元饱和杂环系统的基团。除非本说明书中另外特别指 明，否则杂环烷基基团可以是单环的(“单环的杂环烷基”)，或者是双环、三环或更多环的环体系，其 可包括并环的(稠合的)、桥联的(桥环的)或螺的环系统(例如二环系统(“二环的杂环烷基”)。杂 环烷基二环的环系统可以在一个或两个环中包括一个或多个杂原子；并且是饱和的。示例性3-元杂环 基基团包括但不限于，氮杂环丙基、环氧乙烷基以及硫杂环丙烷基，或者其立体异构体；示例性4-元 杂环基基团包括但不限于，氮杂环丁烷基，环氧丙烷基，硫杂环丁烷基，或者其同分异构体和立体异 构体；示例性5-元杂环基基团包括但不限于，四氢呋喃基，四氢噻吩基，吡咯烷基，噻唑烷基，异噻 唑烷基，噁唑烷基，异噁唑烷基，咪唑烷基，吡唑烷基，二氧戊环基，氧杂硫呋喃基，二硫呋喃基， 或者其同分异构体和立体异构体。示例性6-元杂环基基团包括但不限于，哌啶基，四氢吡喃基，硫化 环戊烷基，吗啉基，硫代吗啉基，二噻烷基，二噁烷基，哌嗪基，三嗪烷基，或者其同分异构体和立 体异构体；示例性7-元杂环基基团包括但不限于，氮杂环庚烷基，氧杂环庚烷基，硫杂环庚烷基，以 及二氮杂环庚基，或者其同分异构体和立体异构体。以及在某一方案中，
四氢喹啉基、四氢三唑并吡 嗪基或二氮杂环庚烷基。在某一方案中，典型的含1个或多个独立选自n、o和s的杂原子的5-6元 单环杂环基。在某一方案中，“杂环烷基”为4-6元杂环烷基，其中杂原子选自n、o和s中的一种或 多种，杂原子数为1、2或3个。
[0215]
术语“芳基”，指具有完全共轭的π电子体系的全碳芳香基团，可为单环或稠合环，通常具有6-14 个碳原子，优选具有6-12个碳原子，最优选具有6个碳原子。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基和 蒽基。
[0216]
术语“杂芳基”是指含有杂原子的芳香基团，可为单环或稠合环，优选含有1-4个独立选自n、o 和s的5-12元杂芳基，包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、吲哚基、咪唑基、噁唑基、异噁唑 基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、(苯并)噁唑基、(苯并)呋喃基、 (苯并)噻吩基、(苯并)噻唑基、三唑基。在某一方案中，典型地含1个或多个独立选自n、o和s的杂 原子的5-6元单环杂芳基。在某一方案中，“杂芳基”为5-6元杂芳基，其中杂原子选自n、o和s中 的一种或多种，杂原子数为1、2或3个。
[0217]
除非另有规定，本文使用的所有技术术语和科学术语具有要求保护主题所属领域的标准含义。倘 若对于某术语存在多个定义，则以本文定义为准。
[0218]
应该理解，在本发明中使用的单数形式，如“一种”，包括复数指代，除非另有规定。此外，术语
ꢀ“
包括”是开放性限定并非封闭式，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。
[0219]
除非另有说明，本发明采用质谱、元素分析的传统方法，各步骤和条件可参照本领域常规的操作 步骤和条件。
[0220]
除非另有指明，本发明采用分析化学、有机合成化学和光学的标准命名及标准实验室步骤和技术。 在某些情况下，标准技术被用于化学合成、化学分析、发光器件性能检测。
[0221]
另外，需要说明的是，除非以其他方式明确指出，在本发明中所采用的描述方式
“…
独立地为”应 做广义理解，是指所描述的各个个体之间是相互独立的，可以独立地为相同或不同的具体基团。更详 细地，描述方式
“…
独立地为”既可以是指在不同基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不 影响；也可以表示在相同的基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响。
[0222]
本领域技术人员可以理解，根据本领域中使用的惯例，本技术描述基团的结构式中所使用的是指，相应的基团通过该位点与化合物中的其它片段、基团进行连接。
[0223]
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
[0224]
本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0225]
本发明的积极进步效果在于：药理实验表明，本发明所述苯并氮杂环类类化合物具有以下有益效 果：
[0226]
1)本发明化合物对hdac6抑制活性较高(近半数化合物对hdac6抑制活性ic
50
<10nm)，且显 示较好选择性抑制活性(对hdac1的的抑制活性ic
50
均>250nm；对hdac1/hdac6选择性多数大 于30倍，部分大于50倍)，优于hdac6抑制剂临床i/ii期在研药物rocilinostat(acy-1215)，选择 性优于sw-100。
[0227]
2)本发明所述化合物在有效抑制多株肿瘤细胞的同时，对正常细胞的抑制作用
弱，表现出较好的 细胞选择抑制活性。
[0228]
3)本发明化合物在细胞模型上对hca诱发的神经元细胞氧化应激显示剂量依赖保护作用，提示 其具有一定神经保护作用。
[0229]
4)本发明所述化合物对herg抑制活性弱，潜在心脏毒性较小；大鼠口服单次灌胃耐受性高，急 性毒性低。
[0230]
5)特别地，体内药物代谢试验表明本发明化合物药代特征理想，具有较高的血脑屏障通特性，脑 通透性优于六元环阳性对照化合物sw-100及五元环阳性对照化合物ii-ing-39。
[0231]
综上，本发明所述苯并氮杂环类化合物优势在于，化合物对hdac6具有选择性高抑制活性，对 心脏影响潜在风险小，动物耐受性高，体外对多株肿瘤细胞显示较好抗增殖活性，同时对人体正常细 胞毒性弱，有望作为高效低毒的靶向抗肿瘤药物使用。同时，本发明的苯并氮杂环类化合物体外对神 经细胞具有保护作用，体内药代显示较高的血脑屏障通特性，亦可作为神经退行性疾病治疗药物使用。
[0232]
本发明所述化合物结构新颖，化合物药效及安全性体现了较好的创造性。本发明具有显著的新颖 性及实质的科学进步。
附图说明
[0233]
图1为hca诱发的神经元毒性模型中细胞生存率
具体实施方式
[0234]
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。 下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0235]
下述实施例中，缩写解释：
[0236]
dcm：二氯甲烷；pe：石油醚；ea：乙酸乙酯；dmf：n,n-二甲基甲酰胺；thf：四氢呋喃； meoh：甲醇；p-tscl：对甲苯磺酰氯；t-buok：叔丁醇钾；pyridine：吡啶；toluene：甲苯；concd： 浓；ppa：多聚磷酸；dibalh：二异丁基氢化铝。
[0237]
下述实例中，室温是指10-30℃；过夜是指8-15小时，例如12小时；eq是指当量；溶剂比例如 pe/ea是指体积比。
[0238]
本发明的化合物可采用如下合成通法进行制备：
[0239]
通法一：
[0240][0241]
通法二：
[0242][0243]
通法三：
[0244][0245]
通过上述合成通法得到包括式i结构的化合物，其可进一步与无机酸、有机酸在溶剂中反应，冷 却析出相应的式i结构化合物的盐。
[0246]
上述制备方法中所用到的原料、化合物和试剂可以通过商业渠道购买。
[0247]
实施例1: 4-((8-氯-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-1)的制备
[0248]
按照合成通法1进行制备，合成路线如下：
[0249][0250]
4-氯-2-((4-甲基苯基)磺酰胺)苯甲酸甲酯(1-2)的合成
[0251]
于500ml三颈瓶中依次加入4-氯-2-氨基苯甲酸甲酯(25g,134.69mmol，1eq)、对甲苯磺酰氯(30.81g， 1.2eq)、吡啶(117.20g，11eq)，室温反应12h。过滤得黄色固体，用200ml二氯甲烷溶清，用100ml浓 度5％盐酸洗2次，100ml水洗1次，有机相干燥后用150ml 50％乙醇打浆，得白色固体，烘干重40.50g， 收率88.49％。
[0252]
4-氯-2-((n-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-4-甲基苯基)磺酰胺)苯甲酸甲酯(1-3)的合成
[0253]
于1l三颈瓶中加入中间体1-2(36.40g,107.12mmol，1eq)，溶于300ml dmf中，加入4-溴丁酸乙 酯(22.98g,1.1eq)、碳酸钾(41.45g，2.8eq)，120℃搅拌5h。冷却至室温，加入500ml水，500ml乙酸乙 酯萃取，分出有机相浓缩至干，柱层析分离得白色固体35.32g，收率72.63％。
[0254]
8-氯-5-氧代-1-对甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-4-甲酸乙酯(1-4)的合成
[0255]
于1l三颈瓶中加入叔丁醇钾(16.81g，149.80mmol，2eq)，400ml甲苯，加热至75℃，搅拌均匀。 中间体1-3(34.00g，74.90mmol，1eq)溶于200ml甲苯，缓慢滴加至反应液中，历
时1h，滴毕，升温至 115℃回流1h。冷却至室温后倒入冰水混合物中，分出有机相，水相用200ml二氯甲烷萃取1次，合 并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干得红色油状物32g，不经纯化直接投下一步。
[0256]
8-氯-1-对甲苯磺酰基-1,2,3,4-四氢-5h-苯并[b]氮卓-5-酮(1-5)的合成
[0257]
于500ml三颈瓶中加入32g中间体1-4粗品、浓盐酸45ml、80ml乙酸，10ml水，加热至105℃ 回流6h。冷却至室温后倒入冰水混合物中，用10％naoh调中性，二氯甲烷萃取，有机层无水硫酸钠 干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，柱层析纯化得无色油状物16.35g，两步收率62.49％。
[0258]
8-氯-1,2,3,4-四氢-5h-苯并[b]氮卓-5-酮(1-6)的合成
[0259]
于250ml三颈瓶中加入中间体1-5(8g，22.87mmol)、60g多聚磷酸，加热至90℃反应2h。用饱 和nahco3溶液调中性，二氯甲烷萃取，有机层无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，柱层析 纯化得黄色固体4.13g，收率92.31％。
[0260]
8-氯-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓(1-7)的合成
[0261]
于100ml三颈瓶中加入中间体1-6(3.00g，15.33mmol，1eq)、50ml无水四氢呋喃，冰水浴降温， 分批次加入四氢铝锂(1.16g，2eq)，加毕室温搅拌2h。将反应液缓慢倾倒至冰水混合物中，搅拌30min， 硅藻土助滤，滤液用二氯甲烷萃取，有机层无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，柱层析纯化 得黄色固体2.15g，收率77.18％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.51
–
1.57(m,2h),1.64
–
1.70(m, 2h),2.61
–
2.64(m,2h),2.92(dt,j＝5.8,3.5hz,2h),5.48(t,j＝3.6hz,1h),6.67(dd,j＝8.0,2.2hz,1h), 6.85(d,j＝2.2hz,1h),7.01(d,j＝8.0hz,1h).esi-ms( )m/z＝182.00[m h]

。
[0262]
4-((8-氯-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)苯甲酸酯(1-8)的合成
[0263]
于100ml三颈瓶中加入中间体1-7(2.00g，11.01mmol，1eq)、4-溴甲基苯甲酸甲酯(2.52g，1eq)、 碳酸钾(2.28g,1.5eq)、50ml dmf，100℃反应4h。冷却至室温，加入100ml水，100ml乙酸乙酯萃取， 有机相干燥后柱层析分离得白色固体2.90g,收率79.86％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.55
–
1.61 (m,4h),2.78
–
2.81(m,2h),2.89
–
2.91(m,2h),3.84(s,3h),4.41(s,2h),6.84(dd,j＝8.0,2.1hz,1h), 6.91(d,j＝2.1hz,1h),7.11(d,j＝8.0hz,1h),7.54(d,j＝8.3hz,2h),7.92
–
7.95(m,2h).esi-ms( ) m/z＝330.10[m h]

。
[0264]
4-((8-氯-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-1)的合成
[0265]
分别将20g盐酸羟胺溶于200ml甲醇，19g氢氧化钾(纯度85％)溶于200ml甲醇，在冰水浴降 温条件下缓慢混匀，室温搅拌2h，过滤取滤液得羟胺甲醇溶液。于100ml三颈瓶中加入中间体1-8(2g，6.06mmol)、羟胺甲醇溶液50ml，室温反应过夜。用1n盐酸调节ph至中性，浓缩后加入乙酸乙酯， 用水洗去羟胺，有机相干燥后浓缩至干加入20ml乙醇/水结晶，过滤得白色固体1.13g，收率56.33％。 1
h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.53
–
1.61(m,4h),2.78
–
2.80(m,2h),2.89(t,j＝4.9hz,2h),4.36(s, 2h),6.83(dd,j＝8.0,2.1hz,1h),6.91(d,j＝2.1hz,1h),7.11(d,j＝7.9hz,1h),7.45(d,j＝8.0hz,2h), 7.72(d,j＝8.1hz,2h),10.13(s,2h).esi-ms( )m/z＝331.00[m h]

。
[0266]
实施例2: 4-((8-氯-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-2)的制备
[0267][0268]
按照通法1进行制备。白色固体，1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.52
–
1.60(m,4h),2.79
–
2.87 (m,4h),4.34(s,2h),6.92(d,j＝8.6hz,1h),7.08(dd,j＝8.5,2.6hz,1h),7.17(d,j＝2.6hz,1h),7.45 (d,j＝8.1hz,2h),7.70
–
7.72(m,2h),9.04(s,1h),11.18(s,1h).esi-ms( )m/z＝331.00[m h]

。
[0269]
实施例3: 4-((8-溴-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-3)的制备
[0270]
按照合成通法2进行制备，具体合成路线如下：
[0271][0272]
7-溴-3,4-二氢萘-1(2h)-酮肟(3-2)的合成
[0273]
于250ml三口瓶中加入7-溴-萘满酮(10g,44.43mmol，1eq)、盐酸羟胺(6.17g,2eq)、100ml吡啶， 室温搅拌3h。减压浓缩蒸除吡啶，加100ml水，用100ml二氯甲烷萃取，分出有机层，无水硫酸钠干 燥，过滤，滤液减压浓缩至干，柱层析纯化得白色固体9.23g，收率86.53％。1h nmr(400mhz,dmso
-ꢀ
d6)δ1.71
–
1.77(m,2h),2.62
–
2.69(m,4h),7.16(d,j＝8.2hz,1h),7.42(dd,j＝8.2,2.2hz,1h),7.94 (d,j＝2.1hz,1h),11.31(s,1h)。
[0274]
7-溴-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓(3-3)的合成
[0275]
于250ml三口瓶中加入3-2(9.00g,47.06mmol)、200ml二氯甲烷，氮气保护，降温至-5℃后，缓慢 滴加二异丁基氢化铝(dibalh，1m/正己烷，280ml，6eq)，历时40min，滴加完毕，室温搅拌4h。缓 慢滴加50ml水淬灭反应，室温搅拌1h，硅藻土助滤，滤液用二氯甲烷萃取，有机层无水硫酸钠干燥， 过滤，滤液减压浓缩至干，柱层析纯化得白色固体5.64g，收率67.61％。1h nmr(400mhz,dmso
-ꢀ
d6)δ1.51
–
1.57(m,2h),1.63
–
1.68(m,2h),2.59
–
2.62(m,2h),2.90
–
2.93(m,2h),5.49(t,j＝3.6hz, 1h),6.80(dd,j＝8.0,2.1hz,1h),6.95(d,j＝8.0hz,1h),7.00(d,j＝2.1hz,1h)。
[0276]
4-((7-溴-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)苯甲酸酯(3-4)的合成
[0277]
于100ml三颈瓶中加入中间体3-3(2.00g，11.28mmol，1eq)、4-溴甲基苯甲酸甲酯(2.58g，1eq)、 碳酸钾(2.34g,1.5eq)、50ml dmf，100℃反应4h。冷却至室温，加入100ml水，100ml乙酸乙酯萃取， 有机相干燥后柱层析分离得白色固体3.12g,收率84.97％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.54
–
1.60 (m,4h),2.77
–
2.80(m,2h),2.89(t,j＝5.1hz,2h),3.84(s,3h),4.41(s,2h),6.97(dd,j＝7.9,2.0hz,1h), 7.03(d,j＝2.0hz,1h),7.06(d,j＝7.9hz,1h),7.52
–
7.55(m,2h),7.93
–
7.95(m,2h)。
[0278]
4-((7-溴-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-3)的合成
[0279]
于100ml三颈瓶中加入中间体3-4(2g，5.34mmol)、羟胺甲醇溶液50ml，室温反应过
夜。用1n盐 酸调节ph至中性，浓缩后加入乙酸乙酯，用水洗去羟胺，有机相干燥后浓缩至干加入20ml乙醇/水 结晶，过滤得白色固体1.27g，收率63.33％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.52
–
1.60(m,4h),2.76
ꢀ–
2.79(m,2h),2.88(t,j＝4.9hz,2h),4.36(s,2h),6.97(dd,j＝7.9,1.9hz,1h),7.04(d,j＝2.0hz,1h), 7.05(d,j＝8.0hz,1h),7.45(d,j＝8.2hz,2h),7.72(d,j＝8.2hz,2h),9.10(s,1h),11.20(s,1h)。esi
-ꢀ
ms( )m/z＝375.00[m h]

。
[0280]
实施例4: 4-((7-氟-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-4)的制备
[0281]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.51
–
1.62(m,4h),2.71
–
2.79(m,2h), 2.88(t,j＝4.9hz,2h),4.35(s,2h),6.96(dd,j＝7.9,1.9hz,1h),7.06(d,j＝2.0hz,1h),7.03(d,j＝8.0 hz,1h),7.46(d,j＝8.2hz,2h),7.74(d,j＝8.2hz,2h),9.12(s,1h),11.21(s,1h)。esi-ms( )m/z＝315.00 [m h]

。
[0282]
实施例5: 4-((7-甲氧基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-5)的制备
[0283]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.51
–
1.58(m,4h),2.73
–
2.80(m,4h), 3.67(s,3h),4.28(s,2h),6.63(dd,j＝8.7,3.0hz,1h),6.73(d,j＝3.0hz,1h),6.89(d,j＝8.7hz,1h), 7.47(d,j＝8.1hz,2h),7.69
–
7.71(m,2h),9.06(s,1h),11.16(s,1h).esi-ms( )m/z＝327.14[m h]

。
[0284]
实施例6: 4-((8-甲氧基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-6)的制备
[0285]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.49
–
1.60(m,4h),2.72
–
2.75(m,2h), 2.84
–
2.87(m,2h),3.65(s,3h),4.34(s,2h),6.38(dd,j＝8.2,2.4hz,1h),6.47(d,j＝2.5hz,1h),6.99 (d,j＝8.2hz,1h),7.46(d,j＝8.0hz,2h),7.70
–
7.72(m,2h),9.09(s,1h),11.14(s,1h).esi-ms( ) m/z＝327.10[m h]

。
[0286]
实施例7: 4-((6-甲氧基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-7)的制备
[0287]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.47
–
1.51(m,2h),1.55
–
1.59(m,2h), 2.87(t,j＝5.3hz,4h),3.73(s,3h),4.34(s,2h),6.57(dd,j＝10.7,8.2hz,2h),6.99(t,j＝8.1hz,1h), 7.45(d,j＝7.9hz,2h),7.71(d,j＝8.0hz,2h),9.20(s,1h),10.98(s,1h).esi-ms( )m/z＝327.10[m h]

。
[0288]
实施例8: 4-((9-甲氧基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-8)的制备
[0289]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.47
–
1.51(m,2h),1.55
–
1.59(m,2h), 2.87(t,j＝5.3hz,4h),3.73(s,3h),4.34(s,2h),6.57(dd,j＝10.7,8.2hz,2h),6.99(t,j＝8.1hz,1h), 7.45(d,j＝7.9hz,2h),7.71(d,j＝8.0hz,2h),9.20(s,1h),10.98(s,1h).esi-ms( )m/z＝327.10[m h]

。
[0290]
实施例9: 4-((7,8-二甲氧基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-9)的制备
[0291]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.63
–
1.80(m,4h),2.84(td,j＝6.9,1.0hz, 4h),3.83(d,j＝7.1hz,6h),4.43(t,j＝1.0hz,2h),6.43(s,1h),6.68(t,j＝
0.9hz,1h),7.30(dt,j＝7.4, 1.0hz,2h),7.85
–
7.91(m,2h),9.25(s,1h),11.09(s,1h).esi-ms( )m/z＝357.20[m h]

。
[0292]
实施例10: 4-((8-苯基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-10)的制备
[0293]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.53
–
1.60(m,4h),2.83(dt,j＝19.4,4.8 hz,4h),4.35(s,2h),6.89(d,j＝1.5hz,1h),7.17(dt,j＝7.7,1.0hz,1h),7.32
–
7.41(m,4h),7.42
–
7.49 (m,2h),7.52
–
7.58(m,2h),7.85
–
7.91(m,2h),9.04(s,1h),11.15(s,1h).esi-ms( )m/z＝373.25[m h]

。
[0294]
实施例11: 4-((8-(吡啶-4-基)-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-11)的制 备
[0295]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.53
–
1.60(m,4h),2.83(dt,j＝19.4,4.8 hz,4h),4.35(s,2h),7.02(d,j＝7.5hz,1h),7.21(q,j＝1.2hz,1h),7.35(dt,j＝7.5,1.1hz,2h),7.49 (dd,j＝7.5,1.5hz,1h),7.64
–
7.70(m,2h),7.85
–
7.91(m,2h),8.76
–
8.81(m,2h),9.04(s,1h),11.15 (s,1h).esi-ms( )m/z＝374.25[m h]

。
[0296]
实施例12: 4-((8-环丙基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-12)的制备
[0297]
按照通法2进行制备。1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ0.55(dt,j＝6.5,3.2hz,2h),0.78
–
0.91(m, 2h),1.42
–
1.66(m,4h),2.78(dt,j＝41.5,5.1hz,4h),4.34(s,2h),6.50(dd,j＝7.6,1.8hz,1h),6.64(d, j＝1.9hz,1h),6.95(d,j＝7.7hz,1h),7.47(d,j＝8.0hz,2h),7.71(d,j＝8.0hz,2h),9.03(s,1h),11.16 (s,1h)..esi-ms( )m/z＝337.19[m h]

。
[0298]
实施例13: 4-((8-(二甲胺基)-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-13)的制 备
[0299]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.64(pd,j＝7.1,0.9hz,2h),1.76(pd,j＝ 7.0,0.8hz,2h),2.75(td,j＝7.0,1.0hz,2h),2.95(s,6h),3.35(t,j＝7.0hz,2h),4.43(t,j＝1.0hz,2h), 6.14(d,j＝1.5hz,1h),6.47(dd,j＝7.5,1.5hz,1h),6.99(dt,j＝7.5,1.1hz,1h),7.31(dt,j＝7.5,1.1hz, 2h),7.84
–
7.90(m,2h),9.26(s,1h),10.96(s,1h).esi-ms( )m/z＝340.20[m h]

。
[0300]
实施例14: 4-((8-(哌啶-1-基)-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-14)的制 备
[0301]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.58
–
1.81(m,10h),2.77(td,j＝7.0,1.0 hz,2h),3.34(t,j＝7.0hz,2h),3.43(t,j＝7.0hz,4h),4.43(t,j＝1.0hz,2h),6.14(d,j＝1.5hz,1h), 6.54(dd,j＝7.5,1.5hz,1h),7.06(dt,j＝7.5,1.1hz,1h),7.34(dt,j＝7.6,1.0hz,2h),7.86
–
7.92(m, 2h),9.26(s,1h),10.96(s,1h).esi-ms( )m/z＝380.25[m h]

。
[0302]
实施例15: 4-((3,4-二氢苯并[b][1,4]氧氮卓-5(2h)-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(15)的制备
[0303]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.90(p,j＝5.8hz,2h),3.19
–
3.22(m,2h), 4.09(t,j＝5.8hz,2h),4.44(s,2h),6.68
–
6.73(m,1h),6.77
–
6.79(m,1h),
6.82
–
6.85(m,2h),7.41(d, j＝8.1hz,2h),7.72(d,j＝8.0hz,2h),9.26(s,1h),10.96(s,1h).esi-ms( )m/z＝299.09[m h]

。
[0304]
实施例16: 4-((3,4-二氢苯并[b][1,4]硫氮卓-5(2h)-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-16)的制备
[0305]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.85(t,j＝5.8hz,2h),2.92(t,j＝5.8hz, 2h),3.28(t,j＝5.4hz,2h),4.45(s,2h),6.76(t,j＝7.4hz,1h),6.88(d,j＝8.0hz,1h),7.03
–
7.08(m, 1h),7.26(dd,j＝7.7,1.6hz,1h),7.43(d,j＝7.9hz,2h),7.71(d,j＝7.9hz,2h),9.11(s,1h),11.10(s, 1h).esi-ms( )m/z＝315.10[m h]

。
[0306]
实施例17: 4-((5-甲基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b][1,4]二氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺；(t-17)的 制备
[0307]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.96(dp,j＝28.4,7.1hz,2h),2.96(s,3h), 3.36(t,j＝7.1hz,2h),3.44(t,j＝7.1hz,2h),4.41(s,2h),6.76(t,j＝7.4hz,1h),6.88(d,j＝8.0hz, 1h),7.03
–
7.08(m,1h),7.26(dd,j＝7.7,1.6hz,1h),7.43(d,j＝7.9hz,2h),7.71(d,j＝7.9hz,2h), 9.15(s,1h),11.16(s,1h).esi-ms( )m/z＝312.20[m h]

。
[0308]
实施例18: 4-((5-氧代-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-18)的制备
[0309]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.91(p,j＝7.1hz,2h),2.62
–
2.68(m,2h), 3.43(t,j＝7.1hz,2h),4.47(t,j＝1.0hz,2h),6.89(dd,j＝7.4,1.6hz,1h),7.28
–
7.35(m,3h),7.39(td, j＝7.5,1.6hz,1h),7.59(dd,j＝7.4,1.6hz,1h),7.84
–
7.89(m,2h),9.11(s,1h),11.10(s,1h).esi
-ꢀ
ms( )m/z＝311.15[m h]

。
[0310]
实施例19: 4-((5-羟基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-19)的制备
[0311]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.75
–
1.81(m,1h),1.81
–
1.89(m,3h), 3.34
–
3.42(m,2h),3.51(d,j＝7.5hz,1h),4.43(t,j＝1.0hz,2h),4.74
–
4.82(m,1h),6.72(dd,j＝7.5, 1.5hz,1h),6.83(td,j＝7.5,1.5hz,1h),7.08(td,j＝7.5,1.6hz,1h),7.32(dddd,j＝13.5,7.5,1.8,0.8hz, 3h),7.84
–
7.89(m,2h),9.11(s,1h),11.10(s,1h).esi-ms( )m/z＝313.20[m h]

。
[0312]
实施例20: 4-((5-羟基-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-20)的制备
[0313]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.78
–
2.03(m,4h),3.23(d,j＝1.5hz,3h), 3.36(t,j＝6.9hz,2h),4.36(dt,j＝12.3,0.9hz,1h),4.51(dt,j＝12.5,1.1hz,1h),4.61(ddt,j＝7.4,5.8, 1.1hz,1h),6.72(dd,j＝7.5,1.5hz,1h),6.83(td,j＝7.5,1.5hz,1h),7.08(td,j＝7.5,1.6hz,1h),7.32 (dddd,j＝13.5,7.5,1.8,0.8hz,3h),7.84
–
7.89(m,2h),9.11(s,1h),11.10(s,1h).esi-ms( )m/z＝327.30 [m h]

。
[0314]
实施例21: 4-((5-(二甲氨基)-2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-21)的制 备
[0315]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.77
–
1.91(m,4h),2.31(d,j＝1.5hz,6h), 3.28
–
3.37(m,2h),3.65
–
3.72(m,1h),4.43(t,j＝1.0hz,2h),6.67(dd,j＝
7.5,1.5hz,1h),6.75(td,j＝ 7.5,1.5hz,1h),7.04(td,j＝7.5,1.6hz,1h),7.31(dt,j＝7.5,1.1hz,2h),7.36
–
7.42(m,1h),7.84
–
7.90 (m,2h),9.26(s,1h),10.96(s,1h).esi-ms( )m/z＝340.20[m h]

。
[0316]
实施例22: 4-((2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)氟甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-22)的制备
[0317]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.53
–
1.60(m,4h),2.83(dt,j＝19.4,4.8 hz,4h),5.85(s,1h),6.81(t,j＝7.3hz,1h),6.94(d,j＝8.0hz,1h),7.06(td,j＝7.7,1.7hz,1h),7.10(d, j＝7.1hz,1h),7.47(d,j＝8.0hz,2h),7.71(d,j＝7.9hz,2h),9.04(s,1h),11.15(s,1h).esi-ms( ) m/z＝315.20[m h]

。
[0318]
实施例23: 4-((2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)二氟甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-23)的制备
[0319]
按照通法2进行制备。1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ1.53
–
1.60(m,4h),2.83(dt,j＝19.4,4.8 hz,4h),6.81(t,j＝7.3hz,1h),6.94(d,j＝8.0hz,1h),7.06(td,j＝7.7,1.7hz,1h),7.10(d,j＝7.1hz, 1h),7.47(d,j＝8.0hz,2h),7.71(d,j＝7.9hz,2h),9.04(s,1h),11.15(s,1h).esi-ms( )m/z＝333.20 [m h]

。
[0320]
实施例24: 4-((2,3,4,5-四氢-1h-苯并[b]氮卓-1-基)甲基)-2-氟-n-羟基苯甲酰胺(t-24)的制备
[0321]
按照通法2进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.65(pd,j＝7.1,0.9hz,2h),1.77(pd,j＝ 6.9,0.8hz,2h),2.78(td,j＝7.1,1.0hz,2h),3.33(t,j＝7.1hz,2h),4.42(dt,j＝12.3,1.0hz,1h),4.51 (dt,j＝12.5,0.9hz,1h),6.52(dd,j＝7.4,1.5hz,1h),6.64(td,j＝7.5,1.5hz,1h),6.84(dq,j＝7.5,1.1 hz,1h),6.95(td,j＝7.4,1.6hz,1h),7.14(tt,j＝8.0,1.3hz,2h),7.79(dd,j＝7.4,5.0hz,1h),8.82(d,j ＝4.9hz,1h),9.09(s,1h),11.25(s,1h).esi-ms( )m/z＝315.20[m h]

。
[0322]
实施例25: 4-((7-甲氧基-1,2,4,5-四氢-3h-苯并[d]氮卓-3-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-25)的制备
[0323]
按照合成通法3进行制备，合成路线如下：
[0324][0325]
产物为白色固体，1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ2.49(s,2h),2.53(s,2h),2.78(dd,j＝6.3,3.8 hz,2h),2.81(dd,j＝6.2,3.7hz,2h),3.62(s,2h),3.69(s,3h),6.63(dd,j＝8.2,2.7hz,1h),6.69(d,j＝ 2.7hz,1h),6.99(d,j＝8.2hz,1h),7.41(d,j＝8.0hz,2h),7.65
–
7.81(m,2h),9.09(s,1h),11.25(s,1h). esi-ms( )m/z＝327.15[m h]

。
[0326]
实施例26： 4-((6-甲氧基-1,2,4,5-四氢-3h-苯并[d]氮卓-3-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-26)的制备
[0327]
按照通法3进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ2.48(m,4h),2.83(m,2h),2.93(m,2h), 3.60(s,2h),6.65
–
6.74(m,1h),6.76
–
6.83(m,1h),7.04(m,1h),7.40(d,j＝8.0hz,2h),7.68
–
7.80(m, 2h),9.11(s,1h),11.25(s,1h).esi-ms( )m/z＝327.15[m h]

。
[0328]
实施例27: 4-((6-溴-9-甲氧基-1,2,4,5-四氢-3h-苯并[d]氮卓-3-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-27)的制 备
[0329]
按照通法3进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ2.46
–
2.50(m,2h),,2.97
–
3.00(m,2h),, 3.08
–
3.11(m,2h),3.59(s,2h),3.74(s,3h),6.79(d,j＝8.9hz,1h),7.36
–
7.39(m,3h),7.73(d,j＝8.0 hz,2h),9.09(s,1h),11.20(s,1h).esi-ms( )m/z＝405.13[m h]

。
[0330]
实施例28: 4-((6-环丙基-9-甲氧基-1,2,4,5-四氢-3h-苯并[d]氮卓-3-基)甲基)-n-羟基苯甲酰胺(t-28) 的制备
[0331]
按照通法3进行制备。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ0.37
–
0.51(m,2h),0.73
–
0.89(m,2h), 1.79(tt,j＝8.4,5.4hz,1h),2.47(q,j＝4.7hz,4h),2.94(dd,j＝7.0,3.1hz,2h),3.11(dd,j＝6.8,3.1hz, 2h),3.58(s,2h),3.69(s,3h),6.69(d,j＝8.5hz,1h),6.87(d,j＝8.5hz,1h),7.40(d,j＝8.0hz,2h),7.63
ꢀ–
7.82(m,2h),9.08(s,1h),11.20(s,1h).esi-ms( )m/z＝366.88[m h]

。
[0332]
实施例29 化合物对hdac抑制活性
[0333]
化合物的组蛋白去乙酰化酶体外抑制活性测定参照hdac1及hdac6抑制剂筛选试剂盒 (biovision公司)说明书进行。以临床在研hdac6抑制剂rocilinostat(acy-1215) 和化合物sw-100为阳性对照。
[0334]
实验结果见表：
[0335][0336][0337]
从上表可见，本发明化合物对hdac6显示较好的抑制活性(大部分ic
50
<100nm)，部分化合物 抑制活性与阳性对照rocilinostat(acy-1215)、sw-100相当或更优。此外，对hdac1的的抑制活性 ic
50
均>250nm；相对于hdac1，本发明化合物可选择性抑制hdac6，大部分选择性>30倍，甚至50 倍，选择性优于rocilinostat和sw-100。
[0338]
实施例30 体外对肿瘤细胞及人体正常细胞抗增殖活性测试
[0339]
测定部分本发明化合物单浓度(10μm)条件下对脑胶质瘤细胞株u-87mg、骨髓瘤细
胞株rpmi 8226、人肝癌细胞株hepg2、人肺癌细胞株a549、及mrc-5人正常胚肺成纤维细胞的抗增殖活性， 选择rocilinostat(acy-1215)为对照。具体结果如表(单位为：inh％in 10μm)：
[0340]
测试方法：取生长状态良好的对数生长期肿瘤细胞，每孔按4
×
103个接种至96孔板中，每组 设置8个复孔，置于细胞培养箱中培养，待细胞贴壁后转染相应质粒后。继续培养48h后，弃含药 培养基，每孔加入新鲜配制的含10ul的毒性检测液cck8，置于培养箱中继续培养4h后，用酶标 仪测波长为450nm的od值。实验重复3次，取实验结果的平均值作为最终实验结果，计算抑制率。
[0341][0342]
a:100≥～>90；b:80<～≤90；c:70<～≤80；d:50<～≤70 e:<50
[0343]
从上表可见，与阳性对照rocilinostat相比，本发明化合物对多种肿瘤细胞均显示了良好的体外 抗肿瘤细胞增殖活性，对脑胶质瘤细胞株u-87mg、骨髓瘤细胞株rpmi 8226、人肝癌细胞株hepg2 具有较高的抑制活性；部分化合物抗肿瘤细胞增殖活性优于阳性对照药。
[0344]
同时，本发明化合物相对于rocilinostat，对mrc-5人正常胚肺成纤维细胞的抑制活性较弱，具 有更低的毒副作用，揭示了本发明化合物在对于肿瘤细胞和正常细胞的抑制增殖方面具有更好的选择 性，预示其作为抗肿瘤药物使用时，可能具有更低的毒副作用。
[0345]
实施例31 化合物对hca诱发的神经元细胞损伤保护作用
[0346]
使用hca(5mmol/l)诱导大鼠皮层混合细胞及原代神经元的损伤，观察不同浓度(测试浓度： 0.1um、1.0um和10.0um)化合物对损伤的影响，检测神经元及胶质细胞的活性、数量、形态以及坏 死的变化，观察化合物对正常神经元的作用；以同类具有神经保护作用的hdac6抑制剂化合物 tubastatin a作为对照。结果显示，本发明化合物对抗hca诱发的神
经元兴奋毒性均具有一定的保护 作用。其中，化合物t-2，t-5，t-15，t-16，t-19，t-21和t-28体外活性与同剂量具有神经保护作 用的hdac6抑制剂化合物tubastatin a相比，保护活性更强，且显示一定量效关系，提示本发明化 合物具有神经保护作用，可用于神经退行性相关疾病治疗。结果见图1。
[0347]
实施例32 化合物对herg钾通道影响实验
[0348]
采用全细胞膜片钳技术记录不同浓度的化合物作用于外源稳定转染表达herg钾通道的 hek293细胞(herg-hek293稳态细胞)后herg电流(ikr)的变化,研究上述化合物对ikr作用的半数 抑制浓度(ic
50
)。
[0349]
初步考察本发明部分化合物t-2，t-5，t-15，t-16，t-19，t-21和t-28体外潜在心脏毒副作用。
[0350]
实验结果如下表：
[0351]
compdherg ic
50
(μm)t-2>10t-5>10t-15>10t-16>10t-19>10t-21>10t-28>10
[0352]
herg实验结果显示，测试化合物t-2，t-5，t-15，t-16，t-19，t-21和t-28对herg钾离子通 道的抑制活性均大于10μm，提示本发明化合物潜在的心脏毒性较低。
[0353]
实施例33 化合物灌胃给药最大耐受量毒性试验
[0354]
取icr小鼠40只，雌雄各半，体重18～20g，分为4组，每组10只动物。禁食6小时后，每 组分别用灭菌塑料注射器抽取受试样品按0.3ml/10g体积口服灌胃。给药后1、2、4小时均对动物的 一般体征以及动物的死亡情况进行记录。给药后连续观察14天，每天对动物的体重以及体征死亡情 况进行观察和记录。对死亡动物进行解剖，观察动物脏器有没有出现肉眼可见的病理变化，对可疑的 组织和器官进行病理学检查。
[0355]
实验结果表明：本发明化合物t-2，t-5，t-15，t-16，t-19，t-21和t-28对小鼠灌胃给药最大 耐受量大于1000mg/kg，动物耐受性较好。
[0356]
实施例34 化合物pk测试
[0357]
本发明部分化合物t-2，t-5，t-15，t-16，t-19，t-21和t-28经单次腹腔给药雄性sd大鼠，采 用lc-ms/ms法测定化合物在大鼠脑、血浆中的药物浓度，计算受试化合物t＝1.0h的脑/血 (brain/plasma)药物浓度比，以评价活性化合物的脑通透性。以化合物sw-100作为对照，试验结果 见表：
[0358]
化合物血脑屏障通透性(b/p)ii-ing-390.77sw-1001.82t-2>2.0t-5>2.0
t-15>2.0t-16>2.0t-19>2.0t-21>2.0t-28>2.0
[0359]
试验结果显示：与阳性对照ii-ing-39和sw-100相比，本发明化合物均显示更好的血脑通透性。