一种洛匹那韦中间体的酶催化合成方法与流程

技术特征：
1.一种洛匹那韦中间体的酶催化合成方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)化合物ⅳ与三氟乙酸在溶剂中反应，制得化合物ⅲ；然后向反应瓶中加入碳酸氢钠、水、溶剂和化合物ⅲ，开启搅拌，降温至
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5～5℃左右，向反应瓶内加入溴化钾和2,2,6,6
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四甲基哌啶氧化物，滴加次10％氯酸钠溶液，tlc监控反应体系；反应完全后，加入硫代硫酸钠溶液，搅拌，水层用溶剂萃取，合并有机层，浓缩至干，重结晶，析晶后抽滤，干燥，得到化合物ii；具体合成路线如下：(2)以化合物ii为底物，在酮羰基还原酶、辅酶、酶循环氢供体、辅酶循环酶、助溶剂和缓冲液的存在下，进行生物催化反应生成洛匹那韦中间体，即化合物i；具体合成路线如下：2.根据权利要求1所述的洛匹那韦中间体的酶催化合成方法，其特征在于：所述步骤(1)具体为：
①
反应瓶中加入化合物ⅳ、二氯甲烷、三氟乙酸，控制温度20
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25℃，反应4h，监控反应，原料反应完全；向体系中加饱和碳酸氢钠洗，分液；有机层再用水洗一次；有机层减压浓缩，至无溶剂蒸出，获得化合物ⅲ；
②
向反应瓶中加入碳酸氢钠、水、二氯甲烷和化合物ⅲ，开启搅拌，降温至
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5～5℃左右，向反应瓶内加入溴化钾和2,2,6,6
‑
四甲基哌啶氧化物，保持
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5～5℃下滴加次10％氯酸钠溶液，2～3h内滴完，2h后tlc监控反应体系；反应完全后，加入10％硫代硫酸钠溶液，升温至25℃下搅拌1h，水层用二氯甲烷萃取2次，合并有机层，浓缩至干，加入乙酸乙酯重结晶，0～5℃下析晶2h后抽滤，干燥，得到化合物ii。3.根据权利要求1所述的洛匹那韦中间体的酶催化合成方法，其特征在于：所述步骤(2)中的辅酶为nadp 或nadph。4.根据权利要求1所述的洛匹那韦中间体的酶催化合成方法，其特征在于：所述步骤(2)中的辅酶循环酶优选为异丙醇脱氢酶。5.根据权利要求1所述的洛匹那韦中间体的酶催化合成方法，其特征在于：所述步骤(2)中辅酶循环氢供体及助溶剂为异丙醇。6.根据权利要求1所述的洛匹那韦中间体的酶催化合成方法，其特征在于：所述步骤(2)中的化合物ii与所述酮羰基还原酶的质量比为1:0.1～1。7.根据权利要求1所述的洛匹那韦中间体的酶催化合成方法，其特征在于：所述步骤(2)中的化合物ii与所述助溶剂的质量体积比为1g:10～50ml。8.根据权利要求1所述的洛匹那韦中间体的酶催化合成方法，其特征在于：所述步骤
(2)中的缓冲液为pb缓冲液，其浓度为0.2mm，ph为7.5～8.0。

技术总结
本发明涉及生物制药技术领域，尤其是一种洛匹那韦中间体酶催化合成方法，包括以下步骤：1)化合物Ⅳ与三氟乙酸在溶剂中反应，制得化合物Ⅲ；然后向反应瓶中加入碳酸氢钠、水、溶剂和化合物Ⅲ，开启搅拌，降温至


技术研发人员：陈本顺 叶金星 石利平 张维冰 何伟 徐春涛 程瑞华 马跃跃 尹斌 陆波
受保护的技术使用者：江苏阿尔法药业股份有限公司
技术研发日：2021.03.12
技术公布日：2021/10/18