一种能高效分化成脂的规模化3D低氧间充质干细胞培养体系的制作方法

技术特征：
1.一种人脐带间充质干细胞3d培养方法，包括以下步骤：1）将人脐带间充质干细胞在2d条件下培养至p2~p4代；2）将获得的p2~p4代脐带间充质干细胞接种3d环境中进行扩增培养至p5~p7代；步骤2）中所述3d环境以玻璃微球为载体；所述3d环境中的氧分压为3%~8%。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述玻璃微球表面积为4~5mm2。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述3d环境中的氧分压为4%~6%。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述3d环境中的氧分压为5%。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述3d环境由生物反应器提供。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）中所述接种的密度为103~105个细胞。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤2）中所述接种的密度为104个细胞。8.一种人脐带间充质干细胞成脂分化的方法，包括以下步骤：1）收集权利要求1中扩增获得的p5~p7代人脐带间充质干细胞，接种至msc培养基中培养，当细胞汇合度达到80~90%时，将培养基更换为成脂分化培养基；2）每1~3d更换一次新鲜的成脂分化培养基，培养至15~20d。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤2）中每2d更换一次新鲜的成脂分化培养基。10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤2）中培养至18d。

技术总结
本发明提供了一种人脐带间充质干细胞3D低氧培养以及分化成脂的方法，属于细胞培养技术领域，3D低氧培养人脐带间充质干细胞的方法，包括以下步骤：1）将人脐带间充质干细胞在2D条件下培养至P2~P4代；2）将获得的P2~P4代脐带间充质干细胞接种3D环境中进行扩增培养至P5~P7代；步骤2）中所述3D环境以玻璃微球为载体；所述3D环境中的氧分压为3%~8%。本发明提供的方法培养获得的人脐带间充质干细胞生长状况良好，细胞形态呈梭形和多棱形；细胞增殖速度快，具有较高成脂分化能力，成脂分化效率高，成脂分化出现时间较早。成脂分化出现时间较早。成脂分化出现时间较早。


技术研发人员：刘中民 贾文文 朱羚 朱邯豫 汤红明
受保护的技术使用者：南京比瑞生物科技有限公司
技术研发日：2021.07.16
技术公布日：2021/10/15