双特异性嵌合抗原受体及其应用的制作方法

技术特征：
1.靶向cd19和cd22双抗原的双特异性嵌合抗原受体，其特征在于，双特异性嵌合抗原受体结构为靶向cd19的嵌合抗原受体与靶向cd22的嵌合抗原受体经自剪切肽连接串联；靶向cd19scfv的氨基酸序列为seq id no.8，靶向cd22scfv的氨基酸序列为seq id no.9。2.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，靶向cd19scfv的核苷酸序列为seq id no.2，靶向cd22scfv的核苷酸序列为seq id no.3。3.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体核苷酸序列如seq id no.1所示。4.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，连接胞外识别区与跨膜区域的hinge区氨基酸序列如seq id no.10所示；跨膜区域的氨基酸序列如seq id no.11所示；胞内共刺激信号域为cd137，氨基酸序列如seq id no.12所示；胞内信号活化区域为cd3ζ，氨基酸序列如seq id no.13所示。5.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，连接胞外识别区与跨膜区域的hinge区核苷酸序列如seq id no.4所示；跨膜区域的核苷酸序列如seq id no.5所示；胞内共刺激信号域为cd137，核苷酸序列如seq id no.6所示；胞内信号活化区域为cd3ζ，核苷酸序列如seq id no.7所示。6.包含权利要求1-5任一项所述的嵌合抗原受体的car表达载体，其特征在于，所述表达载体为慢病毒表达载体、逆转录病毒表达载体、腺病毒表达载体、腺相关病毒表达载体、dna载体，rna载体、质粒中的任一种。7.权利要求6所述的car表达载体，其特征在于，所述载体包含如seq id no:1所示的核苷酸序列。8.表达权利要求7所述的嵌合抗原受体的car-t细胞。9.权利要求1所述的car结构和/或权利要求6所述的表达载体和/或权利要求8所述的car-t细胞在制备治疗肿瘤的药物中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述肿瘤共表达cd19和cd22抗原。

技术总结
本发明属于免疫治疗技术领域，具体涉及一种可识别CD19和CD22肿瘤相关抗原的双特异性嵌合抗原受体，一种该嵌合抗原受体的表达载体、CAR-T细胞及其应用。所述双特异性嵌合抗原受体可识别CD19和CD22双靶点，不仅可以有效的表达于T淋巴细胞，而且能够减少肿瘤免疫逃逸的几率，降低CAR-T治疗后肿瘤复发率。T治疗后肿瘤复发率。T治疗后肿瘤复发率。


技术研发人员：陈雪娇 单娟娟 赵永春 沈俊杰 张巍 黄霞 徐艳敏 陈军 赵文旭 齐亚男
受保护的技术使用者：重庆精准生物产业技术研究院有限公司
技术研发日：2020.04.03
技术公布日：2021/10/11