一种半衰期显著延长的治疗眼部血管新生疾病的融合蛋白的制作方法

技术特征：
1.一种融合蛋白，所述融合蛋白包括亲水性重复序列片段、拮抗vegf片段、免疫球蛋白fc片段。2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述亲水性重复序列片段选自类明胶蛋白片段、或多肽复合单元片段。3.如权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述亲水性重复序列片段包括：a)氨基酸序列如seq id no.28～29其中之一所示的多肽片段；或，b)氨基酸序列与seq id no.28～29其中之一具有90％以上序列一致性且具有a)限定的多肽片段的功能的多肽片段；或，c)氨基酸序列如seq id no.30所示的多肽片段；或，d)氨基酸序列与seq id no.30具有90％以上序列一致性且具有c)限定的多肽片段的功能的多肽片段。4.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述拮抗vegf片段包括：e)氨基酸序列如seq id no.1～7其中之一所示的多肽片段；或，f)氨基酸序列与seq id no.1～7其中之一具有90％以上序列一致性且具有e)限定的多肽片段的功能的多肽片段。5.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白fc片段包括：g)氨基酸序列如seq id no.33～41其中之一所示的多肽片段；或，h)氨基酸序列与seq id no.33～41其中之一具有90％以上序列一致性且具有g)限定的多肽片段的功能的多肽片段；所述免疫球蛋白fc片段为人源的。6.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包括连接肽片段，优选的，所述连接肽片段富含g、s和/或a。7.如权利要求6所述的融合蛋白，其特征在于，所述连接肽片段包括氨基酸序列如seq id no.42-43其中之一所示的多肽片段。8.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包括拮抗ang片段，所述拮抗ang片段选自拮抗ang-1片段、或拮抗ang-2片段。9.如权利要求1或8任一权利要求所述的融合蛋白，其特征在于，所述亲水性重复序列片段位于融合蛋白的n端和/或c端，所述拮抗vegf片段位于免疫球蛋白fc片段的n端或c端；和/或，拮抗vegf片段、或拮抗ang片段独立地位于免疫球蛋白fc片段的n端或c端，优选的，拮抗vegf片段、拮抗ang片段分别位于免疫球蛋白fc片段的n端和c端。10.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列包括seq id no.11-12、seq id no.15-16、seq id no.18-19其中之一所示的序列；或，所述融合蛋白的氨基酸序列包括seq id no.20和seq id no.21所示的序列、seq id no.22和seq id no.24所示的序列、seq id no.23和seq id no.24所示的序列、seq id no.25和seq id no.7所示的序列、或seq id no.26和seq id no.27所示的序列。11.一种分离的多核苷酸，编码如权利要求1～10任一权利要求所述的融合蛋白。12.一种构建体，所述构建体含有如权利要求11所述的分离的多核苷酸。13.一种表达系统，所述表达系统含有如权利要求12所述的构建体或基因组中整合有外源的如权利要求11所述的多核苷酸。
14.如权利要求1-10任一权利要求所述的融合蛋白的制备方法，包括：在合适的条件下培养如权利要求13所述的表达系统，使之表达所述融合蛋白，分离、纯化以提供所述融合蛋白。15.一种药物组合物，包括如权利要求1-10之任一权利要求所述的融合蛋白或如权利要求13所述的表达系统的培养物。16.如权利要求1-10任一权利要求所述的融合蛋白、如权利要求15所述的药物组合物在制备药物中的用途。17.如权利要求16所述的用途，其特征在于，所述药物选自用于眼部血管新生相关疾病的药物。

技术总结
本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种融合蛋白及其制备方法和用途。本发明提供一种融合蛋白，所述融合蛋白包括亲水性重复序列片段、拮抗VEGF片段、免疫球蛋白Fc片段。本发明所提供的融合蛋白在血清中具有更短的半衰期，而在玻璃体中则表现出良好的半衰期，从而使得融合蛋白具有更佳的靶向性，被证明相比目前现有技术中的药物具有更优越的半衰期和良好的药理学性质。此外，本发明所提供的融合蛋白还具有良好的稳定性、较低的粘度，从而具有良好的产业化前景。产业化前景。


技术研发人员：黄岩山
受保护的技术使用者：浙江道尔生物科技有限公司
技术研发日：2020.03.19
技术公布日：2021/10/11