一种文昌锥插穗用生根剂及其使用方法与流程

1.本发明涉及植株插穗技术领域，具体为一种文昌锥插穗用生根剂及其使用 方法。


背景技术：

2.文昌锥(castanopsis wenchangensis)为壳斗科(fagaceae)锥属 (castanopsis)植物，海南特有极小种群物种，其坚果营养价值高，在海南文昌 及海口地区食用历史悠久，为优良的特色干果经济树种资源，极具地方特色。 文昌锥分布范围小，居群及个体数量少，近年来文昌锥资源及生境经常受到台 风干扰和人为破坏，尤其是人为破坏极其严重，种质资源数量急剧减少；另外 文昌锥的坚果受到小鸟、老鼠或其他动物的侵食，后代及小苗更新慢，导致生 态失衡，对文昌锥种群的保护和扩种迫在眉睫。
3.与嫁接、组织培养等其他无性繁殖方法相比，扦插(插穗)技术进行快繁 幼苗具有繁殖速度快、质量高，能有效调节和利用树木的阶段发育规律等特点。 不同植物的生长物质在扦插中扮演的角色是不同的，不同浓度、不同种类的生 根剂对不同类型插穗采取不同时间处理后，会对内源激素合成和分配产生一定 的影响，最终引起插穗生根效果的差异。至今为止，还没有针对文昌锥插穗方 面的研究。
4.本发明提出一种文昌锥插穗用生根剂及其使用方法，解决上述技术问题。


技术实现要素：

5.一种文昌锥插穗用生根剂，包括萘乙酸、吲哚丁酸、复硝酚钠、去离子水。
6.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂,还包括2,4
‑
d(2,4
‑
二氯苯氧乙酸)。
7.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂,所述萘乙酸的含量为500～2000mg/l、 吲哚丁酸500～2000mg/l、复硝酚钠0.5～3.5mg/l。
8.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂,2,4
‑
d的含量为0.5～2.5mg/l。
9.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂,所述萘乙酸的含量为900～1500mg/l、 吲哚丁酸900～1500mg/l、复硝酚钠2～3.5mg/l、2,4
‑
d的含量为0.8～1.5mg/l。
10.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂,所述萘乙酸的含量为1000mg/l、吲哚 丁酸1000mg/l、复硝酚钠2.5mg/l、2,4
‑
d的含量为1mg/l。
11.上述文昌锥插穗用生根剂的使用方法，步骤如下：
12.步骤一、将购买的轻基质装入林木育苗盘中备用；
13.步骤二、将插穗先后进行剪切、消毒；
14.步骤三、将剪切后的插穗基部浸入生根剂中20s～40s；
15.步骤四、将插穗插入消毒后的轻基质中，并将插穗育苗盘整齐摆放在苗床 上。
16.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂及的使用方法,步骤二中用于剪切的插穗 长位于3～5cm且插穗为一叶一芽。
17.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂的用方法,步骤二中剪切后的插穗放入 5％多菌灵溶液中消毒。
18.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂的使用方法,步骤三中将剪切后的插穗基 部1cm～2cm浸入生根剂中20s～40s。
19.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂的使用方法,步骤四中插穗插入轻基质中 的深度为1cm～2cm且每穴一株。
20.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂的使用方法,还包括步骤五、苗床上设置 遮阳网，所述遮阳网的这样面积为60％～80％。
21.优选的，所述文昌锥插穗用生根剂的使用方法,对步骤五中的插穗每隔 25min～35min的时间进行微喷灌溉。
22.优势如下：本专利专注于文昌锥插穗用的生根剂，根据文昌锥自身植株特 点的分析并经过多次试验，统计出不同含量对应的生根剂的成活率、生根率、 愈伤组织产生率等数据，通过数据分析得到文昌锥适用的生根剂。有助于文昌 锥有效、快速的无性繁衍，解决当前文昌锥数量少、存活率低的现象。
附图说明：
23.下面结合附图对具体实施方式作进一步的说明，其中：
24.图1不同外源激素配比处理对文昌锥存活率和生根率的影响；
25.图2不同外源激素配比处理对文昌锥愈伤组织产生面积和产生率的影响；
26.图3不同外源激素配比处理对文昌锥穗条一级不定根数量的影响；
27.如下具体实施方式将结合上述附图进一步说明本发明。
具体实施方式
28.一、试验地概况
29.试验地位于海口市海南省农业科学院热带园艺所苗圃(20
°0′
38.71
″
n， 110
°
21
′
58.07
″
e)，年平均气温23.8℃，最高温28.1℃，最低温18.5℃， 年均日照时数2060h以上，年均降水量1664mm，年均相对湿度为84.0％，地 处低纬度热带北缘，属于热带海洋气候。
30.二、仪器与试剂
31.fa2004b电子天平(万分之一)，上海平轩科学仪器有限公司；日本三丰 mitutoyo电子数显游标卡尺，吴江市亿丰电子仪器有限公司；picus nxt电子 单道移液器，上海锐析仪器设备有限公司。a(萘乙酸)、b(吲哚丁酸)、c(2,4
‑
d)、 d(复硝酚钠)以及专业生根剂，购自上海广锐生物科技有限公司；去离子水为实 验室自制。
32.三、试验方法
33.试验进行于节水微喷灌环境中(每30min一次)。将购买的轻基质装入30 穴的林木育苗盘中，备用。插穗一叶一芽，长3～4cm。插穗剪切后立即放入5％ 多菌灵溶液中消毒。然后将插穗基部1.5cm左右醮于不同处理的生根剂中，时 间30s。将处理好的插穗插入消毒后的轻基质中，每穴1株，深度为1.5cm 左右。处理完成后将插穗育苗盘整齐摆放在苗床上，苗床上面设遮阳网75％。
34.四、试验设计
35.试验采用l25(56)正交试验方案设计，但只有四个因素五个水平，详见表 1。四个因素分别为：a(萘乙酸)、b(吲哚丁酸)、c(2,4
‑
d)、d(复硝酚钠)。共 设25个处理(分别用a1
‑
a25表示)，空白对照ck(采用清水处理)，以及1个 专业生根剂对照。每个处理3次重复，每个重复插条数量为30根。试验时间 持续60d。
36.表1 l25(56)正交试验方案设计
[0037][0038][0039]
注：处理中的生根剂，为市场上购买的专业生根剂，生根率90％以上。
[0040]
五、测定方法
[0041]
试验于2020年4月25日开始，于2020年6月25日结束。扦插60d后， 统计插穗的成活率，随机10株统计愈伤组织产生率和一级不定根数。在此统计 的基础上，分别计算：(1)愈
伤组织产生率＝(已长愈伤组织条数/已存活枝条 数)
×
100％；(2)成活率＝(成活条数/总枝条数)
×
100％(凡此时未生根者计 为扦插不成活，60天)；(3)生根率＝(生根条数/总枝条数)
×
100％；(4) 愈伤组织面积(s)＝πdh(d，愈伤组织直径；h，愈伤组织长度)；依据不同 生长指标的统计情况设置不同等级的评分标准，详见(表2)
[0042]
表2各指标评分标准
[0043][0044]
六、结果与分析
[0045]
(1)不同处理对文昌锥插穗成活率的影响
[0046]
不同配比激素处理对文昌锥插穗成活率的影响不同，由图1可看出，扦插 60d后，不同处理的存活率在24.44％
‑
86.57％间，成活率≤40％的有a10、a18、 a23、a24和a25，分别为33.33％、37.78％、40.00％、24.44％和40.00％；其中， a24成活率最低，a7的成活率最高，达86.57％(图1)。方差分析结果表明(表 3)，不同外源激素配比处理间差异不显著，p＝0.056(p＞0.05)；进一步 的lsd多重比较发现，对照处理与a10、a16、a24表现差异极显著，生根剂与 a16、a24表现差异极显著(p<0.01)；而a2与a21、a22表现差异不显著，a7 仅与a16差异不显著(p＞0.05)。
[0047]
(2)不同处理对文昌锥插穗生根率的影响
[0048]
不同外源激素配比处理对文昌锥插穗的生根率影响差异达极显著水平(p< 0.01)(表3)，生根率≥60％的处理仅有a7、a16、a 19、a 20，生根率分别 为83.27％、78.33％、60.00％和77.78％(图1)，其他处理的生根率均在60％以 下。处理对照处理生根率为0，a24处理仅为6.67％，生根率极低，(专业)生 根剂与处理a1生根率一样，值为46.67％，低于50％。
[0049]
(3)不同处理对文昌锥插穗愈伤组织面积的影响
[0050]
扦插60天后，如图2，不同外源激素配比处理的愈伤组织产生面积在9.61
ꢀ–
84.22mm2之间，最大值为a7处理，84.22mm2，ck处理获得的愈伤组织面积 值最小，仅为9.61mm2；，最大值与最小值相差8.58倍，其中仅a7、a11、a14 和a16愈伤组织产生面积在70mm2以上，值分别为：84.22mm2、72.15mm2、 73.15mm2和78.37mm2。方差分析结果表明不同外源激素配比处理的愈伤组织 产生面积差异不显著(p＝0.104,＞0.05)；lsd多重比较发现，清水处理产 生的愈伤组织面积与a8、a11、a14、a20间差异显著，a8与a6间差异显著(p <0.05)；而其他处理均不显著(表3)。
[0051]
(4)不同处理对文昌锥插穗愈伤组织产生率的影响
[0052]
不同处理对文昌锥插穗愈伤组织产生率的影响极大，图2表明，a7处理的 愈伤组织产生率达75.66％，a16处理的愈伤组织产生率为77.78％；而a10、a18 和a24处理的愈伤组织产生率分别为33.33％、37.78％和24.44％，最高与最低差 距约为3.30倍；方差分析结果表明(见表3)，不同外源激素配比处理间的差 异不显著(p＝0.067，＞0.05)；进一步的lsd多重比较发现，ck与a10、 a16、a24，表现差异极显著，(专业)生根剂与a2、a21、a22和a24差异极 显著(p<0.01)，其他处理均不显著。
[0053]
表3不同处理方差分析
[0054][0055]
[0056]
(5)不同处理对文昌锥插穗一级不定根数的影响
[0057]
不同外源激素配比处理对文昌锥插穗一级不定根数的差异达极显著水平(p ＝0.001，<0.01，表3)。ck不能产生不定根，a18、a23和a24处理产生一级 不定根数分别1.67条、1.54条和1.00条，其他处理均在2条以上；其中，(专 业)生根剂、a1、a3、a7、a8、a11、a14、a15、a16、a19和a20处理的一级 不定根数达到7条以上，a7处理最多，为12.21条(图3)。经lsd多重比较 表明，(专业)生根剂与a11、a14和a17，a5和a9，a7与a16差异不显著(p ＞0.05)，其他处理之间差异均达极显著水平。
[0058]
(6)不同处理对文昌锥插穗生长状况的综合评价
[0059]
不同外源激素配比处理插穗，各个指标所表现出来的差异程度也不同，要 从各个指标中直接对其作出综合判断比较困难，为了给不同处理对插穗的表现 作出综合评价，参照各个处理评分标准对指标进行分值判定。统计结果(见表 4)表明，ck的综合得分仅为13.67，不同配方处理的综合得分在20.11～48.33 分之间，a24的得分最小，仅为20.11分；处理a7和a16两个处理总分值大于 40分，其中，处理a7值最大，为48.33分，分别是ck(13.67分)和a24(20.11 分)的3.54倍和2.40倍。
[0060]
由图1和图2看出，仅有处理a7和a16的成活率、愈伤组织产生率和生根 率均达到75％以上；且a7和a16的一级定根数量也较多，分别为12.21条和11.00 条。因此，处理a7和a16均可用于扦插育苗，但a7的生根率最高，为83.27％。
[0061]
表4不同处理的综合评价分值
[0062]
处理号分值处理号分值处理号分值处理号分值ck13.67a627.22a1323.00a2038.34生根剂27.07a748.33a1437.00a2132.99a135.00a831.00a1535.02a2232.63a233.22a930.67a1643.64a2324.33a325.00a1023.34a1732.67a2420.11a431.00a1139.56a1822.04a2526.00a527.05a1228.99a1939.00
ꢀꢀ
[0063]
(7)不同生长激素对文昌锥插穗指标的影响
[0064]
为了明确单个外源激素对文昌锥插穗指标的影响，本文对正交试验结果(各 处理的分值)进行了极差分析。极差(r)值反映各影响因子对生长指标的影响， r值越大，影响越显著。
[0065]
由表5可知，四种外源激素对文昌锥插穗的成活率、愈伤组织产生率和综 合指标影响情况相似，r值排序均为吲哚丁酸>复硝酚钠>萘乙酸>2,4
‑
d，即 b>d>a>c；在综合指标中，吲哚丁酸的r值最大，为9.92，对插穗影响最大，r 值远大于其他三个激素r值；从成活率来看，b激素的r值为2.40，对成活率 的影响最大，其次为d激素，为2.00。对愈伤组织产生率来看，b激素对愈伤 组织产生率的影响最大，r值为3.99，c对愈伤组织产生率的影响较小，r值为 1.11。
[0066]
四种外源激素对文昌锥插穗一级不定根产生数量来看，r值排序为：吲哚 乙酸>萘乙酸>2,4
‑
d>复硝酚钠，即b>a>c>d，同样是b激素对不定根产生数量 的影响最大，r值为3.55，d激素影响最小，r值为1.34。从生根率来看，r值 排序为：复硝酚钠>萘乙酸＝吲哚丁
酸＝2,4
‑
d，即d>a＝b＝c；d激素的r值最大， 为2.80，其他三个激素对插穗生根率影响结果一致，r值均为2.00，表明d激 素对生根绿影响极大。愈伤组织产生面积中，c激素的影响最大，r值为3.60， 其次是a激素，最小是d激素，r值仅为0.80，是所有指标中r值最小的一个， 影响较小，生产上可以忽略不计。
[0067]
表5不同激素处理极差r值
[0068][0069][0070]
七、结论与讨论
[0071]
激素浓度和种类是影响扦插生根的重要因素，采用外源激素处理插穗可以 提高其生根能力。前人在研究植物扦插技术时大部分是单独使用某种激素，或 仅萘乙酸(naa)、或仅abt生根粉、或仅iba生根粉等，一些试验单一使用激 素仅能获得70％左右的生根率也充分证实了这一观点。如细柄阿丁枫采用300 mg
·
l
‑
1naa浸泡处理插穗2h，生根率为78％；乳油木采用3000mg
·
l
‑
1iba 处理插穗，生根率57.5％,美国黑胡桃采用93.2mmolk
‑
iba溶液浸60s嫩枝 插穗，生根率72.2％。
[0072]
前人的研究结果表明，不同外源激素的混合使用比单一使用能够使插穗获 得较高的生根率，但一直以来，文昌锥扦插试验还未被研究报道，本试验采用 不同外源激素配比处理的方法，首次可获得高达83.27％的生根率，一级不定根 数量达12.21条。通过对比分析发现，对于易生根植物可达研究目的，可采用 单一外源激素即可获得高存活率，存活率在85％以上；如：天竺葵(pvlurgoniumhortorum)采用2000mg
·
l
‑
1iba处理插穗,生根率达97.79％，银杏(ginkgobiloba),采用10umoliba溶液处理嫩枝插穗，生根率达88.89％，但是对于本 研究中的文昌锥，采用市场专业生根剂和清水对照ck，生根率分别为46.67％ 和0，而本研究中首次使用2,4
‑
d和复硝酚钠，并与萘乙酸、吲哚丁酸配比混 合使用，生根率高达83.27％，这可能是能获得高比例混合生根率的原因，为市 场专业生根剂配方的1.78倍，生根率提高差不多一倍。
[0073]
不同外源激素处理对植物插穗不定根形成过程中不同指标的影响差异有主 次之分。为了进一步明确萘乙酸、吲哚丁酸、2,4
‑
d和复硝酚钠对文昌锥插穗 一级不定根形成过程中不同指标对插穗生根的影响，本文对正交试验结果进行 了极差分析。分析结果表明，供试的四种生长激素对插穗的综合指标、成活率 和愈伤组织产生率影响情况一样，即吲哚丁酸＞复硝酚钠＞萘乙酸＞2,4
‑
d，吲 哚丁酸对这两个指标的影响最大，影响较小的是2,4
‑
d；吲哚丁酸还对一级不 定根数的影响较大，与成活率和愈伤组织产生率相似，但萘乙酸对一级生根数 量的作用也不小，排序第二，影响最小的为复硝酚钠。与现有技术中传统观念 不同，萘乙酸在文昌锥扦插过程中起到主导作用(传统观念中吲哚丁酸起主导 作用)。
[0074]
综上所述，吲哚丁酸、萘乙酸、复硝酚钠和2,4
‑
d在文昌锥插穗生根形成 过程均起到重要的作用，尤其经常被忽略的复硝酚钠作用明显。目前所报道的 植物扦插试验中，大部分仅应用萘乙酸和吲哚丁酸，2,4
‑
d和复硝酚钠应用的 较少。结果表明，复硝酚钠单独使用对插条生根作用明显，复硝酚钠和萘乙酸 复合配方能显著提高插穗的生根效果。此外，复硝酚钠对插穗生根率影响较大， 而对愈伤组织产生面积的影响较小。
[0075]
本发明专利中涉及的生根剂，可实现文昌锥的高效扦插育苗，降低文昌锥 育苗成本，促进文昌锥扦插苗在造林中的广泛应用奠定基础，并证实混合使用 2,4
‑
d和复硝酚钠可获得理想的扦插效果。
[0076]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细， 但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的 普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进， 这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求 为准。