一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物及其应用的制作方法

1.本发明属于中药组合物技术领域，具体涉及一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物及其应用。


背景技术：

2.溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，uc)是发生在结肠黏膜层和黏膜下层的慢性非特异性炎症性病变，多累及直肠和乙状结肠，呈连续性、对称性、弥漫性分布，病程迁延、反复发作，临床表现主要为腹痛、腹泻、黏液脓血便以及里急后重。
3.近年来，随着我国的经济高速发展、环境污染范围扩大、人们生活方式和饮食结构的改变等，uc在我国的发病率呈逐年上升的趋势，已成为我国消化系统重大、难治性疾病。尽管西方发达地区有高达每百万人两百至三百人的发病率，但中国人口基数大，炎症性患者的总数可能已超过上述国家。研究发现，uc患者发生癌变的风险性高于正常人的10倍。uc病程迁延难愈，长期使用药物为患病家庭带来身体、心理及经济上的负担。因此，uc不仅是难治性疾病，更是严重的公共卫生问题。
4.uc具体发病原因和发病机制尚不明确，既往研究主要集中在遗传基因的易感性、免疫损伤、肠道微生态紊乱和环境因素等联合导致的肠道黏膜免疫炎症反应。目前现有的治疗手段主要为抗炎、抗菌、调节免疫、营养支持、对症治疗等基础手段。主要服用的相关药物包括：
①
柳氮磺胺吡啶(sasp)或5
‑
氨基水杨酸(5
‑
asa)制剂。
②
糖皮质激素如醋酸泼尼松、甲泼尼龙等。
③
免疫抑制剂如甲氨蝶呤、他克莫司等。但是目前对于溃疡性结肠炎的治疗方法均存在一定的缺陷。例如，柳氮磺胺吡啶类(sasp)用于治疗溃疡性结肠炎已有多年的历史，sasp用量大时疗效提高，但副作用亦增加，如皮疹、粒细胞减少、肝肾损害及胰腺炎等副作用，其发生率与用量成正相关；5
‑
氨基水杨酸(5
‑
asa)，对溃结治疗的机制尚不明，其安全性有待考证；糖皮质皮质激素，长期应用，易生高血压、高血糖、骨质疏松、消化道溃疡等副作用。免疫抑制剂有肝肾损伤、骨髓抑制等副作用。且西药治疗复发率高，远期治疗效果不隹。
5.目前中医中也存在治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，但是现有技术中的治疗溃疡性结肠炎的中药组合物均存在组成复杂、治疗药效不显著等问题。因此研制一种能够有效治疗溃疡性结肠炎的中药组合物至关重要。


技术实现要素：

6.为了解决上述问题，本发明提供了一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，能够有效的治疗溃疡性结肠炎。
7.一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，由如下药材原料组成：阿胶、炒三七、青黛和儿茶。
8.进一步的，由如下质量份数的药材原料组成：阿胶1～10份，炒三七1～10份，青黛0.5～10份，儿茶0.5～3份。
9.优选的，包括阿胶6份，炒三七6份，青黛2份，儿茶1份。
10.进一步的，所述阿胶为阿胶珠粉。
11.上述治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，采用如下方法制备：按质量份数称取药材原料，炒制三七粉后加入其他原料并混合研磨粉粹、过筛、干燥，制成成品制剂。
12.具体的，治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，采用如下方法制备：取重量份数的三七粉置于炒制锅中，文火(约120
‑
150℃)炒制至三七粉浅棕黄色，取出，放冷，加入重量份数的青黛、阿胶、儿茶，研磨粉碎成细粉，过120目筛，混合均匀，75℃干燥120min，制成成品制剂。
13.进一步的，所述成品制剂为颗粒剂、片剂、胶囊剂、合剂、丸剂、滴丸或固体分散剂。
14.本发明还提供了阿胶、炒三七、青黛和儿茶中药组合物在治疗溃疡性结肠炎中的应用。
15.进一步的，所述中药组合物在治疗重度溃疡性结肠炎或难治性溃疡性结肠炎中的应用。
16.与现有技术相比，本发明具有如下有益效果。
17.本发明提供的中药组合物治疗以清热解毒、补虚化瘀、止血为主，中药组合物中青黛清热解毒、凉血，为君，炒三七粉活血止血、祛瘀生新，为臣，阿胶、儿茶可补血滋阴润燥、止痛、敛疮生肌，促进肠道黏膜愈合，为佐。四药相互协同，可以加强清热止痢、止血生肌之功，可有效缓解患者腹泻、脓血便等临床症状，对治疗uc患者具有良好的临床疗效。
附图说明
18.为了更清楚的说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见的，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它附图。
19.图1为不同配比中药组合物干预急性模型后各组dai比较图；
20.图2为急性模型各组体重比较图；
21.图3为慢性模型各组体重比较图；
22.图4为急性模型各组dai比较图
23.图5为慢性模型各组dai比较图；
24.图6为急性模型各组结肠长度比较图；
25.图7为慢性模型各组结肠长度比较图；
26.图8为急性模型结肠组织病理形态比较(he染色，200x)图；
27.图9为慢性模型结肠组织病理形态比较(he染色，200x)图；
28.图10为对比例各组dai比较图。
具体实施方式
29.下面将结合本发明中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通的技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明的保护范围。
30.本发明提供一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，由如下药材原料组成：阿胶、炒三七、青黛和儿茶。
31.青黛，为爵床科植物马蓝、蓼科植物蓼蓝、十字花科植物菘蓝的叶或茎叶经加工制得的干燥粉末或团块，味咸，性寒，归肝、肺经。功效：清热解毒、凉血消斑，清肝泻火，用于疮痈、热毒发斑、吐血衄血、咳嗽痰血等。《本草逢原》“治温毒发斑及产后热痢下重”。本品主要含靛蓝、靛玉红，尚含靛棕、靛黄、鞣酸、β
‑
谷甾醇、蛋白质及大量无机盐。本品醇浸液及煎剂体外实验对炭疽杆菌、肺炎球菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌等均有抑制作用。药理研究证实青黛可调节机体免疫功能，并具有类皮质激素样作用，具有较强的抗肿瘤、抗病毒和抗菌功效。有研究发现青黛可以显著改善溃疡性结肠炎程度。
32.三七为五加科植物三七的干燥根，味甘、微苦，性温，归肝、胃经，功效：化瘀止血，消肿定痛，用于体内外各种出血证、跌扑瘀肿疼痛，本品既善止血，又善化瘀，药效卓著，故出血兼瘀者尤为适宜，有止血不留瘀，化瘀不伤正之特点，可促进出血创面的愈合，广泛用于体内外各类出血，治咳血、吐血、衄血、尿血、便血、崩漏、紫癜及创伤出血等。同时，本品善活血消肿定痛，为外伤科要药。《医学衷中参西录》曰：“三七
……
治疗痢疾下血鲜红久不愈，肠中腐烂，浸成溃疡”，《本草求真》“三七
……
能于血分化其血瘀”。本品主要含四环三萜皂苷活性成分，其主要成分为三七皂苷，尚含止血有效成分田七氨酸、挥发油、甾醇及糖类，可增加表皮生长因子的表达，保护血管内皮细胞，促管平滑肌细胞增生，改善血管及黏膜脆性、改善肠黏膜血流，亦可抗炎，调节免疫。研究亦发现，三七的有效成分人参皂苷可促进肠黏膜紧密连接、降低肠黏膜屏障通透性、抑制炎症因子释放，达到治疗uc的作用。
33.阿胶为马科动物驴的皮，经煎煮、浓缩制成的固体胶，并以蛤粉烫炒成珠用，味甘、性平，归肺、肝、肾经，功效：补血止血，滋阴润燥，用于治疗血虚萎黄、眩晕、心悸、多种出血证、阴虚证及燥证。本品止血作用良好，为止血要药，且为补血之佳品。《神农本草经》载：阿胶“主心腹内崩
……
女子下血，安胎”，《本草纲目》“疗吐血、衄血、血淋、尿血、肠风下痢。”有利于新血化生、黏膜修复。现代药理研究表明，阿胶的化学成分主要为皮胶原，水解后可得到明胶、蛋白质、多种氨基酸及微量元素，如含钙、硫等。阿胶可刺激外周血中血小板的再生,提高骨髓外造血功能，具有强大的补血作用，疗效优于铁剂，并具有免疫促进作用，且阿胶水解后产生的氨基酸有利于黏膜组织修复，并能扩张血管，降低血管通透性，增加血小板数量，缩短部分活化凝血酶原时间，改善微循环。阿胶、炒三七两药配伍，可起到活血止血、祛瘀生新之功，对治疗溃疡性结肠炎具有一定的疗效。
34.儿茶为豆科植物儿茶的去皮枝、干的干燥煎膏。冬季采收枝干，除去外皮，砍成大块加水煎煮，浓缩，干燥。味苦、涩，性凉，归心、肺经。功效：活血疗伤，止血生肌敛疮，用于外伤瘀肿出血，或疮疡久不收口等证。《本草纲目》“清膈上热
……
一切诸疮，生肌定痛，止血，收湿”。《本经逢原》“孩儿茶
……
性涩收敛，止血收湿，为金疮止痛生肌之要药”。本品主要含酚酸性成分，其主要成分为儿茶酸，儿茶鞣酸等，尚含槲皮素等黄酮醇、低聚糖、纤维素等。体外实验证实儿茶对多种皮肤真菌、金黄葡萄球菌、杆菌有抑制作用，现代以本品水煎口服治疗uc具有较好疗效。
35.实施例1
36.一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，按以下质量份抓取中药配方原料：青黛2份，炒三七粉6份，阿胶珠粉6份，儿茶1份。
37.本实施例1治疗溃疡性结肠炎的中药组合物药剂的制备方法为：
38.s1、取重量份数的三七粉，至于炒制锅中，文火(约120℃
‑
150℃)炒制至三七粉浅棕黄色，取出，放冷；
39.s2、加入重量份数的青黛、阿胶、儿茶，粉碎成细粉；
40.s3、过120目筛，混合均匀，75℃干燥120min，制得中药组合物。
41.实施例2
42.一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，按以下质量份抓取中药配方原料：青黛0.5份，炒三七粉1份，阿胶珠粉1份，儿茶0.5份。本实施例2的中药组合物制备方法同实施例1相同。
43.实施例3
44.一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，按以下质量份抓取中药配方原料：青黛10份，炒三七粉10份，阿胶珠粉10份，儿茶3份。本实施例3的中药组合物制备方法同实施例1相同。
45.实施例4
46.一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，按以下质量份抓取中药配方原料：青黛5份，炒三七粉5份，阿胶珠粉5份，儿茶1.5份。本实施例4的中药组合物制备方法同实施例1相同。
47.对比例1
48.本对比例的组合物不含青黛和三七，其余成分及制备方法与实施例1相同。
49.实验一、通过采用实施例1、2、3、4制备的中药组合物进行实验来对本发明的药效进行鉴定：
50.(1)实验动物
51.选用spf级的健康雄性c57小鼠36只，鼠龄6
‑
8wk，体质量为20
‑
25g，均购自广东省医学实验动物中心，饲养于广州中医药大学第一附属医院spf级动物实验中心，实验环境：22
±
2℃恒温，光照周期12小时，自由进食进水。
52.(2)实验药品
53.实验原料购于广州中医药大学第一附属医院，经广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定，所购药材均符合《中华人民共和国药典》标准，分别按照实施例1至实施例4重量分数制备水溶液。
54.(3)造模与实验分组
55.36只小鼠适应性喂养1周后，将其随机分为6组，分别为water组(正常对照组)、dss1组(模型1组)、qqp1组，qqp2组，qqp3组，qqp4组。采用葡聚糖硫酸钠(dss)诱导法制作ibd小鼠急性模型。除water组外，其余小鼠予2％dss(用水溶解)连续7天后再给于正常自由饮水3天形成急性肠炎模型。其中，qqp1
‑
4组连续于0天时开始至实验于第10天结束分别给予实施例1
‑
4制备的中药组合物进行治疗。
56.(4)实验结果
57.由图1实验结果所示，qqp2组小鼠的dai指数仅略低于dss1组，但qqp3组、qqp4组、qqp1组小鼠的dai指数远低于dss1组，高于water组，并有逐渐向water组靠近的趋势，说明在不同比例下，实施例1
‑
4制备得到的中药组合物均对小鼠肠炎具有明显的治疗效果，且实
施例1制备得到的中药组合物对应的qqp1组的治疗效果最优，即为最佳的质量比组分的中药材组成。
58.实验二、通过采用优选实施例1进行实验来对本发明的药效进行鉴定：
59.(1)实验动物
60.选用spf级的健康雄性c57小鼠36只，鼠龄6
‑
8wk，体质量为20
‑
25g，均购自广东省医学实验动物中心(许可证号：syxk(粤)2013
‑
0002)，饲养于广州中医药大学第一附属医院spf级动物实验中心，实验单位使用许可证编号：syxk(粤)2013
‑
0092，研究实验方案由广州中医药大学第一附属医院动物实验伦理委员会批准。实验环境：22
±
2℃恒温，光照周期12小时，自由进食进水。
61.(2)实验药品
62.小鼠用药量确定：药物的等效剂量与单位体重体表面积成正比，成人体质量以60kg计，实施例1临床用药量为每天早晚各服用一次共12g，剂量为0.2/kg，小鼠给药剂量按临床用量的9.1倍计算，即小鼠的等效剂量是1.82g/kg。阿胶珠粉，炒三七粉，青黛，儿茶均购于广州中医药大学第一附属医院，经广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定，所购药材均符合《中华人民共和国药典》标准，常规方法制备水溶液。
63.(3)造模与实验分组
64.急性dss2组(模型2组)、qqp5组模型实验研究流程：18只小鼠适应性喂养1周后，将其随机分为3组，分别为water组(正常对照组)、dss2组(模型2组)、qqp5组，每组6只小鼠。采用葡聚糖硫酸钠(dss)诱导法制作小鼠慢性肠炎模型(inflammatory bowel disease，ibd)。除water组(正常对照组)外，其余小鼠自由饮用2％dss(用水溶解)连续7天后再给于正常自由饮水3天形成急性肠炎模型，其中，qqp5组连续给予实施例1制备的中药组合物(2.275g/kg)于0天时开始至实验于第10天结束。
65.慢性dss3组(模型3组)、qqp6组模型实验研究流程：18只小鼠适应性喂养1周后，将其随机分为3组，分别为water组(正常对照组)、dss3组(模型3组)、qqp6组，每组6只小鼠。采用葡聚糖硫酸钠(dss)诱导法制作ibd小鼠慢性模型。除water组(正常对照组)外，其余小鼠予2％dss(用水溶解)连续5天后激发肠炎，再给于正常自由饮水7天，共循环3次，再次给予2％dss的水连续5天激发肠炎形成慢性复发性肠炎模型。其中，qqp6组连续给予实施例1制备的中药组合物(2.275g/kg)于12天时开始至实验于第41天结束。
66.(4)uc动物模型评价
67.自造模第1天起，每日观察小鼠精神状态、活动、皮毛色泽、饮水量、进食量、舌苔等一般形态。
68.小鼠体质量的变化及评价：
69.急性模型每天定时称量并记录小鼠体质量，观察小鼠体质量变化情况。以第1天体质量为100％，之后每天的体质量与第1天体质量之比再乘以100％进行统计分析。
70.慢性模型小鼠分别于第0天，第5天，第12天，第17天，第24天，第29天，第36天，第41天定时称量并记录小鼠体质量，观察小鼠体质量变化情况。以第1天体质量为100％，之后每天的体质量与第1天体质量之比再乘以100％进行统计分析。
71.小鼠疾病活动指数(dai)评分：
72.对小鼠体质量变化、小鼠粪便性状及便血情况进行评分，计算其体质量变化率[体
质量变化率＝(当日体质量
‑
初始体质量)/初始体质量]，收集各组小鼠(water组、dss2组、dss3组、qqp5组、qqp6组)粪便，肉眼观察小鼠粪便性状改变情况，便潜血试纸法行粪便潜血试验检查，评分标准见表1。根据公式“疾病活动指数(dai)＝(体质量评分 粪便性状评分 隐血评分)/3”计算小鼠疾病活动指数。
[0073]
表1疾病活动指数评分标准
[0074][0075]
注：在大便性状和大便出血的标准界定中，通常没有打分为1分或者3分。
[0076]
动物取材：
[0077]
第10天，采用脊椎脱臼法处死急性模型小鼠；第42天，采用脊椎脱臼法处死慢性模型小鼠。解剖小鼠腹腔，迅速剖取小鼠肛门至盲肠末端的结肠段，清理肠系膜及粘连组织，沿肠系膜纵轴剪开，记录结肠长度，并用生理盐水反复冲洗干净，平铺于滤纸上，取1/3病变部位部分结肠组织，用4％多聚甲醛溶液固定，常规石蜡包埋、制备石蜡切片、he染色，光镜放大200倍观察结肠组织病理变化情况，并进行结肠病理组织学评分。
[0078]
(5)实验结果：
[0079]
对各组小鼠体重变化、疾病活动指数(dai)及结肠长度进行详细记录，同时分析肠组织病理形态。
[0080]
如图2急性模型各组体重比较图所示，造模前各组小鼠体重情况，经统计学分析，无显著差异(p＞0.05)。造模后，water组小鼠体重呈上升趋势，其他各组小鼠体重均较前明显下降。各组治疗后的体重经统计学分析后发现：与water组比较，dss2组体重均显著降低(p＜0.01)；与dss2组相比，qqp5组体重升高(p＜0.01)。如图3慢性模型各组体重比较图所示，造模前各组小鼠体重情况，经统计学分析，无显著差异(p＞0.05)。造模后，water组小鼠体重呈上升趋势，其他各组小鼠体重均较前明显下降。各组治疗后的体重经统计学分析后发现：与water组比较，dss3组体重均显著降低(p＜0.01)；与dss3组相比，qqp6组体重升高(p＜0.01),趋近于water组小鼠体重。
[0081]
如图4急性模型各组dai比较图所示，造模前各组小鼠dai情况，经统计学分析，无显著差异(p＞0.05)。造模后，water组小鼠dai无明显变化，其他各组小鼠dai均较前明显上升。各组治疗后的dai经统计学分析后发现：与water组比较，其他各组dai均显著升高(p＜0.01)；与dss2组相比，qqp5组dai指数降低(p＜0.01)，表明实施例1中制备的中药组合物对小鼠实验性急性肠炎具有明显的治疗效果。如图5慢性模型各组dai比较图所示，造模前各
组小鼠dai情况，经统计学分析，无显著差异(p＞0.05)。造模后，water组小鼠dai无明显变化，其他各组小鼠dai均较前明显上升。各组治疗后的dai经统计学分析后发现：与water组比较，其他各组dai均显著升高(p＜0.01)；与dss3组相比，qqp6组dai指数降低(p＜0.01)，表明实施例1中制备的中药组合物对小鼠实验性慢性肠炎具有明显的治疗效果
[0082]
如图6、图7所示，处死小鼠取结肠后，可见相较于water组小鼠，dss组小鼠肠壁充血肿胀，经统计学分析发现，与water组比较，dss2组、dss3组结肠长度显著缩短(p＜0.01)；而qqp5组、qqp6组结肠长度较dss2组、dss3组长度增加(p＜0.05)；提示实施例1制备的中药组合物可缓解溃疡性结肠炎病情进展。
[0083]
如图8、图9所示，通过he染色观察小鼠结肠组织学改变，结果显示：water组小鼠结肠组织结构完整，未见溃疡、坏死；固有层腺体形态完整、排列规则有序；黏膜肌层完整，隐窝正常，杯状细胞丰富；黏膜下层未见淋巴细胞浸润；肌层完整、平滑。图8中急性模型dss2组、图9中慢性模型dss3组、小鼠黏膜广泛缺失，结肠壁明显增厚，结构紊乱，黏膜上皮细胞大量坏死脱落，腺体多不完整，隐窝破坏甚至消失，杯状细胞缺失，黏膜层和黏膜下层有大量以中性粒细胞、淋巴细胞为主的炎性细胞浸润、血管扩张、充血，呈典型炎症改变。实验结果显示，qqp5组、qqp6组结肠黏膜损伤程度较dss组有不同程度的改善，其腺体、隐窝破坏和炎性细胞浸润程度有所减轻，杯状细胞增加，进一步证明了实施例1中制备的中药组合物对溃疡性结肠炎的保护作用。
[0084]
实验三、将对比例1制备的中药组合物参照实验一进行小鼠实验：
[0085]
高剂量实验组(h组)小鼠每天灌胃本对比例中药配方散剂，使用量按照散剂质量与小鼠体重的比例5g/kg。
[0086]
低剂量实验组(l组)小鼠每天灌胃本对比例中药配方散剂，使用量按照散剂质量与小鼠体重的比例0.5g/kg。
[0087]
柳氮磺胺吡啶栓sasp阳性对照组小鼠每天灌胃柳氮磺胺吡啶栓sasp粉末，按照柳氮磺胺吡啶栓sasp质量与小鼠体重0.5g/kg/d喂食，water组(正常对照组)与急性dss4组(模型4组)正常喂食。
[0088]
根据上述大便性状评分、大便带血评分、体重变化评分计算高剂量实验组、低剂量实验组、sasp阳性对照组、water组及急性dss4组疾病活动指数dai指数。如图10所示，在本对比例中药配方颗粒剂的作用下，高剂量实验组小鼠的dai指数仅略低于急性dss4组，高于sasp阳性对照组，远高于water组。说明对比例1中药配方颗粒剂对小鼠肠炎没有明显的治疗效果。
[0089]
综上所述，本发明提供了一种中药组合物配方以及优选的配方，对治疗溃疡性结肠结肠炎具有很好的疗效，且组合物中药材配方简便，使用过程方便。本发明的中药组合物是根据总结的大量前期临床和实验研究得出uc中医病机特点进行配伍，与现有技术治疗手段相比，其制备方法简便易行、成本低，疗效显著、安全可靠、精准给药、适用性强，对协同治疗uc具有良好的临床疗效。可有效补血化瘀止血，清热解毒，生肌敛疮，弥补西药较大毒副作用及停药后易复发的不足，通过调动患者自身免疫系统抵抗结肠组织炎症，能有效缓解患者腹泻、脓血便等临床症状，提高临床缓解率，从而提高患者的生活质量，对于治疗uc具有重要的经济和药用价值。
[0090]
以上借助具体实施例对本发明做了进一步描述，但是应该理解的是，这里具体的
描述，不应理解为对本发明的实质和范围的限定，本领域内的普通技术人员在阅读本说明书后对上述实施例做出的各种修改，都属于本发明所保护的范围。