一种吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法及其应用与流程

技术特征：
1.一种吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，采用纳米仿生技术，以肺表面活性剂功能性成分为材料，模拟肺表面活性剂在肺泡表面的多膜结构，利用薄膜分散法制备肺表面活性剂纳米仿生体，同时在其脂质层负载活性氧清除剂虾青素，内核中包载抗肺纤维化药物吡非尼酮，构建具有修复、治疗一体化的纳米药物递送系统的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体，具体包括以下步骤：（1）将5～30mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、2～10mg胆固醇、3～20mg卵磷脂三种脂质材料分别溶于5～30ml氯仿中，然后将配制的溶液涡旋震荡混匀，保存放于4℃备用；称取5～10mg虾青素溶于氯仿，配制成浓度为2～3mg/ml虾青素溶液；（2）按照质量比二棕榈酰磷脂酰胆碱：胆固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步骤（1）中配制好的相应脂质材料溶液以及虾青素溶液置入瓶中，在43℃、压强0.05
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0.06kpa的条件下进行旋蒸，除去溶剂，瓶内壁得到一层均匀的白色薄膜，加入2ml浓度为2mg/ml吡非尼酮水溶液水化，将得到的溶液转移至离心管；（3）将步骤（2）中离心管内的溶液利用超声波细胞粉碎机进行冰浴探超处理，探超条件为：工作5s，间歇6s，总工作时间2min，功率100w，使其形成单层囊泡；（4）将步骤（3）得到的单层囊泡溶液中加入400～500
µ
l浓度为2mg/ml的ca
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溶液，进行涡旋5min，再冰浴探超，冰上以100w功率，探超2min，两者交替进行1h，得肺表面活性剂纳米仿生体。2.根据权利要求1所述的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将17.5mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、6mg胆固醇、11.5mg卵磷脂三种脂质材料分别溶于27.5ml氯仿中，然后将配制的溶液涡旋震荡混匀，保存放于4℃备用；称取7.5mg虾青素溶于氯仿，配制成浓度为2.5mg/ml虾青素溶液；（2）按照质量比二棕榈酰磷脂酰胆碱：胆固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步骤（1）中配制好的相应脂质材料溶液以及虾青素溶液置入瓶中，在43℃、压强0.055kpa的条件下进行旋蒸，除去溶剂，瓶内壁得到一层均匀的白色薄膜，加入2ml浓度为2mg/ml吡非尼酮水溶液水化，将得到的溶液转移至离心管；（3）将步骤（2）中离心管内的溶液利用超声波细胞粉碎机进行冰浴探超处理，探超条件为：工作5s，间歇6s，总工作时间2min，功率100w，使其形成单层囊泡；（4）将步骤（3）得到的单层囊泡溶液中加入450
µ
l浓度为2mg/ml的ca
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溶液，进行涡旋5min，再冰浴探超，冰上以100w功率，探超2min，两者交替进行1h，得肺表面活性剂纳米仿生体。3.根据权利要求1所述的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将20.3mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、5.8mg胆固醇、12.4mg卵磷脂三种脂质材料分别溶于5ml氯仿中，然后将配制的溶液涡旋震荡混匀，保存放于4℃备用；称取5.2mg虾青素溶于氯仿，配制成浓度为2.6mg/ml虾青素溶液；（2）按照质量比二棕榈酰磷脂酰胆碱：胆固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步骤（1）中配制好的相应脂质材料溶液以及虾青素溶液置入茄形瓶中，旋转蒸发仪水浴锅在43℃、压强0.05
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0.06kpa的条件下进行旋蒸，除去溶剂，茄形瓶内壁得到一层均匀的白色薄膜，加入
2ml浓度为2mg/ml吡非尼酮水溶液水化，将得到的溶液转移至离心管；（3）将步骤（2）中离心管内的溶液利用超声波细胞粉碎机进行冰浴探超处理，探超条件为：工作5s，间歇6s，总工作时间2min，功率100w，使其形成单层囊泡；（4）将步骤（3）得到的单层囊泡溶液中加入400
µ
l浓度为2mg/ml的ca
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溶液，进行涡旋5min，再冰浴探超，冰上以100w功率，探超2min，两者交替进行1h，得肺表面活性剂纳米仿生体。4.根据权利要求1所述的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将18.7mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、5.1mg胆固醇、11.3mg卵磷脂三种脂质材料分别溶于5ml氯仿中，然后将配制的溶液涡旋震荡混匀，保存放于4℃备用；称取4.8mg虾青素溶于氯仿，配制成浓度为2.4mg/ml虾青素溶液；（2）按照质量比二棕榈酰磷脂酰胆碱：胆固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步骤（1）中配制好的相应脂质材料溶液以及虾青素溶液置入茄形瓶中，旋转蒸发仪水浴锅在43℃、压强0.05
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0.06kpa的条件下进行旋蒸，除去溶剂，茄形瓶内壁得到一层均匀的白色薄膜，加入2ml浓度为2mg/ml吡非尼酮水溶液水化，将得到的溶液转移至离心管；（3）将步骤（2）中离心管内的溶液利用超声波细胞粉碎机进行冰浴探超处理，探超条件为：工作5s，间歇6s，总工作时间2min，功率100w，使其形成单层囊泡；（4）将步骤（3）得到的单层囊泡溶液中加入400
µ
l浓度为2mg/ml的ca
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溶液，进行涡旋5min，再冰浴探超，冰上以100w功率，探超2min，两者交替进行1h，得肺表面活性剂纳米仿生体。5.根据权利要求1所述的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将19.8mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、5.7mg胆固醇、11.2mg卵磷脂三种脂质材料分别溶于5ml氯仿中，然后将配制的溶液涡旋震荡混匀，保存放于4℃备用；称取5mg虾青素溶于氯仿，配制成浓度为2mg/ml虾青素溶液；（2）按照质量比二棕榈酰磷脂酰胆碱：胆固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步骤（1）中配制好的相应脂质材料溶液以及虾青素溶液置入茄形瓶中，旋转蒸发仪水浴锅在43℃、压强0.05
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0.06kpa的条件下进行旋蒸，除去溶剂，茄形瓶内壁得到一层均匀的白色薄膜，加入2ml浓度为2mg/ml吡非尼酮水溶液水化，将得到的溶液转移至离心管；（3）将步骤（2）中离心管内的溶液利用超声波细胞粉碎机进行冰浴探超处理，探超条件为：工作5s，间歇6s，总工作时间2min，功率100w，使其形成单层囊泡；（4）将步骤（3）得到的单层囊泡溶液中加入500
µ
l浓度为2mg/ml的ca
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溶液，进行涡旋5min，再冰浴探超，冰上以100w功率，探超2min，两者交替进行1h，得肺表面活性剂纳米仿生体。6.根据权利要求1
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5所述的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，所述的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的粒径为150～200nm。7.权利要求1
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6所述方法制备的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体在制备增强抗肺纤维化治疗提高疗效药物中的应用。8.权利要求1
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6所述方法制备的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体作为载药系统在制备
实现治疗、修复一体化药物中的应用。

技术总结
本发明涉及吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法及其应用，有效解决吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备及增强抗肺纤维化治疗提高疗效的用药问题，采用纳米仿生技术，以肺表面活性剂功能性成分为材料，模拟肺表面活性剂在肺泡表面的多膜结构，利用薄膜分散法制备肺表面活性剂纳米仿生体，同时在其脂质层负载活性氧清除剂虾青素，内核中包载抗肺纤维化药物吡非尼酮，构建具有修复、治疗一体化的纳米药物递送系统的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体，在修复肺泡Ⅱ型上皮细胞功能的同时，向受损肺泡补给功能性肺表面活性剂，快速有效修复肺功能，增强了吡非尼酮的治疗效果，使吡非尼酮成功跨过肺表面活性剂层，提高吡非尼酮向肺组织的高效转运，协同增强肺纤维化治疗。协同增强肺纤维化治疗。


技术研发人员：王兵华 王明金 李静 张红岭 孙露露 李梦茹
受保护的技术使用者：郑州大学
技术研发日：2021.07.28
技术公布日：2021/10/28