一种可作为GPR35受体激动剂的苯并吡喃酮衍生物、制备方法及其应用与流程

一种可作为gpr35受体激动剂的苯并吡喃酮衍生物、制备方法及其应用
技术领域
1.本发明属于医药技术领域，尤其涉及一种可作为gpr35受体激动剂的苯并吡喃酮衍生物、制备方法及其应用。


背景技术：

2.g蛋白偶联受体(gpcr)是一类在药物研发历史上最成功的药物受体，在现代临床所用的药物中有30-40％的药物都是以g蛋白偶联受体作为靶点(trends in gpcr drug discovery:new agents,targets and indications.nature reviews drug discovery 2017，16:829-842)。在世界最畅销的100个药物中存在若干gpcr配体。然而，在所有g蛋白偶联受体家族中，仅仅有108个受体作为药物靶点被开发出来。因此，此类靶点在药物研发中仍具有巨大的开发潜力(target-based drug discovery:is something wrong？drug discov.today.2005,10,139-147.)。
3.g蛋白偶联受体35(gpr35)是一个于1998年首次发现的孤儿受体(gpr35 is a functional receptor in rat dorsal root ganglion neurons.biochem.biophys.res.commun.2008,365,344-348.)，迄今为止的研究表明，该受体与许多疾病存在关联。然而，由于缺乏合适的药理学工具以及内源性配体的缺失制约了对该受体的生理学研究。尽管有一些内源性分子比如犬尿酸可以激活gpr35受体，但是由于它们的活性普遍不高，因而不能认为是其内源性的配体。因此，寻找其高效配体有助于研究该受体在体内的生理学意义。
4.现代药理学研究表明gpr35可能参与多种疾病的治疗，比如癌症、炎症、冠状动脉疾病、过敏、疼痛、哮喘及高血压(discovery of 2-(4-methylfuran-2(5h)-ylidene)malononitrile and thieno 3,2-b thiophene-2-carboxylic acid derivatives as g protein-coupled receptor 35(gpr35)agonists.j.med.chem.2011,54,7385-7396.)。而在已经上市的药物中，比如抗哮喘类药物色甘酸钠以及敏喘宁(zaprinast,a well-known cyclic guanosine monophosphate-specific phosphodie sterase inhibitor,is an agonist for gpr35.febs lett.2006,580,5003-5008.)，已经被证实是gpr35受体的激动剂。这些发现提示我们gpr35受体具有成为成药受体的前景。开发新型高效的gpr35受体激动剂具有重要意义。
5.苯并吡喃酮类化合物是一类广泛存在于自然界中的内酯化合物，多存在于芸香科和伞形科植物中，其中抗凝血药物双苯并吡喃酮已经被证实是gpr35受体激动剂。


技术实现要素：

6.针对上述前景，本发明的第一个目的是提供一种可作为gpr35受体激动剂的苯并吡喃酮衍生物，包括其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或晶型，其结构通式如下所示：
[0007][0008]
其中，
[0009]
ar为取代或未取代的芳基或杂环芳基，包括苯基、噻吩基、呋喃基、吡啶基或萘基；
[0010]
r1独立地选自硝基、甲氧基、羟基、卤素；
[0011]
r2独立地选自氰基、1h-四唑基。
[0012]
优选的，ar任选地被一个或多个取代基：-h、-c
1-4
烷基、-oc
1-4
烷氧基、苄氧基、苯氧亚甲基、-cooc
1-4
烷氧甲酰基、乙氧甲酰基、羧基、n，n-二甲基、-cn、卤素、-cf3、-no2、-oh在任意位取代。
[0013]
进一步优选的，ar任选地被一个或多个取代基：-h、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、苄氧基、苯氧亚甲基、乙氧甲酰基、羧基、n，n-二甲基、-cn、-f、-cl、-br、-i、-cf3、-no2、-oh在任意位取代。
[0014]
第二优选的，ar是取代或未取代的苯基、噻吩基、呋喃基，其中ar任选地被一个或多个取代基：甲基、乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、苯氧亚甲基、乙氧甲酰基、羧基、n，n-二甲基、-f在任意位取代。
[0015]
优选的，r1为硝基。
[0016]
优选的，r2为1h-四唑基。
[0017]
优选的，当ar是噻吩基时，与苯并吡喃酮母核的连接位点可以是噻吩环上的2-或3-位；当ar是呋喃基时，与苯并吡喃酮母核的连接位点可以是呋喃环上的2-或3-位。
[0018]
在有些具体实施例中，其中衍生物优选自化合物(1)-(31)：
[0019]
(1)6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0020]
(2)6-(3-氟苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0021]
(3)6-(3-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0022]
(4)6-(4-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0023]
(5)6-(4-氟苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0024]
(6)8-硝基-2-氧代-6-(噻吩-2-基)-2h-色烯-3-腈
[0025]
(7)6-(4-乙基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0026]
(8)6-(4-乙基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0027]
(9)6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0028]
(10)6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0029]
(11)6-(2-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0030]
(12)6-(2-甲氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0031]
(13)6-(4-乙氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0032]
(14)6-(4-乙氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0033]
(15)6-(3-甲氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0034]
(16)6-(4-异丙基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0035]
(17)6-(4-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0036]
(18)6-(4-异丙基苯基)-8-甲氧基-2-氧代-2h-色烯-3-甲腈
[0037]
(19)8-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-2h-色烯-3-甲腈
[0038]
(20)6-(4-甲氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0039]
(21)6-(4-异丙基苯基)-8-甲氧基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0040]
(22)6-(4-(苄氧基)苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0041]
(23)6-(4-(苄氧基)苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0042]
(24)4-(3-氰基-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-6-基)苯甲酸乙酯
[0043]
(25)4-(8-硝基-2-氧代-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-6-基)苯甲酸乙酯
[0044]
(26)3-(8-硝基-2-氧代-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-6-基)苯甲酸乙酯
[0045]
(27)6-(4-(二甲基氨基)苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0046]
(28)8-硝基-2-氧代-6-(对-甲苯基)-2h-色烯-3-腈
[0047]
(29)8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-6-(对-甲苯基)-2h-吡喃-2-酮
[0048]
(30)6-(呋喃-2-基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0049]
(31)6-(呋喃-2-基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0050]
以及上述化合物在药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或各种晶型。
[0051]
进一步地，上述所示化合物在药学上可接受的盐，尤其是锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、铵盐。
[0052]
本发明第二个目的是提供一种可作为gpr35受体激动剂的苯并吡喃酮衍生物的制备方法，可通过下式所述反应路线进行制备：
[0053][0054]
反应条件：(a)arylboronic acids,pdcl2(pph3)2,na2co3,dmf:h2o＝1:1,80℃,4h。(b)nh4cl,h2o,8h.(c)hcl(2m),75℃,1h.(d)alcl3,nan3,thf,80℃,过夜。
[0055]
反应路线中涉及以下步骤：
[0056]
(a)在适当条件下，将水杨醛衍生物a与硼酸衍生物b进行suzuki偶连，得到产物c；
[0057]
(b)在适当条件下，将c与丙二腈反应得到r2为氰基的目标产物d；
[0058]
(c)在适当条件下，d与叠氮钠反应，即可得到目标产物e，其中，ar、r1、r2与上述定义相同。
[0059]
根据本发明公开的条件，有经验的研究人员可以很容易地制备出本发明公开的苯并吡喃酮类衍生物及其药学上可接受的盐。在本发明公开合成条件的基础上，等比例的放大或缩小反应规模，或者在合理范围内溶剂使用量或反应温度或反应时间的变化，或者在合理范围内反应底物、催化剂、添加剂等物质的当量的变化，均属于本发明的保护范围内。
[0060]
本发明的第三个目的是提供一种可作为gpr35受体激动剂的苯并吡喃酮衍生物，包括其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或各种晶型的药物组合物，并可进一步包含赋形剂、稀释剂及载体。本发明的化合物可以以未溶化的和与药学上可接受的溶剂溶剂化的形式存在。通常认为溶剂化的形式等同于未溶剂化的形式。本发明的药物组合物可包括一种或多种本发明的化合物，典型的配方是通过混合本发明的化合物或其药学上可接受盐、溶剂化物、水合物与载体、赋形剂或稀释剂进行制备。常用载体、赋形剂或稀释剂包括如碳
水化合物、纤维素及其衍生物、明胶、油、多元醇、水等物质。所述药物的剂型选用固体制剂或液体制剂，具体的为片剂、胶囊、粉末、颗粒、溶液、糖浆、悬浮液或气雾剂。
[0061]
本发明的第四个目的是提供一种可作为gpr35受体激动剂的苯并吡喃酮衍生物在制备治疗、预防及缓解由gpr35受体活性配体调节的疾病的药物中的应用，所述衍生物包括其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或各种晶型。所述疾病包括可能由gpr35受体激动剂及部分激动剂调节的癌症、炎症、冠状动脉疾病、过敏、疼痛、炎症性肠病、哮喘及高血压。所述药物是gpr35受体激动剂。所述药物包括苯并吡喃酮类衍生物及其药学上可接受的盐中的一种或二种以上，与任何药学上可接受的辅料，或其它活性化合物所组成的药物组合物。
[0062]
本发明还提供了一种合成苯并吡喃酮类衍生物的合成方法，合成了一系列以苯并吡喃酮为母核的苯并吡喃酮类衍生物。通过将化合物作用于人源gpr35受体，测试了该系列化合物在人源gpr35受体上的活性。通过将其中一个化合物作用于小鼠，测试了其炎症性肠病的活性，确定了其具有治疗炎症性肠病的潜力。以上结果证明该系列化合物具有一定的药物开发前景。
附图说明
[0063]
图1：本发明衍生物的结构通式图；
[0064]
图2：本发明衍生物制备方法反应路线图；
[0065]
图3：a为化合物20的剂量依赖性dmr信号图；b为该化合物的剂量依赖性曲线；
[0066]
图4：化合物20在小鼠体内药理活性评价；
具体实施方式
[0067]
本发明的通式化合物可以通过下述反应路线制备。
[0068][0069]
反应条件：(a)arylboronic acids,pdcl2(pph3)2,na2co3,dmf:h2o＝1:1,80℃,4h。(b)nh4cl,h2o,8h.(c)hcl(2m),75℃,1h.(d)alcl3,nan3,thf,80℃,过夜。反应路线中涉及以下步骤：首先，在适当条件下，将水杨醛衍生物a与硼酸衍生物b进行suzuki偶连，得到产物c；在适当条件下，将c与丙二腈反应得到r2为氰基的目标产物d；最后，在适当条件下，d与叠氮钠反应，即可得到目标产物e。
[0070]
本发明化合物的制备中所采用的起始原料都是已知的、能够根据已知方法制备的或者可购买获得的。
[0071]
下述各种制备方法用于制备本发明化合物的合成中间体。
[0072]
制备1、3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0073]
将起始原料1.0mmol的5-溴-2羟基-3-硝基苯甲醛溶解在20ml经过氮气置换的dmf：h2o(v：v＝1：1)中，然后于常温下一次向溶液中加入0.05当量的双三苯基磷二氯化钯、6.0当量的碳酸钠以及1.5当量的3-氟苯硼酸。加入完毕后搅拌均匀，并以氮气置换体系中剩余空气2次，然后再在氮气保护下升温80℃搅拌反应4小时。反应完毕后，向溶液中加入过
量浓盐酸，待产物充分析出后滤出固体，然后以乙醇溶解滤出固体，过硅藻土，旋蒸，所得固体产物可直接用于下步反应。
[0074]
制备2、3'-甲氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0075]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为3-甲氧基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0076]
制备3、4'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0077]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为4-氟基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0078]
制备4、2-羟基-3-硝基-5-(噻吩-2-基)苯甲醛
[0079]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为噻吩-2-硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0080]
制备5、4'-乙基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0081]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为噻吩-2-硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0082]
制备6、2'-氟-4-羟基-4'-甲氧基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0083]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为2-氟-4-甲氧基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0084]
制备7、2'-甲氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0085]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为2-甲氧基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0086]
制备8、4'-乙氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0087]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为4-乙氧基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0088]
制备9、3'-甲氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0089]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为3-甲氧基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0090]
制备10、4'-异丙基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0091]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为4-异丙基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0092]
制备11、4'-甲氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0093]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为4-甲氧基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0094]
制备12、4-羟基-4'-异丙基-5-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0095]
将制备1中的5-溴-2羟基-3-硝基苯甲醛替换为5-溴-2-羟基-3-甲氧基苯甲醛，3-氟苯硼酸换为4-异丙基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0096]
制备13、4-羟基-4'，5-二甲氧基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0097]
将制备1中的5-溴-2羟基-3-硝基苯甲醛替换为5-溴-2-羟基-3-甲氧基苯甲醛，3-氟苯硼酸换为4-甲氧基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0098]
制备14、4'-(苄氧基)-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0099]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为4-苄氧基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0100]
制备15、3'-甲酰基-4'-羟基-5'-硝基-[1,1'-联苯]-4-羧酸乙酯
[0101]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为(4-(乙氧羰基)苯基)硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0102]
制备16、3'-甲酰基-4'-羟基-5'-硝基-[1,1'-联苯]-3-羧酸乙酯
[0103]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为(3-(乙氧羰基)苯基)硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0104]
制备17、4'-(二甲氨基)-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0105]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为(4-(二甲基氨基)苯基)硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0106]
制备18、4-羟基-4'-甲基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛
[0107]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为4-甲基苯硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0108]
制备19、5-(呋喃-2-基)-2-羟基-3-硝基苯甲醛
[0109]
将制备1中的3-氟苯硼酸换为呋喃-2-硼酸，其余条件相同，即可得目标中间体产物。
[0110]
实施例1：6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0111]
将1.0mmol的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛均匀分散在20ml水中，然后向体系中加入1.0当量的醋酸铵，搅拌均匀后，向溶液中加入2.0当量的丙二腈，然后于常温下搅拌反应8h，反应完毕后滤出固体并将所得固体加入到稀盐酸中(2m)并在75℃下搅拌反应1h。反应完毕后滤出固体，然后以二氯甲烷溶解所得固体，加入适量硅胶，旋干以纯二氯甲烷过柱即可获得纯品目标产物，产物为黄色固体，产率76％。
[0112]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.99(s,1h),8.75(d,j＝2.1hz,1h),8.52(d,j＝2.1hz,1h),7.73(d,j＝10.4hz,1h),7.68(d,j＝7.9hz,1h),7.62(dd,j＝14.0,7.8hz,1h),7.35(t,j＝8.2hz,1h)。
[0113]
实施例2：6-(3-氟苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0114]
将1.0mmol的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈溶解于20ml超干四氢呋喃中，然后向溶液中加入3.0当量的氯化铝，6.0当量的叠氮钠，在氮气保护下升温至80度搅拌回流反应过夜。反应完毕后，向溶液中加入过量稀盐酸(2m)并以乙酸乙酯萃取溶液2次。合并有机相，以无水硫酸钠干燥有机相并旋干，然后以少量二氯甲烷洗涤固体2次(2ml
×
2)，再以少量甲醇洗涤固体2次(2ml
×
2)即可获得最终产物，产物为黄色固体，产率57％。
[0115]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.12(s,1h),8.78(s,1h),8.71(d,j＝2.0hz,1h),7.74(dd,j＝14.9,9.2hz,2h),7.63(dd,j＝14.4,7.8hz,1h),7.34(t,j＝8.2hz,1h).
[0116]
实施例3：6-(3-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0117]
以3'-甲氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，即可制得该化合物，产物为黄色固体，产率64％。
[0118]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.00(s,1h),8.71(d,j＝2.2hz,1h),8.48(d,j＝2.2hz,
1h),7.48(t,j＝8.1hz,1h),7.37(d,j＝6.5hz,2h),7.11-7.02(m,1h),3.86(s,3h).
[0119]
实施例4：6-(4-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0120]
以4'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，即可制得该化合物，产物为黄色固体，产率79％。
[0121]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.00(s,1h),8.69(d,j＝2.2hz,1h),8.45(d,j＝2.2hz,1h),7.87(dd,j＝8.7,5.3hz,2h),7.42(t,j＝8.8hz,2h).
[0122]
实施例5：6-(4-氟苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0123]
以6-(4-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，即可制得该化合物，产物为黄色固体，产率58％。
[0124]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.15(s,1h),8.72(d,j＝2.1hz,1h),8.66(d,j＝2.2hz,1h),7.91(dd,j＝8.8,5.3hz,2h),7.42(t,j＝8.8hz,2h).
[0125]
实施例6：8-硝基-2-氧代-6-(噻吩-2-基)-2h-色烯-3-腈
[0126]
以2-羟基-3-硝基-5-(噻吩-2-基)苯甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率71％。
[0127]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.02(s,1h),8.69(d,j＝2.3hz,1h),8.39(d,j＝2.2hz,1h),7.76(dd,j＝5.9,4.4hz,2h),7.24(dd,j＝5.0,3.7hz,1h).
[0128]
实施例7：6-(4-乙基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0129]
以4'-乙基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率81％。
[0130]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.02(s,1h),8.67(s,1h),8.45(s,1h),7.74(d,j＝7.9hz,2h),7.41(d,j＝7.9hz,2h),2.69(q,j＝7.4hz,2h),1.22(d,j＝7.6hz,3h).
[0131]
实施例8：6-(4-乙基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0132]
以6-(4-乙基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率58％。
[0133]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.15(s,1h),8.72(d,j＝2.2hz,1h),8.63(d,j＝2.2hz,1h),7.77(d,j＝8.2hz,2h),7.41(d,j＝8.2hz,2h),2.69(q,j＝7.5hz,2h),1.23(d,j＝7.6hz,3h).
[0134]
实施例9：6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0135]
以2'-氟-4-羟基-4'-甲氧基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率65％。
[0136]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.05(s,1h),8.49(d,j＝2.2hz,1h),8.25(d,j＝2.2hz,1h),7.50(dd,j＝8.5,6.8hz,1h),7.15(dd,j＝11.4,2.4hz,1h),6.97(td,j＝8.4,2.5hz,1h),3.85(s,3h).
[0137]
实施例10：6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0138]
以6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率77％。
[0139]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.16(s,1h),8.50(d,j＝2.1hz,1h),8.46(d,j＝2.1hz,1h),7.52(dd,j＝8.4,6.8hz,1h),7.15(dd,j＝11.4,2.4hz,1h),6.97(td,j＝8.4,2.4hz,1h),3.87(s,3h).
[0140]
实施例11：6-(2-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0141]
以2'-甲氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率78％。
[0142]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.03
–
8.95(m,1h),8.71(d,j＝2.2hz,1h),8.48(d,j＝2.2hz,1h),7.48(t,j＝8.1hz,1h),7.40
–
7.28(m,2h),7.07(dd,j＝7.3,2.1hz,1h),3.90
–
3.80(m,3h).
[0143]
实施例12：6-(2-甲氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0144]
以6-(2-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率65％。
[0145]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.18(s,1h),8.52(d,j＝2.1hz,1h),8.48(d,j＝2.1hz,1h),7.47(ddd,j＝7.4,6.0,1.7hz,2h),7.22(d,j＝8.2hz,1h),7.13(dd,j＝11.2,3.7hz,1h),3.85(s,3h).
[0146]
实施例13：6-(4-乙氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0147]
以4'-乙氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率78％。
[0148]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.00(s,1h),8.64(d,j＝2.3hz,1h),8.41(d,j＝2.3hz,1h),7.78
–
7.70(m,2h),7.10(d,j＝8.8hz,2h),4.11(q,j＝7.0hz,2h),1.37(t,j＝7.0hz,3h).
[0149]
实施例14：6-(4-乙氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0150]
以6-(4-乙氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率71％。
[0151]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.14(s,1h),8.68(d,j＝2.2hz,1h),8.60(d,j＝2.2hz,1h),7.78(d,j＝8.8hz,2h),7.10(d,j＝8.8hz,2h),4.11(q,j＝6.9hz,2h),1.37(t,j＝7.0hz,3h).
[0152]
实施例15：6-(3-甲氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0153]
以3'-甲氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例2中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率72％。
[0154]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.12(s,1h),8.74(d,j＝1.9hz,1h),8.66(d,j＝1.6hz,1h),7.48(t,j＝7.8hz,1h),7.41(d,j＝7.3hz,2h),7.09
–
7.03(m,1h),3.87(s,3h).
[0155]
实施例16：6-(4-异丙基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0156]
以4'-异丙基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率81％。
[0157]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.02(s,1h),8.67(s,1h),8.44(s,1h),7.74(d,j＝7.7hz,2h),7.44(d,j＝7.8hz,2h),2.98(dt,j＝13.8,7.0hz,1h),1.25(d,j＝6.9hz,6h).
[0158]
实施例17：6-(4-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0159]
以4'-甲氧基-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率65％。
[0160]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.00(s,1h),8.64(d,j＝2.3hz,1h),8.41(d,j＝2.3hz,1h),7.79
–
7.73(m,2h),7.12(d,j＝8.8hz,2h),3.84(s,3h).
[0161]
实施例18：6-(4-异丙基苯基)-8-甲氧基-2-氧代-2h-色烯-3-甲腈
[0162]
以4-羟基-4'-异丙基-5-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率87％。
[0163]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.95(s,1h),7.68(dd,j＝10.1,4.9hz,3h),7.61(d,j＝1.6hz,1h),7.39(d,j＝8.2hz,2h),4.04(s,3h),2.96(dt,j＝13.7,6.8hz,1h),1.25(d,j＝6.9hz,6h).
[0164]
实施例19：8-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-2h-色烯-3-甲腈
[0165]
以4-羟基-4'，5-二甲氧基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率87％。
[0166]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.93(s,1h),7.70(d,j＝8.7hz,2h),7.67(d,j＝1.8hz,1h),7.58(d,j＝1.7hz,1h),7.08(d,j＝8.7hz,2h),4.04(s,3h),3.82(s,3h).
[0167]
实施例20：6-(4-甲氧基苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0168]
以6-(4-甲氧基苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率82％。
[0169]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.14(s,1h),8.68(d,j＝2.1hz,1h),8.60(d,j＝2.2hz,1h),7.80(d,j＝8.8hz,2h),7.13(d,j＝8.8hz,2h),3.84(s,3h).
[0170]
实施例21：6-(4-异丙基苯基)-8-甲氧基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0171]
以6-(4-异丙基苯基)-8-甲氧基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率82％。
[0172]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.06(s,1h),7.85(d,j＝1.9hz,1h),7.70(d,j＝8.2hz,2h),7.65(d,j＝1.8hz,1h),7.39(d,j＝8.2hz,2h),4.73(s,1h),4.06(s,3h),2.96(dt,j＝
13.8,6.9hz,1h),1.26(d,j＝6.9hz,6h).
[0173]
实施例22：6-(4-(苄氧基)苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0174]
以4'-(苄氧基)-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率65％。
[0175]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.99(s,1h),8.64(d,j＝2.3hz,1h),8.42(d,j＝2.2hz,1h),7.76(d,j＝8.8hz,2h),7.49(d,j＝7.1hz,2h),7.42(t,j＝7.3hz,2h),7.35(t,j＝7.2hz,1h),7.20(d,j＝8.8hz,2h),5.20(s,2h).
[0176]
实施例23：6-(4-(苄氧基)苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0177]
以6-(4-(苄氧基)苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率78％。
[0178]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.14(s,1h),8.68(s,1h),8.61(d,j＝2.1hz,1h),7.80(d,j＝8.7hz,2h),7.49(d,j＝7.3hz,2h),7.42(t,j＝7.3hz,2h),7.36(d,j＝7.0hz,1h),7.21(d,j＝8.7hz,2h),5.21(s,2h).
[0179]
实施例24：4-(3-氰基-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-6-基)苯甲酸乙酯
[0180]
以4'-甲酰基-4'-羟基-5'-硝基-[1,1'-联苯]-4-羧酸乙酯替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率74％。
[0181]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.03(s,1h),8.78(d,j＝2.2hz,1h),8.55(d,j＝2.2hz,1h),8.12(d,j＝8.4hz,2h),7.98(d,j＝8.4hz,2h),4.37(q,j＝7.1hz,2h),1.36(t,j＝7.1hz,3h).
[0182]
实施例25：4-(8-硝基-2-氧代-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-6-基)苯甲酸乙酯
[0183]
以4-(3-氰基-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-6-基)苯甲酸乙酯替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率45％。
[0184]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.16(s,1h),8.82(s,1h),8.74(s,1h),8.13(d,j＝8.2hz,2h),8.01(d,j＝8.2hz,2h),4.37(q,j＝7.0hz,2h),1.36(t,j＝7.1hz,3h).
[0185]
实施例26：3-(8-硝基-2-氧代-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-6-基)苯甲酸乙酯
[0186]
以3-(3-氰基-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-6-基)苯甲酸乙酯替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率68％。
[0187]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.20(s,1h),8.81(d,j＝1.8hz,1h),8.72(d,j＝2.0hz,1h),8.36(s,1h),8.13(d,j＝7.8hz,1h),8.07(d,j＝7.8hz,1h),7.73(t,j＝7.8hz,1h),4.39(q,j＝7.1hz,2h),1.37(t,j＝7.1hz,3h).
[0188]
实施例27：6-(4-(二甲基氨基)苯基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0189]
以6-(4-(二甲氨基)苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-亚甲基-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率36％。
[0190]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.05(s,1h),8.59(d,j＝2.2hz,1h),8.51(d,j＝2.2hz,1h),7.69(d,j＝8.8hz,2h),6.86(d,j＝8.9hz,2h),2.98(s,6h).
[0191]
实施例28：8-硝基-2-氧代-6-(对-甲苯基)-2h-色烯-3-腈
[0192]
以4-羟基-4'-甲基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率87％。
[0193]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.01(s,1h),8.67(d,j＝2.3hz,1h),8.45(d,j＝2.3hz,1h),7.72(d,j＝8.2hz,2h),7.38(d,j＝8.0hz,2h),2.39(s,3h).
[0194]
实施例29：8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-6-(对-甲苯基)-2h-吡喃-2-酮
[0195]
以8-硝基-2-氧代-6-(对-甲苯基)-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率78％。
[0196]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.10(s,1h),8.70(d,j＝2.1hz,1h),8.61(d,j＝2.2hz,1h),7.75(d,j＝8.1hz,2h),7.38(d,j＝8.0hz,2h),2.39(s,3h).
[0197]
实施例30：6-(呋喃-2-基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈
[0198]
以5-(呋喃-2-基)-2-羟基-3-硝基苯甲醛替换实施例1中的3'-氟-4-羟基-5-硝基-[1,1'-联苯]-3-甲醛，采用实施例1相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率69％。
[0199]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.05(s,1h),8.71(d,j＝2.2hz,1h),8.41(d,j＝2.1hz,1h),7.92(d,j＝1.2hz,1h),7.28(d,j＝3.4hz,1h),6.72(dd,j＝3.5,1.8hz,1h).
[0200]
实施例31：6-(呋喃-2-基)-8-硝基-3-(1h-四唑-5-基)-2h-色烯-2-酮
[0201]
以6-(呋喃-2-基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈替换实施例2中的6-(3-氟苯基)-8-硝基-2-氧代-2h-色烯-3-腈，采用实施例2相同的步骤，制备该化合物，产物为黄色固体，产率67％。
[0202]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.13(s,1h),8.65(d,j＝5.2hz,2h),7.92(s,1h),7.24(d,j＝3.0hz,1h),6.72(s,1h).
[0203]
药理学表征——dmr筛选模型
[0204]
材料ht-29细胞购于中国科学院上海细胞库；敏喘宁购于sigma公司。检测平台为康宁第三代成像仪，检测的信号为细胞动态质量重置(dmr)引起的波长位移。
[0205]
将处于对数生长期的ht-29细胞接种于384孔板的细胞板的不同孔中，每孔的接种体积为40μl，每孔接种的细胞数目分别为3.2
×
104个，将接种好的细胞板放置于细胞培养箱中培养20-22h，至细胞融合度达到95％左右。
[0206]
然后将上述所有化合物分别在此细胞系上进行梯度dmr活性测试，活性结果如下表所示。
[0207]
表1.通式所示化合物在dmr筛选模型中的活性数据。
[0208]
[0209]
[0210][0211]
在本实施例中，术语“烷基”表示1到4个碳原子的直链或支链烷基-c
1-4
。该烃基可以选自甲基、乙基、丙基、丁基，及其异构体。例如丙基包括正丙基和异丙基，丁基包括异丁基、仲丁基和叔丁基等。
[0212]
术语“卤素”表示-f、-cl、-br和-i。
[0213]
术语“烷氧基”表示具有1到4个碳原子，通过氧原子键连的直链或支链烷基-o-c
1-4
。下列为可提及的实例：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，及其异构体。
[0214]
ibd动物模型试验：
[0215]
取25只雄性，8周，体重为22-26g健康小鼠，分别分为空白组6只，葡聚糖硫酸钠(dss)造模组6只，美沙拉嗪 dss对照组6只，化合物20 dss给药组6只。造模组每天饮水给药(5％dss)；对照组每天饮水给药(5％dss)，美沙拉嗪为灌胃给药(5mg/kg)；化合物组每天饮水给药(5％dss)，化合物20腹腔注射给药(0.2mg/10g)。饲养一周后，取结肠，对比各组结肠长度，可以看到化合物20对比dss诱导对照组在结肠长度上有明显的增长，说明该化合物具有一定的治疗ibd作用，也说明此类结构的化合物都具有一定的治疗ibd功效。
[0216]
上述仅为本发明专利的优选实施例，并不对本发明专利起到任何限制作用。任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明专利的技术方案的范围内，对本发明专利揭露的技术方案和技术内容做任何形式的等同替换或修改等变动，均属未脱离本发明专利的技术方案的内容，仍属于本发明专利的保护范围之内。